免疫學(xué)診斷試驗(yàn)課件

臨床常用免疫學(xué)檢驗(yàn)第一節(jié)概述臨床應(yīng)用1.為臨床確定診斷提供依據(jù)2.具有很高的臨床診斷參考價(jià)值3.判斷機(jī)體免疫功能高低和免疫耐受力

一、細(xì)胞免疫及相關(guān)分子檢查1.免疫細(xì)胞T細(xì)胞T細(xì)胞亞群及其功能B細(xì)胞表面標(biāo)志；表面受體；亞群NK細(xì)胞巨噬細(xì)胞其他細(xì)胞2.CD分子3.細(xì)胞因子白細(xì)胞介素干擾素TNFCSFG-CSF；GM-CSF；M-CSF；EPO生長(zhǎng)因子四、自身免疫病的免疫學(xué)檢測(cè)1.ANA2.抗雙鏈DNA抗體抗ENA抗體抗線粒體抗體抗平滑肌抗體抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體RFCRP五、腫瘤免疫檢查六、移植免疫學(xué)檢查七、感染免疫學(xué)檢查1.病毒性肝炎2.AIDS3.性傳播疾病（STD）4.其他免疫功能檢驗(yàn)

(ImmunologicFunctionTest)

免疫功能檢驗(yàn)分為細(xì)胞免疫功能檢驗(yàn)和體液免疫功能檢驗(yàn)，對(duì)于了解患者的免疫狀態(tài)，以及細(xì)胞的各種功能，為深入研究和認(rèn)識(shí)機(jī)體免疫系統(tǒng)的生理、病理改變，闡明某些疾病的發(fā)病機(jī)制和臨床診斷與治療將提供有利的信息。下面簡(jiǎn)單介紹臨床常用的一些免疫檢驗(yàn)項(xiàng)目〖參考值〗依年齡、性別、地區(qū)等因素有差異。

IgG：6.94－16.18g/L

IgA：0.68－3.78g/L

IgM：0.60－2.63g/L

〖臨床意義〗

1.Ig含量減低：一種或多種Ig水平減少，分原發(fā)性和繼發(fā)性。見于各種先天性或獲得性免疫缺陷病。繼發(fā)性常與免疫抑制劑應(yīng)用、射線、蛋白質(zhì)丟失、營(yíng)養(yǎng)不良等有關(guān)。也可見于細(xì)胞毒藥物治療后。

2.Ig含量增高：(1)多克隆性增高，見于各種慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病，如SLE、RA、SS等；也見于寄生蟲疾病、結(jié)節(jié)病等。(2)單克隆性增高，又稱“M”蛋白，主要見于免疫增殖性疾病，如多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、輕鏈病，巨球蛋白血癥等。

〖注意事項(xiàng)〗

Ig水平與年齡、性別有一定的關(guān)系，Ig含量因檢測(cè)方法不同而有差別，各地區(qū)參考值也不相同，在判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)綜合考慮。如有“M蛋白”，可進(jìn)一步作血清或尿液免疫電泳，檢測(cè)輕鏈和重鏈。

〖臨床意義〗

1.IgE增高：見于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、特應(yīng)性哮喘、特應(yīng)性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、寄生蟲感染、熱帶嗜酸細(xì)胞增多癥、SLE、RA及某些霉菌病等。

2.IgE減低：一般無(wú)意義。可見于原發(fā)性無(wú)丙種球蛋白血癥、惡性腫瘤及細(xì)胞毒藥物治療后。

〖注意事項(xiàng)〗

年齡、性別均可影響總IgE水平。一般男性高于女性；新生兒水平低，青春期水平最高，30歲以后逐漸下降。不同種族血清總IgE水平也有差別，混血人種比白人高3－4倍，黑人水平更高，黃種人水平也較高。總IgE水平高不一定是過(guò)敏；過(guò)敏者總IgE也不一定高。因此，在評(píng)價(jià)總IgE結(jié)果時(shí)要考慮到以上因素。

三.特異性IgE抗體（sIgE)的檢測(cè)

過(guò)敏患者的血清中存在著具有變應(yīng)原特異性的IgE稱之為特異性IgE,如對(duì)牛奶過(guò)敏者則有針對(duì)牛奶變應(yīng)原的IgE；對(duì)蒿草花粉過(guò)敏者，則有針對(duì)該花粉的IgE，該抗體只能與該變應(yīng)原特異性結(jié)合。

(一)總補(bǔ)體活性測(cè)定（50%hemolyticunitofcomplement，CH50)

Complement可使溶血素(抗體)致敏的SRBC裂解而發(fā)生溶血，補(bǔ)體活性與溶血程度呈正相關(guān)。根據(jù)產(chǎn)生50%溶血所需要的最小補(bǔ)體量，可計(jì)算出血清總補(bǔ)體的活性。

〖參考值〗75－160U/ml

〖臨床意義〗

.增高：常見于各種急性炎癥、組織損傷、心肌梗死和某些惡性腫瘤等。

.降低：見于各種免疫復(fù)合物性疾病，如SLE、急、慢性腎小球腎炎、自身免疫性溶血性貧血。也可見于病毒性肝炎、DIC、蛋白丟失性腸病、嚴(yán)重灼傷、急性粒細(xì)胞性白血病等。

〖注意事項(xiàng)〗

待測(cè)血清需新鮮、無(wú)溶血。測(cè)定方法有試管法、微量板法，近來(lái)又有生化儀器法等。不同方法具有不同的參考值。

〖臨床意義〗

1.C3增高：見于某些急性炎癥或傳染病早期以及某些惡性腫瘤等。

2.C3降低：見于SLE、RA、急性腎小球腎炎、肝臟疾病、冷球蛋白血癥等。狼瘡腎炎時(shí)血清中C3含量降低，當(dāng)病情好轉(zhuǎn)時(shí)，含量恢復(fù)正常。

(三),補(bǔ)體C4測(cè)定（Complement4，C4)

C4是一種多功能的β1-球蛋白，也是補(bǔ)體系統(tǒng)中的主要成分。在補(bǔ)體傳統(tǒng)活化途徑中發(fā)揮重要作用。裂解后的產(chǎn)物在補(bǔ)體的活化、促進(jìn)吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和毒素等方面發(fā)揮很大作用。檢測(cè)方法同C3測(cè)定。

〖參考值〗0.16～0.47g/L

〖臨床意義〗

1.升高：見于風(fēng)濕熱的急性期、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周圍炎、皮肌炎、心肌梗死、Reiter綜合征和各種類型的關(guān)節(jié)炎。

2.降低：見于自身免疫病，例如：SLE、RA、慢性活動(dòng)性肝炎、多發(fā)性硬化癥、IgA型腎病等。在SLE，C4含量下降明顯，并較C3下降為早。

檢測(cè)方法有多種，如聚乙二醇沉淀法、C1q結(jié)合法等。PEG可引起蛋白沉淀，蛋白分子愈大沉淀所需PEG濃度愈小。CIC分子量較大，且抗原-抗體結(jié)合后發(fā)生構(gòu)型改變，而被低濃度PEG從液相中析出，PEG還抑制CIC解離，促使CIC聚合成更大的凝聚物而被沉淀，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)450nm處測(cè)定吸光度。計(jì)算出濁度值，可知CIC的存在和含量。

〖參考值〗PEG沉淀法：<10U/ml

〖臨床意義〗

1.CIC陽(yáng)性常見于自身免疫病如SLE、RA等，也可見于血清病、慢性活動(dòng)性肝炎、細(xì)菌感染、傳染病、惡性腫瘤等。

2.動(dòng)態(tài)檢測(cè)CIC的變化，可監(jiān)測(cè)疾病的發(fā)展、判斷療效及預(yù)后。

應(yīng)用抗CD抗原的單克隆抗體，如抗CD3、抗CD4、抗CD8等，對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，依據(jù)各單抗的陽(yáng)性率，判定各Tcell亞群，并算出CD4/CD8的比值。測(cè)定方法有IFA、IEA、APAAP法、流式細(xì)胞儀法等。

〖參考值〗（IFA法）總T細(xì)胞（CD3+）53-88%；CD4+細(xì)胞32-60%；CD8+細(xì)胞20-40%。CD4+/CD8+1.5-2.0。

（流式細(xì)胞儀法）

總T細(xì)胞（CD3+）955-2860/μl；CD4+細(xì)胞27-51%，550-1440μl；CD8+細(xì)胞15-44%，320-1250μl。CD4+/CD8+0.64-2.85。

〖臨床意義〗

Tcell亞群在許多臨床疾病中可發(fā)生異常改變，特別是免疫功能受損病人。測(cè)定Tcell亞群變化對(duì)了解疾病的發(fā)病機(jī)制、指導(dǎo)臨床治療、控制疾病的發(fā)生發(fā)展均有重要意義。

1.在自身免疫病中，如SLE、RA、自身免疫性溶血性貧血，以及乙型肝炎病人常表現(xiàn)為CD8＋細(xì)胞的數(shù)量及功能低下，有時(shí)也有CD4＋細(xì)胞增高，CD4+/CD8+比值升高。

2.免疫缺陷病患者CD4+/CD8+比值減少，如AIDS病人，CD4+顯著減少，常出現(xiàn)CD4+/CD8+比值倒置。常作為HIV感染者的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

3.感染性疾病患者免疫抑制功能增強(qiáng)，表現(xiàn)為CD8+細(xì)胞的數(shù)量及功能都異常增高。病毒感染時(shí)，CD3+、CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增多，CD4+/CD8+比值降低。

4.腫瘤病人CD3+，CD4+細(xì)胞明顯減少，CD8+明顯增加，CD4+/CD8+比值明顯下降。據(jù)此，可了解機(jī)體的免疫狀態(tài)，指導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)劑及治療藥物的應(yīng)用。

5.支氣管哮喘病人，在過(guò)敏原激發(fā)后，外周血CD4+T細(xì)胞迅速降低，支氣管肺泡灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞則增高。過(guò)敏性鼻炎患者CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞均比正常人低。

6.血液系統(tǒng)疾病Tcell亞群也有相應(yīng)變化，如再生障礙性貧血、粒細(xì)胞減少癥時(shí)CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增多，CD3+/CD8+比值下降。

〖注意事項(xiàng)〗

Tcell亞群檢測(cè)方法很多，參考值也不盡相同，在判斷結(jié)果時(shí)要全面考慮，結(jié)合臨床及其他檢查。此外，利用上法也可測(cè)定B細(xì)胞、NK細(xì)胞等。流式細(xì)胞儀法，B細(xì)胞絕對(duì)值為90-560/μl，百分?jǐn)?shù)為5-18%，NK細(xì)胞絕對(duì)數(shù)為150-1100/μl，百分?jǐn)?shù)為7-40%。華人較其他種族有較高的NK細(xì)胞值。

第四節(jié)

自身免疫病和風(fēng)濕病的免疫學(xué)檢驗(yàn)

自身免疫?。ˋID)是指由于過(guò)度而持久的自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致組織器官損傷并引起相應(yīng)器官病變或臨床癥狀的一類疾病。風(fēng)濕病是一類涉及到關(guān)節(jié)、軟骨、肌肉等結(jié)締組織的慢性疾病。實(shí)驗(yàn)室檢查特別是免疫學(xué)檢查對(duì)AID和風(fēng)濕病的診斷是及其重要的。有些檢查可作為診斷指標(biāo)之一；有些檢查可作為病情進(jìn)展和預(yù)后判斷的監(jiān)測(cè)指標(biāo)；有些檢查可作為藥物療效的考核指標(biāo)之一。隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及分子生物學(xué)的應(yīng)用，各種自身抗體的檢查越來(lái)越多地應(yīng)用于臨床。作為臨床醫(yī)生，應(yīng)該熟悉這些檢驗(yàn)的意義，并能結(jié)合臨床及其他檢查，客觀地運(yùn)用這些指標(biāo)，協(xié)助診斷，了解病情，指導(dǎo)治療。這里僅介紹臨床常用的一些自身抗體的檢測(cè)。

1.抗核抗體（Antinuclearantibody,ANA)測(cè)定

ANA是抗細(xì)胞核多種成分的自身抗體，無(wú)種屬及器官特異性。ANA可分為抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、抗非組蛋白抗體、抗核仁抗體及其他細(xì)胞成分抗體。這些抗體共同組成ANA譜。常用檢測(cè)方法為IFA、ELISA、免疫印跡法、RIA、免疫斑點(diǎn)法、膠體金標(biāo)斑點(diǎn)免疫滲濾法等。其中IFA是應(yīng)用較廣的一種方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2細(xì)胞為底物抗原片，當(dāng)加入病人血清時(shí)，病人血清中的ANA可與細(xì)胞中相應(yīng)抗原成分結(jié)合。再加入熒光標(biāo)記抗人IgG，在熒光顯微鏡下可見細(xì)胞核內(nèi)亮綠色熒光。

〖參考值〗<1:10或陰性

〖臨床意義〗

ANA陽(yáng)性見于多種疾病，常用于風(fēng)濕病及自身免疫病的診斷。SLE患者陽(yáng)性率在95％以上，且效價(jià)常在1：80以上。在其他風(fēng)濕病如RA、系統(tǒng)性硬化癥、皮肌炎、干燥綜合征(SS)、混合結(jié)締組織病(MCTD)等也可陽(yáng)性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效價(jià)陽(yáng)性。

ANA陽(yáng)性，在熒光顯微鏡下一般分為4個(gè)型別：(1)均質(zhì)型，是針對(duì)DNA與組蛋白復(fù)合物的抗體，常見于SLE；(2)周邊型或膜型，主要是針對(duì)雙鏈DNA的抗體，一般只見于SLE活動(dòng)期；(3)斑點(diǎn)型，是針對(duì)可提取性核抗原（ENA）的抗體，見于SLE、MCTD等許多風(fēng)濕性疾??；(4)核仁型，主要是針對(duì)RNA的抗體，主要見于系統(tǒng)性硬化癥。

〖注意事項(xiàng)〗

正常人中特別是老年人中可有低效價(jià)的ANA，此外，口服避孕藥的婦女也可檢測(cè)到ANA。

（一）抗Sm抗體

Sm是病人Smith的縮寫。Sm抗原屬于SnRNP，由5個(gè)RNA和多肽組成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗體是酸性糖蛋白，是SLE的標(biāo)記抗體。

(二)抗nRNP(u1RNP)抗體

u1RNP是u1RNA和蛋白質(zhì)組成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是MLTD的重要血清標(biāo)志。

（三）抗SSA抗體

SS為干燥綜合征的縮寫。此抗體又稱抗RO抗體。SSA抗原是RNA和蛋白質(zhì)復(fù)合物，抗原表位在52KD多肽上，主要見于原發(fā)性干燥綜合征患者及SLE。

（四）抗SSB抗體

SSB抗體常伴隨SSA抗體同時(shí)出現(xiàn)，又稱抗La抗體，SSB抗原屬于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白質(zhì)的復(fù)合物?？乖砦辉?5KD、47KD和48KD多肽上。與SSA抗體并存對(duì)診斷SS有特異性。

（五）抗Scl-70抗體

Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的降解產(chǎn)物，抗Scl-70抗體幾乎僅見于硬皮病，陽(yáng)性率30%左右。

（六）抗Jo-1抗體

Jo-1抗體是組氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗體是多發(fā)性肌炎和皮肌炎的標(biāo)記抗體，陽(yáng)性率25-40%。

（七）抗核糖體抗體

核糖體在核仁合成，然后轉(zhuǎn)入胞漿，抗原表位在大亞基上的38KD、16KD和15KD多肽上?？购颂求w抗體陽(yáng)性主要見于SLE，陽(yáng)性率20-30%。

檢測(cè)以上抗體的方法主要有：對(duì)流免疫電泳法(CIE)、雙相免疫擴(kuò)散法，免疫印跡試驗(yàn)(IBT)，免疫斑點(diǎn)技術(shù)和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或細(xì)胞提取物作為抗原。近年來(lái)，應(yīng)用分子重組抗原制備的試劑盒已投入市場(chǎng)。

〖參考值〗陰性

〖臨床意義〗

1.抗nRNP抗體：見于35－40％的SLE病人，在MCTD病人中陽(yáng)性率可達(dá)95－100％，也可見于其他風(fēng)濕性疾病。

2.抗Sm抗體：主要見于SLE及重疊綜合征，急性期病人75％為陽(yáng)性。一般SLE患者30－40％陽(yáng)性率。但Sm抗體陽(yáng)性者90％以上為SLE，故稱之為SLE的標(biāo)記抗體。

3.抗SSA和抗SSB抗體：見于40－45％的SS病人。抗SSA抗體也可見于25％的SLE病人及其他風(fēng)濕性疾??；抗SSA抗體與新生兒狼瘡和先天性傳導(dǎo)阻滯有關(guān)。抗SSA抗體也可見于病毒感染等非風(fēng)濕性疾病?？筍SB抗體對(duì)原發(fā)性干燥綜合征較特異，但陽(yáng)性率僅27％左右。

4.抗Scl-70抗體：一般僅見于系統(tǒng)性硬化癥病人，陽(yáng)性率20－60％。

5.抗Jol-1抗體見于30％的多發(fā)性肌炎病人及10％的皮肌炎病人?？笿ol-1抗體與多發(fā)性肌炎病人間質(zhì)性肺炎的發(fā)生率增加有關(guān)。

6.抗rRNP抗體：主要見于SLE患者，陽(yáng)性率20%左右，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變有關(guān)，多在疾病活動(dòng)期出現(xiàn)。

〖注意事項(xiàng)〗

判斷試驗(yàn)結(jié)果時(shí)要結(jié)合臨床表現(xiàn)作出評(píng)價(jià)，也應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)方法來(lái)作出解釋。對(duì)流免疫電泳法和雙相擴(kuò)散法敏感性低，但特異性較高；免疫印跡法、斑點(diǎn)免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特異性相對(duì)減少。

三.抗雙鏈DNA抗體（Antidouble-strandedDNA，A-dsDNA，)

A-dsDNA對(duì)SLE有高度特異性，是針對(duì)細(xì)胞核脫氧核糖核酸的自身抗體。臨床上常用的檢測(cè)方法有：①Farr‘s法：125I－DNA與待檢標(biāo)本中的A-dsDNA形成免疫復(fù)合物，加飽和硫酸銨使復(fù)合物沉淀，以γ計(jì)數(shù)器分別測(cè)定上清中游離及沉淀物中已結(jié)合的125I－DNA含量，可計(jì)算出血清中A－dsDNA的結(jié)合活性。②ELISA法：將小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA則結(jié)合到微孔板上，加入酶標(biāo)抗人IgG，加入底物顯色后經(jīng)酶標(biāo)儀比色可知血清中A-dsDNA抗體的量。③免疫熒光法：采用馬疫錐蟲或短膜蟲作為基質(zhì)，加入病人血清。血清中的A-dsDNA與膜上的天然DNA結(jié)合，加入熒光標(biāo)記抗人IgG。馬疫錐蟲和短膜蟲的動(dòng)基體會(huì)發(fā)出綠色熒光。④金標(biāo)斑點(diǎn)法：雙鏈DNA包被于硝酸纖維膜上，加入病人血清，加入金標(biāo)記抗人IgG，如有A-dsDNA存在，會(huì)顯示紅色斑點(diǎn)。

〖參考值〗依方法不同參考值也有不同。

Farr‘s法：≤0.20免疫熒光法：<1:10

ELISA法：依試劑盒而定，一般<70u金標(biāo)法：陰性

〖臨床意義〗

A-dsDNA陽(yáng)性對(duì)SLE有較高的特異性。大約60％的活動(dòng)性SLE病人會(huì)出現(xiàn)A-dsDNA。其他風(fēng)濕性疾病也會(huì)出現(xiàn)，但陽(yáng)性率非常低，如RA、S.S。

〖注意事項(xiàng)〗

假陽(yáng)性結(jié)果非常少見，但陰性亦不能排除SLE的診斷。

四.抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（Antineutrophilcytoplasmicantibody,ANCA)測(cè)定

ANCA是針對(duì)中性粒細(xì)胞胞漿多種成分的自身抗體，主要有髓過(guò)氧化物酶(MPO)和蛋白酶3（Proteinase3，PR3)的抗體。主要用于診斷Wegener肉芽腫和系統(tǒng)性血管炎，特別是伴有腎病、呼吸疾病或其他類型血管炎引起多器官損害的患者。檢測(cè)方法有IFA、ELISA、IBT等。

〖參考值〗陰性。

〖臨床意義〗

免疫熒光法檢查ANCA陽(yáng)性一般分為兩種熒光類型，一種是胞漿型，稱為cANCA，一種是核周型，稱為pANCA。cANCA產(chǎn)生彌漫性細(xì)胞漿染色，是針對(duì)PR3的抗體，一般見于wegener肉芽腫病(WG)，特別是腎和肺受累的病人。pANCA產(chǎn)生核周染色，是針對(duì)MPO的抗體，主要見于系統(tǒng)性血管炎病人。在WG病人中，cANCA陽(yáng)性率在活動(dòng)期可達(dá)80％，且有較高的抗體效價(jià)。在緩解期抗體陽(yáng)性率低，且效價(jià)下降，或完全消失。

〖注意事項(xiàng)〗

ANCA陽(yáng)性也可見于Good-Pastare‘s綜合征和SLE病人。WG的診斷不能單純依賴ANCA的結(jié)果，還要結(jié)合其他臨床表現(xiàn)，試驗(yàn)室檢查和組織病理學(xué)檢查才能確定。ANCA效價(jià)不能完全反應(yīng)疾病的活動(dòng)以及對(duì)治療的反應(yīng)。pANCA陽(yáng)性不是特異性的抗MPO抗體，也可以是抗粒細(xì)胞胞漿中其他酶的抗體，如彈性蛋白酶，組織蛋白酶G等。ANCA檢測(cè)應(yīng)注意排除其他自身抗體的交叉反應(yīng)，如ANA。因其可產(chǎn)生假陽(yáng)性應(yīng)注意鑒別，并進(jìn)行ANA檢測(cè)。

五.抗線粒體抗體（Antimitochondrialantibody,AMA)

AMA是以細(xì)胞漿中的線粒體為抗原的一種自身抗體，無(wú)器官和種屬特異性。一般采用大鼠腎及胃作為抗原基質(zhì)，采用IFA檢測(cè)，陽(yáng)性可見大鼠腎和胃的細(xì)胞漿呈現(xiàn)細(xì)顆粒狀熒光。采用免疫印跡法可將與線粒體抗原的反應(yīng)分為從M1到M9九種類型，高效價(jià)的M2和M9型自身抗原與原發(fā)性膽汁性肝硬變相關(guān)。目前已有檢測(cè)M2的ELISA試劑盒供應(yīng)。

〖參考值〗陰性

>1：10為陽(yáng)性

〖臨床意義〗

AMA是原發(fā)性膽汁性肝硬化的標(biāo)記抗體，陽(yáng)性率達(dá)90%，并且50%患者抗體效價(jià)達(dá)1：1280或更高。此外，也可見于慢性活動(dòng)性肝炎、隱匿性肝硬化。肝外阻塞性黃疸患者AMA常陰性，因此可作為鑒別診斷的一個(gè)指標(biāo)。正常人中陽(yáng)性率<10%，且效價(jià)較低。

六.抗平滑肌抗體（Antismoothmuscleantibody，ASMA)

ASMA是抗肝細(xì)胞膜上一種肌動(dòng)球蛋白的自身抗體。這種肌動(dòng)球蛋白與平滑肌有交叉抗原性，因此與平滑肌有反應(yīng)。一般采用IFA法，以大鼠胃作為抗原基質(zhì)，陽(yáng)性可見胃壁平滑肌呈現(xiàn)亮綠色熒光。

〖參考值〗陰性，>1：10為陽(yáng)性

〖臨床意義〗

主要見于明顯活動(dòng)期的自身免疫性肝炎患者，陽(yáng)性率在80%以上，效價(jià)在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可陽(yáng)性，且早于HBsAg出現(xiàn)。其他疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽(yáng)性率。正常人中僅有2%陽(yáng)性。

七.抗甲狀腺球蛋白抗體（ATGA)和抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)

ATGA是由甲狀腺炎引起的自身抗體，抗原是一種糖蛋白。ATGA有器官特異性而無(wú)種屬特異性。ATMA的抗原是甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)的脂蛋白。常用檢測(cè)方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。

〖參考值〗

IHA：血清效價(jià)≤1：32，>1：32為陽(yáng)性，ATGA和ATMA

ELISA：正常為陰性，P/N<2.1，>2.1為陽(yáng)性,ATGA和ATMA

RIA：ATGA<30%；ATMA<15%

〖臨床意義〗

主要見于橋本甲狀腺炎、甲亢、甲低患者，也可見于甲狀腺瘤、惡性貧血、重癥肌無(wú)力、Edison病和肝臟疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的陽(yáng)性率。

正常人也可檢出這兩種抗體，并且隨著年齡的增長(zhǎng)，陽(yáng)性率增加，特別是40歲以上婦女，可達(dá)18%左右。

應(yīng)該注意到，有的患者ATGA陰性，但ATMA陽(yáng)性，因此兩種抗體同時(shí)檢測(cè)可提高抗甲狀腺自身抗體的檢出水平。

八.HLA－B27測(cè)定

HLA－B27抗原為人類MHCI類抗原B位點(diǎn)的表達(dá)產(chǎn)物，可分為幾種亞型。HLA－B27的檢測(cè)方法有多種，補(bǔ)體依賴性微量細(xì)胞毒法(CDMA)；流式細(xì)胞儀法；玫瑰花法；ELISA法；等電聚焦法等。近來(lái)應(yīng)用PCR法檢測(cè)HLA－B27，敏感而特異，并且可進(jìn)行B27亞型的分析。

〖參考值〗

非洲－美洲人：3－4%；高家索人：6－8%；亞洲人：1%。

〖臨床意義〗

強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者HLA－B27陽(yáng)性率為90－95%。大約42%的青年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(JRA)存在HLA－B27，Reiter‘s綜合征患者陽(yáng)性率大約79%。此外，腸病性關(guān)節(jié)炎、銀屑病性關(guān)節(jié)炎也有一定的陽(yáng)性率。RA病人陽(yáng)性率不高。

〖注意事項(xiàng)〗

在評(píng)價(jià)HLA－B27陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合考慮，不能單純依靠此結(jié)果作出診斷。

小結(jié):

總之，自身抗體的檢測(cè)對(duì)診斷自身免疫病有著重要的意義。人血清中存在著多種自身抗體，有器官特異性的，也有非器官特異性的。因此，在選擇自身抗體檢測(cè)時(shí)應(yīng)綜合考慮，合理選用。

抗核抗體（ANA）的檢查最常用于篩查全身性風(fēng)濕病和自身免疫病。ANA的檢查可觀察到能與細(xì)胞核內(nèi)的核酸和蛋白抗原起反應(yīng)的自身抗體。細(xì)胞內(nèi)可能存在對(duì)多種抗原起反應(yīng)的自身抗體。細(xì)胞內(nèi)可能存在對(duì)多種抗原起反應(yīng)的抗體。只有某種抗體的效價(jià)很高時(shí)，IFA才能加以鑒別。

在大約1%的正常人的體內(nèi)可測(cè)到低效價(jià)的非特異性抗核抗體，80歲以上老人的檢出率可高達(dá)50%。高效價(jià)的ANA一般與活動(dòng)期SLE密切相關(guān)。采用Hep-2細(xì)胞檢測(cè)ANA，可見到不同的染色模型。

homogenous（均質(zhì)型）

又稱彌散型，相應(yīng)的抗原是雙鏈DNA和組蛋白復(fù)合物。常見于SLE，特別是腎臟受累病人。也可見于其它結(jié)締組織病，如：風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，MCTD，干燥綜合征，硬皮病，慢性活動(dòng)性肝炎及原發(fā)性膽汁性肝硬變。

Peripheral(周邊型)

相應(yīng)的抗原為雙鏈DNA，多見于活動(dòng)性SLE病人。

Speckle(斑點(diǎn)型)

主要是針對(duì)ENA的抗體，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般認(rèn)為低效價(jià)的斑點(diǎn)型ANA不是結(jié)締組織病特有的，實(shí)際上不代表臨床異常。高效價(jià)的抗Sm抗體多與SLE有關(guān)。高效價(jià)的抗RNP自身抗體見于MCTD，但也見于SLE?？筍SA和抗SSB抗體，見于S.