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文檔簡介
關于種子生活力測定第1頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月一、實驗目的
通過實驗,掌握主要作物種子生活力測定方法、基本操作和結果計算。氯化三苯基四氮唑(TTC)法紅墨水(酸性大紅G)染色法第2頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月二、實驗原理1、氯化三苯基四氮唑(TTC)法
凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過程中都有氧化還原反應,而無生活力的種胚則無此反應。當TTC溶液滲入種胚的活細胞內,并作為氫受體被脫氫輔酶(NADH2或NADPH2)還原時,可產生紅色的三苯基甲腙(TTF),胚便染成紅色。當種胚生活力下降時,呼吸作用明顯減弱,脫氫酶的活性亦大大下降,胚的顏色變化不明顯,故可由染色的程度推知種子的生活力強弱。第3頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月2、紅墨水(酸性大紅G)染色法
有生活力的種子其胚細胞的原生質具有半透性,有選擇吸收外界物質能力,某些染料如紅墨水中的酸性大紅G不能進入細胞內,胚部不染色。而喪失活力的種子其胚部細胞原生質膜喪失了選擇吸收的能力,染料進入細胞內使胚部染色,所以可根據(jù)種子胚部是否染色來判斷種子的生活力。第4頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月第5頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月三、試材與設備【實驗材料】玉米種子【儀器與用具】培養(yǎng)皿、鑷子、單面刀片、墊板(切種子用)、燒杯、棕色試劑瓶、搪瓷盤、pH試紙?!驹噭縏TC溶液的配制:取1gTTC溶于1L蒸餾水或冷開水中,配制成0.1%的TTC溶液。藥液pH應在6.5~7.5,以pH試紙試之(如不易溶解,可先加少量酒精,使其溶解后再加水)。紅墨水溶液的配制:取市售紅墨水稀釋20倍(1份紅墨水加19份自來水)作為染色劑。第6頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月四、實驗步驟
1.將玉米種子用溫水(30℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。(待充分吸脹后取出一部分種子,在沸水中煮沸3~5min,作為死種子)2.隨機取種子50粒,沿種胚中央準確切開,并取幾粒死種子作為對照。3.將每粒種子的一半用TTC法染色,溶液以浸沒種子為度。
第7頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月4.TTC染色的種子放入30~35℃的恒溫箱內保溫30min.也可在20℃左右的室溫下放置40~60min;紅墨水法室溫染色10~20min5.保溫后,傾出藥液,用自來水沖洗2~3次,立即觀察種胚著色情況,判斷種子有無生活力,把判斷結果記入表1內。第8頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月表1染色法測定種子生活力記載表種子活力(%)=有活力的種子數(shù)/種子總數(shù)×100%第9頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月【注意事項】
1.TTC溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如需貯藏則應貯于棕色瓶中,放在陰涼黑暗處,如溶液變紅則不可再用。2.染色溫度一般以25~35℃為宜。3.判斷有生活力的種子應具備:胚發(fā)育良好、完整、整個胚染成鮮紅色;子葉有小部分壞死,其部位不是胚中軸和子葉連接處;胚根尖雖有小部分壞死,但其它部位完好。4.TTC反應結束,從黑暗下取出后立即觀察,因光下久放TTC本身會變色。5.不同作物種子生活力的測定,所需試劑濃度、浸泡時間、染色時間不同?,F(xiàn)將主要作物種子生活力測定所需條件列入
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