0805園藝植物生物技術(shù)

西南大學(xué)網(wǎng)絡(luò)與繼續(xù)教育學(xué)院課程代碼： 0805學(xué)年學(xué)季：20182判斷題1、RAPD標(biāo)記是指簡單重復(fù)序列標(biāo)記，主要檢測(cè)真核生物的基因組中普遍存在著二核苷酸、三核苷酸或四核苷酸的簡單三2.B.X2、RFLP分子標(biāo)記多態(tài)性出現(xiàn)只能由限制性酶切位點(diǎn)的改變所導(dǎo)致A.JB.X3、基因槍介導(dǎo)的基因遺傳轉(zhuǎn)化屬于物理轉(zhuǎn)化A.JB.X4、pUC質(zhì)粒載體可以容忍插入比4噬菌體載體更長的外源DNA片段A.JB.X5、White首先建立了世界上第一例人工合成培養(yǎng)基A.JB.X6、Western雜交是針對(duì)轉(zhuǎn)基因生物外源目的基因RNA轉(zhuǎn)錄水平的檢測(cè)A.JB.X7、“細(xì)胞學(xué)說”是由德國植物生理學(xué)藤erlandt（哈布蘭特）于1902年提出的A.JB.X8、基因組文庫和cDNA文庫的概念是等同的A.JTOC\o"1-5"\h\zB.X9、花粉培養(yǎng)可以獲得單倍體植株A.JB.X10、分子標(biāo)記是遺傳標(biāo)記的一種形式A.JB.X11、胞質(zhì)雜種屬于非對(duì)稱雜種的一種形式A.JB.X主觀題12、最早記載的植物病毒是—。參考答案：郁金香雜色病13、植物原生質(zhì)體是指不含—的植物細(xì)胞。參考答案：細(xì)胞壁14、原生質(zhì)體誘發(fā)融合包括NaNO3法、高PH-高鈣法、PEG法、—及微融合。參考答案：電擊法15、與pBR322等環(huán)狀質(zhì)粒不同，堿菌體為—雙鏈口附分子。參考答案：線狀16、原生質(zhì)體主要的培養(yǎng)方法有三種： 液體淺層培養(yǎng)法、固體培養(yǎng)法和。參考答案：固液雙層培養(yǎng)法17、由免疫動(dòng)物的單細(xì)胞系所產(chǎn)生的抗體稱為—。參考答案：單克隆抗體18、用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物時(shí)，需要在植物再生培養(yǎng)基中添加_，防止細(xì)菌過度生長而產(chǎn)生污染。參考答案：抑菌性抗生素19、血清學(xué)檢測(cè)病毒的原理是。參考答案：抗原擊體反應(yīng)20、我國首例商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因園藝植物是 。參考答案：番茄通日鮮21、我國頒布的第一部與轉(zhuǎn)基因植物有關(guān)的條例是—。參考答案：基因工程安全管理辦法22、圖位克隆法需要對(duì)目的基因進(jìn)行定位，定位的主要途徑是通匚技術(shù)。參考答案：分子標(biāo)記23、通過花粉培養(yǎng)可以獲得—植株，在植物育種中具有重要價(jià)值。參考答案:單倍體世界上轉(zhuǎn)基因植物種植面積最大的國家是—。參考答案:美國體細(xì)胞雜種中葉綠體的遺傳行為主要有三種：單親傳遞、共存及重組，其中較為常見的遺傳方式匕。參考答案:單親傳遞26、世界上首例轉(zhuǎn)座子是在玉米中發(fā)現(xiàn)的—。參考答案：AC/DS世界上第一例通過植物花藥培養(yǎng)獲得單倍體植株是由印度科學(xué)家培養(yǎng)―植物花藥得以實(shí)現(xiàn)。參考答案：曼佗羅人生物體外進(jìn)行口附的復(fù)制采用的方法是一。參考答案：PCR人工培養(yǎng)基上由外植體上形成的一團(tuán)無序生長狀態(tài)的薄壁細(xì)胞稱為參考答案：愈傷組織30、熱處理脫毒的原理是利用病毒類病原與植物的—不同。參考答案：耐熱性配子-體細(xì)胞融合可以獲得無籽的—植株。參考答案：三倍體農(nóng)桿菌用于植物遺傳轉(zhuǎn)化時(shí)，適合用于—類型的植物的轉(zhuǎn)化。參考答案：雙子葉33、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化主要使用來源于_和發(fā)根農(nóng)桿菌的工程載體。參考答案：根癌農(nóng)桿菌34、—年，世界首例轉(zhuǎn)基因植物培育成功。參考答案：198335、目前植物離體培養(yǎng)中最常用和使用范圍最廣的一種培養(yǎng)基L。參考答案：MS36、連鎖圖譜構(gòu)建的理論基礎(chǔ)是一。參考答案：染色體的交換與重組37、離體培養(yǎng)的植物材料常用的碳源是一。參考答案：蔗糖凈化工作臺(tái)無菌風(fēng)送風(fēng)方式主要有垂直送風(fēng)和—。參考答案：水平送風(fēng)發(fā)根農(nóng)桿菌侵染植物后，會(huì)誘使植物細(xì)胞產(chǎn)生許多。參考答案：發(fā)狀根對(duì)維生素、蛋白質(zhì)、多肽、生長因子等無法用高溫高壓滅菌的物質(zhì)，一般用過濾的方式滅菌，過濾器所使用濾膜的孔徑為參考答案：0.22〃m41、對(duì)培養(yǎng)基的滅菌一般采用濕熱高溫高壓滅菌法，滅菌的溫度為_。參考答案：121℃42、RNA提取過程中的關(guān)鍵是抑制_的活性。參考答案：RNA酶43、理想的遺傳標(biāo)記應(yīng)具備的特點(diǎn)？參考答案：（1）多態(tài)性高，標(biāo)記數(shù)目多，提供的信息量大。（2）共顯性遺傳，能區(qū)分純合基因型與雜合基因型。（3）呈現(xiàn)中性，不影表現(xiàn)穩(wěn)定，不受植株內(nèi)外環(huán)境的影響。（5）經(jīng)濟(jì)方便，易于觀察記載。44、簡述原生質(zhì)體分離酶液的組成及作用。參考答案：（1）纖維素酶。從綠色木霉中提取的一種復(fù)合酶制劑，主要含有纖維素酶C1，作用于天然的和結(jié)晶的纖維素，具有分解定形的纖維素，可分解短鏈纖維素。（2）半纖維素酶。可以降解半纖維素為單糖或單糖衍生物。（3）果膠酶。降解聯(lián)結(jié)2與細(xì)胞分開。（4）離析酶。離析形成單細(xì)胞。45、簡述影響原生質(zhì)體培養(yǎng)及植株再生的因素。參考答案：（1）原生質(zhì)體來源。分離原生質(zhì)體所用外植體的生理狀態(tài)與原生質(zhì)體的質(zhì)量對(duì)其后的分裂頻率之間有著密切的關(guān)系。（2）與再分化所要求的條件不一樣，造成不同品種在相同條件下的再生能力也會(huì)不同。（3）培養(yǎng)基。來源于同一種基因型的原生J培養(yǎng)基附加成分。包括培養(yǎng)基中的內(nèi)源、外源激素以及其他添加成分也會(huì)對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)生影響。（5）培養(yǎng)條件和培養(yǎng)方法。主§生。（6）滲透壓調(diào)節(jié)劑。（7）外界微電流處理。46、簡述AFLP標(biāo)記優(yōu)缺點(diǎn)？參考答案：（1）AFLP標(biāo)記優(yōu)點(diǎn)：A、具有RFLP技術(shù)的可靠性與PCR技術(shù)的高效性。B、與RFLP相比，AFLP不需要Southern轉(zhuǎn)結(jié)果穩(wěn)定可靠，信息量大。（2）AFLP主要的缺點(diǎn)：A、對(duì)基因組DNA和限制酶的質(zhì)量要求高，酶切不完全可能會(huì)出現(xiàn)假成本也較高。C、大多數(shù)為顯性標(biāo)記，難于鑒別等位基因。D、該技術(shù)已申請(qǐng)專利，只能用于非盈利性的科學(xué)研究。47、轉(zhuǎn)基因食品評(píng)價(jià)的內(nèi)容包括哪些方面？參考答案：（1）、有毒物質(zhì)。轉(zhuǎn)基因食品不應(yīng)比其他同種可食食物含有更多的毒素，必須確保轉(zhuǎn)入外源基因或基因產(chǎn)物對(duì)人畜無毒。（已知過敏源的序列同源性、目標(biāo)蛋白與已知過敏患者血清中IgE能否發(fā)生免疫反應(yīng)，另外還要考慮營養(yǎng)物質(zhì)和抗?fàn)I養(yǎng)因子的營養(yǎng)價(jià)值產(chǎn)生無法預(yù)期的改變，其中有些營養(yǎng)降低而另一些營養(yǎng)增加。（4）對(duì)抗生素的抵抗作用。遺傳工程體中引入的:物或上皮細(xì)胞中，并成功地結(jié)合和表達(dá)，從而對(duì)抗生素產(chǎn)生抗性，影響到人或動(dòng)物的安全。48、轉(zhuǎn)基因沉默的原因及對(duì)策？參考答案:轉(zhuǎn)基因在受體植物中往往不能穩(wěn)定表達(dá)，有時(shí)甚至完全不表達(dá)，出現(xiàn)轉(zhuǎn)基因沉默現(xiàn)象。轉(zhuǎn)基因沉默的原因是多方面的，根三類：位置效應(yīng)、轉(zhuǎn)錄水平的基因沉默（TGS）和轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默（PTGS）。防止基因沉默的對(duì)策主要從以下方面實(shí)三子及重復(fù)序列并保證載體上的構(gòu)建序列在同一個(gè)方向閱讀以免產(chǎn)生異?；蚍戳xRNA，盡量使用植物偏愛密碼子。（2）使用去甲基化試劑。（3）轉(zhuǎn)基因的側(cè)翼接上核基質(zhì)結(jié)合序列（乂人國會(huì)在一定程度上避免位置效應(yīng)，提高基因表達(dá)。（49、植物原生質(zhì)體培養(yǎng)主要用于哪些領(lǐng)域？參考答案:（1）、種質(zhì)資源保存。主要用于超低溫保存。（2）、原生質(zhì)體融合。通過不同類型的原生質(zhì)體融合克服傳統(tǒng)育種方法所面K變體。由于原生質(zhì)體在培養(yǎng)過程中能夠產(chǎn)生體細(xì)胞無性系變異，可以從中選出具有優(yōu)良性狀的變異體，因此可成為農(nóng)作基礎(chǔ)研究。原生質(zhì)體為細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、細(xì)胞生理學(xué)、病毒學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)理論研究提供了想的實(shí)驗(yàn)體系。50、在植物病毒檢測(cè)中將涉及到單克隆抗體的制備，簡述制備的基本步驟？參考答案:（1）免疫注射。用病毒抗原免疫注射實(shí)驗(yàn)用小白鼠。（2）細(xì)胞融合。取免疫小白鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，］用稀釋法，取單細(xì)胞在培養(yǎng)板中進(jìn)行培養(yǎng)。（4）、篩選。采用血清學(xué)方法，用已知的抗原病毒對(duì)單細(xì)胞培養(yǎng)液中的抗體進(jìn)體生產(chǎn)。可用一定濃度的雜交瘤細(xì)胞注射小白鼠腹腔，使其產(chǎn)生腹水，取腹水離心后獲得含抗體的腹水?；?qū)⑺@的雜交得含單克隆抗體的培養(yǎng)液。51、園藝植物組織培養(yǎng)的作用體現(xiàn)在哪些方面？參考答案:（1）、快速繁殖。離體培養(yǎng)方法已成為一些園藝植物良種繁育的一種有力手段，可產(chǎn)生了明顯的經(jīng)濟(jì)效益。（2）、脫毒種克育單倍體；B、胚與胚乳培養(yǎng)；C、與常規(guī)育種技術(shù)相結(jié)合，提高育種成效。（4）、種質(zhì)資源保存。（5）、進(jìn)行生理生化，細(xì)52、用于構(gòu)建文庫的cDNA載體應(yīng)具有哪些共同的特性？參考答案：（1）能在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行獨(dú)立和穩(wěn)定的DNA自我復(fù)制。（2）易于從宿主細(xì)胞中分離，并進(jìn)行純化。（3）在其0附序列（于DNA復(fù)制的非必需區(qū)內(nèi)，可在這些位點(diǎn)上插入外源DNA，但不影響載體自身DNA的復(fù)制。（4）具有能夠觀察的表型特為重組DNA的選擇標(biāo)志。53、如何對(duì)轉(zhuǎn)入植物基因組中的外源目的基因進(jìn)行檢測(cè)？參考答案：（1）對(duì)轉(zhuǎn)入的目的基因序列片段進(jìn)行檢測(cè)。包括兩種手段：一是PCR方法檢測(cè)外源基因；二是用Southern雜交方法，以同源的部分。常見有Southern斑點(diǎn)雜交和Southern印跡雜交兩種。（2）轉(zhuǎn)入目的基因的RNA轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)。包括兩種方式：一是Northern雜交，通過總RNA或mRNA與探針的雜交來分模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后經(jīng)PCR擴(kuò)增目的基因特異條帶。（3）外源基因表達(dá)蛋白的檢測(cè)。外源基因編碼蛋白在轉(zhuǎn)基因植物中能夠正常表達(dá)并表現(xiàn)出應(yīng)有的功能乃是植物基因轉(zhuǎn)化的學(xué)原理，主要采用ELISA檢測(cè)、Western雜交檢測(cè)。ELISA檢測(cè)程序包括抗體制備、抗體或抗原的包被、免疫反應(yīng)及檢出白提取、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)條帶印跡、探針制備、雜交檢出五個(gè)步驟。54、植物培養(yǎng)基由哪些成分構(gòu)成，具有何作用？參考答案：（1）、無機(jī)營養(yǎng)成分。主要包括氮、磷、硫、鉀、鈣、鎂、鐵、鎰、銅、鋅、硼、鉬及碳、氫、氧等大量元素與微量元素加入一些有機(jī)物如維生素類和氨基酸類等有機(jī)成分，以利培養(yǎng)材料的快速生長。離體培養(yǎng)的植物材料常用的碳源是蔗糖。（愈傷組織的生長以及根、芽的分化或胚狀體的發(fā)育等必須輔以適當(dāng)種類和適當(dāng)濃度的植物激素。生長素的生理作用主要是根的分化和細(xì)胞分裂，與一定量的細(xì)胞分裂素配合使用，可誘導(dǎo)不定芽的分化、側(cè)芽萌發(fā)與生長以及誘導(dǎo)胚狀體產(chǎn)生（細(xì)促進(jìn)器官分化不定芽及解除頂端優(yōu)勢(shì)促進(jìn)腋芽萌發(fā)。（4）瓊脂、pH及其他成分。瓊脂是一種由海藻獲得的多糖類物質(zhì)，：養(yǎng)（離體培養(yǎng)的植物材料大多數(shù)要求弱酸性的環(huán)境，需要的pH在5.0-6.0之間。在培養(yǎng)基中往往因培養(yǎng)目的不同、植炭、抗氧化劑、抗生素、誘變劑等。55、分子標(biāo)記主要在園藝植物哪些方面應(yīng)用？參考答案：（1）種質(zhì)資源的遺傳多樣性分析及親緣關(guān)系研究。采用比較植物學(xué)特征并結(jié)合細(xì)胞學(xué)、孢粉學(xué)和同工酶學(xué)等方法進(jìn)行評(píng)價(jià)子標(biāo)記技術(shù)為種質(zhì)資源的遺傳多樣性分析及親緣關(guān)系研究開辟了廣闊的前景。（2）遺傳圖的構(gòu)建和基因定位（遺傳圖譜是:因克隆等許多應(yīng)用研究的理論依據(jù)和基礎(chǔ)（分子標(biāo)記為構(gòu)建高飽和度的連鎖圖提供了有力的工具。（3）分子標(biāo)記輔助選擇j標(biāo)記可以在0附水平上直接反映種質(zhì)資源的基因型和遺傳結(jié)構(gòu)，具有受環(huán)境影響較小、檢測(cè)快速、多態(tài)性高等優(yōu)點(diǎn)，在H（5）品種鑒定與純度分析（分子標(biāo)記是在基因水平上的品種鑒定和種子純度檢驗(yàn)無組織器官特異性，不受環(huán)境的影響，為56、一個(gè)完整的組織培養(yǎng)室由哪些部分所構(gòu)成？參考答案：（1）洗滌室（洗滌室用于組織培養(yǎng)用的玻璃器血、塑料器血和其他實(shí)驗(yàn)用具清洗。（2）儲(chǔ)存室（用于各類器血和用具的彳框等。（3） 培養(yǎng)基配制室（培養(yǎng)基配制室主要用來完成培養(yǎng)基配制的各個(gè)環(huán)節(jié)的工作，如藥品的稱量、溶解，培養(yǎng)基基、玻璃器血及接種工具的滅菌。（5）接種室。（6）培養(yǎng)室（培養(yǎng)室要求衛(wèi)生清潔、保溫和隔熱效果要好（窗戶用雙層玻生物的進(jìn)入，達(dá)到清潔效果。（7）研究室。研究室用于對(duì)培養(yǎng)材料及培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行觀察、鑒定、記錄和分析。（8）溫室或移栽。繼代培養(yǎng)參