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發(fā)酵試題2008年氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)試題答案一、名稱(chēng)解釋1、前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中,能直接彼微生物在生物合成過(guò)程中合成到產(chǎn)物物分子中去,而其自身的結(jié)構(gòu)并沒(méi)有多大變化,但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。2、發(fā)酵生長(zhǎng)因子從廣義上講,凡是微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量的有機(jī)物質(zhì),如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱(chēng)生長(zhǎng)因子3、菌濃度的測(cè)定是衡量產(chǎn)生菌在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中菌體量的變化,一般前期菌濃增長(zhǎng)很快,中期菌濃基本恒定。補(bǔ)料會(huì)引起菌濃的波動(dòng),這也是衡量補(bǔ)料量適合與否的一個(gè)參數(shù)。4、攪拌熱:在機(jī)械攪拌通氣發(fā)酵罐中,由于機(jī)械攪拌帶動(dòng)發(fā)酵液作機(jī)械運(yùn)動(dòng),造成液體之間,液體與攪拌器等設(shè)備之間的摩擦,產(chǎn)生可觀的熱量。攪拌熱與攪拌軸功率有關(guān)5、分批培養(yǎng):簡(jiǎn)單的過(guò)程,培養(yǎng)基中接入菌種以后,沒(méi)有物料的加入和取出,除了空氣的通入和排氣。整個(gè)過(guò)程中菌的濃度、營(yíng)養(yǎng)成分的濃度和產(chǎn)物濃度等參數(shù)都隨時(shí)間變化。6、接種量:移入種子的體積接種量=—————————接種后培養(yǎng)液的體積7、比耗氧速度或呼吸強(qiáng)度單位時(shí)間內(nèi)單位體積重量的細(xì)胞所消耗的氧氣,mmolO2?g菌-1?h-18、次級(jí)代謝產(chǎn)物是指微生物在一定生長(zhǎng)時(shí)期,以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體物質(zhì),合成一些對(duì)微生物的生命活動(dòng)無(wú)明確功能的物質(zhì)過(guò)程,這一過(guò)程的產(chǎn)物,即為次級(jí)代謝產(chǎn)物。9、實(shí)罐滅菌實(shí)罐滅菌(即分批滅菌)將配制好的培養(yǎng)基放入發(fā)酵罐或其他裝置中,通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用設(shè)備加熱至滅菌溫度后維持一定時(shí)間,在冷卻到接種溫度,這一工藝過(guò)程稱(chēng)為實(shí)罐滅菌,也叫間歇滅菌。恒定的。19、臨界溶氧濃度指不影響呼吸所允許的最低溶氧濃度20、回復(fù)突變由突變型回到野生型的基因突變21、種子見(jiàn)種子擴(kuò)大培養(yǎng)22、培養(yǎng)基廣義上講培養(yǎng)基是指一切可供微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的一組營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和原料。同時(shí)培養(yǎng)基也為微生物培養(yǎng)提供除營(yíng)養(yǎng)外的其它所必須的條件。23、發(fā)酵工程:利用微生物特定性狀和功能,通過(guò)現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)有用物質(zhì)或直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系,是將傳統(tǒng)發(fā)酵于現(xiàn)代的DNA重組、細(xì)胞融合、分子修飾和改造等新技術(shù)集合并發(fā)展起來(lái)的發(fā)酵技術(shù)。二、填空題1、微生物發(fā)酵培養(yǎng)(過(guò)程)方法主要有分批培養(yǎng)、補(bǔ)料分批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)四種。2、微生物生長(zhǎng)一般可以分為:調(diào)整期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。3、發(fā)酵過(guò)程工藝控制的只要化學(xué)參數(shù)溶解氧、PH、核酸量等.4、發(fā)酵過(guò)程控制的目的就是得到最大的比生產(chǎn)率和最大的得率。5、菌種分離的一般過(guò)程采樣、富集、分離、目的菌的篩選。6、富集培養(yǎng)目的就是讓目的菌在種群中占優(yōu)勢(shì),使篩選變得可能。7、根據(jù)工業(yè)微生物對(duì)氧氣的需求不同,培養(yǎng)法可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩種。8、微生物的培養(yǎng)基根據(jù)生產(chǎn)用途只要分為孢子培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基。9、常用滅菌方法:化學(xué)滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌10、常用工業(yè)微生物可分為:細(xì)菌、酵母菌、霉菌、放線菌四大類(lèi)。11、發(fā)酵過(guò)程工藝控制的代謝參數(shù)中物理參數(shù)溫度、壓力、攪拌轉(zhuǎn)速、功率輸入、流加數(shù)率和質(zhì)量等12、環(huán)境無(wú)菌的檢測(cè)方法有:顯微鏡檢查法、肉湯培養(yǎng)法、平板培養(yǎng)法、發(fā)酵過(guò)程的異常觀察法等13、染菌原因:發(fā)酵工藝流程中的各環(huán)節(jié)漏洞和發(fā)酵過(guò)程管理不善兩個(gè)方面。14、實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的發(fā)酵菌液體發(fā)酵方式主要有四種:試管液體培養(yǎng)、淺層液體培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、臺(tái)式發(fā)酵罐15、發(fā)酵高產(chǎn)菌種選育方法包括(自然選育)、(雜交育種)、(誘變育種)、(基因工程育種)、(原生質(zhì)體融合)。16、發(fā)酵產(chǎn)物整個(gè)分離提取路線可分為:預(yù)處理、固液分離、初步純化、精細(xì)純化和成品加工加工等五個(gè)主要過(guò)程。17、發(fā)酵過(guò)程主要分析項(xiàng)目如下:pH、排氣氧、排氣CO2和呼吸熵、糖含量、氨基氮和氨氮、磷含量、菌濃度和菌形態(tài)。18、微生物調(diào)節(jié)其代謝采用酶活性、酶合成量、細(xì)胞膜的透性。19、工業(yè)微生物菌種可以來(lái)自自然分離,也可以來(lái)自從微生物菌種保藏機(jī)構(gòu)單位獲取。20、發(fā)酵工業(yè)上常用的糖類(lèi)主要有葡萄糖、糖蜜。21、工業(yè)發(fā)酵方式根據(jù)所用菌種是單一或是多種可以分為單一純種發(fā)酵和混合發(fā)酵。22、種子及發(fā)酵液進(jìn)行無(wú)菌狀況控制常用的方法顯微鏡檢測(cè)法、酚紅肉湯培養(yǎng)基法、平板畫(huà)線培養(yǎng)法、發(fā)酵過(guò)程的異常觀察法。23、菌種的分離和篩選一般分為采樣、富集、分離、目的菌的篩選步驟。24、菌種的分離和篩選一般可分為________。25、常用滅菌方法有:化學(xué)滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌三、問(wèn)答題1、發(fā)酵工程的概念是什么?發(fā)酵工程基本可分為那兩個(gè)大部分,包括哪些內(nèi)容?答:發(fā)酵工程是利用微生物特定性狀好功能,通過(guò)現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)有用物質(zhì)或其直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系,是將傳統(tǒng)發(fā)酵與現(xiàn)代的DNA重組、細(xì)胞融合、分子修飾和改造等新技術(shù)結(jié)合并發(fā)展起來(lái)的發(fā)酵技術(shù)。也可以說(shuō)是滲透有工程學(xué)的微生物學(xué),是發(fā)酵技術(shù)工程化的發(fā)展,由于主要利用的是微生物發(fā)酵過(guò)程來(lái)生產(chǎn)產(chǎn)品,因此也稱(chēng)為微生物工程。一.發(fā)酵部分:1.菌種的特征和選育§2.培養(yǎng)基的特性,選擇及其滅菌理論§3.發(fā)酵液的特性§4.發(fā)酵機(jī)理。§5.發(fā)酵過(guò)程動(dòng)力學(xué)§6.空氣中懸浮細(xì)菌微粒的過(guò)濾機(jī)理§7.氧的傳遞。溶解。吸收。理論?!臁?.連續(xù)培養(yǎng)和連續(xù)發(fā)酵的控制二.提純部分§1.細(xì)胞破碎,分離§2.液輸送,過(guò)濾.除雜§§3.離子交換滲析,逆滲透,超濾4.凝膠過(guò)濾,沉淀分離§5溶媒萃取,蒸發(fā)蒸餾結(jié)晶,干燥,包裝等過(guò)程和單元操作§2、現(xiàn)代發(fā)酵工程所用的發(fā)酵罐應(yīng)具備那些特征?答:(1)、發(fā)酵罐應(yīng)有適宜的徑高比。罐身較長(zhǎng),氧的利用率較高;(2)、發(fā)酵罐應(yīng)能承受一定的壓力。因?yàn)榘l(fā)酵罐在滅菌和正常工作時(shí),要承受一定的壓力(氣壓和液壓)和溫度;(3)、發(fā)酵罐的攪拌通風(fēng)裝置能使氣液充分混合,實(shí)現(xiàn)傳質(zhì)傳熱作用,保證微生物發(fā)酵過(guò)程中所需的溶解氧;(4)、發(fā)酵罐內(nèi)應(yīng)盡量減少死角,避免藏污納垢,保證滅菌徹底,防止染菌;(5)、發(fā)酵罐應(yīng)具有足夠的冷卻面積;(6)、攪拌器的軸封要嚴(yán)密,以減少泄露。3、微生物發(fā)酵的種子應(yīng)具備那幾方面條件?答:(1)、菌種細(xì)胞的生長(zhǎng)活力強(qiáng),移種至發(fā)酵罐后能迅速生長(zhǎng),遲緩期短。(2)、生理性狀穩(wěn)定。(3)、菌體總量及濃度能滿足大量發(fā)酵罐的要就。(4)、無(wú)雜菌污染。(5)、保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。4、發(fā)酵工業(yè)上常用的氮源有那些,起何作用?答:氮源主要用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)(氨基酸,蛋白質(zhì)、核酸等)和含氮代謝物。常用的氮源可分為兩大類(lèi):有機(jī)氮源和無(wú)機(jī)氮源。1、無(wú)機(jī)氮源種類(lèi):氨鹽、硝酸鹽和氨水特點(diǎn):微生物對(duì)它們的吸收快,所以也稱(chēng)之謂迅速利用的氮源。但無(wú)機(jī)氮源的迅速利用常會(huì)引起pH的變化如:(NH4)2SO4→2NH3+2H2SO4NaNO3+4H2→NH3+2H2O+NaOH無(wú)機(jī)氮源被菌體作為氮源利用后,培養(yǎng)液中就留下了酸性或堿性物質(zhì),這種經(jīng)微生物生理作用(代謝)后能形成酸性物質(zhì)的無(wú)機(jī)氮源叫生理酸性物質(zhì),如硫酸胺,若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則此種無(wú)機(jī)氮源稱(chēng)為生理堿性物質(zhì),如硝酸鈉。正確使用生理酸堿性物質(zhì),對(duì)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程的pH有積極作用。所以選擇合適的無(wú)機(jī)氮源有兩層意義:滿足菌體生長(zhǎng)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程中的pH2、有機(jī)氮源來(lái)源:工業(yè)上常用的有機(jī)氮源都是一些廉價(jià)的原料,花生餅粉、黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、魚(yú)粉、蠶蛹粉、尿素、廢菌絲體和酒糟。成分復(fù)雜:除提供氮源外,有些有機(jī)氮源還提供大量的無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子。有機(jī)氮源成分復(fù)雜可以從多個(gè)方面對(duì)發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行影響,而另一方面有機(jī)氮源的來(lái)源具有不穩(wěn)定性。所以在有機(jī)氮源選取時(shí)和使用過(guò)程中,必須考慮原料的波動(dòng)對(duì)發(fā)酵的影響5、發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)特點(diǎn)是什么,什么是種子擴(kuò)大培養(yǎng),其任務(wù)是什么?答:(2)、種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后,再經(jīng)過(guò)扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過(guò)程。這些純種培養(yǎng)物稱(chēng)為種子。(3)、種子擴(kuò)大培養(yǎng)的任務(wù):現(xiàn)代的發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)規(guī)模越來(lái)越大,每只發(fā)酵罐的容積有幾十立方米甚至幾百立方米,?要使小小的微生物在幾十小時(shí)的較短時(shí)間內(nèi),完成如此巨大的發(fā)酵轉(zhuǎn)化任務(wù),那就必須具備數(shù)量巨大的微生物細(xì)胞才行。(1)發(fā)酵和其他化學(xué)工業(yè)的最大區(qū)別在于它是生物體所進(jìn)行的化學(xué)反應(yīng)。其主要特點(diǎn)如下:1,發(fā)酵過(guò)程一般來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行的生物化學(xué)反應(yīng),反應(yīng)安全,要求條件也比較簡(jiǎn)單。2,發(fā)酵所用的原料通常以淀粉、糖蜜或其他農(nóng)副產(chǎn)品為主,只要加入少量的有機(jī)和無(wú)機(jī)氮源就可進(jìn)行反應(yīng)。微生物因不同的類(lèi)別可以有選擇地去利用它所需要的營(yíng)養(yǎng)?;谶@—特性,可以利用廢水和廢物等作為發(fā)酵的原料進(jìn)行生物資源的改造和更新。3,發(fā)酵過(guò)程是通過(guò)生物體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式來(lái)完成的,反應(yīng)的專(zhuān)一性強(qiáng),因而可以得到較為單—的代謝產(chǎn)物。4,由于生物體本身所具有的反應(yīng)機(jī)制,能夠?qū)R恍缘睾透叨冗x擇性地對(duì)某些較為復(fù)雜的化合物進(jìn)行特定部位地氧化、還原等化學(xué)轉(zhuǎn)化反應(yīng),也可以產(chǎn)生比較復(fù)雜的高分子化合物。5,發(fā)酵過(guò)程中對(duì)雜菌污染的防治至關(guān)重要。除了必須對(duì)設(shè)備進(jìn)行嚴(yán)格消毒處理和空氣過(guò)濾外,反應(yīng)必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行。如果污染了雜菌,生產(chǎn)上就要遭到巨大的經(jīng)濟(jì)損失,要是感染了噬菌體,對(duì)發(fā)酵就會(huì)造成更大的危害。因而維持無(wú)菌條件是發(fā)酵成敗的關(guān)鍵。6,微生物菌種是進(jìn)行發(fā)酵的根本因素,通過(guò)變異和菌種篩選,可以獲得高產(chǎn)的優(yōu)良菌株并使生產(chǎn)設(shè)備得到充分利用,也可以因此獲得按常規(guī)方法難以生產(chǎn)的產(chǎn)品。7,工業(yè)發(fā)酵與其他工業(yè)相比,投資少,見(jiàn)效快,開(kāi)可以取得顯著的經(jīng)濟(jì)效益?;谝陨咸攸c(diǎn),工業(yè)發(fā)酵日益引起人們重視。和傳統(tǒng)的發(fā)酵工藝相比,現(xiàn)代發(fā)酵工程除了上述的發(fā)酵特征之外更有其優(yōu)越性。除了使用微生物外,還可以用動(dòng)植物細(xì)胞和酶,也可以用人工構(gòu)建的“工程菌’來(lái)進(jìn)行反應(yīng);反應(yīng)設(shè)備也不只是常規(guī)的發(fā)酵罐,而是以各種各樣的生物反應(yīng)器而代之,自動(dòng)化連續(xù)化程度高,使發(fā)酵水平在原有基礎(chǔ)上有所提高和和創(chuàng)新。發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)特點(diǎn):①一般操作條件比較溫和;②以淀粉、糖蜜等為主,輔以少量有機(jī)、無(wú)機(jī)氮源為原料;③過(guò)程反應(yīng)以生命體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式進(jìn)行;④能合成復(fù)雜的化合物如酶、光學(xué)活性體等;⑤能進(jìn)行一些特殊反應(yīng),如官能團(tuán)導(dǎo)入;⑥生產(chǎn)產(chǎn)品的生物體本身也是產(chǎn)物,含有多種物質(zhì);⑦生產(chǎn)過(guò)程中,需要防止雜菌污染;⑧菌種性能被改變,從而獲得新的反應(yīng)性能或提高生產(chǎn)率。6、培養(yǎng)成分用量的確定有什么規(guī)律?答:(1)、參照微生物細(xì)胞內(nèi)元素的比例確定。培養(yǎng)基的成分配比雖然千差萬(wàn)別,但都是用來(lái)培養(yǎng)某種微生物的,而不同類(lèi)型的微生物細(xì)胞的成分比例其實(shí)是有一定規(guī)律的。這些規(guī)律可以在很大程度上知道培養(yǎng)基的基本成分配比的選擇。不同種類(lèi)的微生物內(nèi)某種成分的含量其實(shí)是比較穩(wěn)定的。培養(yǎng)基最終會(huì)被微生物吸收利用,因此其成分比例可以參考該種微生物的成分比例,至少可以作為一個(gè)重要依據(jù)。另外,盡管不同種類(lèi)的微生物的成分比例有一定的差異,但還是有一定共性的。所以培養(yǎng)基中這集中營(yíng)養(yǎng)成分不管由什么具體物質(zhì)提供,其用量基本上也符合這種關(guān)系。(2)參照碳氮比確定。如果培養(yǎng)基中碳源過(guò)多,不利產(chǎn)物的合成。同樣碳源過(guò)少或氮源過(guò)少對(duì)發(fā)酵的影響也是不利的。不同種微生物碳氮比差異很大,既是同種微生物在其不同生理時(shí)期對(duì)碳氮比要求也有不同,所以最適碳氮比要通過(guò)試驗(yàn)確定,一般在100:(1—20)之間。(3)、其他因素。培養(yǎng)基中一些用量極少的物質(zhì)一般要嚴(yán)格控制,不能過(guò)量。例如,維生素、微量元素、某些生長(zhǎng)因子、前體等。具體用量要通過(guò)試驗(yàn)確定。培養(yǎng)基中的一些成分的比例會(huì)影響培養(yǎng)基的某些理化性質(zhì),這時(shí)要引起重視。7、敘述防止發(fā)酵菌種退化的具體條件措施有那些?答:(1)控制傳代次數(shù):盡量避免不必要的移種和傳代,并將必要的傳代降低到最低限度,以減少細(xì)胞分裂過(guò)程中所產(chǎn)生的自發(fā)突變幾率。(2)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件:如在赤霉素生產(chǎn)菌G.fujikuroi的培養(yǎng)基中,加入糖蜜、天冬酰胺、谷氨酰胺、5‘-核苷酸或甘露醇等豐富營(yíng)養(yǎng)物時(shí),有防止衰退效果。(3)利用不易衰退的細(xì)胞傳代:對(duì)于放線菌和霉菌,菌絲細(xì)胞常含有幾個(gè)細(xì)胞核,因此用菌絲接種就易出現(xiàn)衰退,而孢子一般是單核的,用于接種就可避免這種現(xiàn)象。(4)采用有效的菌種保藏方法(5)合理的育種:選育菌種是所處理的細(xì)胞應(yīng)使用單核的,避免使用多核細(xì)胞;合理選擇誘變劑種類(lèi)或增加突變位點(diǎn),以減少分離回復(fù)突變;在誘變處理后及分離提純化,從而保證保藏菌種的純度。(6)、選用合適的培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中添加某種化學(xué)物質(zhì)可以防止菌種退化?;蛘哌x取營(yíng)養(yǎng)相對(duì)貧乏的培養(yǎng)基在菌種保藏培養(yǎng)基,限制菌株的生長(zhǎng)代謝減少變異反而發(fā)生從而防止菌種的退化。8、如何選擇最適發(fā)酵溫度?答:1、根據(jù)菌種及生長(zhǎng)階段選擇。微生物種類(lèi)不同,所具有的酶系及其性質(zhì)不同,所要求的溫度范圍也不同。在發(fā)酵前期由于菌量少,發(fā)酵目的是要盡快達(dá)到大量的菌體,取稍高的溫度,促使菌的呼吸與代謝,使菌生長(zhǎng)迅速;在中期菌量已達(dá)到合成產(chǎn)物的最適量,發(fā)酵需要延長(zhǎng)中期,從而提高產(chǎn)量,因此中期溫度要稍低一些,可以推遲衰老。發(fā)酵后期,產(chǎn)物合成能力降低,延長(zhǎng)發(fā)酵周期沒(méi)有必要,就又提高溫度,刺激產(chǎn)物合成到放罐。2、根據(jù)培養(yǎng)條件選擇。溫度選擇還要根據(jù)培養(yǎng)條件綜合考慮,靈活選擇。通氣條件差時(shí)可適當(dāng)降低溫度,使菌呼吸速率降低些,溶氧濃度也可髙些。培養(yǎng)基稀薄時(shí),溫度也該低些。因?yàn)闇囟雀郀I(yíng)養(yǎng)利用快,會(huì)使菌過(guò)早自溶。3、根據(jù)菌生長(zhǎng)情況菌生長(zhǎng)快,維持在較高溫度時(shí)間要短些;菌生長(zhǎng)慢,維持較高溫度時(shí)間可長(zhǎng)些。培養(yǎng)條件適宜,如營(yíng)養(yǎng)豐富,通氣能滿足,那么前期溫度可髙些,以利于菌的生長(zhǎng)。總的來(lái)說(shuō),溫度的選擇根據(jù)菌種生長(zhǎng)階段及培養(yǎng)條件綜合考慮。要通過(guò)反復(fù)實(shí)踐來(lái)定出最適溫度。9、不同時(shí)間染菌對(duì)發(fā)酵有什么影響,染菌如何控制?答:(1)種子培養(yǎng)期染菌:由于接種量較小,生產(chǎn)菌生長(zhǎng)一開(kāi)始不占優(yōu)勢(shì),而且培養(yǎng)液中幾乎沒(méi)有抗生素(產(chǎn)物)或只有很少抗生素(產(chǎn)物)。因而它防御雜菌能力低,容易污染雜菌。如在此階段染菌,應(yīng)將培養(yǎng)液全部廢棄。(2)發(fā)酵前期染菌:發(fā)酵前期最易染菌,且危害最大。原因發(fā)酵前期菌量不很多,與雜菌沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì);且還未合成產(chǎn)物(抗生素)或產(chǎn)生很少,抵御雜菌能力弱。在這個(gè)時(shí)期要特別警惕以制止染菌的發(fā)生。染菌措施可以用降低培養(yǎng)溫度,調(diào)整補(bǔ)料量,用酸堿調(diào)pH值,縮短培養(yǎng)周期等措施予以補(bǔ)救。如果前期染菌,且培養(yǎng)基養(yǎng)料消耗不多,可以重新滅菌,補(bǔ)加一些營(yíng)養(yǎng),重新接種再用。(3)發(fā)酵中期染菌:發(fā)酵中期染菌會(huì)嚴(yán)重干擾產(chǎn)生菌的代謝。雜菌大量產(chǎn)酸,培養(yǎng)液pH下降;糖、氮消耗快,發(fā)酵液發(fā)粘,菌絲自溶,產(chǎn)物分泌減少或停止,有時(shí)甚至?xí)挂旬a(chǎn)生的產(chǎn)物分解。有時(shí)也會(huì)使發(fā)酵液發(fā)臭,產(chǎn)生大量泡沫。措施降溫培養(yǎng),減少補(bǔ)料,密切注意代謝變化情況。如果發(fā)酵單位到達(dá)一定水平可以提前放罐,或者抗生素生產(chǎn)中可以將高單位的發(fā)酵液輸送一部分到染菌罐,抑制雜菌。(4)發(fā)酵后期染菌:發(fā)酵后期發(fā)酵液內(nèi)已積累大量的產(chǎn)物,特別是抗生素,對(duì)雜菌有一定的抑制或殺滅能力。因此如果染菌不多,對(duì)生產(chǎn)影響不大。如果染菌嚴(yán)重,又破壞性較大,可以提前放罐。發(fā)酵染菌后的措施:染菌后的培養(yǎng)基必須滅菌后才可放下水道。滅菌方法:可通蒸汽滅菌,也可加入過(guò)氧乙酸等化學(xué)滅菌劑攪拌半小時(shí),才放下水道。否則由于各罐的管道相通,會(huì)造成其它罐的染菌,而且直接放下水道也會(huì)造成空氣的污染而導(dǎo)致其它罐批染菌。凡染菌的罐要找染菌的原因,對(duì)癥下藥,該罐也要徹底清洗,進(jìn)行空罐消毒,才可進(jìn)罐。ll染菌厲害時(shí),車(chē)間環(huán)境要用石灰消毒,空氣用甲醛熏蒸。特別,若染噬菌體,空氣必須用甲醛蒸汽消毒10、發(fā)酵級(jí)數(shù)確定的依據(jù)是什么?答:一般由菌絲體培養(yǎng)開(kāi)始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù),但有時(shí),工廠從第一級(jí)種子罐開(kāi)始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)谷氨酸:三級(jí)發(fā)酵一級(jí)種子(搖瓶)→二級(jí)種子(小罐)→發(fā)酵青霉素:三級(jí)發(fā)酵一級(jí)種子(小罐)→二級(jí)種子(中罐)→發(fā)酵1、發(fā)酵級(jí)數(shù)確定的依據(jù):級(jí)數(shù)受發(fā)酵規(guī)模、菌體生長(zhǎng)特性、接種量的影響。2、級(jí)數(shù)大,難控制、易染菌、易變異,管理困難,一般2-4級(jí)。3、在發(fā)酵產(chǎn)品的放大中,反應(yīng)級(jí)數(shù)的確定是非常重要的一個(gè)方面11、發(fā)揮菌種的最

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