18-第18章-體液免疫球蛋白測(cè)定

18-第18章-體液免疫球蛋白測(cè)定第一頁，共28頁。

第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測(cè)定一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義第二節(jié)血清IgD和IgE測(cè)定一、IgD測(cè)定及臨床意義二、IgE測(cè)定及臨床意義

第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測(cè)定一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義第二頁，共28頁。

第四節(jié)血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義第五節(jié)M蛋白測(cè)定及臨床意義第六節(jié)輕鏈測(cè)定及臨床意義第七節(jié)冷球蛋白的檢測(cè)

思考題小結(jié)第三頁，共28頁。免疫球蛋白（Ig）：抗體活性、化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似重鏈性質(zhì)，Ig分5類：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、

IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質(zhì)，Ig分2型：κ、λIg占血漿蛋白總量：20%檢測(cè)意義：反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L體液IgG、IgA、IgM：mg/L第四頁，共28頁。第一節(jié)血清IgG、IgA、IgM測(cè)定

IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和細(xì)胞外液中的主要抗體，也是機(jī)體再次免疫的主要抗體。IgA分為血清型和分泌型，是參與黏膜局部免疫的主要抗體，主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液中。IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是個(gè)體發(fā)育過程中最早合成和分泌的抗體，也是抗原刺激誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體。第五頁，共28頁。一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定測(cè)定方法

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法免疫濁度法第六頁，共28頁。原理誤差主要原因評(píng)價(jià)

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法示意圖原理誤差主要原因評(píng)價(jià)

單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法第七頁，共28頁。免疫濁度法直接透射比濁法速率散射比濁法注意點(diǎn)評(píng)價(jià)第八頁，共28頁。二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義低Ig血癥:先天性低Ig血癥（免疫缺陷?。?；獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).

高Ig血癥:多克隆Ig增高（感染）；單克隆Ig增高（免疫增殖病）.第九頁，共28頁。第二節(jié)血清IgD、IgE測(cè)定

正常人血清中IgD含量很低，膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR，是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌，為親細(xì)胞抗體，引起I型超敏反應(yīng)；與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。第十頁，共28頁。一、血清IgD測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法：

放射免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法

酶聯(lián)免疫吸附法第十一頁，共28頁。IgD：生物功能不詳

增高：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、敗血癥、新生兒溶血病

降低：意義不大第十二頁，共28頁。二、血清IgE測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法總IgE測(cè)定：放射免疫分析法

化學(xué)發(fā)光免疫分析法免疫比濁法酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測(cè)定：免疫斑點(diǎn)法酶聯(lián)免疫吸附法第十三頁，共28頁。IgE臨床意義：

增高：變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。

降低：意義不大第十四頁，共28頁。第三節(jié)尿液及腦脊液Ig測(cè)定

正常人尿液中的Ig含量甚微，當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?；蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí)，可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損，從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。生理情況下，Ig根據(jù)其分子量大小，通過血腦屏障的難易度不同，IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí)，腦脊液組分發(fā)生改變。第十五頁，共28頁。一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義尿液：

腎小球?yàn)V膜受損程度：選擇性蛋白尿指數(shù)

增高有臨床意義：腎病、免疫增殖病可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類第十六頁，共28頁。二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義腦脊液：

血腦屏障受損程度：白蛋白商值、CSF-IgG指數(shù)

增高有臨床意義：多發(fā)性硬化癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染第十七頁，共28頁。第四節(jié)血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降測(cè)定方法：

單向免疫擴(kuò)散法免疫比濁法（常用）放射免疫分析法酶聯(lián)免疫吸附法臨床意義：IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化免疫缺陷病降低明顯第十八頁，共28頁。第五節(jié)M蛋白測(cè)定及臨床意義

M蛋白：B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等

第十九頁，共28頁。M蛋白測(cè)定蛋白區(qū)帶電泳：經(jīng)典方法計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法：免疫球蛋白定量準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳：M蛋白分型免疫固定電泳：M蛋白分型及鑒定，分辨率高第二十頁，共28頁。GAMκλIgG-κ型M蛋白Marker免疫固定電泳模式圖第二十一頁，共28頁。第六節(jié)輕鏈測(cè)定及臨床意義本周蛋白的檢測(cè)

樣本：尿液方法：免疫電泳、加熱沉淀（簡便易行）κ–Ig和λ-Ig定量檢測(cè)

樣本：尿液、血液方法：單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法（常用，準(zhǔn)確、快速）應(yīng)用：M蛋白血癥的分型及鑒定第二十二頁，共28頁。第七節(jié)冷球蛋白的檢測(cè)冷球蛋白：

在低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物，其抗原可以是外源性的，也可以是內(nèi)源性的第二十三頁，共28頁。冷球蛋白的類型及臨床意義

I型：為單克隆冷球蛋白型，占25%～40%;多見于免疫增生性疾病

Ⅱ型：單克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%～25%;多見于自身免疫性疾病

Ш型：多克隆混合型冷球蛋白，約占50%;多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病第二十四頁，共28頁。1.免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？2.什么是免疫球蛋白?其分子基本結(jié)構(gòu)?3.免疫球蛋白分類及亞類?4.血清免疫球蛋白測(cè)定方法有哪些?5.比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。6.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測(cè)定有何臨床意義？思考題第二十五頁，共28頁。7.免疫球蛋白IgG亞類測(cè)定有何臨床意義？8.單向免疫擴(kuò)散測(cè)定中有哪些主要影響因素？9.如何保證速率散射比濁法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確？10.如何評(píng)估腎小球?yàn)V過膜破壞程度？11.如何判定血腦屏障受損程度？12.如何正確選擇測(cè)定M蛋白的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?第二十六頁，共28頁。

免疫球蛋白是由漿細(xì)胞所產(chǎn)生能與相應(yīng)抗原特異性