尿液分析檢查標準化

尿液分析檢查標準化第1頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一

尿液分析（Urinalysis）是尿液（Urina）和分析（Analysis）二詞組合，相當于我國沿用的尿常規(guī)（UrineRoutine）檢驗。尿液分析對泌尿系、消化系、心血管、內(nèi)分泌等多種疾病的診斷、鑒別診斷、療效觀察，預后估計；對人群健康保健均有重要價值。更因標本易得、檢測簡便，結(jié)果客觀而成為臨床使用最廣泛的檢驗項目之一。第2頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一由于尿液成份復雜，易受污染，放置時間過長后受理化因素影響而使檢查結(jié)果發(fā)生改變，加上缺乏統(tǒng)一標準要求和檢查方法不一致，導致同一份標本在不同實驗室或同一實驗室不同操作者檢查得出截然不同的結(jié)果。因此，按照標準化要求實施規(guī)范化操作是當前實驗室首要解決的問題。第3頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一1995年，NCCLS（美國臨床檢驗標準委員會）頒布了《尿液分析和尿液樣本的收集，運輸及儲存；批準指南》文件GP16-A，對尿液分析作出全面的指導。第4頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一1999年，NCCLS和CCCLS（中國臨床檢驗標準分委會）正式同意在臨床實驗的標準化與一致性方面進行合作，標志著我國檢驗醫(yī)學已與國際接軌，逐步走上規(guī)范化，法制化管理的軌道。第5頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2002年1月在廣州召開中華醫(yī)學檢驗分會“血液學和體液學專家委員會”全體委員會議上，經(jīng)過認真討論，一致通過由叢玉隆教授起草的《尿沉渣檢查標準化的建議》文件。并建議全國檢驗界參考此文件規(guī)范實驗室的操作。第6頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一尿液分析包括理學、化學、顯微鏡檢查三個組成部份。下面，以NCCLSLiteratrueGP16-A和尿沉渣檢查標準化的建議為基礎(chǔ)，參考JCCLSGP1～P3文件、ECCLS提出尿沉渣檢查的相關(guān)文件和國內(nèi)、外有關(guān)文獻，結(jié)合在實驗室中按標準化的要求實施尿液分析規(guī)范化操作方面談?wù)剛€人的意見，供同道們參考。第7頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一一、標本收集與運送1、

標本收集1.1實驗室工作人員、醫(yī)護人員必需要對病人留尿進行指導，務(wù)必使尿道口保持清潔。第8頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一清晨天然中段尿隨機尿時段尿（起點和終點，起始時先排空膀胱的貯尿）雙份尿?qū)Ч苣虼┐棠?.2在不同時間和方式收集尿液：第9頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一1.3尿量30～50ml。1.4送檢單上應(yīng)注明留尿時間、送檢時間。須說明近期是否給服用對尿液分析有影響的藥物和其它物質(zhì)。第10頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2、標本運送

2.1尿液留取后盡快送實驗室、并應(yīng)在2小時內(nèi)完成檢驗。

2.2如留尿后2小時內(nèi)無法完成分析，可置2-8℃冰箱冷藏，6小時內(nèi)完成檢驗。

2.3如僅作尿沉渣檢查，需加40%甲醛0.5%～1.0%防腐（應(yīng)注意甲醛過量時可與尿素產(chǎn)生沉淀物，干擾顯微鏡檢查）。第11頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3、標本標記病人姓名特定編碼（住院病人的病區(qū)、床號）采集時間。標本必須有標記，并貼于容器上，不可貼在蓋上。第12頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一4、標本接收

標本容器是否符合要求標記內(nèi)容與醫(yī)生所填寫化驗單是否一致留尿到接收標本時間是否過長標本是否被污染尿量不少于30ml特殊病例不能達到此要求時（如小兒、燒傷，腎衰無尿期等）應(yīng)在報告單上注明收到尿量及檢查方法（離心/未離心）。實驗室應(yīng)建立嚴格的標本接收制度，工作人員在接收標本時，必須檢查：第13頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一二、材料及設(shè)備

潔凈、防漏、防滲，一次性使用容積應(yīng)>50ml

園形開口的直徑>4cm

具有較寬的底部盡可能使用具有安全、易于開啟的密封裝置。1、

收集標本的容器2.1收集和運送尿液的容器應(yīng)由不與尿液成份發(fā)生反應(yīng)的惰性材料制成，應(yīng)具備以下條件：第14頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.2離心管潔凈，透明有足夠硬度的塑料管/玻璃管（最好是不易破碎的一次性管）有體積刻度（刻度應(yīng)至少標明10ml、

5ml、1ml、0.2ml）確保容積標準化試管底部呈錐形/縮窄形，以濃集沉淀物有蓋，以減少因尿液濺出/離心形成氣霧的危險無化學干擾物。注：不推薦重復使用離心管。適用于尿離心的試管應(yīng)具備下列特點：第15頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.3離心機

水平式離心機有蓋，當轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)時具備鎖蓋子的功能離心時，機內(nèi)溫度15～25℃

離心機相對離心力（RCF）約400G左右

作尿沉渣時，應(yīng)使用具下列特征的離心機：第16頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一公式：RCF=1.118×10-5×R×N2RCF：相對離心力（用G表示）R：半徑，單位：cm（從離心機軸中央到試管底部的距離）N：每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)第17頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.4尿沉渣計數(shù)板尿沉渣的量和壓（涂）片厚度是標準化重要環(huán)節(jié)，在普通玻片上隨意滴加沉渣液加蓋玻片，或不加蓋玻片，都不能提供標準化的結(jié)果。建議使用標準化的沉渣計數(shù)板。

第18頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.5顯微鏡雙目鏡筒內(nèi)置光源機械載物臺，使玻片易于平穩(wěn)移動基本的物鏡組（10X和40X）及目鏡組（10X/12.5X）如使用多臺顯微鏡時，應(yīng)用相同的物鏡或目鏡。在尿分析實驗室，應(yīng)使用具有下列特點的高質(zhì)量顯微鏡：第19頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.6有條件的實驗室，可配置多種類型顯微鏡（如：位相差顯微鏡、偏振光顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡……等）。第20頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.7自動化設(shè)備有條件的實驗室可使用各類自動，半自動的尿沉渣分析儀作為尿沉渣分析，或用作過篩，但此類儀器必須經(jīng)權(quán)威機構(gòu)認可。第21頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.8計算機處理系統(tǒng)有條件的單位，可用帶計算機成像系統(tǒng)的顯微鏡、標準化的沉渣檢測系統(tǒng)和相關(guān)輔助軟件來自動處理結(jié)果。但檢查方法和尿沉渣結(jié)果報告方法必須標準化。

第22頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.9試紙條判讀器干化學試劑帶結(jié)果，可用兩種方法判讀：2.9.1目測法將反應(yīng)的試劑帶與不同顏色強度的模塊標準圖比較而確定。2.9.2儀器判讀法用反射光度計檢測試條塊表面反射的光量。儀器可檢測試條塊反應(yīng)的強度，并消除由反應(yīng)時間和顏色判讀所引起的差異第23頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一閱讀并按照操作手冊的要求進行操作建立并遵守執(zhí)行保養(yǎng)計劃保持儀器清潔需按儀器廠商的手冊中推薦方案進行校準。使用這些儀器必須按下列要求進行：第24頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一三、檢查方法1、外觀/物理學分析1.1

顏色正常尿液應(yīng)為黃色和琥珀色。病理尿色應(yīng)圍繞紅色、黃色、綠色、棕色、乳白色報告1.2濁度（透明度）正常混勻尿應(yīng)透明。其濁度可用透明、霧狀、云霧狀、渾濁報告。1.3氣味必要時應(yīng)報告。第25頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一1.4比重（SG）建議用折射儀法作為參考方法。（當尿液含X光線反差介質(zhì)、葡萄糖、蛋白時可使結(jié)果增高，應(yīng)予校正。pro1G/dl時SG增高0.003,Glu1G/dlSG增高0.004）。第26頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一干化學試劑帶法是利用SG與離子濃度呈正比原理作SG的估計，尿堿性標本會影響指示劑系統(tǒng)，中量蛋白100～750mg/dl也會增加SG，因此，不能作為檢測和診斷腎功能的指標，更不宜用于新生兒SG測定。非離子性物質(zhì)不影響檢查結(jié)果。第27頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一尿比重計法用置換法測定SG，裝置，操作、標準化方面存在不少問題，不是尿比重測定方法。（也有用滲透壓計和諧波振蕩進行SG測定）。第28頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2、化學分析濕化學分析至少應(yīng)包括糖和蛋白兩項。尿糖可用葡萄糖氧化酶法，條件較差者也可用班氏法：尿蛋白可用磺基水楊酸法或加熱加酸法。干化學分析是用尿“浸漬條”進行，是一種簡單快速，對尿半定量的檢測方法。由于生產(chǎn)尿分析儀和使用的試劑帶廠商繁多，各廠對量級標準不一致，造成醫(yī)院間、醫(yī)院內(nèi)測定結(jié)果差異很大。

第29頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一在使用干化學法分析時應(yīng)注意下列問題：2.1標本必須新鮮，要求在采樣后2小時內(nèi)完成。2.2使用儀器與試劑帶應(yīng)配套，若使用不同廠商生產(chǎn)的試劑帶，必須經(jīng)嚴格對照，確定無顯著性差異時方可代用。第30頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一試劑條貯放于原裝容器內(nèi)，短暫暴露于直射光和室內(nèi)溫度都會使試劑條產(chǎn)生錯誤的結(jié)果。參照廠商規(guī)定，要避光、防潮、干燥，并在一定溫度條件下妥善保存。使用時一次只取出所需要的試劑帶，并立即蓋緊，多余的試劑帶不可再放回容器中。不要合并各容器內(nèi)的試劑帶。不可觸摸試劑帶上的化學檢測塊。2.3所用試劑帶必須優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定，要具備“三證”，要求：第31頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.4干化學法與濕化學法對尿液化學成份檢測原理、靈敏度不同，兩者存在一定差異。如：葡萄糖膜塊用酶法僅能檢測葡萄糖，對乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖均不起反應(yīng)，而班氏法用還原法原理能檢測所有的還原糖；。第32頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一蛋白質(zhì)膜塊用指示劑蛋白誤差法原理僅對白蛋白敏感，靈敏度100～300mg/L，磺基水楊酸法用生物堿的陰離子與蛋白質(zhì)的陽離子結(jié)合成不溶性蛋白鹽沉淀的原理檢測白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白等，靈敏度50～100mg/L，加熱加酸法是通過加熱使蛋白質(zhì)變性凝固，再加酸使蛋白質(zhì)凝固的原理檢測各種蛋白質(zhì)，靈敏度150mg/L；膽紅素膜塊檢測膽紅素的靈敏度為20mg～40mg/L，而濕化學法靈敏度為5mg～10mg/L。第33頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.5干擾干化學法的理化，藥物因素很多，常導致假陽性，假陰性結(jié)果出現(xiàn)，造成誤診及漏診，因此，對干化學結(jié)果，要結(jié)合臨床資料進行分析。第34頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一第35頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.6關(guān)于干化學法檢測紅細胞、白細胞出現(xiàn)假陽性、假陰性問題。在臨床上經(jīng)常遇到尿干化學法檢出BLO、LEU陽性而在顯微鏡下看不到RBC和WBC（假陽性）或尿干化學法陰性而在顯微鏡下看到RBC、WBC（假陰性）。統(tǒng)計國內(nèi)4898例資料，BLO假陽性率為24.2%，假陰性率為30.6%；Leu假陽性率為19.4%，假陰性率為31.2%。第36頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一

另外，伊藤機一博士報告3936例尿定性檢查陰性而臨床上有意義的尿沉渣的觀察結(jié)果頻度：門診386/1935，頻度19.95%；住院674/2001，頻度33.68%；總計1060/3936頻度為26.93%。其中RBC假陰性為21.1%，WBC假陽性為26.9%。（見下表）第37頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一作者例數(shù)鏡檢方法RBCWBC誤診率（%）漏診率（%）誤診率（%）漏診率（%）許建邦、鄧小燕等2458DiaSys法21.031.520.332.8孟海華、楊愛蓮1740離心玻片法32.326.817.429.2方毅等700牛鮑氏板法19.738.020.333.0伊藤機一3936WBC記載法---21.1---26.9第38頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一究其原因是因為干化學法檢測紅、白細胞與顯微鏡檢查紅、白細胞是采用兩種完全不同的原理和方法，如BLO是根據(jù)尿中RBC、游離Hb含有的亞鐵血紅素具有過氧化物酶的作用，在供氫（電子）體的情況下能催化供氫體脫氫（氧化）同時使過氧化氫（H2O2）還原為（H2O）。試劑帶的供氫體是聯(lián)苯胺或（4-氯-1苯酚）的本身不含發(fā)色基因，故無色，當其脫氫后，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，出現(xiàn)了發(fā)色基因（如：或醌式結(jié)構(gòu)）而顯色的原理進行。第39頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一因此，除了尿中有RBC和尿PH值偏高、低滲環(huán)境做成RBC破壞釋出游離HB呈現(xiàn)真陽性外，尿中含肌紅蛋白，細菌過氧化酶污染，易熱酶干擾，氧化型清潔劑，次氯酸鹽的污染都可導致“假陽性”，當在高蛋白尿，高比重尿，高維生素C（>100mg/l），PH<5.0，卡普托利，福爾馬林，樣品未混勻致RBC沉淀，試劑帶靈敏度達不到150mg/l時會出現(xiàn)“假陰性”。第40頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一又如LEU是根據(jù)粒細胞酯酶與吲哚酚酯反應(yīng)生成吲哚酚，再與重氮鹽氧化縮合生成紫色化合物的原理進行，不與淋巴細胞反應(yīng)，當尿中含有福爾馬林、呋喃坦啶、大量膽紅素、氧化型清潔劑時可出現(xiàn)“假陽性”，而當在高比重尿，尿含頭孢霉素VI、慶大霉素、四環(huán)素、硼酸、高濃度草酸時出現(xiàn)“假陰性”。顯微鏡檢查是基于細胞形態(tài)學觀察來判斷RBC和WBC，因此更為準確可靠。第41頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2.7干化學法定位于“過篩試驗”，原則上對陽性結(jié)果應(yīng)用傳統(tǒng)濕化學法復核。按NCCLSLiterationGP16-A規(guī)定：尿蛋白用磺基水楊酸法確證；尿葡萄糖用葡萄糖氧化酶定量法確證；尿膽紅素用哈里遜（Harrison）法確證；尿紅細胞、白細胞用顯微鏡確證。第42頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一目前仍有相當一部分實驗室把干化學結(jié)果作為尿液分析結(jié)果不做顯微鏡檢查就發(fā)出報告的做法，顯然是不對的，應(yīng)予糾正。第43頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3、顯微鏡檢查醫(yī)生提出要求。病人的疾病，病情或其他檢查要求。尿液分析中有任何一項理化檢查不正常。

尿液顯微鏡檢查是尿液有形成份確證的唯一方法。3.1NCCLS對尿沉渣鏡檢范圍提出三點要求：第44頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.2根據(jù)NCCLSLiteratureGP16-A要求，達到以下條件者可認為是標準化操作：3.2.1尿樣最佳選擇是第一次晨尿，并在未冷藏情況下2小時內(nèi)完成檢查。3.2.2尿樣本量應(yīng)標準化，建議統(tǒng)一用10ml。第45頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.2.3離心時間建議統(tǒng)一為5分鐘，以確保同等程度的沉積。3.2.4離心速度建議相對離心力（RCF）約為400G。3.2.5留置尿沉渣樣本為0.2ml（200ul）。第46頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.2.6用統(tǒng)一述語，報告格式，參考范圍對尿有形成份以單位體積定量報告。建議用XX細胞（或管型）/ul的報告方式。（有利于臨床醫(yī)師對患者進行動態(tài)觀察）。*在報告結(jié)果前，必須重審所有結(jié)果（包括生化結(jié)果）是否與鏡檢結(jié)果一致，不符合的結(jié)果應(yīng)再次檢測。第47頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.3尿沉渣鏡檢操作步驟

中華醫(yī)學檢驗分會“血液學和體液學專家委員會”全體會議上通過《尿沉渣標準化的建議》文件中明確規(guī)定操作步驟如下：3.3.1離心離心管中倒入充分混勻的尿液至10ml刻度處，RCF400×g，離心5分鐘。離心后傾倒或吸去上清液，離心管底部殘留尿液的量應(yīng)在0.2ml處，使之濃縮50倍。第48頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.3.2鏡檢沉渣液混勻后，取1滴（約15-20μl）充液到標準尿沉渣計數(shù)板里（按說明書操作），先用低倍鏡觀察，后用高倍鏡。計數(shù)細胞數(shù)或管型，按XX/μl報告。尿結(jié)晶、細菌、真菌、寄生蟲等以+、++、+++、++++或者1+、2+、3+、4+形式報告。第49頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一尿結(jié)晶、鹽類的報告方法（各實驗室根據(jù)具體情況而定）。3.3.3尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括：3.3.3.1細胞：紅細胞、白細胞、吞噬細胞、上皮細胞（包括腎小管上皮細胞、移行上皮細胞、鱗狀上皮細胞）、異型細胞等。第50頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.3.3.2管型：透明管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型等。3.3.3.3結(jié)晶：磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶等。3.3.3.4細菌、寄生蟲（或蟲卵）、真菌、精子、粘液等。3.3.3.5臨床醫(yī)生特殊要求的其他成分第51頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3.4有條件的實驗室應(yīng)開展各種尿液有形成分的染色檢查，配置多種類型顯微鏡，以便于有形成分的進一步鑒別。

第52頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一尿液沉渣檢查僅為尿液分析的一部分，應(yīng)結(jié)合尿液理學、化學檢查及臨床資料綜合分析，再發(fā)出報告。尿沉渣檢查應(yīng)建立質(zhì)量保證體系，同時應(yīng)進行尿沉渣檢查的專業(yè)培訓，技術(shù)未達到熟練要求者，不得上崗第53頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一四、質(zhì)量控制尿液分析應(yīng)在分析前、分析中、分析后實行全過程的質(zhì)量控制。包括：檢查方法規(guī)范化、室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)控、交流學習。第54頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一標本采集規(guī)范使用器材、儀器，試劑帶及其它試劑的規(guī)范。檢查方法規(guī)范判斷標準規(guī)范報告方式規(guī)范1、

檢查方法規(guī)范化：第55頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一2、

室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控尿陽性率，陰性率結(jié)果相互矛盾的復核了解病人情況了解上一次檢查結(jié)果與其它有關(guān)檢查結(jié)合的分析排除產(chǎn)生假陽性，假陰性的原因復核制度數(shù)據(jù)貯存第56頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一3、

室間質(zhì)控

參加室間評價活動尿沉渣涂片調(diào)查交叉檢查，現(xiàn)場檢查交流學習定期或不定期規(guī)?？纱罂尚〉?7頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一4、室內(nèi)質(zhì)控物可自行配制或選用商品化質(zhì)控尿，如BayerCHEKSTIXTM，BIO_RADLiquichekTM、JapanQC1ε2。

第58頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一5、質(zhì)控方法5.1做好試劑帶的質(zhì)量管理。5.2每天用高、低值兩種質(zhì)控尿與常規(guī)標本進行平行試驗，結(jié)果用質(zhì)控管理圖記錄。第59頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一5.3當發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果不符時，除核查試劑帶外，還應(yīng)注意質(zhì)控尿是否過期或混濁，進行綜合分析。5.4在一天內(nèi)最好使用同一份質(zhì)控品，能用“正?！焙汀爱惓！眱煞N質(zhì)控物進行試驗則更好。第60頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一5.5質(zhì)控物某一膜塊測定結(jié)果與“靶值”相差±1個膜塊內(nèi)是允許的，否則為“失控”。5.6質(zhì)控物的測定結(jié)果由“正常”變?yōu)椤爱惓！被蛳喾?，均為“失控”。?1頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一5.7對尿液分析儀應(yīng)選用技術(shù)性能優(yōu)良符合要求的產(chǎn)品；使用時應(yīng)嚴格遵守操作規(guī)程，使用后對儀器做好全面清理、保養(yǎng)；使用期間定期校正，保證儀器處于最佳狀態(tài)。第62頁，共64頁，2023年，2月20日，星期一

1．用質(zhì)控物進行質(zhì)控

在控失控↓↓開始進行標本測定進行第二步

2．檢查質(zhì)控物是否失效、是否正確儲存、是否污染

是這些問題沒有明確說明↓↓使用新的質(zhì)控物重新試驗重新試驗↓