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文檔簡介
水產(chǎn)動物的免疫學診斷免疫診斷技術,又稱血清學檢測技術。利用已知的病原生物或其產(chǎn)物可以制備成診斷抗原或診斷血清。用免疫技術診斷水產(chǎn)動物疾病的方法有兩種:①用診斷血清與從患病動物體上分離的病原體在體外進行免疫反應,可用于診斷病原體的種類;②用診斷抗原與待檢水產(chǎn)動物血清中的抗體在體外進行免疫反應,可確定該動物體內(nèi)抗體的種類,從而間接診斷引起被檢動物所感染的病原體。此種方法僅適合被病原體感染后能產(chǎn)生抗體的動物。無論是應用診斷抗原追蹤抗體,還是應用診斷血清檢測抗原,都是利用免疫學原理,即抗原和抗體在適宜條件下可以發(fā)生特異性反應的特性。人們通過凝集試驗、沉淀試驗、免疫酶技術以及放射性免疫測定等技術,研制出一系列快速診斷水產(chǎn)動物疾病的方法和制劑。單克隆抗體是由一個抗體產(chǎn)生細胞與骨髓瘤細胞融合,產(chǎn)生雜交瘤細胞,再經(jīng)大量繁殖而來的細胞群所產(chǎn)生的抗體。與常規(guī)血清抗體相比,其特異性強,親和性一致,還具有識別單一抗原決定簇的特性。1.單克隆抗體技術ELISA的基本原理為受檢物中的抗原或抗體與固相表面的抗體或抗原發(fā)生免疫反應并結(jié)合在固相表面,此抗原抗體結(jié)合物又能結(jié)合相應的酶標記物,用洗滌法去除未結(jié)合而游離的酶標記物,繼而加入酶反應的底物后,底物被酶催化為有色產(chǎn)物,顯色的程度與受檢物中的抗原或抗體的量直接相關,由此可根據(jù)顯色的深淺進行定性或定量的測定。2.酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA法)免疫熒光抗體技術是以熒光素標記抗體或抗原,使其與相應抗原或抗體結(jié)合后,借熒光檢測儀器查看熒光現(xiàn)象或檢測熒光強度,從而判斷抗原或抗體的存在、定位、分布情況或檢測樣本中抗原或抗體含量。3.免疫熒光抗體技術Dot–ELISA技術是以硝酸纖維膜NCM代替反應板,用不溶性供氫體顯色。由于硝酸纖維膜NCM對蛋白質(zhì)具有高度的親和力,所以克服了常規(guī)ELISA抗原抗體復合物結(jié)合過程中存在的明顯的泄露和解吸附現(xiàn)象。4.酶聯(lián)免疫斑點法(Dot–ELISA)SPA技術應用較多的是協(xié)同凝集反應,它能在那些顆粒透明或很小、沉淀不明顯的凝集反應中起載體和放大作用,提高實驗的敏感性。該技
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