血管生成與腫瘤

血管生成與腫瘤第1頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日血管生成(angiogenesis)

是指活體組織在已存在的微血管床上芽生出新的以毛細(xì)血管為主的血管系統(tǒng)的過程。血管生成可發(fā)生在傷口愈合、子宮內(nèi)膜周期性變化、腫瘤、心肌梗塞后和糖尿病。

第2頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

血管生成過程是受嚴(yán)密調(diào)控的過程，該過程處于血管生成激活物或促進(jìn)因子和其它必需過程（促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖）與血管生成抑制因子（阻止血管生成過程）的共同調(diào)控之下。該調(diào)控也被稱為“血管生成開關(guān)”。第3頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第4頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

腫瘤血管生成是指腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的微血管生長(zhǎng)以及腫瘤中血液循環(huán)建立的過程。腫瘤血管形成是腫瘤發(fā)生、生長(zhǎng)和浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移的重要條件。

第5頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

隨著對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)制研究的不斷深入,腫瘤血管形成在腫瘤發(fā)展中的重要地位及抗血管生成治療腫瘤的作用成為腫瘤治療的一個(gè)全新的領(lǐng)域。血管生成抑制劑有可能成為抗腫瘤的主要藥物，并為最終治愈腫瘤提供有效手段。第6頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第一節(jié)

腫瘤血管生成的基本過程

血管形成

胚胎發(fā)育時(shí)形成原始血管結(jié)構(gòu)出芽方式繼續(xù)增生分化出新生血管

血管生成

Cap基底膜降解、EC遷移、增殖、形成管狀結(jié)構(gòu)，基底膜及血流貫通

病理的血管生成，特別是腫瘤條件下的血管生成呈持續(xù)、失控性的過程。生理?xiàng)l件下嚴(yán)格受控血管第7頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

血管生成（平衡被打破）（1）原血管基底膜的酶解；（2）內(nèi)皮細(xì)胞的遷移；（3）內(nèi)皮細(xì)胞的增殖；（4）新生毛細(xì)血管的成熟器官化構(gòu)建。

第8頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第9頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第10頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日腫瘤無血管生成的支持就不能進(jìn)一步增長(zhǎng)

血管前期腫瘤生長(zhǎng)休眠期，直徑<1～2mm

血管期瘤體積增大,浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有誘導(dǎo)血管形成的能力。

腫瘤血管形成這一過程既受機(jī)體神經(jīng)內(nèi)分泌因素影響，又受腫瘤細(xì)胞和腫瘤基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的生長(zhǎng)因子調(diào)控。腫瘤生長(zhǎng)過程第11頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第12頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日一、腫瘤血管形成的特征

⑴失控性：腫瘤新生血管出現(xiàn)迅速，生長(zhǎng)快，并呈持續(xù)性，10%～20%的腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞始終處于DNA合成狀態(tài),這種持續(xù)的血管生成是由腫瘤組織血管生成生長(zhǎng)因子持續(xù)高水平釋放造成的。第二節(jié)腫瘤微血管形態(tài)和生物學(xué)特性第13頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑵

不成熟性：不規(guī)則、竇狀壁薄、BM膜厚薄不一、斷裂、碎片或缺乏。內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中管樣小體明顯增多，細(xì)胞之間連接松散。部分毛細(xì)血管壁缺乏內(nèi)皮細(xì)胞。很少進(jìn)化為成熟的小動(dòng)脈或小靜脈，不具收縮功能，不受神經(jīng)體液調(diào)節(jié)。對(duì)正常血管有活性的物質(zhì)對(duì)該血管不起作用(乙酰膽堿、血管緊張素Ⅱ、溫度）。第14頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第15頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑶血管異常生長(zhǎng)

腫瘤不同區(qū)域的血管有不同的形態(tài)，反映了腫瘤生長(zhǎng)不同時(shí)間內(nèi)微血管變化狀態(tài)與癌細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖不均勻有關(guān)。新生的Cap網(wǎng)直接進(jìn)入腫瘤中央，呈樹狀向外分支，隨腫瘤長(zhǎng)大血管不斷地向外延伸，并與外圍Cap網(wǎng)相連。血管豐富區(qū)——熱點(diǎn)第16頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日新生的Cap從腫瘤外圍長(zhǎng)入腫瘤中第17頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日新生的Cap網(wǎng)直接進(jìn)入腫瘤中央，呈樹狀向外分支第18頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑷腫瘤中血供與血流速度不同

腫瘤中有細(xì)胞豐富區(qū)、邊緣區(qū)、半壞死區(qū)和壞死區(qū)，各區(qū)血供不盡相同，半壞死區(qū)與壞死區(qū)血流明顯減少減慢，非壞死區(qū)血流速度可以快于正常組織。大腫瘤血流速度的均值低于小腫瘤，在大腫瘤內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供給少，腫瘤中實(shí)際增加的效應(yīng)血管管徑小，血流慢，營(yíng)養(yǎng)耗盡。第19頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑸癌細(xì)胞更新速度快于內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生乏氧性壞死

在腫瘤周圍內(nèi)皮細(xì)胞增生指數(shù)為2.2％，腫瘤細(xì)胞增生指數(shù)為7.3％。同樣小鼠瘤細(xì)胞22小時(shí)更新一代，血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖是50小時(shí)更新一代。瘤細(xì)胞無氧酵解產(chǎn)生大量H+，使腫瘤中存在著不同程度的低營(yíng)養(yǎng)、低PH值、低氧的三低細(xì)胞群。腫瘤微循環(huán)較腫瘤生長(zhǎng)表現(xiàn)出低效和相對(duì)不足，腫瘤組織特別是中心部位常常因?yàn)槿毖?、缺氧而壞死。?0頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑹血管內(nèi)皮細(xì)胞的異質(zhì)性是其突出的生物學(xué)特性，主要表現(xiàn)在內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能、抗原成分與代謝特點(diǎn)上。在某些器官的腫瘤組織中，其血管內(nèi)皮細(xì)胞仍保留著該器官的抗原性，說明內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原來源的部位可能在腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)的選擇性粘附、體液因子的區(qū)域性釋放中發(fā)揮作用或由這些腫瘤細(xì)胞演化為內(nèi)皮細(xì)胞。

第21頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑺擬血管生成研究人的黑色素瘤微循環(huán)發(fā)現(xiàn)了一種與經(jīng)典的腫瘤血管生成途徑完全不同的、不依賴內(nèi)皮細(xì)胞的全新的腫瘤血管生成模式。黑色素瘤細(xì)胞通過自身變形并與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用模仿血管壁結(jié)構(gòu)形成可輸送血液的管道系統(tǒng)，從而重建腫瘤的微循環(huán)，并在某個(gè)環(huán)節(jié)與宿主血管相連使腫瘤獲得血液供應(yīng)，并將這個(gè)過程命名為血管生成擬態(tài)(vasculogenicmimicry)。

第22頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

血管生成擬態(tài)特點(diǎn)為：腫瘤細(xì)胞通過自身變形和基質(zhì)重塑產(chǎn)生血管樣通道,通道內(nèi)無內(nèi)皮細(xì)胞襯覆，通道外基底膜PAS染色為陽性。第23頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

第三節(jié)

腫瘤血管形成的影響因素及調(diào)控機(jī)制

腫瘤血管形成是一個(gè)復(fù)雜的多步驟過程，受多種因子調(diào)節(jié)，是刺激因素和抑制因素失衡的結(jié)果。已經(jīng)報(bào)道的有30多種血管生長(zhǎng)因子：bFGFaFGF、VEGF、EGF、HGF、TNF、IL－8、粒細(xì)胞集落刺激因子(G－CSF)等。第24頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日一、促腫瘤血管生成的生長(zhǎng)因子㈠

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)一種可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和血管發(fā)生的促有絲分裂因子。第25頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日1、VEGF的結(jié)構(gòu)：

五種異構(gòu)體：VEGF121、VEGF165、VEGF189、VEGF206、

VEGF145，多數(shù)組織以其成熟的形式VEGF165表達(dá)為主，促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂潛能方面VEGF165比VEGFl21更強(qiáng)。5種類型的VEGF具有相同的生物學(xué)活性，其中VEGF121和VEGF165以可溶性方式分泌，另外三種VEGF以與細(xì)胞表達(dá)蛋白多糖結(jié)合的形式存在。VEGF/VPF的蛋白家族基本成員包括胎盤生長(zhǎng)因子和VEGFB，C，D，E。原來命名為血管通透因子(VPF)。

第26頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日2、VEGF的受體（VEGFR）

VEGF選擇性的，具有高度親和性的直接作用于兩種Ⅲ型酪氨酸激酶受體：VEGFR-1(flt-1)和VEGFR-2(KDR/flk-1)來發(fā)揮作用，VEGFR-2是發(fā)揮主要功能的受體。基因打靶技術(shù)證實(shí)VEGFR-1和VEGFR-2在血管發(fā)生中起重要的作用。

第27頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑴VEGFR是VEGF促有絲分裂、血管生成和增強(qiáng)通透性效應(yīng)的主要調(diào)節(jié)因子。⑵蛋白激酶C作用下VEGFR-2活化使VEGF誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)。VEGFR-2的活化具有抗凋亡效應(yīng)。

VEGFR-2在內(nèi)皮細(xì)胞中傳輸一個(gè)促存活的信號(hào)可能誘導(dǎo)抗凋亡基因survivin的表達(dá)。第28頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第29頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日3、VEGF的作用⑴增加腫瘤血管通透性

VEGF增加局部血循環(huán)大分子的通透性，血漿蛋白在組織中的沉積，為成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的長(zhǎng)入提供臨時(shí)性基質(zhì)。

VEGF/VPF主要靶器官是毛細(xì)血管后靜脈和小靜脈，因這些血管的內(nèi)皮細(xì)胞表面均有VEGFR-1和VEGFR-2，VEGF/VPF與其受體結(jié)合，形成有利于大分子滲透的通道?？筕EGF抗體處理后會(huì)較少腹水形成和較低的腫瘤微血管滲透性。膠質(zhì)瘤中VEGFmRNA水平與毛細(xì)血管滲透性和血管面積有密切相關(guān)性）。第30頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑵VEGF促血管生成的作用①VEGF以旁分泌方式特異地作用于內(nèi)皮細(xì)胞，促其分裂、增殖、趨化。②誘導(dǎo)血管內(nèi)皮中窗孔和囊狀空泡的形成,增加血管通透性，促使血漿蛋白外滲，提供血管生成的基質(zhì)和腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境。③誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)和分泌多種蛋白酶,對(duì)降解血管基底膜和ECM具有重要的意義。④通過誘導(dǎo)Bcl-2、survivin等抗凋亡分子的表達(dá)，抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,促進(jìn)血管的生成。⑤誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞生成和釋放bFGF,和增強(qiáng)多種促血管生成因子效應(yīng)。第31頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日VEGF的作用過程

VEGF是一種促內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原，腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF通過旁分泌方式與特異性分布在內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體結(jié)合，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、分離和遷移，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增加表達(dá)組織因子、尿激酶、組織血漿酶原激活劑和基質(zhì)金屬蛋白酶，這些物質(zhì)可引起凝血、促發(fā)纖溶、降解膠原，誘導(dǎo)腫瘤血管形成，新生的腫瘤血管為腫瘤生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)，并間接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，而且為腫瘤提供了轉(zhuǎn)移的通道，促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展。第32頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生VEGF釋放EC表面受體結(jié)合EC活化定向遷移管形成攀形成血管建立第33頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日4、VEGF與腫瘤的相關(guān)性研究1.在原發(fā)與轉(zhuǎn)移性腫瘤中VEGF過表達(dá)的研究已在mRNA和蛋白質(zhì)水平上。2.研究腫瘤微血管內(nèi)皮細(xì)胞上兩種特異性高親和性受體過表達(dá)與腫瘤發(fā)生的關(guān)系。3.腫瘤血管血漿蛋白、纖維蛋白原滲出與血管外纖維蛋白的交聯(lián)和沉積，促進(jìn)腫瘤間質(zhì)的形成。VEGF

抗體的抗血管活性，使腫瘤由于斷絕血供而死亡（動(dòng)物模型中正、反義VEGF抗體的不同結(jié)果證明）。目前正在進(jìn)行人源化的抗VEGF抗體的可行性與安全性研究。

第34頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑴

VEGF與腫瘤的微血管密度(MVD)增加有關(guān)

關(guān)于各種腫瘤中VEGF的表達(dá)及其血管生成作用已有了較多的研究，已知結(jié)直腸癌，子宮內(nèi)膜癌、肝癌等多種腫瘤組織中VEGF呈陽性表達(dá)，且表達(dá)與MVD呈正相關(guān)。結(jié)直腸腫瘤MVD明顯高于正常粘膜和腺瘤，提示血管生成是結(jié)直腸癌發(fā)生的早期事件，癌組織中VEGF陽性組MVD值明顯高于VEGF陰性組。VEGF與MVD均可作為判斷結(jié)直腸癌預(yù)后的指標(biāo)。結(jié)直腸腺瘤、原位癌、粘膜下浸潤(rùn)癌中MVD逐漸增高，VEGF表達(dá)程度與MVD密切相關(guān)。第35頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日膠質(zhì)瘤中VEGF蛋白陽性染色主要定位于腫瘤細(xì)胞的胞漿，內(nèi)皮細(xì)胞也可呈陽性表達(dá)。43例星形細(xì)胞瘤組織中腫瘤細(xì)胞VEGF陽性表達(dá)率為77.0%。Ⅰ、Ⅱ級(jí)組VEGF陽性表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度均顯著低于Ⅲ、Ⅳ級(jí)組，VEGF表達(dá)強(qiáng)度與MVD呈等級(jí)正相關(guān)，VEGF表達(dá)情況和MVD及腫瘤微血管形態(tài)可能有助于判斷星形細(xì)胞瘤的惡性程度。第36頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑵

VEGF表達(dá)與腫瘤增殖及預(yù)后差有關(guān)

部分腫瘤細(xì)胞表面也存在VEGF受體，使瘤細(xì)胞產(chǎn)生的VEGF作為一種自分泌生長(zhǎng)因子可直接刺激腫瘤細(xì)胞增殖。表達(dá)KDR/flk-1的胰腺癌細(xì)胞系，經(jīng)VEGF處理后，導(dǎo)致了癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，而用flk-1反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染后會(huì)明顯抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，此結(jié)果提示胰腺癌中存在著VEGF受體的自分泌旁分泌促有絲分裂環(huán)機(jī)制。

VEGF表達(dá)對(duì)于鑒別一些介于良、惡性病變間的病例具有一定的臨床價(jià)值，VEGF表達(dá)與腫瘤分期、分化、腫瘤生長(zhǎng)、預(yù)后差呈正相關(guān)（卵巢癌、鼻咽癌、乳腺癌等）。第37頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日5、與VEGF作用相關(guān)的分子

許多因子調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞上VEGF的表達(dá)，同時(shí)由腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF又通過某些機(jī)制刺激其他分子的表達(dá)。VEGF通過與這些分子的相互作用或協(xié)同作用而發(fā)揮生理學(xué)效應(yīng)。

VEGF主要的作用因素：低氧。其他引起VEGF過表達(dá)因子：細(xì)胞因子（如EGF、bFGF）、某些激素（如甲狀腺球蛋白）及癌基因（如ras、src）與腫瘤抑制基因（如VonHippelLindau蛋白）。第38頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日㈡堿性纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）1、bFGF的分子結(jié)構(gòu)

bFGF是由155個(gè)氨基酸所組成，其基因位于人類染色體的4q25處，基因長(zhǎng)約38kb。bFGF的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物有4種，1.2kb、2.2kb、3.7kb和7.0kb，主要表達(dá)的是3.7kb和7.0kb，bFGF的基因轉(zhuǎn)錄是受其5’的UTR序列的調(diào)控，但其轉(zhuǎn)錄長(zhǎng)度的不同主要是產(chǎn)物中3'UTR的長(zhǎng)短所決定的。

第39頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日2、bFGF的生物學(xué)功能⑴

是一種廣譜有絲分裂原(mitogen)，具有廣泛的細(xì)胞增殖效應(yīng)。⑵

誘導(dǎo)新生血管形成。bFGF作用于新生血管形成過程中的多個(gè)環(huán)節(jié)。bFGF可上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌膠原酶、UPA及其受體、整合素等，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增生、遷移。⑶

bFGF在傷口愈合過程中發(fā)揮重要作用。⑷

在胚胎的早期發(fā)育過程中bFGF也起重要作用。第40頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日⑸

bFGF參與了神經(jīng)系統(tǒng)的分化與維持。它是對(duì)神經(jīng)細(xì)胞有突出作用的多功能生長(zhǎng)因子，促進(jìn)大腦神經(jīng)元的存活及神經(jīng)突的生長(zhǎng)。⑹

bFGF對(duì)骨組織的損傷有修復(fù)作用，體外實(shí)驗(yàn)表明外源性植入bFGF能明顯促進(jìn)骨形成過程。bFGF對(duì)軟骨細(xì)胞既是分裂原又是形態(tài)發(fā)生因子。⑺

體內(nèi)過度表達(dá)的bFGF參與腎小球內(nèi)皮細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)積聚，影響腎小球腎炎和和腎小球硬化過程。

第41頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日3、bFGF與腫瘤血管生成

bFGF通過2種途徑參與腫瘤血管形成⑴通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的活性。bFGF穿透內(nèi)皮細(xì)胞釋放蛋白水解酶消化ECM，并且bFGF對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有趨化性。⑵誘導(dǎo)VEGF的表達(dá)及與VEGF的協(xié)同作用，VEGF也可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞生成釋放bFGF。同時(shí)VEGF體外促血管生成的作用以及誘導(dǎo)纖溶酶原激活物(PA)的能力有賴于內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的bFGF。

第42頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日㈢其它血管生成因子

由于這么多促進(jìn)因子的存在，所以只抑制一個(gè)促進(jìn)因子不足以抑制整個(gè)血管生成過程，這也解釋了為何抑制腫瘤血管生成過程困難重重的原因。第43頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日二、缺氧對(duì)血管生成的誘導(dǎo)作用

VEGF調(diào)節(jié)途徑涉及一種在缺氧狀態(tài)下激活的轉(zhuǎn)錄因子(缺氧誘導(dǎo)因子1，HIF1)，缺氧不僅通過HIF1增加VEGF的轉(zhuǎn)錄，而且使VEGFmRNA穩(wěn)定性增加。第44頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日在腫瘤組織中，缺氧一方面可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡，另一方面也刺激瘤細(xì)胞上調(diào)血管生成因子的表達(dá)。第45頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日三、腫瘤血管生成抑制因子1、血管抑素（agiostatin）：氨基酸序列分析提示血管抑素與纖溶酶原N末端地第98位氨基酸殘基到440位氨基酸殘基內(nèi)有98%的同源性片段。研究指出血管抑素與細(xì)胞表面ATP合成酶а亞單位的結(jié)合可能是抗腫瘤的另一種方式。

第46頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日2、內(nèi)皮抑素(endostatin)：分子量約20kD,有更強(qiáng)的抗腫瘤血管形成作用。氨基酸序列分析提示內(nèi)皮抑素為ⅩⅧ型膠原C末端的一個(gè)片段。有效濃度的內(nèi)皮抑素可限制腫瘤生長(zhǎng),使腫瘤處于休眠狀態(tài)或使腫瘤退化到難以測(cè)量到的微小體積,而不產(chǎn)生耐藥性。第47頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日內(nèi)皮抑素

Endostatin

的發(fā)現(xiàn)O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.第48頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.內(nèi)皮抑素Endostatin的抑瘤試驗(yàn)第49頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日抗腫瘤血管生成治療-內(nèi)皮抑制素及其作用機(jī)理。

FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,2005.內(nèi)皮抑素的作用機(jī)理第50頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日內(nèi)皮抑素的作用機(jī)理1、下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF

的表達(dá)。2、抑制金屬蛋白酶MMP-2

的活性。3、抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移，引起細(xì)胞周期停滯，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。4、降低體內(nèi)血管生成促進(jìn)因子的表達(dá)，提高體內(nèi)血管生成抑制因子的表達(dá)，通過影響人體基因組近12%的基因來抑制體內(nèi)的病理性血管生成。

第51頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日1989年,Tombran-Tink等從胎兒視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中最初分離出PEDF,此后在人和鼠中克隆和純化。PEDF在視網(wǎng)膜基質(zhì)中以較高的濃度存在。分子量50kD。位于染色體17p13。PEDF屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑基因家族,但不具備抗蛋白酶活性。

PEDF最早在人胚胎RPE細(xì)胞中表達(dá),顯示PEDF是影響早期神經(jīng)元發(fā)育的一個(gè)候補(bǔ)因子。隨后研究表明,PEDF不僅對(duì)原代培養(yǎng)的小腦顆粒細(xì)胞的生存有顯著促進(jìn)作用,還可以有效地促進(jìn)脊髓神經(jīng)元的分化和生存。3.PEDF第52頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日PEDF除了上述的神經(jīng)保護(hù)作用外,Dawson等1999年首次發(fā)現(xiàn)PEDF還具有很強(qiáng)的抑制血管的作用,可能是維持角膜,玻璃體等眼內(nèi)組織無血管形成的主要原因,在玻璃體內(nèi)是主要的血管增生抑制劑。PEDF與腫瘤的關(guān)系。第53頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日對(duì)于絕大多數(shù)腫瘤來說，僅約1/1000的腫瘤細(xì)胞具備浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移能力。原發(fā)腫瘤細(xì)胞必須獲得進(jìn)入血管系統(tǒng)的途徑，能夠在循環(huán)中生存、靶器官微血管內(nèi)著床、進(jìn)入靶器官和誘發(fā)靶器官內(nèi)的血管形成，才能完成轉(zhuǎn)移；而且，轉(zhuǎn)移瘤的細(xì)胞擴(kuò)散再導(dǎo)致新的轉(zhuǎn)移瘤的形成，同樣需要經(jīng)過這一連鎖過程。

腫瘤血管形成與腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系第54頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

新生毛細(xì)血管由于基底膜不完整且存在滲漏現(xiàn)象，為腫瘤轉(zhuǎn)移提供了阻力最小的通道。而且，內(nèi)皮細(xì)胞分泌的膠原酶和纖維蛋白溶酶原激活物(PA)加強(qiáng)了毛細(xì)血管突起部的浸潤(rùn)趨化行為。實(shí)際上，這些“浸潤(rùn)性”毛細(xì)血管“吞噬”腫瘤細(xì)胞的行為,使腫瘤細(xì)胞更容易轉(zhuǎn)移而擴(kuò)散。腫瘤的血管形成能加強(qiáng)生長(zhǎng)活躍的周邊部位腫瘤細(xì)胞與淋巴管的密切接觸；或者增加淋巴靜脈管的數(shù)量使更多的血管內(nèi)微轉(zhuǎn)移細(xì)胞團(tuán)進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。

第55頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日第四節(jié)

抗腫瘤血管形成的治療研究

一、抗血管形成靶向治療的優(yōu)點(diǎn)1、除對(duì)某些生理及創(chuàng)傷情況下的血管形成具有一定程度的抑制作用外，可避免骨髓抑制、胃腸道及心臟損害等毒性反應(yīng)；2、主要通過細(xì)胞因子、受體及信號(hào)傳導(dǎo)過程發(fā)揮作用，避免影響遺傳物質(zhì)而導(dǎo)致基因突變的繼發(fā)性癌癥；3、該方法作用于具有遺傳穩(wěn)定性的內(nèi)皮細(xì)胞，不易發(fā)生耐藥；第56頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日

4、血管生成與腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，抗血管生成治療具有廣譜作用；

5、抗血管生成治療可與化、放療聯(lián)合應(yīng)用，具有協(xié)同作用,并減輕后者的毒副反應(yīng)。第57頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日二、血管生成抑制劑

1、直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞的抑制劑其中以血管抑素、內(nèi)皮抑素較為重要。2、對(duì)抗血管生成的因子此類抑制劑通過選擇性地抑制一種或幾種血管生成因子或通過阻斷其受體而發(fā)揮作用。血管緊張素-2、蛋白激酶Cβ抑制劑、SU5416（VEGF受體Flk－1/KDR酪氨酸激酶的抑制物）3、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(MMPI)第58頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日4、Avastin

Avastin是一種重組人單克隆抗體，能中和VEGF,抗血管新生。

2004年2月份，美國(guó)FDA以快速通道方式，批準(zhǔn)該藥作為轉(zhuǎn)移性結(jié)－直腸癌聯(lián)合用于化療的第一線藥物。2004年10月歐洲人類醫(yī)學(xué)產(chǎn)品委員會(huì)（CHMP）也批準(zhǔn)該藥應(yīng)用于臨床。美國(guó)國(guó)立癌癥研究所等作了一份隨機(jī)對(duì)照多中心研究，受試者包括829例轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者，隨機(jī)接受化療加Avastin或單用化療。結(jié)果顯示加用Avastin的患者死亡危險(xiǎn)性下降26％，生存期與單用化療組相比，延長(zhǎng)2個(gè)月。該藥對(duì)其他癌，如非小細(xì)胞性肺癌、胰腺癌、腎細(xì)胞癌也可能有效，目前正在試驗(yàn)中。

第59頁，共65頁，2023年，2月20日，星期日三、抗腫瘤血管形成的基因治療

基因治療即通過載體將目的基因?qū)塍w內(nèi)，通過作用于mRNA或表達(dá)特定的蛋白質(zhì)而發(fā)揮其抗血管生成作用。主要作用機(jī)制為:抑制血管生成因子基因的表達(dá)；干擾內(nèi)皮細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)；直接導(dǎo)入抑制血管生成基因,表達(dá)特定的血