DB5404T 0003-2023林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體 第1部分：菌種基本要求

ICS65.020.99B395404方標(biāo)準(zhǔn)林芝方標(biāo)準(zhǔn)DBT023林芝市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB5404/T0003—2023 性引用文件 1 4子實體形態(tài)特征 2 2微生物學(xué)要求 43菌絲生長速度 4 6.2微生物學(xué)檢驗 46.3菌絲生長速度檢驗 56.4一級種農(nóng)藝性狀和商品性狀 5 8標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運輸、貯存 6簽、標(biāo)志 6 DB5404/T0003—2023前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是《林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體》的第1部分，《林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體》已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：菌種基本要求；——第2部分：菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程；——第3部分：菌袋制作規(guī)程；——第4部分：栽培技術(shù)規(guī)程；——第5部分：采收存儲技術(shù)規(guī)范；——第6部分：分級規(guī)范。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由林芝市質(zhì)量協(xié)會提出。本文件由林芝市市場監(jiān)督管理局歸口。本文件起草單位：西藏自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所、林芝市藏醫(yī)院、西藏米林紅太陽藏藥材科技開發(fā)有限公司、林芝市質(zhì)量協(xié)會。本文件主要起草人：洛桑卓瑪、何天文、旦巴旺久、羅笑娟、龍莎莎、辛雙陽、次仁卓嘎、邵強(qiáng)、措姆、趙明。1DB5404/T0003—2023林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體第1部分：菌種基本要求1范圍本文件規(guī)定了林芝靈芝(白肉靈芝)[Ganodermaleucocontextum(Leyss.ExFr.)Karst]品種、菌種質(zhì)量和菌種檢驗。本文件適用于林芝市靈芝的固體菌種及檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志GB/T12728食用菌術(shù)語GB4789.28食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義GB/T12728界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.13.2林芝靈芝在林芝靈芝地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍內(nèi)野生的或按本文件種植、采收和加工的具有獨特品質(zhì)的多孔菌科靈芝屬白肉靈芝(Ganodermaleucocontextum)的子實體。3.33.4地理標(biāo)志產(chǎn)品保護(hù)范圍林芝靈芝產(chǎn)地范圍為西藏自治區(qū)林芝市巴宜區(qū)、米林縣、工布江達(dá)縣、波密縣、察隅縣、朗縣、墨脫縣共7個縣(區(qū))現(xiàn)轄行政區(qū)域。3.53.6菌種生長在適宜基質(zhì)上具結(jié)實性的菌絲培養(yǎng)物，包括一級種、二級種和三級種。3.73.8一級種經(jīng)各種方法先育得到的具有結(jié)實性菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物稱一級種，也稱母種。3.93.10二級種由一級種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物稱二級種，也稱原種。3.113.12三級種2DB5404/T0003—2023由二級種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，栽培種只能用于栽培，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種，稱三級種，也稱栽培種。3.133.14拮抗現(xiàn)象具有不同遺傳基因的菌落間產(chǎn)生不生長區(qū)帶或形成不同形式線狀邊緣的現(xiàn)象。3.153.16角變因菌絲體局部變異或感染雜菌而導(dǎo)致菌絲變細(xì)、生長緩慢、菌絲體表面特征成角狀異常的現(xiàn)象。3.173.18高溫抑制線食用菌菌種在生產(chǎn)過程中受高溫的不良影響，培養(yǎng)物出現(xiàn)的圈狀發(fā)黃、發(fā)暗或菌絲變稀弱的現(xiàn)象。3.193.20生物學(xué)效率單位質(zhì)量培養(yǎng)料的風(fēng)干物質(zhì)所培養(yǎng)產(chǎn)生出的子實體或菌絲體質(zhì)量(鮮重)，常用百分?jǐn)?shù)表示。4子實體形態(tài)特征林芝靈芝菌柄較短，呈黑紅色，有漆狀光亮，菌柄內(nèi)為白色海綿狀，菌蓋呈圓形或扇形狀，表面紅色或深紅色，邊緣色略淡，外圍為白色，菌孔面呈白色至奶油色，菌肉為白色，擔(dān)孢子呈橢圓體，具白肉靈芝固有的氣味。5質(zhì)量要求5.1感官要求5.1.1一級種(母種)應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1母種感官要求項目要求容器完整，無損，無色透明棉塞或硅膠塞干燥、潔凈、松緊適度，能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基灌入量試管總?cè)莘e的五分之一至四分之一斜面長度頂端距棉塞或硅膠塞40mm~50mm接種塊大小(接種量)(3mm~5mm)×(3mm~5mm)菌種外觀菌絲生長量長滿斜面菌絲體特征菌絲白色、濃密、短絨狀，氣生菌絲有但不茂盛。在接種塊附近的菌絲有時呈淺黃色。菌絲體表面均勻、平展、無角變、無高溫抑制線菌絲分泌物部分品種會產(chǎn)生少許淺黃色分泌物菌落邊緣整齊雜菌菌落無3DB5404/T0003—2023項目要求斜面背面外觀培養(yǎng)基不干縮，顏色均勻、無暗斑、無色素氣味有林芝靈芝菌種特有清香味，無酸、臭、霉等異味5.1.2二級種應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2原種感官要求項目要求容器完整，無損棉塞或無棉塞塑料蓋干燥、潔凈、松緊適度，能滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶(袋)棉塞或無棉塑料蓋下部距離≥40mm接種量(每支母種接原種數(shù)，接種物大小)4瓶(袋)~6瓶(袋)，≥(12mm×15mm)菌種外觀菌絲生長量長滿培養(yǎng)料菌絲體特征菌絲白色、濃密、短絨狀培養(yǎng)物表面菌絲體均勻、平展、無角變、無高溫抑制線、均勻緊貼于物料顆粒表面。培養(yǎng)基及菌絲體不能與菌種瓶壁或塑料袋分離，緊貼瓶(袋)壁、無干縮。培養(yǎng)物表面分泌物一般情況下無，培養(yǎng)后期偶有透明淡黃色露珠狀分泌物。雜菌菌落無拮抗現(xiàn)象無子實體原基無氣味有林芝靈芝菌種特有清香味，無酸、臭、霉等異味5.1.3三級種應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3栽培種感官要求項目要求容器完整，無損棉塞或無棉塞塑料蓋干燥、潔凈、松緊適度，滿足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶(袋)口的距離≥40mm接種量(每瓶或袋原種接栽培種數(shù))20瓶(袋)~40瓶(袋)菌種外觀菌絲生長量長滿培養(yǎng)料菌絲體特征菌絲白色、濃密、短絨狀不同部位菌絲體生長齊整，色澤一致，無角變，無高溫抑制線培養(yǎng)基及菌絲體不能與菌種瓶壁或塑料袋分離，緊貼瓶(袋)壁、無干縮培養(yǎng)物表面分泌物一般情況下無，培養(yǎng)后期偶有透明淡黃色露珠狀分泌物。雜菌菌落無拮抗現(xiàn)象無子實體原基培養(yǎng)后期在瓶(袋)口附近允許有小塊原基出現(xiàn)4DB5404/T0003—2023氣味有林芝靈芝菌種特有清香味，無酸、臭、霉等異味5.2微生物學(xué)要求應(yīng)符合表4的規(guī)定。表4母種微生物學(xué)要求項目要求菌絲生長狀態(tài)濃密、豐滿、旺健，長速正常、整齊，菌絲有較多鎖狀聯(lián)合。雜菌無5.3菌絲生長速度5.3.1一級種在PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)培養(yǎng)基上，在避光、適溫(25±1)℃條件下，菌絲長速為(8.2±1.1)mm/d，菌絲長滿斜面的時間為8d~10d。5.3.2二級種在適宜培養(yǎng)基上、適宜培養(yǎng)容器里(以使用15cm×28cm聚丙烯塑料菌種袋、裝量300g干料每袋為例)，在避光、適溫(25±1)℃條件下，菌絲長速為(8.0±0.8)mm/d，菌絲長滿容器的時間為23d~30d。5.3.3三級種在適宜培養(yǎng)基上、適宜培養(yǎng)容器里(以使用17cm×33cm聚丙烯塑料菌種袋、裝量400g干料每袋為例)，在避光、適溫(25±1)℃條件下，菌絲長速為(6.7±0.8)mm/d，菌絲長滿容器的時間為26d~40d。6檢驗方法6.1感官檢驗按表5逐項進(jìn)行。表5感官要求檢驗方法檢驗項目檢驗方法檢驗項目檢驗方法容器肉眼觀察接種量母種、原種肉眼觀察、測量栽培種檢查生產(chǎn)記錄硅膠塞、無棉塑料蓋肉眼觀察培養(yǎng)基上表面距瓶(袋)口的距離肉眼觀察一級種培養(yǎng)基灌入量肉眼觀察菌種外觀各項(雜菌菌落除外)肉眼觀察一級種斜面長度測量雜菌菌落肉眼觀察，必要時用5×放大鏡觀察一級種斜面背面外觀肉眼觀察氣味鼻嗅6.2微生物學(xué)檢驗5DB5404/T0003—20236.2.1表4中菌絲生長狀態(tài)用放大倍數(shù)不低于400倍的光學(xué)顯微鏡對培養(yǎng)物的水封片進(jìn)行觀察，每一檢樣應(yīng)觀察不少于50個視野。6.2.2細(xì)菌檢驗取少量疑有細(xì)菌污染的培養(yǎng)物或菌塊，按無菌操作接種于GB4789.28中規(guī)定的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液中，36℃~38℃避光震蕩培養(yǎng)1天，觀察培養(yǎng)液是否混濁。培養(yǎng)液混濁，為有細(xì)菌污染；培養(yǎng)液澄清，為無細(xì)菌污染。6.2.3霉菌檢驗取少量疑有霉菌污染的培養(yǎng)物或菌塊，按無菌操作接種于PDA培養(yǎng)基中，25℃~28℃避光培養(yǎng)3d~4d，出現(xiàn)白色以外色澤的菌落或非林芝靈芝菌絲形態(tài)菌落的，或出現(xiàn)異味者為霉菌污染物，必要時進(jìn)行水封片鏡檢。6.3菌絲生長速度檢驗6.3.1一級種按培養(yǎng)基配方，在24℃~26℃避光培養(yǎng)，計算長滿試管所需天數(shù)(d)。6.3.2二級種和三級種按培養(yǎng)基配方，在24℃~26℃避光培養(yǎng)，計算菌絲長滿所需天數(shù)(d)。6.4一級種農(nóng)藝性狀和商品性狀將被檢一級種制成二級種、三級種。分三組，每組不少于100袋，共不少于300袋。與一級種在同一環(huán)境下，常規(guī)管理并按表6項目做好栽培記錄，統(tǒng)計對比一級種與二級種、三級種的檢驗結(jié)果，以時間計的檢驗項目，被檢一級種有一項較對照菌株推遲5d以上(含5d)者，判定為不合格；產(chǎn)量顯著低于對照菌株者，為不合格；子實體外觀形態(tài)與對照明顯不同或畸形者，為不合格。表6一級種栽培中農(nóng)藝性狀和商品形狀檢驗記錄檢驗項目檢驗結(jié)果檢驗項目檢驗結(jié)果一級種長滿所需時間(d)原種長滿所需時間(d)菌絲長滿培養(yǎng)基料面所需時間(d)總生物學(xué)效率(%)第一潮出芝所需時間(d)色澤、質(zhì)地第一潮出芝生物學(xué)效率(%)芝蓋形狀平均單產(chǎn)(g/袋)芝蓋尺寸(mm)6.5留樣各級菌種都要留樣備查，留樣的數(shù)量應(yīng)每個批號菌種3支(瓶、袋)，于避光、6℃~8℃下儲存，儲存期一級種為3個月，二級種為2個月，三級種為1個月。7檢驗規(guī)則7.1抽樣6DB5404/T0003—2023抽樣應(yīng)具有代表性。一級種按來源、品種、培養(yǎng)條件、接種時間分批編號，二級種、三級種按菌種來源、制種方法和接種時間分批編號。按批隨機(jī)抽取被檢樣品一級種、二級種、三級種的抽樣量分別為該批菌種量的10%、5%、1%。但每批抽樣數(shù)量不得少于10支(瓶、袋)；若一級抽樣超過100支(瓶、袋)的，可進(jìn)行兩級抽樣。7.2判定規(guī)則檢驗項目全部符合要求的，判定為合格菌種，其中任何一項不符合要求，判定為不合格菌種。技術(shù)指標(biāo)不符合要求的，允許復(fù)檢一次，仍不符合要求，則判該批產(chǎn)品不合格。8標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運輸、貯存8.1標(biāo)簽、標(biāo)志8.1.1產(chǎn)品標(biāo)簽每支(瓶、袋)菌種應(yīng)貼(印)有清晰注明以下內(nèi)容的標(biāo)簽：a)產(chǎn)品名稱(如：林芝靈芝母種)；b)品種名稱(如：林芝靈芝××菌種廠×號)；e)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。8.1.2包裝標(biāo)簽每箱(或其它包裝單位)菌種必須貼有清晰注明以下要素的包裝標(biāo)簽：a)產(chǎn)品名稱、品種名稱；b)廠名、廠址、聯(lián)系電話；c)出廠日期；d)保質(zhì)期、貯存日期、貯存條件；e)數(shù)量；f)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。8.1.3包裝儲運圖示按GB/T191的規(guī)定，應(yīng)注明以下圖示標(biāo)志：a)小心輕放標(biāo)志；b)防水、防潮、防凍標(biāo)志；c)防曬、防高溫標(biāo)志