第六章吸光光度法

第六章吸光光度法第1頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三3.吸收曲線1)最大吸收波長λmax：吸光度最大處的波長.2)同一物質(zhì)濃度增加時(shí),吸收曲線形狀相同,λmax不變，吸光度增大.AC增大什么是吸收曲線？第2頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三4.光吸收定律c：mol/L

摩爾吸光系數(shù):

L·mol–1·cm-1c：g/L

吸光系數(shù)K:

L·

g–1·cm-1第3頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三5.摩爾吸光系數(shù)和桑德爾靈敏度摩爾吸光系數(shù):其大小反應(yīng)了吸光物質(zhì)對光的吸收能力,也反應(yīng)了光度法測定吸光物質(zhì)的靈敏度.

同一吸光物質(zhì)的只與波長有關(guān),λmax處的最大,即在λmax處測定的靈敏度最高.<104

~104~105

>105低靈敏度中等靈敏度高靈敏度第4頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三桑德爾靈敏度S

當(dāng)儀器的檢測極限A=0.001時(shí)，單位截面積光程內(nèi)所能檢測出來的吸光物質(zhì)的最低含量，單位為μg·cm-2.S越小,測定的靈敏度越高.S與的轉(zhuǎn)化:注意:不要換算單位第5頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三6.目視比色法比較的是透過光強(qiáng)度

吸光光度法比較的是吸收光的強(qiáng)度7.光度計(jì)的基本部件及其作用

光源單色器樣品池檢測器

顯示器氫燈、氘燈---紫外;鎢燈---可見棱鏡(玻璃、石英)、光柵玻璃(可見)，石英(紫外、可見)光電倍增管。將光信號轉(zhuǎn)換為電信號，并放大.第6頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三6.2分光光度法的設(shè)計(jì)2.吸光度的讀數(shù)范圍:0.2～0.83.參比溶液的作用:用于調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)，扣除非待測組分的吸收.

參比溶液的選擇:P3181.影響顯色反應(yīng)的因素P321:（了解）第7頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三例題：分光光度法測定純鈷鹽中微量Mn，方法是加入無色氧化劑將Mn2+氧化為MnO4-，測定中應(yīng)選下列哪種溶液作參比：()(A)試劑空白(B)不加氧化劑的樣品空白(C)蒸餾水空白（D）加氧化劑的樣品空白第8頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三配制系列待測物標(biāo)準(zhǔn)溶液:C1、C2…Cn相同條件下測吸光度:A1、A2…An

AxCx

先制作工作曲線，然后查出待測組分含量

4.定量方法:工作曲線法

5.測定波長的選擇P323標(biāo)準(zhǔn)曲線不過原點(diǎn)的原因:P229AC0第9頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三6.3光度法的誤差1.對比爾定律的偏離原因:P3242.儀器的測量誤差即T的讀數(shù)誤差與不同的T值有關(guān)?！鱐為透光率的讀數(shù)誤差,一般為±0.01.T=36.8%,A=0.434時(shí)誤差最小.T:15%~65%，A:0.2~0.8.(Er≤±4%)

課后習(xí)題第10頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三6.4其他光度法及其應(yīng)用1.示差光度法(高濃度組分的測定)參比:以濃度為Cs的標(biāo)準(zhǔn)溶液為參比.(Cs＜Cx)△A△C△Cx△A定量方法---工作曲線法第11頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三示差法可以減小誤差的原因:改變了A(T)的讀數(shù)范圍,使其在0.2～0.8范圍內(nèi).以標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比，即標(biāo)準(zhǔn)溶液的T=100%,對被測溶液,在示差法中透光率的擴(kuò)大倍數(shù)與參比相同.---有關(guān)計(jì)算題的依據(jù)課后習(xí)題

例題:一含KMnO4

8.57ug/L的溶液,在波長525nm處,以水做參比測定T=21.6%.以上述溶液為參比,測定另一濃度較大KMnO4溶液時(shí),測定透光率為25.7%,計(jì)算KMnO4溶液的濃度.第12頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三2.弱酸弱堿離解常數(shù)的測定說明:AHR----酸性溶液中全部以HR存在時(shí)的吸光度.

AR---堿性溶液中全部以R存在時(shí)的吸光度.

A---某PH下HR+R的吸光度.且三個(gè)吸光度的測定波長相同.RRAHRHR第13頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三3.絡(luò)和物組成的測定1)飽和法(摩爾比法)2)連續(xù)變化法(等摩爾系列法)ACR/CMn00.51.0ACM/C第14頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三條件穩(wěn)定常數(shù)的測定0.501.0ACM/CA′由于絡(luò)合物離解引起A′<A離解度:MR=R+M總濃度C平衡濃度C(1-a)CaCa將代入上式即可求出絡(luò)合物的條件穩(wěn)定常數(shù).第15頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三例題1

某顯色絡(luò)合物MR2，M的總濃度為

5.0×10-5mol/L，R的總濃度為2.0×10-5mol/L，一定波長下用1厘米比色皿測得透射比為63％（?＝4×104L·mol-1·cm-1)，求該絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)。

第16頁，共19頁，2023年，2月20日，星期三例題2以鄰二氮菲R作顯色劑用光度法測定Fe,顯色反應(yīng)為:Fe2++3R=FeR3lgK(FeR3)=21.31.如過量顯色劑總濃度為[R

′]=5.0×10-5mol/L,問在PH=3.0時(shí)未配位的Fe2+占多大比例(%)?(PH=3.0時(shí),lgR(H)=1.9)2.稱取0.5000克試樣,制成100ml試液,從中移取10.00ml顯色后稀釋為50ml,用1.0cm比色皿,在510nm處測定透光率T=60.0%.求試樣中鐵的質(zhì)量分?jǐn)?shù).510nm處的=1.1×104L·mol