實驗八：葉綠體中色素的提取和分離

實驗6：葉綠體中色素的提取和分離

馬山縣周鹿中學(xué)陸保宗實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)二、實驗原理（一）葉綠體色素：1.葉綠素2.類胡蘿卜素葉綠素a葉綠素b胡蘿卜素葉黃素3:1(陽生)２:1(陰生)2：13：1實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)葉綠素a、b的結(jié)構(gòu)式實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)式實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)（二）四種色素的化學(xué)性質(zhì)均為親脂性>親水性，∴均不溶于水，而溶于有機溶劑，故可用乙醇、丙酮等有機溶劑提取。極性大?。喝~綠素b>葉綠素a>葉黃素>胡蘿卜素?！喔鶕?jù)相似相溶原理，在有機溶液中的溶解度：

葉綠素b<葉綠素a<葉黃素<胡蘿卜素。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)（二）葉綠素的光學(xué)性質(zhì)葉綠素的吸收光譜實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)類胡蘿卜素的吸收光譜實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗原理：①葉綠體中的色素是有機物，不溶于水，易溶于丙酮等有機溶劑中，所以用丙酮、無水乙醇等能提取色素。②層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，隨層析液在濾紙上擴散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。所以用層析液來分離四種色素。

實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)

實驗材料用具：

1、材料：新鮮的綠色葉片(如菠菜葉片)。

2、儀器：干燥的定性濾紙，燒杯(100mL)，研缽玻璃漏斗，尼龍布（或棉花），毛細吸管，剪刀，小試管，培養(yǎng)皿蓋，藥勺，量筒(10mL)，天平，鑷子，鉛筆，尺子。

3、藥品：丙酮，層析液，二氧化硅，碳酸鈣。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗過程：1、提取葉綠素的步驟

：（1）稱：用天平稱量5g除去葉柄的葉片（2）剪：越細越好，盡量去除葉脈等部分（3）加藥品：加少量二氧化硅，碳酸鈣和丙酮（約5mL）快速充分研磨。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)（4）磨：研磨要領(lǐng)是要用力壓快速研磨。（5）過濾：用紗布（或棉花）、漏斗和試管，最后提取液置于試管中待用，及時用棉塞（或塞子）將試管塞嚴.實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)2、分離色素的步驟①制備濾紙條：將預(yù)備在試驗桌上的濾紙條一端剪去兩個角作標記，在距離這一端1cm處用鉛筆畫一條細的橫線。②畫濾液細線：沿鉛筆線輕輕均勻地畫一道線，用提取液反復(fù)劃好幾次，每次劃完盡量吹干，不要弄破紙條。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)③層析分離葉綠體中的色素：將3mL層析液倒入燒杯中，注意將紙條畫有濾液細線的一端置于燒杯中的層析液中，注意千萬不要將濾液細線浸沒在層析液中。④觀察實驗結(jié)果：最后濾紙條上將分離出四條色素帶，顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍綠色和黃綠色，四種色素分別是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗結(jié)果：實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)問題討論：

實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？

二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸鈣的作用是保護葉綠素不分解實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)2、將濾液放在試管中，為什么要及時用棉塞將試管塞嚴？

濾液含有丙酮，丙酮有毒，防止揮發(fā)

實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)3、

畫濾液細線時重復(fù)畫幾次的目的是什么？

增加色素的含量，使分離后的色素帶更加清晰實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)4.為什么不能讓濾液細線觸及層析液？

層析液會溶解色素使色素?zé)o法分離。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)5.觀察實驗結(jié)果有什么現(xiàn)象？濾紙條上出現(xiàn)了幾條色素帶？每條色素帶的顏色和排序如何？

濾紙條上將分離出四條色素帶，顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍綠色和黃綠色，四種色素分別是胡蘿卜素（最快）、葉黃素、葉綠素a（最多）和葉綠素b（最慢）。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)二、實驗原理（一）葉綠體色素：1.葉綠素2.類胡蘿卜素葉綠素a葉綠素b胡蘿卜素葉黃素3:1(陽生)２:1(陰生)2：13：1實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)綠葉中的色素類胡蘿卜素（含量約1/4）葉綠素（含量約3/4）胡蘿卜素（橙黃色）葉黃素（黃色）葉綠素a（藍綠色）葉綠素b（黃綠色）實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)實驗關(guān)鍵:1.選材時應(yīng)注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿汁的葉片.(如菠菜葉)2.畫濾液細線時應(yīng)以細、齊、直為標準，重復(fù)畫線時必須等上次畫線干燥后再進行，重復(fù)2-3次。3.層析時不要讓濾液細線觸及層析液。實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)

隨堂演練：1.通過紙層析分離葉綠體色素，結(jié)果在濾紙條上出現(xiàn)四條色素帶，從上到下依次為（）

A.胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b B.胡蘿卜素、葉綠素a、葉綠素b、葉黃素

C.葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素

D.葉黃素、葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素A實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)2.下列關(guān)于“葉綠體色素提取和分離”的實驗描述中，不屬于實驗要求的是（）A.提取高等植物葉綠體中的色素B.用紙層析法分離色素C.了解各種色素的吸收光譜D.驗證葉綠體中所含色素的種類C實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)3.用紙層析法將色素進行分離,在濾紙條上出現(xiàn)的最窄的一條色素帶的顏色是 （）

A.黃色 B.橙黃色 C.黃綠色 D.藍綠色

B實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)4.提取葉綠體中的色素時要加丙酮，其原因是 （）

A.讓色素溶解

B.防止葉綠素被破壞

C.便于將葉片研磨成勻漿

D.促使葉綠體中色素分離A實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)5.在葉綠體色素的提取和分離實驗中，在濾紙條上擴散速度最快的色素是（）

A.葉綠素a B.葉綠素b C.胡蘿卜素

D.葉黃素C實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)6.綠色植物的光合作用中，葉綠素是 （）

A.光合作用的原料

B.光合作用的產(chǎn)物

C.能量轉(zhuǎn)換器

D.氫的接受器A實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)7.下列作用不屬于葉綠素的功能的是 （）

A.吸收光能

B.利用光能使水分解

C.利用光能合成ATP D.固定和還原二氧化碳D實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)能力提高練習(xí)：

(1)在圓形濾紙的中央，點上葉綠體色素的提取液進行層析，隨著層析液從濾紙的中央向四周擴散，形成四個色素環(huán)帶，排在最里圈的色素是（

）

A.橙黃色

B.黃綠色

C.藍綠色

D.黃色B實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)

(2)在做“葉綠體中色素的提取和分離”實驗時，向研缽中加入SiO2的目的是：

，加入CaC03的目的是

在盛有層析液的燒杯上蓋上培養(yǎng)皿蓋的是在濾紙條上擴散速度最慢的色素帶是其顏色是

為使研磨充分防止研磨過程中，葉綠素受到破壞防止層析液揮發(fā)葉綠素b黃綠色實驗八：葉綠體中色素的提取和分離(整理)(3)某同學(xué)在做“葉綠體中色素的提取分離”實驗時，操作情況如下所述，結(jié)果實驗失敗，請指出其錯誤所在:①將5克新鮮完整的菠菜葉，放在研缽中，加入丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。

(原因是沒有去除粗葉脈和將葉剪碎，這樣降低了葉綠素的提取率）

②用毛細吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線處小心均勻地劃出一條濾液細線，并連續(xù)