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文檔簡(jiǎn)介
作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫(kù)食品安全快速檢測(cè)
新疆農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院韓陽(yáng)花
民以食為天,食以安為先。食品安全關(guān)系著民生、關(guān)系到社會(huì)的穩(wěn)定與經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,是任何時(shí)候都不能忽視的大事。食品安全問(wèn)題是一個(gè)全球性問(wèn)題。當(dāng)一個(gè)國(guó)家經(jīng)濟(jì)處于快速發(fā)展階段時(shí),食品安全問(wèn)題就彰顯得尤為突出。以往食品污染,添加劑濫用,不法分子唯利是圖的摻雜造假以及極端分子的投毒作案等,致使局部地區(qū)或全國(guó)范圍內(nèi)食品安全事件時(shí)有發(fā)生。前言負(fù)責(zé)檢驗(yàn)食品安全的檢驗(yàn)室建制數(shù)量有限,尤其是欠發(fā)達(dá)地區(qū)和廣大農(nóng)村地區(qū);檢驗(yàn)室的檢驗(yàn)成本較高,影響了應(yīng)該送檢的樣品未能及時(shí)送檢;檢驗(yàn)室的檢驗(yàn)周期較長(zhǎng),有些樣品如蔬菜、豆?jié){、鮮類食品等,沒等檢測(cè)報(bào)告出來(lái)食品就已經(jīng)銷售完畢了。食品安全事件屢屢發(fā)生的原因解決的辦法之一就是開展快速檢測(cè)。PART1概述快速檢測(cè)的定義概述
快速檢測(cè)沒有經(jīng)典的定義,而是一種約定俗成的概念,即在短時(shí)間內(nèi),如幾分鐘、十幾分鐘,采用不同方式方法檢測(cè)出被檢物質(zhì)是否處于正常狀態(tài)?被檢物質(zhì)是否是有毒有害物質(zhì)?或檢測(cè)的物質(zhì)是否超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值的一種檢測(cè)、篩查行為稱之為快速檢測(cè)。負(fù)責(zé)檢驗(yàn)食品安全的檢驗(yàn)室建制數(shù)量有限,尤其是欠發(fā)達(dá)地區(qū)和廣大農(nóng)村地區(qū);檢驗(yàn)室的檢驗(yàn)成本較高,影響了應(yīng)該送檢的樣品未能及時(shí)送檢;檢驗(yàn)室的檢驗(yàn)周期較長(zhǎng),有些樣品如蔬菜、豆?jié){、鮮類食品等,沒等檢測(cè)報(bào)告出來(lái)食品就已經(jīng)銷售完畢了。食品安全事件屢屢發(fā)生的原因解決的辦法之一就是開展快速檢測(cè)。快速檢測(cè)是食品安全監(jiān)管人員的有利工具
在日常衛(wèi)生監(jiān)督過(guò)程中,除感官檢測(cè)外,采用現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法,及時(shí)發(fā)現(xiàn)可疑問(wèn)題,迅速采取相應(yīng)措施,這對(duì)提高監(jiān)督工作效率和力度,保障食品安全有著重要的意義。快速檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)的有益補(bǔ)充
為了保障食品安全,需要檢測(cè)的產(chǎn)品、半成品以及生產(chǎn)環(huán)節(jié)有很多,一一采集樣品送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)不現(xiàn)實(shí),采用快速檢測(cè)的方法,可增加樣品檢測(cè)數(shù)量,擴(kuò)大食品安全控制范圍,對(duì)有問(wèn)題的食品,必要時(shí)送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步檢測(cè),既能提高監(jiān)督效率,又能提出有針對(duì)性的檢測(cè)項(xiàng)目,達(dá)到現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的有益互補(bǔ)??焖贆z測(cè)的意義快速檢測(cè)是大型活動(dòng)衛(wèi)生保障與應(yīng)急事件處理的有效措施
在大型活動(dòng)衛(wèi)生保障中,為了防止發(fā)生群發(fā)性食物中毒;在應(yīng)急事件處理中,快速篩查食物中毒可疑因子,快速檢測(cè)有其特殊作用可以利用。快速檢測(cè)是我國(guó)國(guó)情所決定的一項(xiàng)重要工作
我國(guó)近30年來(lái)經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展,社會(huì)處于轉(zhuǎn)型時(shí)期,而且還會(huì)持續(xù)相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)期。在這種迅猛的商品經(jīng)濟(jì)運(yùn)行中,食品安全也出現(xiàn)了一些問(wèn)題,如農(nóng)藥、鼠藥、甲醇、亞硝酸鹽等群發(fā)性食物中毒,甲醛、吊白塊、注水肉、瘦肉精等事件的發(fā)生等。我國(guó)在提高食品安全整體水平方面仍有很長(zhǎng)的路要走,我國(guó)對(duì)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)有著特殊的需求。快速檢測(cè)的意義理化快速檢驗(yàn)方法微生物快速檢驗(yàn)方法
包括樣品制備在內(nèi),能夠在兩小時(shí)以內(nèi)出具檢測(cè)結(jié)果,即可視為實(shí)驗(yàn)室快速檢測(cè)方法。如果方法能夠應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng),在30分鐘內(nèi)出具檢測(cè)結(jié)果,即可視為現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法。如果能夠在10幾分鐘甚至幾分鐘內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果,可視其為比較理想的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法。與傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法相比,能夠大幅度縮短檢測(cè)時(shí)間,其檢測(cè)結(jié)果基本相同或相近的方法,可視為快速檢測(cè)方法??焖贆z測(cè)的時(shí)間概念用試紙顯色來(lái)定性或作為限量指示:如農(nóng)藥、敵鼠鈉鹽等。用試紙層析顯色來(lái)定性并來(lái)作為限量指示:如蘇丹紅、瘦肉精等?,F(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法(試紙法)用試紙顯色的深淺來(lái)半定量:如食用油酸價(jià)、過(guò)氧化值等用試管顯色來(lái)定性并來(lái)作為限量指示:如毒鼠強(qiáng)、生豆?jié){等。用試管顯色的深淺來(lái)半定量:如亞硝酸鹽、甲醇、二氧化硫等,比色定量可以是目視,也可以用便攜式光度計(jì)?,F(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法(試管法)滴瓶法:將標(biāo)準(zhǔn)溶液放在滴瓶中,根據(jù)消耗的滴數(shù)量來(lái)判定被檢物質(zhì)的含量。如酸堿、氧化還原性物資等。便攜式儀器法:如便攜式甲醇速測(cè)儀、酸度計(jì)、電導(dǎo)儀、溫濕度計(jì)、中心溫度計(jì)、食用油極性測(cè)定儀、輻照度計(jì)、ATP熒光度儀等。現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法定性檢測(cè)與表述
即快速地得出被檢樣品中是否含有有毒有害物質(zhì),或其本身就是有毒有害物質(zhì)。通常以陰性或陽(yáng)性來(lái)表述。陰性表示用本方法未檢出要檢測(cè)的物質(zhì)。陽(yáng)性表示檢出了有毒有害物質(zhì)。限量檢測(cè)與表述
即快速地得出被檢樣品中有毒有害物質(zhì)是否超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值或有效物質(zhì)是否達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值。通常以合格或不合格來(lái)表述?,F(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)結(jié)果的表述半定量檢測(cè)與表述
能夠快速地得出所測(cè)物質(zhì)成分的大概含量,通常以合格或不合格來(lái)表述,也可標(biāo)出具體數(shù)值。定量檢測(cè)
如溫度、濕度、消毒間紫外線輔照強(qiáng)度、純凈水電導(dǎo)率等物理指標(biāo)的檢測(cè)。通常以具體數(shù)值表述?,F(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)結(jié)果的表述對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果以及不合格結(jié)果的樣品
應(yīng)重復(fù)測(cè)試,排除偶然誤差。重要樣品,如含急性中毒物質(zhì)或可能會(huì)對(duì)后期處理帶來(lái)較大社會(huì)影響或較大經(jīng)濟(jì)損失的樣品,應(yīng)注意留樣,并將樣品送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步確證。對(duì)于陰性與陽(yáng)性、合格與不合格之間不易判定的樣品
應(yīng)重復(fù)測(cè)試,以多次重復(fù)相同的結(jié)果報(bào)告之。現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的注意事項(xiàng)快速檢測(cè)報(bào)告形式
可參見單樣品或多樣品檢測(cè)結(jié)果打印模板。國(guó)外食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)狀況
就食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)而言,各國(guó)依其國(guó)情的不同其狀況不盡相同。有些是各國(guó)共同關(guān)注的,如農(nóng)藥殘留、金屬污染物、亞硝酸鹽等。有些是依其國(guó)內(nèi)易發(fā)生的食品安全問(wèn)題而開展的研究項(xiàng)目,如牛肉中瘋牛病因子的快速檢測(cè),是一些發(fā)達(dá)國(guó)家是研發(fā)的重點(diǎn),而毒鼠強(qiáng)等的快速檢測(cè)是我國(guó)研發(fā)的重點(diǎn)。又如三聚氰胺事件,在我國(guó)表現(xiàn)的尤為突出,迫使我國(guó)在極短的時(shí)間內(nèi)研發(fā)制定出快速檢測(cè)方法。各個(gè)國(guó)家中不法分子在食品中摻雜使假的情況也不盡相同,可以借鑒加以取舍。有些國(guó)家的科學(xué)技術(shù)較為先進(jìn),能夠采用特異試材研制出專用試劑,或能夠?qū)?shí)驗(yàn)室使用的大型儀器小型化,將其安放在專用車中進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。社會(huì)在進(jìn)步,技術(shù)在發(fā)展,國(guó)際間的交流在加快加大,各種食品安全快速檢測(cè)方法被不斷研發(fā)出來(lái),取長(zhǎng)補(bǔ)短、價(jià)廉物好將會(huì)是一種趨勢(shì)。
我國(guó)裝備了一些快速檢測(cè)車輛,起到了一定的作用,由于起步較晚,儀器設(shè)備應(yīng)該如何裝備以及如何發(fā)揮作用都還有一個(gè)過(guò)程。
目前,我國(guó)在開發(fā)快速檢測(cè)方法與設(shè)備,其中有不少好的方法與產(chǎn)品,但也不排除有些方法有待完善,產(chǎn)品的質(zhì)量還有待進(jìn)一步提高。國(guó)內(nèi)食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)狀況
經(jīng)過(guò)多年努力,我國(guó)已能開展四大類80多項(xiàng)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)項(xiàng)目,并能夠提供這些項(xiàng)目的試劑與設(shè)備,為我國(guó)開展此領(lǐng)域的工作奠定了一定的基礎(chǔ)。常見食物中毒類
如農(nóng)藥、鼠藥、金屬毒物、有毒油脂、亞硝酸鹽、甲醇、生豆?jié){、有毒豆角等的快速檢測(cè)方法。非法食品添加物與劣質(zhì)食品類
如摻雜造假、食品物理或化學(xué)性質(zhì)的改變等。現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)項(xiàng)目的分類食品生產(chǎn)、加工和儲(chǔ)運(yùn)控制環(huán)節(jié)類
如溫度、潔凈度、消毒效果等。生物性污染類
如細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群。注意:在生物性污染項(xiàng)目中,致病菌是常見食物中毒因子。食物在加工、貯存或運(yùn)輸過(guò)程中被污染。食物在貯藏過(guò)程中腐敗變質(zhì)、分解產(chǎn)生有毒物質(zhì)。食物中殘留有毒物質(zhì)或食物本身含有有毒物質(zhì)。自殺或投毒等。誤食、誤用有毒物質(zhì)。人為摻入了不該摻入的物質(zhì)或過(guò)量摻入了對(duì)人體有危害的物質(zhì)。引發(fā)食品安全問(wèn)題的主要原因PART1有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的快速檢測(cè)
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,會(huì)在很長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)使用化學(xué)性農(nóng)藥,如果不按規(guī)定的用藥量、次數(shù)、方法或安全間隔期施藥,或施用了不該使用的農(nóng)藥,就會(huì)引起農(nóng)藥超標(biāo)或農(nóng)藥中毒。
食物中毒發(fā)生后,快速篩查出是否是由有機(jī)磷或氨基甲酸酯類的農(nóng)藥或鼠藥所致,對(duì)于及時(shí)搶救傷者具有重要意義。
農(nóng)藥的檢測(cè)重點(diǎn)是有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥。檢測(cè)意義酶抑制率法速測(cè)卡法檢測(cè)方法定量分析定性分析氣相色譜法有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的測(cè)定方法測(cè)定原理速測(cè)卡法
膽堿脂酶可催化靛酚乙酸脂(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色),有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對(duì)膽堿脂酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變,由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥的存在。蔬菜表面測(cè)定法(粗篩法)
擦去蔬菜表面泥土,滴2~3滴浸提液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。取一片速測(cè)卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng),將速測(cè)卡對(duì)折后,用手捏3min時(shí),打開與空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)卡比較判定。速測(cè)卡法的分類蔬菜整體測(cè)定法
選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10mL浸提液,震搖50次,靜置2min以上。取2~3滴浸提液滴在速測(cè)卡上,以下操作與表面測(cè)定法相同。
目前國(guó)內(nèi)外所使用的農(nóng)藥殘留測(cè)定方法(紙片法和分光光度法)的檢驗(yàn)原理基本相同,測(cè)定中的干擾物質(zhì)也基本相同。蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí)(包括含葉綠素較高的蔬菜),不要剪的太碎。測(cè)定番茄時(shí),可將提取液放在茄蒂處浸泡2min,取浸泡液測(cè)定。測(cè)定韭菜或大蒜時(shí),可整根或整粒放入容器中,加入提取液后振搖提取測(cè)定。檢測(cè)樣品的速測(cè)卡預(yù)反應(yīng)放置的時(shí)間應(yīng)與空白對(duì)照卡放置的時(shí)間盡量一致。紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時(shí)間控制在3min,打開觀察結(jié)果的時(shí)間應(yīng)以1min內(nèi)為準(zhǔn)。農(nóng)藥的檢測(cè)重點(diǎn)是有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥。速測(cè)卡法的注意事項(xiàng)測(cè)定原理酶抑制率法
根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制乙酰膽堿酯酶的活性原理,向蔬菜的提取液中加入生化反應(yīng)底物碘化乙酰硫代膽堿和乙酰膽堿酯酶,如果蔬菜不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留或殘留量低,酶的活性就不被抑制,實(shí)驗(yàn)中加入的底物就能被酶水解,水解產(chǎn)物與加入的顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)。如果蔬菜的提取液含有農(nóng)藥并殘留量較高時(shí),酶的活性被抑制,底物就不被水解,當(dāng)加入顯色劑時(shí)就不顯色或顏色變化很小。用分光光度計(jì)在412nm處或農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀測(cè)定吸光值,根據(jù)計(jì)算出的抑制率,就可以判斷蔬菜中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的情況。樣品處理
選取有代表性的蔬菜樣品,去掉不可食部分后稱取蔬菜試樣,沖洗掉表面泥土,剪成1cm左右碎片。取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5mL緩沖液,振蕩1~2min,倒出提取液,靜置3~5min,待用。對(duì)照溶液測(cè)試
先于試管中加入2.5mL緩沖液,再加入0.1mL酶液、0.1mL顯色劑。搖勻后于37℃放置15min以上(每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致)。加入0.1mL低物搖勻,此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即放入比色皿中,記錄反應(yīng)3min的吸光度的變化值ΔA0。
酶抑制率法的操作步驟酶抑制率法的操作步驟樣品溶液測(cè)定
先于試管中加入2.5mL樣品提取液,其他操作與對(duì)照測(cè)定相同,記錄反應(yīng)3min的吸光度的變化值ΔAt。結(jié)果計(jì)算
式中ΔA0——對(duì)照液反應(yīng)3min吸光度的變化值;ΔAt——樣品溶液反應(yīng)3min吸光度的變化值。抑制率(%)=
對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性的樣品,需用其他方法進(jìn)一步確定殘留農(nóng)藥的種類和進(jìn)行定量測(cè)定。
蔥、蒜、蘿卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中,含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性,處理樣品時(shí),可采取整株(體)蔬菜浸提或采用表面測(cè)定法。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采
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