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文檔簡介
細胞生物學內(nèi)膜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能演示文稿目前一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點(優(yōu)選)細胞生物學內(nèi)膜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能目前二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點一高爾基復合體的形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài):由一些(4~8個)排列較為整齊的扁平膜囊(saccules)堆疊形成。囊多呈弓形,也有的呈半球形或球形。目前三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點1極性細胞器1)排列有方向性2)物質(zhì)轉(zhuǎn)運方向性物質(zhì)從順面進入,
從反面輸出3)功能區(qū)隔性不同區(qū)隔功能不同目前四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2
高爾基復合體的結(jié)構(gòu)高爾基體順面膜囊及順面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(CGN)高爾基中間膜囊高爾基體反面膜囊及反面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(TGN)
目前五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點1)順面膜囊及順面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)
(cisGolginetwork,CGN):
位于高爾基體順面最外側(cè)的扁平膜囊,又稱cis膜囊,是中間多孔而呈連續(xù)分支狀的管網(wǎng)結(jié)構(gòu)。鋨酸特異性染色;功能:初步分選來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì);蛋白的o-連接糖基化及?;?。目前六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點順面初步分選:含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)駐留信號的蛋白返還內(nèi)質(zhì)網(wǎng);分泌蛋白進入中間膜囊。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)駐留信號:C末端有Lys-Asp-Glu-Leu
/KDEL序列目前七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2)高爾基中間膜囊(medialGolgi)由扁平膜囊與管道組成,形成不同間隔,功能上是連續(xù)、完整的膜囊體系。NADP酶是其標志酶功能:合成多糖、蛋白質(zhì)和脂類的糖基化。目前八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點3)高爾基體反面膜囊(transgolgi)和反面高爾基體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(transGolginetwork,TGN)TGN位于反面的最外層,與反面的扁平膜囊相連,另一側(cè)伸入反面的細胞質(zhì)中;形態(tài)呈管網(wǎng)狀,周圍有一些成熟的分泌囊泡;對蛋白質(zhì)進行分類和包裝。高爾基體各膜囊之間有膜性結(jié)構(gòu)相連目前九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點4)高爾基體周圍囊泡:順面?zhèn)饶遗?為ER和Golgi之間的運輸小泡,稱為ERGIC(endoplasmicreticulm-golgiintermediatecompartment)或VTCs(Vesicular-tubularclusters),P53為其標志蛋白;反面?zhèn)饶遗?為分泌泡和分泌顆粒;高爾基體膜囊周緣也可膨大出芽形成囊泡:用來完成膜囊間的物質(zhì)運輸;目前十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點
高爾基體各部分的特異細胞化學反應順面膜囊被鋨酸特異地染色中間幾層扁平囊煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的反應trans面的1—2層膜囊
焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)反應近反面的一些膜囊狀和管狀結(jié)構(gòu)
胞嘧啶單核苷酸酶(CMP酶)的細胞化學反應,CMP酶也是溶酶體的標志酶。
目前十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點二高爾基復合體的化學組成脂類介于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和質(zhì)膜之間粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基復合體質(zhì)膜神經(jīng)鞘磷脂、膽固醇磷脂酰膽堿多糖形成面成熟面梯度上升蛋白質(zhì)
各種酶,糖基轉(zhuǎn)移酶是高爾基復合體的特征性酶目前十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點三高爾基復合體的功能
接收由粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的物質(zhì)進一步加工、分選、包裝輸出至細胞不同區(qū)域及胞外
“交通樞紐”目前十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點3分鐘標記20分鐘標記120分鐘標記標記蛋白分泌泡內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體用3H—亮氨酸標記天竺鼠胰腺外分泌細胞,應用放射自顯影電鏡技術(shù)跟蹤放射性標記氨基酸在胰腺細胞內(nèi)的分布1、參與細胞分泌活動目前十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點分泌蛋白的分泌過程:
RER上合成蛋白質(zhì)→進入ER腔→出芽形成囊泡→進入CGN→medialGolgi中加工→TGN→形成囊泡→囊泡與質(zhì)膜融合→排出胞外。
目前十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點高爾基體對溶酶體蛋白的分類與轉(zhuǎn)運機制:溶酶體中的酸性水解酶類在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成
N—連接的糖基化修飾酶分子中的天冬酰氨殘基上共價結(jié)合一個寡糖鏈高爾基體順面膜囊
N—乙酰葡萄糖胺磷酸轉(zhuǎn)移酶
N—乙酰葡萄糖胺磷酸糖苷酶酶分子寡糖鏈中多個甘露糖被磷酸化產(chǎn)生6—磷酸甘露糖。高爾基體反面膜囊上的6—磷酸甘露糖的受體特異結(jié)合溶酶體酶,使其分離,并局部濃縮ER腔目前十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點蛋白質(zhì)在高爾基體中的分選及轉(zhuǎn)運信息存在于其基因本身。高爾基體識別各蛋白所攜帶的分選信號,進而對其分類、包裝與運送的機制?!目前十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2蛋白和脂類的糖基化
蛋白糖基化:
RER上合成的大多數(shù)蛋白質(zhì)在從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體及在高爾基體各膜囊之間的轉(zhuǎn)運過程中,連接在蛋白側(cè)鏈上的寡糖基會發(fā)生一系列有序的加工與修飾。
糖鞘脂糖基化:
磺基-糖基轉(zhuǎn)移酶半乳糖甘露糖N-乙酰葡萄糖氨N-乙酰神經(jīng)酰氨目前十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點糖基化的兩種形式:
N—連接糖基化:
寡糖連接到蛋白質(zhì)天冬酰胺的酰胺氮原子上發(fā)生在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中成熟的N—連接的寡糖鏈都含有2個N—乙酰葡萄糖胺和3個甘露糖殘基
O—連接糖基化:
寡糖與蛋白質(zhì)絲氨酸、蘇氨酸或在膠原纖維中的羥賴氨酸或羥脯氨酸的羥基(-OH)結(jié)合;在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體中進行,由不同的糖基轉(zhuǎn)移酶催化,每次加上一個單糖。最后一步是加上唾液酸殘基,(高爾基體反面膜囊和TGN中)目前十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點目前二十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點糖基化的意義:
①標記蛋白,便于分類包裝,保證糖蛋白從RER至高爾基體膜囊單方向轉(zhuǎn)移;②影響多肽構(gòu)象確保正確折疊;糖的羥基可影響蛋白水溶性和所帶電荷的性質(zhì);③保護蛋白,抵御水解酶降解;(溶酶體酶)
④在細胞表面形成糖萼,起細胞識別和保護質(zhì)膜作用。目前二十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點3
前體蛋的加工和改造無活性的蛋白前體加工活性蛋白前胰島素原的加工目前二十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點前體蛋白的加工類型及其意義類型
①切除N端或C、N兩端后成為成熟蛋白(胰島素、胰高血糖素、血清蛋白);②水解含重復氨基酸序列的前體蛋白成多個相同的活性小肽(神經(jīng)肽);③根據(jù)前體蛋白的信號序列將其加工成不同產(chǎn)物;意義防止活性蛋白在合成細胞中發(fā)揮作用;小肽分子難以在核糖體上合成(神經(jīng)肽5aa)產(chǎn)生包裝并轉(zhuǎn)運到分泌泡中的必要信號;目前二十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點4參與膜脂合成和膜的轉(zhuǎn)化合成鞘磷脂和鞘糖脂膜轉(zhuǎn)化:高爾基體膜在厚度和化學組成上處于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和質(zhì)膜之間。在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的新膜轉(zhuǎn)至高爾基體后,經(jīng)修飾加工,形成運輸泡與質(zhì)膜融合,使新形成的膜整合到質(zhì)膜上。意義:使膜性細胞器的膜成分得到補充和更新。目前二十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點
ER高爾基復合體質(zhì)膜膜流示意圖目前二十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點5參與細胞內(nèi)的膜泡運輸1)RER-Golgi的膜泡運輸2)分泌小泡的外排3)內(nèi)吞小泡的運輸目前二十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點第四節(jié)溶酶體和過氧化物酶體
溶酶體(lysosome)是一種外被以單位膜、內(nèi)含有多種酸性水解酶,能水解多種內(nèi)源性和外源性大分子物質(zhì)的細胞器,被稱為細胞內(nèi)的“消化器”。幾乎存在于所有的動物細胞中,植物細胞內(nèi)的圓球體及中央液泡與其功能類似,原生動物細胞中也存在類似溶酶體的結(jié)構(gòu)。
酶的最適pH為5左右。目前二十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點溶酶體的發(fā)現(xiàn)DeDuve1949發(fā)現(xiàn),1974獲諾貝爾醫(yī)學生理學獎;溶酶體3
線粒體1.19gcm-3糾纏不清;在大鼠肝線粒體中與糖代謝相關(guān)酶研究中,存在于“分離的線粒體”(包含溶酶體)中的不參與糖代謝的酸性磷酸酶被選為對照偶然:樣品經(jīng)長時間放置或蒸餾水處理后酸性磷酸酶活性升高;但其他的酶并未發(fā)生變化。另外一種具膜的細胞器中含酸性磷酸酶;近一步離心,分離得到了溶酶體,1955,電鏡下觀察到,得到確認。偶然?敏銳的洞察能力科學發(fā)現(xiàn)的兩種模式常規(guī)模式:正確的假說指導,無偶然因素作用下發(fā)現(xiàn)科學事實;非常規(guī)模式:以意外科學事實為契機而作出的科學發(fā)現(xiàn);目前二十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點溶酶體的分布目前二十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點溶酶體結(jié)構(gòu)電鏡圖目前三十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點一溶酶體的結(jié)構(gòu)類型1.形態(tài)結(jié)構(gòu)特點:異質(zhì)性細胞器(不同溶酶體形態(tài)大小及水解酶種類差異較大)多呈球形直徑多在m,最小0.05m,可達數(shù)m
。大鼠肝細胞溶酶體目前三十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點酶天然底物酶天然底物磷酸酶類酸性磷酸酶磷酸單脂酸性磷酸二脂酶磷酸二脂酸性焦磷酸酶ATP,F(xiàn)AD磷脂酸磷酸酶磷脂酸磷酸蛋白磷酸酶磷酸蛋白硫酸酯酶芳基硫酸酯酶芳基硫酸酯蛋白酶和肽酶組織蛋白酶蛋白質(zhì)膠原酶膠原肽酶肽核酸酶核糖核酸酶RNA脫氧核糖核酸酶DNA脂酶磷酸脂酶磷脂酯酶脂肪酸酯β-葡萄糖腦苷脂酶葡萄糖腦苷脂糖苷酶α葡萄糖苷酶糖原β葡萄糖苷酶糖蛋白β-半乳糖苷酶糖脂、糖蛋白溶菌酶細菌的細胞壁目前三十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點異質(zhì)性細胞器(形態(tài),內(nèi)含物質(zhì)上的差異)目前三十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點溶酶體膜的特點:①嵌有質(zhì)子泵,以形成和維持酸性內(nèi)環(huán)境。②具有多種載體蛋白,用于水解的產(chǎn)物向外轉(zhuǎn)運;③膜蛋白高度糖基化,防止自身膜蛋白的降解。目前三十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2溶酶體的類型根據(jù)所處功能階段不同可分為:初級溶酶體(primarylysosome)次級溶酶體(secondarylysosome)殘余體(residualbody)目前三十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點1)初級溶酶體(primarylysosome)由高爾基復合體分選產(chǎn)生的運輸小泡和前溶酶體融合形成;內(nèi)含各種酸性水解酶,未與底物結(jié)合均質(zhì)球形初級溶酶體目前三十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點初級溶酶體的發(fā)生①溶酶體酶的分選②含溶酶體酶的無被小泡形成③無被小泡結(jié)合前溶酶體形成初級溶酶體目前三十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點初級溶酶體的形成過程圖前溶酶體目前三十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點溶酶體酶的分選溶酶體酶具有信號區(qū)/信號斑(Signalpatch)目前三十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點CGN區(qū)中的磷酸轉(zhuǎn)移酶識別溶酶體蛋白的信號斑,并對其上的甘露糖進行磷酸化,目前四十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點6-磷酸甘露糖的形成N—乙酰葡萄糖胺磷酸糖苷酶N-乙酰葡萄糖胺磷酸轉(zhuǎn)移酶
順面膜囊中間膜囊甘露糖催化部位識別部位目前四十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點TGN區(qū)M6P受體識別并結(jié)合M6P,在反面膜囊聚積并出芽形成有被小泡.M6P受體與M6P在pH7結(jié)合,在pH6分離.目前四十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點有被小泡脫被形成無被運輸小泡目前四十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點無被小泡與前溶酶體融合,形成成熟的溶酶體酶.H+目前四十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點酶的合成N-連接糖基化M6p殘基形成酶的分揀、集中酶運輸酶活化附著核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔順面高爾基網(wǎng)反面高爾基網(wǎng)運輸小泡前溶酶體初級溶酶體(受體返回)目前四十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點
依賴于M6P的分選途徑效率不高:含M6P的溶酶體酶可直接分泌到細胞外;
質(zhì)膜上有依賴Ca++的M6P受體,結(jié)合胞外溶酶體酶,將其內(nèi)吞至前溶酶體中,M6P受體返回質(zhì)膜,反復使用。
M6P分選途徑只限于溶酶體的酸性水解酶,溶酶體中還存在不依賴于M6P的分選途徑:如溶酶體膜蛋白的分選和轉(zhuǎn)運等目前四十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點含M6P的酶的運輸特異性不強目前四十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點初級溶酶體和次級溶酶體模式圖次級溶酶體初級溶酶體目前四十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2)次級溶酶體(secondarylysosome)由初級溶酶體與胞內(nèi)的自噬泡或異噬泡、胞飲泡或吞噬泡融合形成,分為自噬溶酶體(autophago1ysosome)和異噬溶酶體(phagolysosome),包含多種生物大分子、顆粒性物質(zhì)、線粒體等細胞器乃至細菌等,形態(tài)不規(guī)則,直徑可達幾微米。目前四十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點自噬性溶酶體和異噬性溶酶體目前五十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點電鏡下初級溶酶體和次級溶酶體大綱目前五十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點①異噬性溶酶體(heterophagolysosome)底物是外源性的.吞噬性溶酶體(phagolysosome):吞噬泡和初級溶酶體結(jié)合多泡體(multivesicularbody):胞飲泡和初級溶酶體結(jié)合目前五十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點②自噬性溶酶體底物是內(nèi)源性的:存在于正常細胞、受損細胞及病變細胞對正常細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的更新起著重要作用目前五十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點自噬性溶酶體線粒體過氧化物酶體目前五十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點3)殘余體未被消化的殘渣物質(zhì)累積在次級溶酶體中形成殘余小體,可通過胞吐的方式將內(nèi)含物排出。根據(jù)殘余物不同分為:脂褐素(lipofusion)
含鐵小體(siderosome)
髓樣結(jié)構(gòu)(myelinflgure)目前五十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點殘余小體次級溶酶體異噬性溶酶體消化底物是細胞外源性物質(zhì)自噬性溶酶體消化底物是細胞內(nèi)源性物質(zhì)吞噬溶酶體吞噬泡融合多泡小體胞飲泡融合初級溶酶體底物目前五十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點二溶酶體的功能細胞內(nèi)消化與營養(yǎng)作用免疫與防御功能參與器官、組織形成與更新協(xié)助受精目前五十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點1.清除無用的生物大分子、衰老的細胞器及衰老損傷和死亡的細胞依靠自噬泡降解無用的蛋白、脂和核酸等大分子物質(zhì)和細胞器;巨噬細胞清除衰老細胞;
生活垃圾累積?細胞內(nèi)垃圾?疾病臺-薩氏病神經(jīng)節(jié)苷脂累積導致目前五十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2防御功能:殺死入侵的病毒或細菌。某些病原體麻風桿菌和利什曼原蟲(黑熱病)可抑制吞噬泡的酸化,從而抑制溶酶體活性;
通過受體介導的內(nèi)吞作用侵入細胞的病毒,則利用酸性環(huán)境脫掉衣殼.目前五十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點3作為胞內(nèi)消化“器官”為細胞提供營養(yǎng)降解內(nèi)吞及體內(nèi)存在的大分子物質(zhì)為小分子物質(zhì),供其他細胞器合成新的大分子.目前六十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點LDL
在溶酶體中形成膽固醇目前六十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點4參與器官、組織形成與更新自溶作用溶酶體膜破裂,釋放水解酶到細胞質(zhì)中,引起細胞自身物質(zhì)的溶解,整個細胞被釋放的酶所消化。(PCD)蝌蚪變態(tài)時的尾部吸收。骨骼發(fā)生過程中骨組織的更新。目前六十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點5協(xié)助受精頂體(acrosome)
由精母細胞內(nèi)的高爾基復合體演變而來的,是一個大的特化的溶酶體。頂體反應在受精過程中,頂體膜與精子質(zhì)膜融合穿孔,釋放到細胞外的頂體酶協(xié)助精子穿透卵的外層,進入卵內(nèi),完成受精。目前六十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點返回卵子精子頂體精子細胞核皮質(zhì)顆粒
精子頂體反應目前六十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點三溶酶體與人類疾病各類貯積癥:貯積癥(storagedisease)是由于遺傳缺陷引起溶酶體的酶發(fā)生變異,功能喪失,導致底物在其中大量貯積,進而影響細胞功能,常見的貯積癥主要有以下幾類。臺-薩氏綜合征(Tay-Sachsdiesease):也叫黑蒙性家族癡呆癥,溶酶體缺少氨基已糖酯酶A(β-N-hexosaminidase),導致神經(jīng)節(jié)甘脂GM2積累,影響細胞功能,造成精神癡呆,2~6歲死亡?;颊弑憩F(xiàn)為漸進性失明、病呆和癱瘓,該病主要出現(xiàn)在猶太人群中。II型糖原累積?。≒ompe?。喝苊阁w缺乏α-1,4-葡萄糖苷酶,糖原在溶酶體中積累,導致心、肝、舌腫大和骨骼肌無力。屬常染色體缺陷性遺傳病,患者多為小孩,常在兩周歲以前死亡。Gaucher?。河址Q腦苷脂沉積病,是巨噬細胞和腦神經(jīng)細胞的溶酶體缺乏β-葡萄糖苷酶造成的。大量的葡萄糖腦苷脂沉積在這些細胞溶酶體內(nèi),巨噬細胞變成Gaucher細胞,患者的肝、脾、淋巴結(jié)等腫大,中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生退行性變化,常在1歲內(nèi)死亡。目前六十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點矽肺:
二氧化硅塵粒(矽塵)吸入肺泡后被巨噬細內(nèi)吞噬,含有矽塵的吞噬小體與溶酶體合并成為次級溶酶體。二氧化硅形成硅酸,其羥基與溶酶體膜的磷脂或蛋白形成氫鍵,導致吞噬細胞溶酶體崩解,細胞也被破壞,矽塵釋出,后又被其他巨噬細胞吞噬,如此反復進行。受損或已破壞的巨噬細胞釋放“致纖維化因子”,并激活成纖維細胞,導致膠原纖維沉積,肺組織纖維化。肺結(jié)核:結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素,也無莢膜和侵襲性酶。但是菌體外表含有硫酸腦苷脂能抵抗溶酶體水解酶,使結(jié)核桿菌在肺泡內(nèi)大量生長繁殖,導致巨噬細胞裂解,釋放出的結(jié)核桿菌再被吞噬而重復上述過程,最終引起肺組織鈣化和纖維化。類風濕性關(guān)節(jié)炎患者溶酶體膜很易脆裂,其釋放的酶導致關(guān)節(jié)組織損傷和發(fā)炎
。目前六十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點四過氧化物酶體過氧化物酶體(peroxisome)又稱微體(microbody),是由單層膜圍繞的、內(nèi)含一種或幾種氧化酶類的細胞器。存在于所以動物和多數(shù)植物細胞中。異質(zhì)性細胞器,一直把它看作某種溶酶體,Rhodin(1954)電鏡下觀察到,1970s(DeDuve發(fā)現(xiàn)尿酸氧化酶同溶酶體酶及酸性磷酸酶分布相當一致,但也有例外,最后發(fā)現(xiàn)尿酸氧化酶和H2O2代謝相關(guān)酶單獨存在于“H2O2
”小體中),才逐漸確認過氧化物酶體的存在。目前六十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點離心分離實驗”溶酶體”中至少有一種非酸性水解酶-尿酸氧化酶。尿酸氧化酶1.25g/cm3,線粒體1.19g/cm3,溶酶體3。密度差異小,難分開?一次偶然:TritonWR1339注射小鼠,其主要積累在溶酶體中,降低溶酶體浮力密度3)。酸性磷酸酶和過氧化氫酶的釋放實驗用去垢劑(毛地黃皂苷)破壞細胞器,要加十倍量的去垢劑才能釋放過氧化氫酶和尿酸氧化酶。溶酶體和過氧化物酶體是不同細胞器,且它們的膜對去垢劑耐受性不同。目前六十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點1過氧化物酶體的形態(tài)結(jié)構(gòu)單層膜包裹的圓形或卵圓形小體直徑為m中央常含有類核體,為尿酸氧化酶的結(jié)晶目前六十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點2過氧化物酶體中的酶依賴于黃素(FAD)的氧化酶:將底物氧化,并形成H2O2;
RH2+O2R+H2O2
過氧化氫酶:占過氧化物酶體總蛋白量的40%,為過氧化物酶體的標志酶,可將H2O2分解,形成水和氧氣。
H2O2+R'H2R'+2H2O.
目前七十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點過氧化物酶體中發(fā)現(xiàn)的主要酶類酶鼠肝植物種子植物葉過氧化氫酶+++尿酸氧化酶+++D-氨基酸氧化酶++-L-氨基酸氧化酶±+-L-α-羥酸氧化酶+++乙醇酸氧化酶+++脂肪酸β-氧化酶++-檸檬酸合成酶-+-順烏頭酸酶+-異檸檬酸裂解酶-+-馬來酸合成酶-+-馬來酸脫氫酶-++乙醛酸還原酶+-+乙醛酸轉(zhuǎn)氨酶--+
說明:+:存在,-;:不存在;空白:未測。目前七十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點3過氧化物酶體與溶酶體的區(qū)別過氧化物酶體目前七十二頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點目前七十三頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點4過氧化物酶體的功能動物細胞中的作用:動物細胞(肝細胞或腎細胞)中過氧化物酶體可氧化分解血液中的有毒成分,起到解毒作用。
分解脂肪酸等高能分子向細胞直接提供熱能,而不必通過水解ATP的途徑獲得熱能。乙肝中過氧化物酶體中的乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶可使酒精轉(zhuǎn)化為乙醛和乙酸,最后生成二氧化碳和水放出能量。但過渡飲酒會傷害肝臟:乙醇氧化產(chǎn)生的乙醛,可作為黃嘌呤氧化酶的底物而產(chǎn)生大量的超氧化陰離子(O2-),O2-可引起肝細胞膜類脂過氧化而損害肝細胞。體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)可催化O2-生成O2和H2O2,H2O2則由谷胱甘肽過氧化物酶催化轉(zhuǎn)變成O2和H2O,從而保護肝臟免受損害。目前七十四頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點在植物細胞中的作用綠色植物葉肉細胞:催化CO2固定反應副產(chǎn)物(乙醇酸)的氧化,是光呼吸反應(光合作用25%的產(chǎn)物被其“浪費”掉)的重要一環(huán);種子萌發(fā):降解儲存的脂肪酸產(chǎn)生乙酰輔酶A,轉(zhuǎn)化成琥珀酸,再生成葡萄糖。此過程伴隨著一系列稱為乙醛酸循環(huán)的反應;因此又稱為乙醛酸循環(huán)體(glyoxysome)。目前七十五頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點5過氧化物酶體的發(fā)生過氧化物酶體成熟后分裂形成子代過氧化物酶體,其內(nèi)蛋白由核基因編碼,在胞質(zhì)中合成后轉(zhuǎn)運到其中。蛋白上有信號序列(Peroxisomal-targetingsignal,PTS),膜上有受體:
PTS1:Ser-lys-leuC端PTS2:Arg/Lys-Leu/lle-5X-His/Gln-LeuN端過氧化物酶體成長成熟過氧化物酶體分裂目前七十六頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點過氧化物酶體的膜脂在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成后轉(zhuǎn)運而來;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也參與過氧化物酶體的發(fā)生。目前七十七頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點
第五節(jié)膜泡運輸
普遍存在于真核細胞中,是蛋白運輸?shù)囊环N特有方式。在轉(zhuǎn)運過程中涉及蛋白本身的修飾、加工和組裝,及不同膜泡定向運輸和復雜的調(diào)控過程。>10種運輸小泡參與完成胞內(nèi)的膜泡運輸,其上有特殊標志,可以保證轉(zhuǎn)運物質(zhì)到達特定部位。目前七十八頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點
內(nèi)體目前七十九頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點網(wǎng)格蛋白有被小泡;COPII有被小泡;COPI有被小泡;1.參與膜泡運輸?shù)娜N不同類型的有被小泡目前八十頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點1)網(wǎng)格蛋白包被小泡
結(jié)構(gòu):網(wǎng)格蛋白組成外層結(jié)構(gòu)骨架;接合素構(gòu)成內(nèi)殼。功能:
a.負責蛋白質(zhì)從高爾基體TGN到質(zhì)膜、胞內(nèi)體或溶酶體和植物液泡的運輸。
b.在受體介導的細胞內(nèi)吞途徑中負責將物質(zhì)從質(zhì)膜運到細胞質(zhì),以及從胞內(nèi)體到溶酶體的運輸。網(wǎng)格蛋白接合素蛋白受體貨物分子目前八十一頁\總數(shù)八十七頁\編于二十一點①網(wǎng)格(籠形)蛋白:由3個重鏈和3個輕鏈形成的具有3個曲臂形狀(triskelion)的蛋白?;\形蛋白的曲臂部分可相互交織,形成5/6邊形網(wǎng)孔的“籠子”。網(wǎng)格蛋白的結(jié)構(gòu),A
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