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微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告題目:放線菌的形態(tài)觀察姓名:學(xué)號(hào): 年級(jí)班級(jí): 組別:同組者: 時(shí)間:【實(shí)驗(yàn)器材】1..菌種:青色鏈霉菌(S.glaucus),弗氏鏈霉菌(S.fiadiae)。培養(yǎng)基:高氏I號(hào)培養(yǎng)基。儀器或其他用具:培養(yǎng)皿,蓋玻片,載玻片,蓋玻片,接種環(huán),銀子,顯微鏡等?!灸康囊蟆空莆张渲坪铣膳囵B(yǎng)基的一般方法。學(xué)習(xí)并掌握觀察放線菌形態(tài)的基本方法。初步了解放線菌的形態(tài)特征。【基本原理】高氏I號(hào)培養(yǎng)基高氏I號(hào)培養(yǎng)基是用來(lái)培養(yǎng)和觀察放線菌形態(tài)特征的合成培養(yǎng)基。此合成培養(yǎng)基的主要特點(diǎn)是含有多種化學(xué)成分己知的無(wú)機(jī)鹽,這些無(wú)機(jī)鹽可能相互作用而產(chǎn)生沉淀。因此,在混合培養(yǎng)基成分時(shí),一般是按配方的順序依次溶解各成分,甚至有時(shí)還需要將二種或多種成分分別滅菌,使用時(shí)再按比例混合。此外,合成培養(yǎng)基有的還要補(bǔ)加微量元素。放線菌放線菌是指能形成分枝絲.狀體或菌絲?體的一類(lèi)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。常見(jiàn)放線菌大多能形成菌絲.體,緊貼培養(yǎng)基表面或深入培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)的叫基內(nèi)菌統(tǒng),基內(nèi)菌幺幺.生長(zhǎng)到一定階段還能向空氣中生長(zhǎng)出氣生菌統(tǒng),并進(jìn)一步分化產(chǎn)生抱子統(tǒng)及抱子。有的放線菌只產(chǎn)生基內(nèi)菌絲而無(wú)氣生菌絲。在顯微鏡下直接觀察時(shí),氣生菌統(tǒng)色暗,基內(nèi)菌絲?較透明。抱子幺幺.依種類(lèi)的不同,有直、波曲、各種螺旋形或輪生。在油鏡下觀察,放線菌的抱子有球形、橢圓、桿狀或柱狀。能否產(chǎn)生菌幺幺?體及由菌絲?體分化產(chǎn)生的各種形態(tài)特征是放線菌分類(lèi)鑒定的重要依據(jù)。為了觀察放線菌的形態(tài)特征,人們?cè)O(shè)計(jì)了各種培養(yǎng)和觀察方法,這些方法的主要目的是為了盡可能保持放線菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)下的形態(tài)特征。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用插片法。插片法將放線菌接種在平板上,插上滅菌蓋玻片后培養(yǎng),使放線菌菌絲.沿著培養(yǎng)基表面與蓋玻片的交接處生長(zhǎng)而附著在蓋玻上。觀察時(shí),輕輕取出蓋玻片,置于載玻片上直接鏡檢。這種方法可觀察到放線菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)下的特征,而且便于觀察不同生長(zhǎng)期的形態(tài)?!静僮鞑襟E】配制高氏I號(hào)培養(yǎng)基(200mL)o按配方稱取高氏培養(yǎng)基各組分,先用少量冷水,將淀粉調(diào)成糊狀,倒入煮沸的水中,在火上加熱,邊攪拌邊加入其他成分,溶化后,補(bǔ)足水分至200mL,調(diào)節(jié)pH,121°C滅菌2Omnio倒平板。取融化并冷至大約50°C的高氏I號(hào)培養(yǎng)基倒平板,倒平板時(shí)盡量使培養(yǎng)基厚一些,凝固待用。接種。無(wú)菌操作,用接種環(huán)挑取菌種斜面培養(yǎng)物在平板上劃線接種,劃線要密。插片。以無(wú)菌操作用鑲子將滅菌的蓋玻片以大約與培養(yǎng)基成45°角插入平板內(nèi),并與劃線垂直,每個(gè)平板插入3個(gè)蓋玻片。培養(yǎng)。將平板倒置,28°C培養(yǎng)3~5d。鏡檢。用鑲子小心拔出蓋玻片,擦去背面培養(yǎng)物,然后將無(wú)菌的一面朝上放在載玻片上,直接鏡檢。觀察時(shí),宜用略暗光線;先用低倍鏡找到適當(dāng)視野,再換高倍鏡觀察,必要時(shí)可用油鏡觀察?!緦?shí)驗(yàn)結(jié)果】圖片:青色鏈霉菌及弗氏鏈霉菌菌絲.青色鏈霉菌(示菌絲.)(10X100,油鏡)弗氏鏈霉菌(示菌絲.)(10X100,油鏡)表格:各種菌絲.形態(tài)特征項(xiàng)目基內(nèi)菌統(tǒng)形態(tài)項(xiàng)目基內(nèi)菌統(tǒng)形態(tài)青色鏈霉菌較長(zhǎng),疏松,多分枝弗氏鏈霉菌略短,較密,多分枝氣生菌絲?形態(tài)抱子統(tǒng)形態(tài)毛狀緊密螺旋形厚絮狀直條狀【思考題】1.鏡檢時(shí)如何區(qū)分放線菌基內(nèi)菌統(tǒng)、氣生菌統(tǒng)及抱子統(tǒng)?答:基內(nèi)菌幺幺比較亮比較粗、較透明;氣生菌幺幺比較黑比較細(xì)、色暗;抱子絲?依種類(lèi)的不同,有直、波曲、各種螺旋形或輪生,末端有時(shí)有抱子脫落?!靖健扛呤螴號(hào)培養(yǎng)基配方:TOC\o"1-5"\h\z可溶性淀粉 20gKNO3 lgNaCl 0.5gK2HPO4 0.5gMgSO4 0.5gFeSO4 0.01g瓊脂 20g水 lOOOmLpH 7.2
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