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
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文檔簡介
關(guān)于血糖的測定及激素對血糖濃度的影響第1頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月一實驗?zāi)康恼莆誈OD-POD法測定血糖的原理及方法。觀察胰島素,腎上腺素對血糖濃度的影響。了解動物實驗的基本知識和兔耳緣靜脈取血的方法。第2頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月二原理(2)激素對血糖濃度的影響
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫,過氧化氫被過氧化物酶(POD)催化釋放初生態(tài)氧,氧又對與色原性氧受體4-氨基安替比林偶聯(lián)的酚氧化,并與4-氨基安替比林結(jié)合生成紅色醌類化合物。第3頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月二原理(2)顯色原理
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫,過氧化氫被過氧化物酶(POD)催化釋放初生態(tài)氧,氧又對與色原性氧受體4-氨基安替比林偶聯(lián)的酚氧化,并與4-氨基安替比林結(jié)合生成紅色醌類化合物。第4頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月
葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸+H2O24-氨基安替比林+酚+H2O2
POD
紅色醌類化合物+4H2O
葡萄糖越多,生成的醌類物質(zhì)就越多,顏色就越深,通過所講過的比色法,求出它的葡萄糖含量,即血糖濃度。(標(biāo)準管法)第5頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月三操作1.準備抗凝試管:首先放入試管一小勺抗凝劑(草酸鈉)。2.分組。稱重:Kg,共有四只兔子,兩只注射胰島素,兩只注射腎上腺素。兔子抓取方法:一手抓取頸部皮膚,另一只手托臀部,把它放在天平上稱重。第6頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月
操作3.注射前取血:一般多以心臟取血的方式進行。第7頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月
操作4.注射激素:抓住兔子,肚皮朝上,在腹部的皮下注射,注意要抓緊兔耳以免被咬住,方法是掂起皮膚,刺入皮下有落空感,然后緩慢注入激素。首先注射胰島素0.75mg/kg(注意記錄時間)然后注入腎上腺素0.5mg/kg,并記錄時間。5.制備無蛋白血慮液:這是注射前的血液,在胰島素等待一個小時,腎上腺素等待半個小時期間制備注射前無蛋白血慮液。方法:蛋白沉淀劑4ml+全血0.2ml混勻,室溫放置7分鐘后,在漏斗上過濾,這時標(biāo)記為注射前無蛋白血濾液。第8頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月
操作6.注射后再次取血7.再制備無蛋白血慮液:標(biāo)記為注射后8.比色:最后我們用標(biāo)準管法來測定血糖濃度,按表操作:第9頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月
混勻,置37℃水浴15分鐘調(diào)波長為505nm,以空白管調(diào)零,分別讀取A測A標(biāo),根據(jù)標(biāo)準管法求測定管血糖濃度。
加入物(ml)測定管(注射前)測定管(注射后)標(biāo)準管空白管去蛋白血濾液
0.50.5處理后的葡萄糖
0.5標(biāo)準應(yīng)用液
蛋白沉淀劑0.5酶酚混合試劑
3333第10頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月四結(jié)果與計算C測(mmol/l)=(A測/A標(biāo))×5mmol/L(5為葡萄糖標(biāo)準應(yīng)用液濃度值)通過計算比較一下家兔注射前后血糖濃度的變化情況。第11頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月五分析
(1)對家兔而言血糖正常值:2.8-5.2mmol/L,驗證是否在此
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