冷鏈核酸檢測課件

冷鏈核酸檢測知其然，知其所以然2冷鏈核酸檢測生產01裝卸02運輸03儲存04CONTENTS采樣環(huán)節(jié)05銷售3冷鏈核酸檢測01環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測4冷鏈核酸檢測□原輔料庫01□生產線02□半成品庫03成品庫（□待檢區(qū)□已檢區(qū)）04CONTENTS生產環(huán)節(jié)

5冷鏈核酸檢測肉類加工企業(yè)---《肉類加工企業(yè)新冠肺炎疫情防控指南》

重點場所采集范圍-操作臺面、接觸面/點備注飼養(yǎng)車間運輸車輛（方向盤、車門把手）卸車臺圈舍通道地面墻面污水三區(qū)（更衣室、廁所、浴室）-消毒池-工作區(qū)屠宰車間刀具洗手池機械設備地面墻面分割肉車間消毒池排水溝機械設備、工（容）器具地面墻面（墻裙）操作臺、砧板包裝車間消毒池絞肉機、切片機、攪拌機、包裝接、鋸骨機等；勺子、鉗子冷庫墊板托盤式貨架搬運工具（叉車、推車）化驗室地面墻面公共區(qū)域樓梯扶手門把手按鍵（開關）移動設備（電話）食堂、辦公室、宿舍、茶水間、衛(wèi)生間等屠宰過程：指屠宰時進行的圈欄沖洗、宰前淋洗、宰后燙毛或剝皮、開腔、劈半、解體、內臟洗滌及車間沖洗過程。

6冷鏈核酸檢測肉類加工企業(yè)---《肉類加工企業(yè)新冠肺炎疫情防控指南》

肉制品加工機械和設備屠宰加工車間實行機械化或半機械化作業(yè)，從原料到屠宰各加工環(huán)節(jié)，及屠宰加工車間和其它加工車間有機聯系分類名稱項目第一類屠宰加工設備自走懸空設備燙毛推擋機刮毛機劈半機電擊暈裝置......第二類原料初步加工機械解凍分割剔骨切塊/條攪碎第三類半成品加工機械和設備斬拌拌和灌填腌制壓模第四類成品加工機械和設備水煮蒸煮醬鹵油炸烘烤干制7冷鏈核酸檢測□農貿市場：用于銷售蔬菜、水果、瓜果、水產品、禽蛋、肉類及其制品、糧油及其制品、豆制品、熟食、調味品、土特產等各類農產品和食品的以零售經營為主的固定場所。也指農村中臨時或定期買賣農副業(yè)產品和小手工業(yè)產品的市場01□菜市場/別名“農貿市場”02□批發(fā)市場：指集中進行現貨批量交易的場所。目前我國批發(fā)市場大多采用“攤位制”交易形式03□商場04CONTENTS流通環(huán)節(jié)

05

□超市

06

□小食雜店07□網購08□其他（

）8冷鏈核酸檢測重點場所、環(huán)節(jié)采集范圍-操作臺面、接觸面/點重點：生鮮宰殺冰箱冷藏柜臺面地面器具、刀具墩布（池）垃圾桶污水砧板稱量工具、盛裝工具刀、剪刀、刮鱗器、絞肉機、鋸（切）骨機9冷鏈核酸檢測01□食堂（機關食堂/學校、托幼食堂/企事業(yè)單位食堂/建筑工地食堂）02□小吃店：專賣小吃零食的商店因為位于旺區(qū)，租金貴，小食店多數不似餐廳或快餐店，無座位，03□快餐店：一種專門供應預先做好的、食用迅速方便的飯食的餐館04CONTENTS餐飲環(huán)節(jié)

05

□飲品店06

□集體用餐配送單位07□中央廚房：是將菜品用冷藏車配送，全部直營店實行統(tǒng)一采購和配送08□其他（

）□餐館（特大型餐館/大型餐館/中型餐館/小型餐館）10冷鏈核酸檢測重點場所、環(huán)節(jié)采集范圍-操作臺面、接觸面/點重點：生鮮宰殺冰箱冷藏柜門臺面面板地面器具、刀具衛(wèi)生潔具垃圾桶污水把手把手開放式自助展示臺服務用具墩布（池）水龍頭、洗槽、排水溝、下水道11冷鏈核酸檢測010302（醫(yī)院）環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測體現預防為先的感控理念，是檢驗日常清潔及消毒效果的一種必要的手段，是研究醫(yī)院中各種有害因素，如物理、化學、生物因素等等對患者、醫(yī)務人員及社會人群的危害及預防措施的科學。環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測包括：空氣、物體表面、醫(yī)護人員手常規(guī)環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測中不包含病毒12冷鏈核酸檢測常規(guī)環(huán)境衛(wèi)生學檢測種類及文件要求（醫(yī)療機構/略）

序號種類頻次標準參考標準1手衛(wèi)生手每季度菌落總數≤10cfu/cm2《醫(yī)務人員手衛(wèi)生規(guī)范》WS/T313—20092外科手菌落總數≤5cfu/cm23Ⅰ類環(huán)境手術室空氣Ⅰ級100級手術區(qū)每個房間每季度一次菌落總數≤0.2cfu/皿（30min）《醫(yī)院潔凈手術部建筑技術規(guī)范》（GB50333-2013）、《醫(yī)院空氣凈化管理規(guī)范》（WS/T368—2012）41000級周邊區(qū)菌落總數≤0.4cfu/皿（30min）5Ⅱ級1000級手術區(qū)菌落總數≤0.75cfu/皿（30min）610000級周邊區(qū)菌落總數≤1.5cfu/皿（30min）7Ⅲ級10000級手術區(qū)菌落總數≤2cfu/皿（30min）8100000級周邊區(qū)菌落總數≤4cfu/皿（30min）9Ⅳ級300000級菌落總數≤6cfu/皿（30min）10Ⅰ類環(huán)境輔助用房空氣潔凈度100級每個房間每年做一次菌落總數≤0.2cfu/皿（30min）11潔凈度1000級菌落總數≤0.4cfu/皿（30min）12潔凈度10000級菌落總數≤1.5cfu/皿（30min）13潔凈度100000級菌落總數≤4cfu/皿（30min）14潔凈度300000級菌落總數≤6cfu/皿（30min）13冷鏈核酸檢測常規(guī)環(huán)境衛(wèi)生學檢測種類及文件要求

序號種類頻次標準參考標準15各類環(huán)境空氣Ⅱ類環(huán)境/菌落總數≤4cfu/皿（15min）《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》（GB15982-2012）16Ⅲ類環(huán)境菌落總數≤4cfu/皿（5min）17Ⅳ類環(huán)境菌落總數≤4cfu/皿（5min）18各類環(huán)境物體表面Ⅰ類環(huán)境/菌落總數≤5cfu/cm219Ⅱ類環(huán)境菌落總數≤5cfu/cm220Ⅲ類環(huán)境菌落總數≤10cfu/cm221Ⅳ類環(huán)境菌落總數≤10cfu/cm222醫(yī)療用品高度危險性/無菌23中度危險性菌落總數≤20CFU/件（g或100cm2）24低度危險性菌落總數≤200CFU/件（g或100cm2）25消毒劑滅菌劑/0《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》（GB15982-2012）、《病區(qū)醫(yī)院感染管理規(guī)范》（WS/T510-2016）26皮膚黏膜消毒液符合相應標準27其他使用中消毒液菌落總數≤100cfu/ml14冷鏈核酸檢測常規(guī)環(huán)境衛(wèi)生學檢測種類及文件要求

序號種類頻次標準參考標準28壓力蒸汽滅菌的監(jiān)測每周陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，實驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格?！夺t(yī)院消毒供應中心第三部分》（WS310.1-2016）29環(huán)氧乙烷滅菌的監(jiān)測每批次30過氧化氫低溫等離子滅菌的監(jiān)測每天31低溫蒸汽甲醛滅菌的監(jiān)測每周32消毒后內鏡每季度菌落總數≤20cfu/件《軟式內鏡清洗消毒技術規(guī)范》（WS507-2016）33純化水菌落總數≤10cfu/100ml34醫(yī)用超聲耦合劑（無菌型）/不得檢出任何微生物《醫(yī)用超聲耦合劑》（YY0299—2016）35醫(yī)用超聲耦合劑（非無菌型）/細菌數每1g（ml）不得超過100CFU；霉菌和酵母菌數每1g（ml）不得超過100CFU；金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌，每1g（ml）不得檢出。36高度危險性醫(yī)療器材/不得檢出任何微生物《消毒技術規(guī)范》（WS/T367-2012）37中度危險性醫(yī)療器材/菌落總數≤20cfu/件（或cfu/g或cfu/100cm2）38低度危險性醫(yī)療器材/菌落總數≤200cfu/件（或cfu/g或cfu/100cm2）15冷鏈核酸檢測常規(guī)環(huán)境衛(wèi)生學檢測種類及文件要求

序號種類頻次標準參考標準39洗衣房手每半年菌落總數≤10cfu/cm2《醫(yī)院醫(yī)用織物洗滌消毒技術規(guī)范》（WS/T508-2016）40物表菌落總數≤10cfu/cm241透析用水每月菌落總數＜100cfu/ml《陜西省醫(yī)療質量控制工作手冊》（2017）42透析液入口菌落總數＜100cfu/ml43透析用水內毒素每季度＜0.25EU/ml44透析液內毒素＜0.5EU/ml45污水采樣口水樣檢測每月糞大腸菌群數≤5000cfu/L《醫(yī)療機構水污染物排放標準》（GB18466-2005）46每季度沙門氏菌47每半年志賀菌16冷鏈核酸檢測環(huán)境衛(wèi)生學采樣原則及采樣方法1.采樣原則

采樣后應盡快對樣品進行相應指標的檢測，送檢時間不得超過4h；若樣品保存于0℃～4℃（冰袋）時，送檢時間不得超過24h。

若所采表面干燥，則用無菌稀釋液潤濕棉簽后擦拭；若表面有水，則用干棉簽擦拭，擦拭后立即將棉簽頭用無菌剪刀剪入盛樣容器。（一般環(huán)境和物品表面濕潤的居多，所以直接用拭子涂抹即可）2.采樣方法2.1

采樣時間潛在污染區(qū)、污染區(qū)消毒后采樣。清潔區(qū)根據現場情況確定。2.2

采樣面積被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。17冷鏈核酸檢測環(huán)境衛(wèi)生學采樣原則及采樣方法2.3

涂抹法---適用于表面平坦的設備和工器具產品接觸面。取經過滅菌的50cm2鋁片框放在需檢查的部位上，用無菌棉簽蘸上無菌生理鹽水擦拭后放入盛樣容器（略）。用5cm×5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol／L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉動棉拭子，連續(xù)采樣1～4個規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管中送檢（醫(yī)療機構/略）。（采樣面積5x5cm，橫豎往返轉動拭子涂抹各5次，折斷拭子尾端放入病毒采樣管中）門把手等小型（不規(guī)則）物體則采用棉拭子直接涂抹（全部表面積）物體采樣。3.樣本量外環(huán)境：30份（大）10份（?。?8冷鏈核酸檢測02手衛(wèi)生監(jiān)測19冷鏈核酸檢測1

采樣時間

采取手衛(wèi)生后，在接觸物品或從事工作前采樣。2

采樣方法（細菌）將浸有無菌0.03mol／L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的棉拭子一支在雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦各兩次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管內送檢。（用拭子在雙手曲面從指根到指端來回涂擦各兩次，折斷尾端，將拭子放入病毒采樣管中）3.采樣面積按平方厘米(cm2)計算。若采樣時手上有消毒劑殘留，采樣液應含相應中和劑。從業(yè)人員手衛(wèi)生檢查方法20冷鏈核酸檢測03食品衛(wèi)生學監(jiān)測21冷鏈核酸檢測

國家食品安全抽樣檢驗抽樣單

抽樣單編號：NO任務來源

任務類別□監(jiān)督抽檢□風險監(jiān)測被抽樣單位信息單位名稱

區(qū)域類型城市□鄉(xiāng)村□景點單位地址?。▍^(qū)、市）地區(qū)（市、州、盟）縣（市、區(qū)）鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）

法人代表

年銷售額萬元營業(yè)執(zhí)照號

聯系人

電話

傳真

郵編

抽樣地點生產環(huán)節(jié)：□原輔料庫□生產線□半成品庫成品庫（□待檢區(qū)□已檢區(qū)）流通環(huán)節(jié)：□農貿市場□菜市場□批發(fā)市場□商場□超市□小食雜店□網購□其他（

）餐飲環(huán)節(jié)：□餐館（□特大型餐館□大型餐館□中型餐館□小型餐館）□食堂（□機關食堂□學校∕托幼食堂□企事業(yè)單位食堂□建筑工地食堂）□小吃店□快餐店□飲品店□集體用餐配送單位□中央廚房□其他（

）樣品信息樣品來源□加工∕自制□委托生產□外購□其他樣品屬性□普通食品□特殊膳食食品□節(jié)令食品□重大活動保障食品樣品類型□食用農產品□工業(yè)加工食品□餐飲加工食品□食品添加劑□食品相關產品□其他（）樣品名稱

商標

□生產∕□加工∕□購進日期年月日規(guī)格型號

樣品批號

保質期

執(zhí)行標準∕技術文件

質量等級

生產許可證編號

單價

是否出口□是□否抽樣基數∕批量

抽樣數

備樣數量

樣品形態(tài)□固體□半固體□液體□氣體包裝分類□散裝□預包裝22冷鏈核酸檢測進口食品的包裝和標簽、標識進口鮮凍肉類產品內外包裝---標明產地國家（地區(qū)）、商品名、生產企業(yè)注冊號、生產批號；外包裝上應當以中文標明規(guī)格、產地（具體到州/省/市）、目的地、生產日期、保質期限、儲存溫度等內容，目的地應當標明為中華人民共和國，加施出口國家（地區(qū)）官方檢驗檢疫標識。進口水產品內外包裝上---標明（中英文標識）商品名和學名、規(guī)格、生產日期、批號和保存條件、生產方式（海水捕撈、淡水捕撈、養(yǎng)殖）、生產地區(qū)（海洋捕撈海域、淡水捕撈國家或者地區(qū)、養(yǎng)殖產品所在國家或者地區(qū))、生產加工企業(yè)（含捕撈船、加工船）名稱及編號、須標注目的地為中華人民共和國。24冷鏈核酸檢測抽樣前準備1.物資準備：抽樣記錄單、采樣工具、防護裝備等。2.防護要求---

二級防護3.《食品安全抽樣檢驗管理辦法》第十四條抽樣人員執(zhí)行現場抽樣任務時不得少于2人（+市場監(jiān)督局工作人員，會有相關行政執(zhí)法記錄）4.通訊聯系---聯系采樣單位相關負責人，詢問采樣地址，采樣品種及量（數量或重量）注：流通環(huán)節(jié)，同一貨架或攤位抽取同一產地、同一生產商、同一種類、統(tǒng)一生產日期（進貨日期）、同一碼放堆、同一等級的樣品、視為同一批次樣品25冷鏈核酸檢測現場采樣1、直接食用的小包裝食品2、液體樣品（如：污水）2.1原則用100mL無菌注射器抽取、混勻。流動水采樣，直接用拭子浸入污水采集瞬時水樣；靜態(tài)水采樣，直接蘸取；2.2車間用水自來水樣從車間各水龍頭上采取；冷卻水湯料等從車間容器不同部位用100mL無菌注射器抽取?！就涝讖U水】指屠宰過程中產生的廢水、主要含有血污、油脂、碎肉、畜毛、未消化的食物及糞便、尿液等【肉類加工廢水】指肉類加工過程中產生的廢水，主要含有碎肉、脂肪、血液、蛋白質、油脂等2.3污水處理處理流程：廢水-格柵-沉砂池-隔油池-集水池-調節(jié)池（初沉池/氣浮）-厭氧處理-好氧處理-消毒（或-深度處理-出水再用?。?標準排放口-達標排放26冷鏈核酸檢測現場采樣3、固體樣品3.1、每份樣品應采幾個不同部位采取；3.2、大塊整體食品、小塊大包裝食品；3.3、若為檢驗食品的污染情況，可取表層樣品；若為檢驗食品品質的情況，應從深部采樣。4、冷凍樣品4.1、對大塊冷凍食品，應從幾個不同部位采樣，使之有充分的代表性。4.2、大包裝小塊冷凍食品按小塊個體采?。?.采樣數量科學的隨機抽樣，以不影響結果為最基本要求。采集的樣品具有代表性；采集能充分說明達到監(jiān)測目的典型樣本；樣品采集數量應滿足檢驗要求，同時不應造成浪費；樣品應盡可能保持食品原有的品質及包裝型態(tài)；采樣必須符合無菌操作的要求，防止交叉污染；注意樣品的冷藏運輸與保存（低溫、避光、及時送檢）27冷鏈核酸檢測現場采樣-抽樣量《計數抽樣檢驗程序》第1部分：按接收質量限（AQL）檢索的逐批檢驗抽樣計劃GB/T2828.1-2003/ISO2859-1:199928冷鏈核酸檢測國際微生物規(guī)格委員會（ICMSF）推崇的采樣方案國際微生物規(guī)格委員會（ICMSF）推崇的采樣基本原則為：一是根據各種微生物對人體的危害程度來確定采樣方案。二是食品經不同條件處理后，其危害度變化情況來確定采樣方案。二級和三級采樣方案是根據統(tǒng)計學的原理，對所采樣的同一批次食品，確定至少五個樣品，來進行檢驗。這樣才能對該批次食品有代表性，也就是說，結果能客觀地、接近真實地反應出該批次食品的衛(wèi)生（安全）質量。1.二級抽樣方案：二級采樣方案設有n、с及m三個值。從統(tǒng)計學角度看，食品中微生物的分布曲線一般呈現正態(tài)分布，以其一點作為食品微生物的限量值，只設合格判定標準m值，超過c個食品的m值，則為不合格食品。通過檢查檢樣中是否有c個食品檢樣超過m值的，來判定該批食品是否合格。以即食蛋制品為例n=5，c=0，m=0。即:在n=5的抽樣送檢樣品中是5個，c=0即表示在該批檢樣中，不可以檢到有超過m值的檢樣，此批食品即為合格食品。2．三級抽樣方案：三級采樣方案有n、c、m及M四個值。它有m及M值兩個限量值。它與二級采樣方案不同，超過m值的檢樣，不能算為不合格食品。只有當從m值到M值的范圍內的檢樣食品數，在c個范圍內，也能成為合格的條件。如果僅有一個單位的食品中有超過M值者，即為不合格食品。如：調味醬油中的副溶血弧菌，其n=5，c=1，m=100，M=1000，如果有一瓶醬油的M高于1000，該食品即為不合格。29冷鏈核酸檢測現場采樣-抽樣量（一）目前各類食品標準中，對于包裝食品，確定樣本數的方法大致有以下幾種：①根據批量的大小，按抽樣數②根據批量按百分比確定，如按批量的5%取樣；③固定樣本大小，如隨機抽取某批飲料n瓶作為樣品；④根據具體的批量，給出具體的樣本數，（如疾控規(guī)定-計劃采樣）樣本批量范圍（箱）樣本數（箱）單位樣品件數50以下3351～1200521201～35000111≥3500113130冷鏈核酸檢測固態(tài)食品：（1）大包裝食品：根據不同堆放部位，在每一包裝的上、中、下三層，四角和中心五點取樣(三層五點取樣法)。（2）小包裝食品