黃連素的提取制藥

生物制藥工藝課程黃連素的提取制藥

黃連素又稱小檗堿，廣泛分布在植物界。它是臨床上一種常用的廣譜抗菌藥，主要用于菌痢、胃腸炎、癰腫等細(xì)菌性感染。黃連素是黃色針狀晶體，表現(xiàn)為季銨型、醇型，其中以季銨堿型最穩(wěn)定。小檗堿能緩慢溶解于冷水（1∶20）或冷乙醇（1∶100），在熱水或熱乙醇中溶解度比較大，難溶于丙醇、氯仿或苯。

主要的提取方法有：

1、酸水法

2、乙醇法3、石灰乳法4、超聲波法

5、酶法

6、超臨界萃取法一、酸水法提取小檗堿

1、首先選擇含有小檗堿的植物組織，例如：三棵針，黃連和黃柏的干燥樹皮，進(jìn)行粉碎。

2、固液比1:100，加入0.3％硫酸水溶液浸提24小時，然后過濾，棄去濾渣，得到濾液。

3、將上述濾液有石灰乳調(diào)節(jié)PH=7.0，放置10分鐘，然后抽濾，得到濾液。4、再將上述濾液用鹽酸調(diào)節(jié)PH=2～3，然后加入濾液體積4～5％的精制食鹽，放置半小時左右使試驗(yàn)完全溶解，抽濾得到沉淀。

5、將上述沉淀加入到適當(dāng)水溶液中加熱溶解，當(dāng)溶液澄明時，趁熱抽濾，得到的沉淀即為粗品小檗堿。簡要工藝流程圖：二、乙醇法加熱回流提取小檗堿

1、稱取一定量的含有小檗堿的植物組織粉末，放入250ml圓底燒瓶中用100ml乙醇作提取溶媒，熱水浴加熱回流30min。

2、上述溶液放置浸泡1h，抽濾，濾渣重復(fù)上述處理兩次，合并3次，得到濾液。減壓蒸出乙醇直到為棕紅色糖漿狀

為止。3、在棕紅色糖漿狀物中加入1%醋酸（約30～40ml）加熱使溶解，抽濾以除去不溶物。

4、然后于溶液中滴加濃鹽酸至溶液渾濁為止，放置用冰水冷卻，即有鹽酸小檗堿析出。

5、抽濾，結(jié)晶用水洗滌兩次，再用丙酮洗滌一次，干燥、烘干，即得到初品小檗堿。簡要工藝流程圖一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)從植物中提取生物堿的原理和方法；2、熟悉固液提取的裝置及方法。二、實(shí)驗(yàn)原理黃連為我國特產(chǎn)藥材之一，又有很強(qiáng)的抗菌力，對急性結(jié)膜炎、口瘡、急性細(xì)菌性痢疾、急性腸胃炎等均有很好的療效。黃連中含有多種生物堿，以黃連素（俗稱小蘗堿Berberine）為主要有效成分，隨野生和栽培及產(chǎn)地的不同，黃連中黃連素的含量約4～10%。含黃連素的植物很多，如黃柏、三顆針、伏?；?、白屈菜、南天竹等均可作為提取黃連素的原料，但以黃連和黃柏中的含量為高。黃連素是黃色針狀體，微溶于水和乙醇，較易溶于熱水和熱乙醇中，幾乎不溶于乙醚，黃連素存在三種互變異構(gòu)體，但自然界多以季銨堿的形式存在。黃連素的鹽酸鹽，氫碘酸鹽，硫酸鹽、硝酸鹽均難溶于冷水，易溶于熱水，其各種鹽的純化都比較容易。三、主要儀器與試劑儀器：10mL燒瓶、冷凝管、蒸餾頭、1mL吸量管、布氏漏斗、抽濾瓶。

試劑：黃連、95%乙醇、濃鹽酸、1%乙酸。四、實(shí)驗(yàn)流程五、操作步驟

1、稱取2g磨細(xì)的中藥黃連，放入25mL圓底燒瓶中，加入10mL乙醇，裝上回流冷凝管，在熱水浴中加熱回流半h，冷卻并靜置浸泡半h，抽濾，濾渣重復(fù)上述操作處理一次，合并兩次所得濾液。2、在水泵減壓下蒸出乙醇，再加入1%醋酸溶液（6－8mL），加熱溶解，趁熱抽濾以除去不溶物，然后在濾液中滴加濃鹽酸至溶液混濁為止（約需2mL)，放置冷卻即有黃色針狀晶體析出.3、抽濾結(jié)晶，并用冰水洗滌兩次，再用丙酮洗滌一次，烘干后稱重約0.2g

。本實(shí)驗(yàn)約需3.5h。六、實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵及注意事項(xiàng)（1）后一次提取可適當(dāng)減少乙醇用量和縮短浸泡時間。也可用Soxhlet提取器連續(xù)提取。（2）最好用冰水浴冷卻。（3）如晶形不好，可用水重結(jié)晶一次。（4）得到純凈的黃連素晶體比較困難。將黃連素鹽酸鹽加熱水至剛好溶解，煮沸，用石灰乳調(diào)節(jié)pH=8.5－9.8，冷卻后濾去雜質(zhì)，濾液繼續(xù)冷卻到室溫以下，即有針狀體的黃連素析出，抽濾，將結(jié)晶在50－60℃下干燥，熔點(diǎn)145℃