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第五章植物檢驗檢疫技術詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)三十頁\編于十七點優(yōu)選第五章植物檢驗檢疫技術目前二頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術一、現(xiàn)場檢驗檢疫技術2、過篩檢驗:取樣攜回室內(nèi)進行過篩檢驗,按糧谷、油料、豆類顆粒形狀和大小,選用不同孔徑的規(guī)格篩目前三頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術一、現(xiàn)場檢驗檢疫技術2、過篩檢驗:將需用的篩層,按篩孔大小順序套好(小篩孔放在下面),將樣品放人上層選篩內(nèi)(不宜過多,約達篩層高度的2/3),套上篩蓋,電動或手動回旋轉(zhuǎn)動一定時間后,按篩層將篩上物和篩下物分別倒入白瓷盤中,用擴大鏡或解剖鏡檢查,檢出昆蟲和螨類,同時還可檢出蟲粒、病粒、雜草籽和其它夾雜物。若檢查時室溫低于10℃,最下層篩出物須在20—30℃下處理15—20min,促使害蟲活動,再行檢查。目前四頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術一、現(xiàn)場檢驗檢疫技術3、軟X光透視檢測4、檢疫犬檢查目前五頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術1、相對密度檢驗一定濃度的食鹽水或其它溶液目前六頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術2、染色檢驗法檢查糧粒中的谷象、米象等可將樣品放在鐵絲網(wǎng)中,在30℃的水中浸lmin,再移入1%高錳酸鉀溶液中l(wèi)min,然后用清水沖洗或用過氧化氫硫酸液洗滌20—30s,用擴大鏡檢查,挑出有直徑約0.5mm黑斑點的籽粒,再行剖檢。豆類可用1%碘化鉀或2%碘酒染色1—1.5min,再移入0.5%氫氧化鈉或氫氧化鉀液中20—30s,取出用水沖洗30s,如粒面有1—2mm直徑的黑圓點,則內(nèi)部可能隱藏豆象。目前七頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術2、染色檢驗法對植物病原細菌檢驗可以用革蘭氏染色法和鞭毛染色法,對于植物病原線蟲則用透明染色法目前八頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術3、直接鏡檢目前九頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術4、洗滌檢驗法用于檢測種子表面附著的真菌孢子,包括黑粉菌的厚垣孢子、霜霉菌的卵孢子、銹菌的夏孢子以及多種半知菌的分生孢子等。目前十頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術4、洗滌檢驗法洗滌檢驗的操作程序如下:(1)洗脫孢子:將一定數(shù)量的種子樣品放人容器內(nèi)并加入定量蒸餾水或其它洗滌液,振蕩5一lOmin,使孢子脫離種子,轉(zhuǎn)移到洗滌液中。(2)離心富集:將孢子洗滌液移人離心管,低速離心(2500—3000r/min)10—15min,使孢子沉集在離心管底部。目前十一頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術4、洗滌檢驗法洗滌檢驗的操作程序如下:(3)鏡檢計數(shù):棄去離心管內(nèi)的上清液,加入一定量蒸餾水或其它浮載液,重新懸浮沉集在離心管底部孢子,取懸浮液,滴加在血球計數(shù)板上,用高倍顯微鏡檢查孢子種類并計數(shù),據(jù)此可計算出種子的帶菌量。(4)孢子生活力測定:用常規(guī)孢子萌發(fā)測定法、分離培養(yǎng)法或紅四氯唑(TTC)染色法判定孢子死活。目前十二頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術5、分離培養(yǎng)檢驗主要適用于潛伏于種子、苗木、繁殖材料及植物產(chǎn)品內(nèi)的病原菌分離真菌一般用PDA培養(yǎng)基,分離培養(yǎng)細菌用牛肉汁培養(yǎng)基,對于特殊要求的菌類可以用選擇性培養(yǎng)基目前十三頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術5、分離培養(yǎng)檢驗方法有:組織分離法稀釋分離法劃線分離法目前十四頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術6、血清學檢驗方法有:免疫電鏡技術酶聯(lián)免疫吸附技術斑點免疫法免疫熒光抗體法目前十五頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術7、生理生化測定目前十六頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術8、噬菌體檢驗法噬菌體是感染細菌的病毒,能在活細菌細胞中寄生繁殖,破壞和裂解寄主細胞,在液體培養(yǎng)時,使混濁的細菌懸浮液變得澄清,在固體平板上培養(yǎng)時,則出現(xiàn)許多邊緣整齊,透明光亮的圓形無菌空斑,稱為“噬菌斑”,肉眼即可分辯。目前十七頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術8、噬菌體檢驗法國內(nèi)已采用噬菌體法檢查水稻稻種是否帶有白葉枯病菌。病田稻種的稻殼中通常都帶有?;缘氖删w或存活細菌,可據(jù)以確定稻種確系帶菌。目前十八頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術8、噬菌體檢驗法取10g稻種,脫下谷殼剪碎或磨碎,放入已滅菌處理的燒杯中,加滅菌水20ml浸泡30min,過濾后分別吸取濾液1.5、1.0和0.5ml,置于三個滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)目前十九頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術8、噬菌體檢驗法各加lml新培養(yǎng)的白葉枯細菌指示菌液(濃度為9X108/ml以上)混勻后加入10ml融化的肉汁胨瓊脂培養(yǎng)基,搖勻凝成平板后,放在25—28℃溫箱中,培養(yǎng)10—12h目前二十頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術9、保濕萌芽檢驗保濕培養(yǎng)檢驗吸水紙檢驗法通常用底部鋪有三層吸水紙的塑料培養(yǎng)皿或其它適用容器作培養(yǎng)床。先用蒸餾水濕潤吸水紙,將種子按適當距離排列在吸水紙上,再在一定條件下培養(yǎng),對多數(shù)病原真菌,適宜的培養(yǎng)溫度為20—25℃,每天用近紫外光(NUV)燈或日光燈照明12h。目前二十一頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術9、保濕萌芽檢驗保濕培養(yǎng)檢驗吸水紙檢驗法培養(yǎng)7一l0d后檢查和記載種子帶菌情況,檢查時,用兩側照明的實體顯微鏡逐粒種子檢查。本法依據(jù)種子上真菌菌落的整個形象,即“吸水紙鑒別特征”來區(qū)分真菌種類。檢查時應特別注意觀察種子上菌絲體的顏色、疏密程度和生長特點、真菌繁殖結構的類型和特征目前二十二頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術9、保濕萌芽檢驗保濕培養(yǎng)檢驗冰凍吸水紙法是前一個的改進版,可以減少雜菌污染、抑制種子發(fā)芽目前二十三頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術9、保濕萌芽檢驗保濕培養(yǎng)檢驗瓊脂平皿法用瓊脂培養(yǎng)基代替了吸水紙目前二十四頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術9、保濕萌芽檢驗萌芽法檢驗沙土萌發(fā)檢驗土內(nèi)萌發(fā)檢驗試管幼苗癥狀測定目前二十五頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術10、誘捕器誘集檢驗信息素誘餌目前二十六頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術11、鑒別寄主檢測應用于植物病毒的鑒定、診斷及檢疫中目前二十七頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術12、植物病原線蟲的各種分離方法漏斗分離法:此法適于分離少量植物材料中有活動能力的線蟲?;狙b置是一個直徑適當?shù)穆┒罚┒奉i末端接一段乳膠管,用彈簧夾把管子夾住。漏斗放置在支架上,其內(nèi)盛滿清水。把檢驗的植物材料洗掉泥土后,切成0.5cm長的小段,放在紗布中包起來,輕輕地浸入漏斗內(nèi)。線蟲從植物組織中逸出,經(jīng)紗布沉落到漏斗頸底,經(jīng)12h或過一夜后,打開彈簧夾使膠管前端的水流到玻皿內(nèi),鏡檢線蟲目前二十八頁\總數(shù)三十頁\編于十七點第五章植物檢驗檢疫技術第一節(jié)常規(guī)檢驗檢疫技術二、實驗室檢驗檢疫技術12、植物病原線

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