細胞培養(yǎng)的設(shè)施與基本條件

第一章細胞培養(yǎng)的設(shè)施與基本條件細胞工程實驗室的設(shè)置常用的儀器與設(shè)備實驗室的生物安全目前一頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點⑴動物細胞工程實驗室的設(shè)置⑵植物細胞工程實驗室的設(shè)置目前二頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點無菌操作室：更衣間、緩沖間、操作間培養(yǎng)與觀察室：培養(yǎng)箱、顯微鏡制備室：天平、PH計、磁力攪拌器儲藏室：冰箱、液氮罐、儲物柜清洗和滅菌室：消毒柜、干燥箱、純水設(shè)備目前三頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前四頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點無菌室操作室：超凈工作臺或接種箱培養(yǎng)室：培養(yǎng)架、搖床鑒定室：各種顯微鏡清洗室：干燥箱、清洗器械滅菌室：滅菌裝置、過濾器制備室：冰箱、藥品柜、器械柜馴化移植室：溫室、彌霧裝置、蔭棚、移植床、塑料布、粗沙等目前五頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點溫度：25±2℃

光照：散射光濕度：＞50%目前六頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點⑴動物與植物細胞工程實驗室通用的儀器設(shè)備⑵動物細胞工程實驗室的常用儀器設(shè)備⑶植物細胞工程實驗室的常用儀器設(shè)備目前七頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點超凈工作臺倒置顯微鏡電熱干燥箱水純化裝置冰箱壓力蒸汽消毒器細胞記數(shù)板和電子細胞記數(shù)儀過濾除菌裝置離心機（離心管）移液管和吸管

移液器天平目前八頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前九頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點超凈工作臺的工作原理是利用鼓風機驅(qū)動空氣遁過高效濾器除去空氣中的塵埃顆粒，使空氣得到凈化。凈化空氣徐徐通過工作臺面，使工作臺內(nèi)構(gòu)成無菌環(huán)境。目前十頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前十一頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點

■烘干和干熱滅菌玻璃器皿■100度以下時再打開箱門■金屬器械、塑料制品、橡膠等不能在干燥箱內(nèi)消毒電熱鼓風干燥箱：溫度均勻、效果較好。目前十二頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點蒸餾式：三重純水蒸餾器過濾式：超純水裝置系統(tǒng)目前十三頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點普通冰箱：儲存各種溶液及短期保存組織標本-200C冰箱：儲存需要冷凍保持生物活性（酶、血清）及長期存放的制劑目前十四頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點電子細胞計數(shù)儀細胞記數(shù)板目前十五頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前十六頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前十七頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前十八頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點高速冷凍離心機目前十九頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前二十頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點培養(yǎng)箱顯微操作儀細胞融合儀細胞冷凍儲存器培養(yǎng)用器皿手術(shù)器械目前二十一頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前二十二頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點CO2培養(yǎng)箱設(shè)定的條件為37℃，5％CO2

。使用CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)細胞時應(yīng)注意的問題：①用螺旋口瓶培養(yǎng)細胞時，需將瓶蓋微松，以保證通氣。②保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈。定期消毒（90℃，14h)。③箱內(nèi)滅菌蒸餾水3000毫升蒸餾水槽中以保持箱內(nèi)濕度，避免培養(yǎng)液蒸發(fā)。目前二十三頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點顯微操作/注射儀：細胞核移植、染色體操作、顯微注射、胚胎切割等目前二十四頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點細胞電融合儀目前二十五頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點程序化冷凍儀液氮罐目前二十六頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)器目前二十七頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點多孔培養(yǎng)板4、6、24、96孔培養(yǎng)皿30、60、100毫米培養(yǎng)瓶

500毫升、250毫升、100毫升目前二十八頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點器械

解剖刀

解剖剪

虹膜剪

鑷子

注意保護刀鋒，鈍刀對組織有傷害，不利細胞生長

目前二十九頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點光照培養(yǎng)箱人工氣候室搖床培養(yǎng)瓶目前三十頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前三十一頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前三十二頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前三十三頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前三十四頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前三十五頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點人工氣候室目前三十六頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前三十七頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點根據(jù)密封程度分：

P1、P2、P3、P4四個等級（P為protect的縮寫）三不：培養(yǎng)物不被污染實驗人員不被污染環(huán)境不被污染SARS實驗室目前三十八頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點生物安全防護水平（BSL）由一級防護屏障（安全設(shè)備）和二級防護屏障（實驗室設(shè)施）組合構(gòu)成四級生物安全水平。

一級生物安全防護水平（BSL－1）二級生物安全防護水平（BSL－2）三級生物安全防護水平（BSL－3）

四級生物安全防護水平（BSL－4）目前三十九頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點生物安全一級(BSL-1)：適合于非常熟悉的病源，不會經(jīng)常引發(fā)健康成人疾病，對實驗人員和環(huán)境潛在危險小。一般也不使用特殊的遏制設(shè)備和設(shè)施。

生物安全二級(BSL—2)：適合于對人和環(huán)境有中度潛在危險的病源，應(yīng)在生物安全柜中或其它物理遏制設(shè)備中進行。

生物安全三級(BSL—3)：該會引發(fā)嚴重的、可能致死的疾病的病源。在生物安全柜或其他物理遏制裝置中進行，或由穿戴合適防護服及設(shè)施的實驗人員進行。實驗室經(jīng)過特殊設(shè)計和施工。

生物安全四級(BSL—4)：處理特別危險的傳染源目前四十頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點Pneumococcus:肺炎球菌Salmonella：沙門氏菌目前四十一頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點Hepatitis:肝炎LymeDisease：萊姆病Influenza:流感目前四十二頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點Ebola:埃博拉Lassa：拉沙熱Hantavirus:漢坦病毒目前四十三頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前四十四頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點無菌條件：凈化工作室，高效過濾器，生物安全柜，超凈工作臺，紫外燈，電熱干燥箱，濾器，高壓滅菌器，抗生素細胞生長條件：純水蒸餾器，純水儀，培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶，

CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)基，血清細胞檢測條件：倒置顯微鏡，酶標儀，微孔板震蕩器，

高速離心機，移液器細胞保存條件：液氮罐實驗室安全：生物實驗室安全，P1,P2,P3實驗室安全Summary：細胞培養(yǎng)的基本條件目前四十五頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點Anthrax:炭疽Typhus：斑疹傷寒HIV:目前四十六頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前四十七頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前四十八頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點培養(yǎng)室一角目前四十九頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點培養(yǎng)室一角目前五十頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點培養(yǎng)室一角目前五十一頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點培養(yǎng)室一角目前五十二頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點培養(yǎng)室一角目前五十三頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點倒置顯微鏡目前五十四頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點目前五十五頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點超低溫冰箱目前五十六頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點無菌培養(yǎng)室目前五十七頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點光照培養(yǎng)室目前五十八頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點菌種培養(yǎng)室目前五十九頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點細胞培養(yǎng)室目前六十頁\總數(shù)六十六頁\編于二十一點四川省種子管理站建人工氣候室對農(nóng)作物種子進行發(fā)芽試驗和幼苗鑒定，通過技術(shù)手段檢測監(jiān)督種子質(zhì)量北京大學(xué)人類疾病基因研究中心成立。該中心