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高考生物大一輪復(fù)習(xí)基因工程蘇教選修第1頁(yè)/共83頁(yè)2.DNA連接酶(1)作用實(shí)質(zhì):將具有末端堿基互補(bǔ)的2個(gè)DNA片段連接在一起,形成重組DNA分子。(2)限制性核酸內(nèi)切酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾。(3)DNA連接酶起作用時(shí)不需要模板。第2頁(yè)/共83頁(yè)3.DNA連接酶、DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶DNA聚合酶連接DNA鏈雙鏈單鏈連接部位限制性核酸內(nèi)切酶與DNA連接酶的關(guān)系在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個(gè)核苷酸加到已存在的核酸片段上,形成磷酸二酯鍵第3頁(yè)/共83頁(yè)4.基因工程的載體——質(zhì)粒(1)作用①作為運(yùn)載工具,將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞內(nèi)。②利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)使目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。(2)具備的條件①。②。③。能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存,并大量復(fù)制有一個(gè)或多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn),以便與外源基因連接具有某些遺傳標(biāo)記基因(多為抗性基因),以便進(jìn)行篩選第4頁(yè)/共83頁(yè)拓展提升

①一般來(lái)說(shuō),天然載體往往不能滿足人類的所有要求,因此人們根據(jù)不同的目的和需要,對(duì)某些天然的載體進(jìn)行人工改造。②限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外,這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性,有利于對(duì)目的基因的檢測(cè)。第5頁(yè)/共83頁(yè)對(duì)位訓(xùn)練1.下列有關(guān)基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶的描述,錯(cuò)誤的是()

A.一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列

B.限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度的影響

C.限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別和切割RNAD.限制性核酸內(nèi)切酶可從原核生物中提取

C第6頁(yè)/共83頁(yè)2.下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述,正確的是()

A.將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯鍵

B.將斷開(kāi)的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來(lái),重新形成磷酸二酯鍵

C.連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵

D.只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái),而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接B第7頁(yè)/共83頁(yè)考點(diǎn)二基因工程的基本操作步驟1.獲得目的基因(1)如果目的基因的序列是已知的,可用化學(xué)方法合成目的基因,或者用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增目的基因。(2)如果目的基因的核苷酸序列是未知的,可以從基因文庫(kù)中獲取。2.形成重組DNA分子第8頁(yè)/共83頁(yè)3.將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的DNA上→表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物氯化鈣處理細(xì)菌細(xì)胞→細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性增加→重組質(zhì)粒進(jìn)入宿主細(xì)胞第9頁(yè)/共83頁(yè)4.篩選含有目的基因的受體細(xì)胞

(1)原理:質(zhì)粒上有抗生素的抗性基因。

(2)方法:利用選擇培養(yǎng)基篩選。

(3)舉例5.目的基因的表達(dá)

(1)場(chǎng)所:含重組DNA分子的受體細(xì)胞中。

(2)標(biāo)志:表達(dá)“目的基因”所控制的性狀。第10頁(yè)/共83頁(yè)對(duì)位訓(xùn)練3.下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述,正確的是()

A.重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、連接酶和載體

B.所有的限制性核酸內(nèi)切酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列

C.選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快

D.只要目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞就能實(shí)現(xiàn)表達(dá)C第11頁(yè)/共83頁(yè)4.利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá),可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列選項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是()

A.棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲(chóng)基因

B.大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素DNA序列

D.酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白

解析在基因工程中,判斷外源基因是否“表達(dá)”常用的方法是看有無(wú)目的基因產(chǎn)物產(chǎn)生。D第12頁(yè)/共83頁(yè)考點(diǎn)三基因工程的應(yīng)用1.基因工程與遺傳育種類型傳統(tǒng)遺傳育種基因工程育種實(shí)例轉(zhuǎn)基因植物所需時(shí)間較長(zhǎng),無(wú)法完成遠(yuǎn)緣親本的雜交所需時(shí)間較短,無(wú)遠(yuǎn)緣親本難雜交的限制①抗逆性,抗病蟲(chóng)害的植物②優(yōu)良品質(zhì)植物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物費(fèi)時(shí),費(fèi)力所需時(shí)間較短①生長(zhǎng)速度較快的轉(zhuǎn)基因魚(yú)、豬等②具有抗病能力的轉(zhuǎn)基因雞和牛等第13頁(yè)/共83頁(yè)2.基因工程與疾病治療(1)基因工程藥物在基因工程中,若受體細(xì)胞是原核生物(如大腸桿菌),則生產(chǎn)的“干擾素”是不具備活性的,因?yàn)樵思?xì)胞內(nèi)無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器,只有核糖體,因此只能合成相應(yīng)的蛋白質(zhì),而無(wú)法添加糖基,若使“干擾素”具有活性,還必須人工處理加上糖基。第14頁(yè)/共83頁(yè)3.基因工程與生態(tài)環(huán)境保護(hù)(1)利用細(xì)菌發(fā)酵和轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)具有生物可降解的新型塑料。(2)利用基因工程改造分解石油的細(xì)菌,提高其分解石油的能力。(3)利用轉(zhuǎn)基因微生物吸收環(huán)境中的重金屬,降解有毒化合物和處理工業(yè)廢水。第15頁(yè)/共83頁(yè)(2)基因治療①含義:向目標(biāo)細(xì)胞中引入正常功能的基因,以

糾正或補(bǔ)償基因的缺陷,達(dá)到治療的目的。②實(shí)例:重度免疫缺陷癥的基因治療第16頁(yè)/共83頁(yè)深化拓展

“基因治療”與“基因診斷”辨析基因治療基因診斷原理把健康的外源基因?qū)牒谢蛉毕莸募?xì)胞中DNA分子雜交:互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠進(jìn)行雜交。這種結(jié)合是特異的,即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行,它不僅能在DNA和DNA之間進(jìn)行,也能在DNA和RNA之間進(jìn)行過(guò)程健康基因的表達(dá),達(dá)到了治療疾病的目的a.制備用放射性同位素(如32P)、熒光分子等標(biāo)記的DNA單鏈(疾病DNA)分子探針。b.待測(cè)DNA:患者DNA制成單鏈。c.讓兩者進(jìn)行雜交,若兩者能進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì),則說(shuō)明患者患有此??;若兩者不能進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì),則患者無(wú)此病第17頁(yè)/共83頁(yè)對(duì)位訓(xùn)練5.下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述,正確的是()A.基因治療就是把缺陷基因誘變成正?;?/p>

B.基因診斷的基本原理是DNA分子雜交

C.一種基因探針能檢測(cè)水體中的各種病毒

D.原核基因不能用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良B第18頁(yè)/共83頁(yè)解析

基因工程是生物工程技術(shù)的核心內(nèi)容,能夠按照人們的意愿,定向地改造生物的遺傳性狀?;蛑委熓前颜5幕?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞,從而使其表達(dá),達(dá)到治療目的。基因診斷常用基因探針來(lái)進(jìn)行,其遵循的原理是DNA分子雜交?;蛱结樉哂泻軓?qiáng)的特異性,因此一種探針只能檢測(cè)水體中的一種(類)病毒。所有生物共用一套遺傳密碼,所以原核基因也能用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良。答案

B第19頁(yè)/共83頁(yè)6.我國(guó)科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù),將蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁?xì)胞并成功表達(dá),培育出了抗蟲(chóng)棉。下列敘述不正確的是()A.RNA聚合酶對(duì)于抗蟲(chóng)基因在棉花細(xì)胞中的表達(dá)不可缺少

B.重組DNA分子中增加一個(gè)堿基對(duì),不一定導(dǎo)致毒蛋白的毒性喪失

C.抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)基因可通過(guò)花粉傳遞至近緣作物,從而造成基因污染

D.轉(zhuǎn)基因棉花是否具有抗蟲(chóng)特性是通過(guò)檢測(cè)棉花對(duì)抗生素抗性來(lái)確定的D第20頁(yè)/共83頁(yè)解析

RNA聚合酶參與目的基因的轉(zhuǎn)錄,對(duì)于抗蟲(chóng)棉基因在棉花細(xì)胞中的表達(dá)不可缺少。增加的堿基對(duì)如果不在編碼區(qū)或在編碼區(qū)最后,便有可能不影響蛋白質(zhì)的功能。抗蟲(chóng)棉與其他近緣植物雜交,能造成基因污染。檢測(cè)棉花對(duì)抗生素的抗性,不能確定棉花是否具有抗蟲(chóng)的特性。答案

D第21頁(yè)/共83頁(yè)考點(diǎn)四蛋白質(zhì)工程1.概念蛋白質(zhì)工程是指通過(guò)物理化學(xué)與生物化學(xué)等技術(shù)

了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能,并借助計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)、基因定點(diǎn)誘變和重組DNA技術(shù)改造基因,以定向改造天然蛋白質(zhì),甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)的技術(shù)。第22頁(yè)/共83頁(yè)2.蛋白質(zhì)工程與基因工程的比較項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過(guò)程目的結(jié)果生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)一般是生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→推測(cè)相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)獲取目的基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上,延伸出來(lái)的第二代基因工程。因?yàn)閷?duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì),必須通過(guò)基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)第23頁(yè)/共83頁(yè)拓展延伸

蛋白質(zhì)組計(jì)劃和人類基因組計(jì)劃的比較蛋白質(zhì)組計(jì)劃基因組計(jì)劃啟動(dòng)時(shí)間2001年成立組織1990年正式啟動(dòng)主要內(nèi)容“肝臟蛋白質(zhì)”和“血漿蛋白質(zhì)”的研究測(cè)定人類基因組24條染色體上全部DNA序列參加國(guó)家16個(gè)國(guó)家,80多個(gè)實(shí)驗(yàn)室6個(gè)國(guó)家,中國(guó)是唯一的發(fā)展中國(guó)家我國(guó)承擔(dān)任務(wù)牽頭執(zhí)行“人類肝臟蛋白質(zhì)組計(jì)劃”承擔(dān)1%的測(cè)序工作意義揭示并確認(rèn)肝臟(血漿)蛋白質(zhì)為重大疾病預(yù)防、診斷、治療以及新藥研發(fā)提供科學(xué)基礎(chǔ);推動(dòng)支持蛋白質(zhì)工程遺傳病的診斷和治療;揭示基因表達(dá)的機(jī)理第24頁(yè)/共83頁(yè)對(duì)位訓(xùn)練7.胰島素可以用于治療糖尿病,但是胰島素被注射到人體后,會(huì)堆積在皮下,要經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)的時(shí)間才能進(jìn)入血液,而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解,因此,治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題:第25頁(yè)/共83頁(yè)(1)構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵,圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是

。(2)通過(guò)DNA合成形成的新基因應(yīng)與

結(jié)合后轉(zhuǎn)移到

中才能得到準(zhǔn)確表達(dá)。(3)若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素,需用到的生物工程有

、

和發(fā)酵工程。(4)圖解中從新的胰島素模型到新的胰島素基因的基本思路是什么?。蛋白質(zhì)的預(yù)期功能載體大腸桿菌等受體細(xì)胞蛋白質(zhì)工程基因工程根據(jù)新的胰島素中氨基酸的序列,推測(cè)出其基因中的脫氧核苷酸序列,然后利用DNA合成儀來(lái)合成出新的胰島素基因第26頁(yè)/共83頁(yè)(5)下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()

A.蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),使之更加符合人類需要

B.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子的結(jié)構(gòu)

C.蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界中不曾存在的新型蛋白質(zhì)分子

D.蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分,又稱為第二代基因工程B第27頁(yè)/共83頁(yè)解析

(1)蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求,對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì),因此,圖中構(gòu)建新的胰島素模型的依據(jù)是胰島素的預(yù)期功能。(2)合成的目的基因應(yīng)與載體構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受體細(xì)胞中才能得以表達(dá)。(3)利用蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)自然界原本不存在的蛋白質(zhì),需對(duì)原有的胰島素進(jìn)行改造,根據(jù)新的胰島素中氨基酸的序列推測(cè)出其基因中的脫氧核苷酸序列,人工合成新的胰島素基因,形成目的基因,改造好的目的基因需通過(guò)基因工程來(lái)生產(chǎn)基因產(chǎn)物,并且在生產(chǎn)過(guò)程中要借助工程菌,所以還需要進(jìn)行第28頁(yè)/共83頁(yè)發(fā)酵,因此該過(guò)程涉及蛋白質(zhì)工程、基因工程和發(fā)酵工程。(4)由新的蛋白質(zhì)模型到構(gòu)建新的基因,其基本設(shè)計(jì)思路是根據(jù)新的蛋白質(zhì)中氨基酸的序列,推測(cè)出基因中的脫氧核苷酸序列。然后用DNA合成儀直接合成出新的基因。(5)由于基因決定蛋白質(zhì),因此,要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,最終還必須通過(guò)改造基因來(lái)完成,而不是直接對(duì)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作。答案

(1)蛋白質(zhì)的預(yù)期功能(2)載體大腸桿菌等受體細(xì)胞(3)蛋白質(zhì)工程基因工程(4)根據(jù)新的胰島素中氨基酸的序列,推測(cè)出其基因中的脫氧核苷酸序列,然后利用DNA合成儀來(lái)合成出新的胰島素基因(5)B第29頁(yè)/共83頁(yè)考點(diǎn)五轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題及生物武器的危害性1.如何理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)?提示對(duì)于這個(gè)問(wèn)題的學(xué)習(xí),要求注意以下幾個(gè)方面:(1)首先認(rèn)識(shí)到轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用前景是非常廣闊的,以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果,進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活,特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用。第30頁(yè)/共83頁(yè)(2)要正視轉(zhuǎn)基因技術(shù)帶來(lái)的安全性問(wèn)題,切實(shí)認(rèn)識(shí)到個(gè)別有害轉(zhuǎn)基因生物的危害性,要趨利避害。(3)完善相應(yīng)的法令法規(guī),利用法制手段確保轉(zhuǎn)基因生物的安全性。(4)增強(qiáng)科學(xué)家的法制意識(shí),提高科學(xué)家的研究道德水平。第31頁(yè)/共83頁(yè)2.為保護(hù)轉(zhuǎn)基因食品安全性,采取了哪些監(jiān)控和預(yù)防措施?

提示(1)立法是監(jiān)控農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全的有力措施。(2)多環(huán)節(jié)監(jiān)控。轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物研究,從實(shí)驗(yàn)室走向大田試驗(yàn)及產(chǎn)品商品化都有相應(yīng)法規(guī)對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控,只有每一步階段試驗(yàn)獲得認(rèn)可證書(shū)后,才可進(jìn)行下一階段。(3)安全評(píng)價(jià)內(nèi)容具體而嚴(yán)格。第32頁(yè)/共83頁(yè)3.生物武器的種類種類舉例致病菌鼠疫菌、霍亂弧菌、傷寒桿菌、炭疽桿菌、痢疾桿菌病毒天花病毒、動(dòng)物痘病毒等基因重組的致病菌、生化毒劑如肉毒桿菌毒素可以阻滯神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿從而引起肌肉麻痹。只要有0.01mg的肉毒桿菌毒素就可以使人死亡第33頁(yè)/共83頁(yè)4.殺傷特點(diǎn)(1)致病力強(qiáng),多數(shù)具有傳染性某些生物戰(zhàn)劑只需少數(shù)病原體侵入人體,就能引起發(fā)病,如幾十個(gè)熱桿菌侵入人體就能致病。某些生物戰(zhàn)劑,如鼠疫桿菌等,有很強(qiáng)的傳染性,在一定條件下能在人員之間傳播,長(zhǎng)期流行。(2)污染面積廣生物戰(zhàn)劑致病力強(qiáng),氣溶膠可隨風(fēng)飄散,在氣象、地理?xiàng)l件適宜時(shí),可造成大面積污染區(qū)。(3)不易被發(fā)現(xiàn)生物戰(zhàn)劑氣溶膠無(wú)色無(wú)味,加之?dāng)撤蕉嘣邳S昏、夜間、拂曉、多霧時(shí)秘密施放,不易被人發(fā)現(xiàn)。第34頁(yè)/共83頁(yè)(4)有一定的潛伏期生物戰(zhàn)劑致病需經(jīng)幾小時(shí)至幾天的時(shí)間,在這個(gè)期間人員不會(huì)很快減弱工作能力。(5)受自然條件影響大風(fēng)速、氣溫對(duì)氣溶膠傳播有影響,大雪、低溫、干燥、日曬等能加速病菌的消亡。第35頁(yè)/共83頁(yè)對(duì)位訓(xùn)練8.在對(duì)番茄的研究中發(fā)現(xiàn),害蟲(chóng)損傷番茄葉片后,葉上的細(xì)胞壁能釋放出一種類激素因子,這種物質(zhì)通過(guò)細(xì)胞組織擴(kuò)散到莖和其他葉片上,啟動(dòng)蛋白酶抑制劑的基因后,開(kāi)始高效合成蛋白酶抑制劑,并在莖葉中迅速積累,以對(duì)付害蟲(chóng)的再次侵襲。蛋白酶抑制劑對(duì)害蟲(chóng)的消化酶有抑制作用,因此害蟲(chóng)取食后,就會(huì)因無(wú)法消化食物而被殺死。人們嘗試將番茄的蛋白酶抑制劑基因?qū)胗衩?,讓玉米獲得與番茄相似的抗蟲(chóng)性狀,以對(duì)付異常猖獗的玉米螟(一種玉米害蟲(chóng))。第36頁(yè)/共83頁(yè)根據(jù)材料回答下列問(wèn)題:(1)番茄的蛋白酶抑制劑很可能是在莖葉細(xì)胞的

處合成的。(2)將番茄的蛋白酶抑制基因?qū)胗衩變?nèi),使玉米形成新的性狀,這種變異屬于

。(3)能抗玉米螟的抗蟲(chóng)玉米的生態(tài)效益顯著,有人認(rèn)為抗蟲(chóng)玉米就是無(wú)蟲(chóng)玉米,不必防治害蟲(chóng)。你是否贊成這種說(shuō)法?

。說(shuō)明理由:

。(4)有人對(duì)食用這種轉(zhuǎn)基因玉米的安全性感到擔(dān)憂。你認(rèn)為這種擔(dān)憂有道理嗎?試以學(xué)過(guò)的知識(shí)進(jìn)行簡(jiǎn)要的分析說(shuō)明。

。第37頁(yè)/共83頁(yè)答案

(1)核糖體(2)基因重組(3)不贊成轉(zhuǎn)基因玉米能抵抗玉米螟,但不能抵抗所有的害蟲(chóng)(4)①有道理。這種轉(zhuǎn)基因玉米的果實(shí)中可能含有蛋白酶抑制劑,食用后可能抑制人體消化酶的活性,使人無(wú)法對(duì)食物進(jìn)行消化而出現(xiàn)病患;②無(wú)必要。因?yàn)槿伺c害蟲(chóng)消化酶的結(jié)構(gòu)存在差異,玉米果實(shí)中含有的蛋白酶抑制劑對(duì)害蟲(chóng)的消化酶有抑制作用,但對(duì)人可能無(wú)影響;③無(wú)必要。人類食用的通常是煮熟后的玉米食品,玉米果實(shí)中含有的蛋白酶抑制劑在高溫下已經(jīng)被破壞,因此不會(huì)對(duì)人的消化造成不良影響(答案不惟一)第38頁(yè)/共83頁(yè)糾正訓(xùn)練1.繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。請(qǐng)回答:(1)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞中,常用方法是

。(2)進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí),通常要將外源基因轉(zhuǎn)入

中,原因是

。(3)通常采用

技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組。(4)在研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí),應(yīng)使外源基因在小鼠的

細(xì)胞中特異表達(dá)。第39頁(yè)/共83頁(yè)解析

轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器是指利用轉(zhuǎn)基因活體動(dòng)物的某種能夠高效表達(dá)外源基因的器官或組織來(lái)進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)活性功能蛋白的技術(shù),該技術(shù)的第一步就是導(dǎo)入外源基因,對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞來(lái)說(shuō),常采用的方法是顯微注射法。顯微注射法的優(yōu)點(diǎn)是導(dǎo)入的外源基因片段可長(zhǎng)達(dá)50kb,且無(wú)需載體,外源基因在宿主染色體上的整合率相對(duì)較高。答案

(1)顯微注射(2)受精卵(或早期胚胎細(xì)胞)受精卵(或早期胚胎細(xì)胞)具有全能性,可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞中表達(dá)(3)DNA分子雜交(核酸探針)(4)膀胱上皮第40頁(yè)/共83頁(yè)2.下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是()

A.基因治療需要將正?;?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞

B.基因診斷的基本原理是DNA分子雜交

C.一種基因探針只能檢測(cè)水體中的一種病毒

D.原核基因不能用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良第41頁(yè)/共83頁(yè)解析

基因治療是把正?;?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療疾病的目的?;蛟\斷是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作探針,利用DNA分子雜交原理,鑒定被檢測(cè)標(biāo)本上的遺傳信息,達(dá)到檢測(cè)疾病或水體中病毒的目的,因此一種基因探針只能檢測(cè)相應(yīng)的遺傳信息。在基因工程中,由于DNA分子規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)在所有DNA分子中相同,因此,可以在任何不同DNA分子之間進(jìn)行操作。答案

D第42頁(yè)/共83頁(yè)知識(shí)綜合應(yīng)用重點(diǎn)提示通過(guò)“基因工程和蛋白質(zhì)工程綜合”的考查,提升“把握所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)和知識(shí)之間內(nèi)在的聯(lián)系”的能力。第43頁(yè)/共83頁(yè)典例分析(2009·廣東卷,39)(1)飼料加工過(guò)程溫度較高,要求植酸酶具有較好的高溫穩(wěn)定性。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)其進(jìn)行改造時(shí),首先必須了解植酸酶的

,然后改變植酸酶的

,從而得到新的植酸酶。(2)培育轉(zhuǎn)植酸酶基因的大豆,可提高其作為飼料原料時(shí)磷的利用率。將植酸酶基因?qū)氪蠖辜?xì)胞常用的方法是

。請(qǐng)簡(jiǎn)述獲得轉(zhuǎn)基因植株的完整過(guò)程:

。第44頁(yè)/共83頁(yè)(3)為了提高豬對(duì)飼料中磷的利用率,科學(xué)家將帶有植酸酶基因的重組質(zhì)粒通過(guò)

轉(zhuǎn)入豬的受精卵中。該受精卵培養(yǎng)至一定時(shí)期可通過(guò)

方法,從而一次得到多個(gè)轉(zhuǎn)基因豬個(gè)體。(4)若這些轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物進(jìn)入生態(tài)環(huán)境中,對(duì)生態(tài)環(huán)境有何影響?解析(1)蛋白質(zhì)工程首先要根據(jù)已有蛋白質(zhì),從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā),設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列,找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,合成目的基因,再通過(guò)基因工程產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因生物。第45頁(yè)/共83頁(yè)(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有:農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法、基因槍介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法,其中有80%的轉(zhuǎn)基因植物都是通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法產(chǎn)生的。(3)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性受細(xì)胞質(zhì)的抑制,故目的基因需注入到受精卵中,再將注射了目的基因的受精卵移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi),使其發(fā)育成具有新性狀的動(dòng)物。(4)轉(zhuǎn)基因生物可造成基因污染等不良影響。第46頁(yè)/共83頁(yè)答案

(1)分子結(jié)構(gòu)及預(yù)期功能基因(2)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法首先將目的基因與質(zhì)粒組合,構(gòu)建基因表達(dá)載體,將含目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得表現(xiàn)新性狀的植物(3)顯微注射法胚胎分割(4)轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境可能產(chǎn)生的影響主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①轉(zhuǎn)基因生物打破了物種的原有界限,改變了物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng),對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性造成破壞;②重組DNA與微生物雜交,可能出現(xiàn)對(duì)動(dòng)、植物和人類有害第47頁(yè)/共83頁(yè)的病原微生物;③增加目標(biāo)害蟲(chóng)的抗性和進(jìn)化速度;④轉(zhuǎn)基因植物通過(guò)傳粉進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致超級(jí)雜草出現(xiàn);⑤轉(zhuǎn)基因植物的花粉如含有有毒蛋白或過(guò)敏蛋白,通過(guò)蜜蜂的采集,很可能進(jìn)入蜜蜂中,再經(jīng)過(guò)食物鏈的傳遞,最后有可能進(jìn)入其他動(dòng)物和人體內(nèi)。第48頁(yè)/共83頁(yè)定時(shí)檢測(cè)一、選擇題1.(2009·浙江理綜,3)下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)物、植物或微生物

B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶

C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性

D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)第49頁(yè)/共83頁(yè)解析

基因工程中目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)物、植物或微生物;常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性,只有經(jīng)過(guò)一定的物質(zhì)激活以后,才有生物活性;載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞,不能促進(jìn)目的基因的表達(dá),所以D錯(cuò)誤。答案

D第50頁(yè)/共83頁(yè)2.(2009·安徽卷,4)2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白”的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因,再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi),表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是()

A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程

B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布

D.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)第51頁(yè)/共83頁(yè)解析

將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因,將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi),表達(dá)出的蛋白質(zhì)帶有綠色熒光,從而可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。故C正確。答案

C第52頁(yè)/共83頁(yè)3.(2008·全國(guó)理綜Ⅰ,4)已知某種限制性核酸內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn),如下圖中箭頭所指。如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段?,F(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子,若在每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性

DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種類數(shù)是()

A.3B.4C.9D.12

解析若每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則多個(gè)線性DNA可以切得的種類有:a、

b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd,共九種。C第53頁(yè)/共83頁(yè)4.基因工程中,需使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—,限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。根據(jù)圖示判斷下列操作正確的是()A.目的基因和質(zhì)粒均用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ切割

B.目的基因和質(zhì)粒均用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ切割

C.質(zhì)粒用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ切割,目的基因用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ切割

D.質(zhì)粒用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ切割,目的基因用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ切割第54頁(yè)/共83頁(yè)解析

本題中要遵循一個(gè)原則:不能同時(shí)將兩個(gè)標(biāo)記基因切開(kāi),至少保留一個(gè),所以只能用酶Ⅰ切割質(zhì)粒,而從目的基因右側(cè)堿基序列可知只能用酶Ⅱ。答案

D第55頁(yè)/共83頁(yè)5.(2009·廣東理基,45)錢(qián)永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎(jiǎng)。在某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光,將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后,結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光。由此可知()

A.該生物的基因型是雜合的

B.該生物與水母有很近的親緣關(guān)系

C.綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)

D.改變綠色熒光蛋白基因的1個(gè)核苷酸對(duì),就不能檢測(cè)到綠色熒光第56頁(yè)/共83頁(yè)解析

某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光,將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后,結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光,說(shuō)明綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)。答案

C第57頁(yè)/共83頁(yè)6.下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容,正確的組合是()

解析

基因操作過(guò)程中,供體為提供目的基因的生物,剪刀為限制性核酸內(nèi)切酶,針線為DNA連接酶,載體為細(xì)菌的質(zhì)粒、噬菌體或其他一些病毒,受體一般為大腸桿菌等生物。供體剪刀針線載體受體A質(zhì)粒限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶提供目的基因的生物大腸桿菌等B提供目的基因的生物DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶質(zhì)粒大腸桿菌等C提供目的基因的生物限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)粒大腸桿菌等D大腸桿菌等DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶提供目的基因的生物質(zhì)粒C第58頁(yè)/共83頁(yè)7.我國(guó)自主研制的復(fù)制型艾滋病疫苗,是把艾滋病病毒RNA的幾個(gè)重要片段逆轉(zhuǎn)錄后插入天花病毒

DNA中,形成重組疫苗。該疫苗具有復(fù)制能力,可以持續(xù)刺激免疫系統(tǒng),使人產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫能力。在該疫苗研制過(guò)程中()A.運(yùn)用了RNA病毒容易突變的特點(diǎn)

B.運(yùn)用基因工程手段,使用質(zhì)粒作為載體

C.通常需要利用動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

D.體現(xiàn)了天花病毒的間接使用價(jià)值C第59頁(yè)/共83頁(yè)8.基因治療是指()A.把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,達(dá)到治療疾病的目的

B.對(duì)有缺陷的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù),從而使其恢復(fù)正常,達(dá)到治療疾病的目的

C.運(yùn)用人工誘變的方法,使有基因缺陷的細(xì)胞產(chǎn)生基因突變恢復(fù)正常

D.運(yùn)用基因工程技術(shù),把有缺陷的基因切除,達(dá)到治療疾病的目的A第60頁(yè)/共83頁(yè)9.下列黏性末端屬于同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割而成的是()

A.①②B.①③C.①④D.②③B第61頁(yè)/共83頁(yè)10.基因芯片技術(shù)是近幾年才發(fā)展起來(lái)的嶄新技術(shù),涉及生命科學(xué)、信息學(xué)、微電子學(xué)、材料學(xué)等眾多的學(xué)科,固定在芯片上的各個(gè)探針是已知的單鏈DNA分子,而待測(cè)DNA分子被用同位素或能發(fā)光的物質(zhì)標(biāo)記。如果這些待測(cè)的DNA分子中正好有能與芯片上的DNA配對(duì)的,它們就會(huì)結(jié)合起來(lái),并在結(jié)合的位置發(fā)出熒光或者射線,出現(xiàn)“反應(yīng)信號(hào)”,下列說(shuō)法中錯(cuò)誤的是()第62頁(yè)/共83頁(yè)A.基因芯片的工作原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)B.待測(cè)的DNA分子首先要解旋變?yōu)閱捂?,才可用基因芯片測(cè)序C.待測(cè)的DNA分子可以直接用基因芯片測(cè)序D.由于基因芯片技術(shù)可以檢測(cè)未知DNA堿基序列,因而具有廣泛的應(yīng)用前景,好比能識(shí)別的“基因身份證”答案

C第63頁(yè)/共83頁(yè)11.干擾素是治療癌癥的重要藥物,它必須從血液中提取,每升人血中只能提取0.5μg,所以價(jià)格昂貴。美國(guó)加利福尼亞的某生物制品公司用如下方法生產(chǎn)干擾素。如圖所示:從上述方式中可以看出,該公司生產(chǎn)干擾素運(yùn)用的方法是()

A.個(gè)體間的雜交B.基因工程

C.細(xì)胞融合D.器官移植第64頁(yè)/共83頁(yè)解析

從圖中可以看出整個(gè)過(guò)程是將人的淋巴細(xì)胞中控制干擾素合成的基因與質(zhì)粒結(jié)合后導(dǎo)入酵母菌,并從酵母菌產(chǎn)物中提取干擾素,這項(xiàng)技術(shù)為基因工程。答案

B第65頁(yè)/共83頁(yè)12.限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA序列并進(jìn)行剪切,不同的限制性核酸內(nèi)切酶可以對(duì)不同的核酸序列進(jìn)行剪切。現(xiàn)用3種不同的限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)一6.2kb(千堿基對(duì))大小的線狀DNA進(jìn)行剪切后,用凝膠電泳分離各核酸片段,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。請(qǐng)問(wèn):3種不同的限制性核酸內(nèi)切酶在此DNA片段上的切點(diǎn)位置是圖中的()ABC4.21.70.35.21.03.61.41.2第66頁(yè)/共83頁(yè)解析

限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的核苷酸序列,并且在特定的部位切開(kāi),酶A應(yīng)有兩個(gè)切點(diǎn),酶B有一個(gè)切點(diǎn),酶C有兩個(gè)切點(diǎn),可以看出選項(xiàng)B、C是不正確的,而且酶A切成的三段長(zhǎng)度為4.2、1.7、0.3,選項(xiàng)A不符合。答案

D第67頁(yè)/共83頁(yè)13.在已知某小片段基因堿基序列的情況下,獲得該基因的最佳方法是()

A.以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNAB.以4種脫氧核苷酸為原料人工合成

C.將供體DNA片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中,再進(jìn)一步篩選

D.由蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)mRNA

解析

已知目的基因的堿基序列,人工合成是最方便快捷的。沒(méi)有必要再利用mRNA、蛋白質(zhì)的氨基酸序列來(lái)合成,更不必再進(jìn)行篩選。B第68頁(yè)/共83頁(yè)二、非選擇題14.已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。

SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在

SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗,開(kāi)展了前期研究工作,其簡(jiǎn)要的操作流程如下:第69頁(yè)/共83頁(yè)

(1)實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過(guò)程是

。(2)步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用限制性核酸內(nèi)切酶和

酶,后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的

連接起來(lái)。(3)如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌,一般情況下,不能得到表達(dá)的S蛋白,其原因是S基因在大腸桿菌中不能

,也不能

。第70頁(yè)/共83頁(yè)(4)為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S

蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性,可用

進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn),從而得出結(jié)論。(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比,原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列(相同/不同),根本原因是

。第71頁(yè)/共83頁(yè)解析

(1)利用RNA獲取DNA,一般采用逆轉(zhuǎn)錄的方法,在這一過(guò)程中需要逆轉(zhuǎn)錄酶;(2)目的基因與載體結(jié)合,先用限制性核酸內(nèi)切酶在目的基因和載體上切出相同的黏性末端,將目的基因片段插入載體的切口處,再加入適量DNA連接酶,將黏性末端連接起來(lái);(3)選擇性擴(kuò)增后得到的含有遺傳信息的DNA片段(S基因),直接導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),在不與其DNA整合的情況下,不進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,得不到相應(yīng)的蛋白質(zhì);(4)通過(guò)大腸桿菌合成的S蛋白,結(jié)構(gòu)和功能可能會(huì)發(fā)生變化,可與人體內(nèi)產(chǎn)生的抗S蛋白的抗體進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng),以此進(jìn)行檢測(cè);(5)因轉(zhuǎn)入的目的基因相同,翻譯出的蛋白質(zhì)一般情況下也相同。第72頁(yè)/共83頁(yè)

答案

(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)DNA連接載體S基因(3)復(fù)制合成S基因的mRNA(4)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白SARS康復(fù)病人血清(5)相同表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同第73頁(yè)/共83頁(yè)15.據(jù)報(bào)道,美國(guó)佛羅里達(dá)大學(xué)的享利·丹尼爾教授利用基因工程,研制出轉(zhuǎn)基因萵苣,可用其中的有效藥物成分制造胰島素膠囊來(lái)治療糖尿病。如圖所示是獲得轉(zhuǎn)基因萵苣的技術(shù)流程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:第74頁(yè)/共83頁(yè)(1)①過(guò)程需要的酶有

。(2)為了便于篩選,質(zhì)粒A上應(yīng)具有

。(3)接受重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞可能有三種情況:如果受體細(xì)胞是土壤農(nóng)桿菌,則導(dǎo)入它的目的是為了

,以便于得到大量的含目的基因的土壤農(nóng)桿菌。然后用土壤農(nóng)桿菌侵染受體細(xì)胞C2,受體細(xì)胞C2可以是

或其他細(xì)胞,然后應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù),經(jīng)

過(guò)程

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