藥物分析課件芳香胺類藥物的分析詳解

藥物分析課件芳香胺類藥物的分析詳解演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)（優(yōu)選）藥物分析課件芳香胺類藥物的分析目前二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)第一節(jié)芳胺類藥物的分析芳胺類藥物分為兩類芳伯氨基未被取代芳伯氨基被?；?、對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物目前三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)苯佐卡因鹽酸普魯卡因目前四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因胺目前五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反應(yīng)；芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。（二）主要理化性質(zhì)水解特性：分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵或酰胺鍵易水解，除鹽酸丁卡因外水產(chǎn)物為對(duì)丁基苯甲酸外，上述均為對(duì)氨基苯甲酸。弱堿性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的側(cè)鏈，故具有弱堿性。4.其它特性：因結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基或同時(shí)具有脂烴胺側(cè)鏈，其游離堿多為堿型油狀液體或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水。目前六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)二、酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物目前七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）醋氨苯砜目前八頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)鹽酸布比卡因鹽酸利多卡因目前九頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

1.水解后顯芳伯氨基特性：分子結(jié)構(gòu)中含有芳酰氨基，酸水解后顯芳伯氨基的特性反應(yīng)。注意空間位阻的影響。

2.水解產(chǎn)物易酯化：對(duì)乙?；雍痛装北巾?，酸水解生成醋酸，在硫酸中與乙醇反應(yīng)，發(fā)出醋酸乙酯香味。

（二）主要化學(xué)性質(zhì)目前十頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)3.酚羥基特性：對(duì)乙?；佑杏坞x酚羥基；醋氨苯砜酸水解有酚羥基，可與FeCl3發(fā)生顯色反應(yīng)，可相互區(qū)別。4.弱堿性：利多卡因和布比卡因烴胺側(cè)鏈有叔胺氮，顯堿性，可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)，可相互區(qū)別。5.與金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可與Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。目前十一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)三、鑒別試驗(yàn)（一）重氮化-偶合反應(yīng)

分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應(yīng)。Ar-NH2HClNaNO2重氮鹽OH--萘酚橙黃~猩紅色目前十二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

直接反應(yīng)：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺間接反應(yīng)：對(duì)乙酰氨基酚、醋氨苯砜利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發(fā)生此反應(yīng)。目前十三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

丁卡因雖無芳伯氨基，但可與NaNO2反應(yīng)生成N－亞硝基化合物的乳白色沉淀。

目前十四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前十五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前十六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)（二）與三氯化鐵反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚+FeCl3藍(lán)紫色化合物目前十七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

1.與銅和鈷離子反應(yīng)：

利多卡因與硫酸銅生成藍(lán)紫色配位化合物；與氯化鈷生成亮綠色沉淀。（三）與金屬離子反應(yīng)目前十八頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前十九頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)2.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

基于普魯卡因胺分子中的芳酰胺結(jié)構(gòu)。目前二十頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)3.與汞離子反應(yīng)鹽酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2黃色對(duì)氨基苯甲酸酯＋H2NO3+Hg(NO3)2紅色或橙黃色目前二十一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)1.鹽酸普魯卡因的鑒別

(四)水解產(chǎn)物反應(yīng)鹽酸普魯卡因+NaOH普魯卡因油狀物對(duì)氨基苯甲酸鈉+二乙氨基乙醇（使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變蘭色）對(duì)氨基苯甲酸鈉+HCl對(duì)氨基苯甲酸（白色）目前二十二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前二十三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)2.苯佐卡因的鑒別

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2

+NaOHCHI3（碘仿臭氣，黃色沉淀）目前二十四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(五)制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1.三硝基苯酚衍生物的制備：利多卡因和布比卡因目前二十五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

2.硫氰酸鹽衍生物的制備：鹽酸丁卡因

目前二十六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(六)紫外特征吸收光譜法

1.在λmax處測(cè)定供試液的百分吸收系數(shù)。

例如：對(duì)乙?；釉?.4%NaOH中于λmax=240nm;E1%1cm=715在HCl(0.1nol/L)-甲醇于λmax=249nm;E1%1cm=8802.在規(guī)定的濃度測(cè)定λmax

例如：醋氨苯砜5μg/ml;λmax=256nm;284nm

再例如：鹽酸普魯卡因胺5μg/ml;λmax=280nm目前二十七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(七)紅外吸收光譜法目前二十八頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前二十九頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)（一）對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查

1.乙醇溶液的澄清度與顏色：因其生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，可能帶入，致使乙醇溶液產(chǎn)生混濁，中間體對(duì)氨基酚易氧化產(chǎn)生有色化物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。

四、特殊雜質(zhì)檢查檢查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液應(yīng)澄清，無色；如顯混濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更深。目前三十頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)2.有關(guān)物質(zhì)檢查：Ch.P是以對(duì)氯苯乙酰胺為對(duì)照品，采用TLC法中的雜質(zhì)對(duì)照品法。3.對(duì)氨基酚檢查：利用對(duì)氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍(lán)色配位化合物，采用比色法。目前三十一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(二)鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查為什么要檢查？怎樣檢查？采用TLC法中的雜質(zhì)對(duì)照品法進(jìn)行檢查。目前三十二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)（一）亞硝酸鈉滴定法

Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法

Ch.P中的苯佐卡因；鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺及其制劑可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。五、含量測(cè)定目前三十三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前三十四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)1.原理：Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O目前三十五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)測(cè)定主要條件：(1)加KBr增加反應(yīng)速度重氮化的反應(yīng)歷程為：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl目前三十六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前三十七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)KBr+HClHBr+KClHNO2+HClNOBr+H2OKKBr∵

KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反應(yīng)速度目前三十八頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

(2)加過量HCl加速反應(yīng)：

①重氮化速度加快；

②重氮鹽在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-Ar

Ar-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩爾比為Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。目前三十九頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(3)室溫條件下滴定:溫度高反應(yīng)速度快；每升高10℃加快2.5倍太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定目前四十頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

3.指示終點(diǎn)的方法

(1)用停滴定法

溶液檢流計(jì)

終點(diǎn)前：

無過量無電流

HNO2

終點(diǎn)時(shí)：有過量有電流（使指針偏離零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示劑法

用KI-淀粉指示劑指示終點(diǎn)的原理：

2NaO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OGVVR1R2+V目前四十一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(二）非水溶液滴定法

基于鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因側(cè)鏈?zhǔn)灏返诘味}酸丁卡因時(shí)，因其在冰醋酸中堿性弱，加醋酐可增加其堿性。因醋酐合乙酰氧離子比醋酸和質(zhì)子的酸性強(qiáng)，可增加堿性。2(CH3CO)2O(CH3CO)3O++CH3COO-相當(dāng)于［B]HCl+Hg(Ac)2[B]HAc+HgCl2[B]HAc+HClO4[B]HClO4+HAc目前四十二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

1.對(duì)乙酰基酚原料的含量測(cè)定在0.4%NaOH介質(zhì)中；257nm

D%＝［E1%1cm]樣／［E1%1cm]標(biāo)×100％；E1%1cm＝715

2.對(duì)乙?；悠艹龆葴y(cè)定（測(cè)定條件同上）1片＋稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100mlλ257nm測(cè)定A。W×1／1000×5／100×100＝C（g/100ml)

W(g)=200×C;C=A/715∴溶出度＝W／標(biāo)示量×100％＞80％為合格（三）分光光度法目前四十三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)中性條件下的重氮化反應(yīng)（四）比色法鹽酸普魯卡因+1,2-蒽醌-4-磺酸鈉pH4-9棕紅色化合物，max482nm處測(cè)定A目前四十四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)（五）鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測(cè)定λex400nm（激發(fā)波長(zhǎng)）、λem485nm（發(fā)射波長(zhǎng)）處測(cè)定熒光強(qiáng)度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。鹽酸普魯卡因胺+熒胺pH7.5熒光物目前四十五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)此法主要用于鹽酸普魯卡因注射液的測(cè)定。因該注射液中常含有降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸；可以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)同時(shí)測(cè)定兩者的含量，該法簡(jiǎn)單準(zhǔn)確。

色譜條件：色譜柱為μBondapakC18300mm×4mm

流動(dòng)相為甲醇－1％HAc(40:60);UV檢測(cè)器250nm.

（六）HPLC法返回目前四十六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析一、苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物*目前四十七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)常見的苯乙胺類藥物目前四十八頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前四十九頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前五十頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)目前五十一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

（二）主要化學(xué)性質(zhì)

1.弱堿性本類藥物結(jié)構(gòu)中有烴氨基側(cè)鏈，為仲胺氮顯弱堿性。

2.酚羥基特性本類藥物結(jié)構(gòu)中有酚羥基，可與FeCl3;發(fā)生氧化。

3.光學(xué)活性多數(shù)藥物結(jié)構(gòu)中有手性碳原子，具有旋光性。目前五十二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)二、鑒別試驗(yàn)(一)與三氯化鐵反應(yīng)Ar-OH＋FeCl3絡(luò)合顯色＋堿液紫紅色目前五十三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)。

(二）甲醛－硫酸反應(yīng)

在此試劑中形成醌式結(jié)構(gòu)而顯色。

藥物

三氯化鐵

甲醛－硫酸

腎上腺素0.1mol/LHCl顯綠色,甲氨試液顯紅－紫紅紅色重酒石酸去甲腎上腺素綠色,加NaCO3試液顯紫色－紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素紫色玫瑰紅橙紅棕紅鹽酸異丙腎上腺素深綠色,加5％NaCO3試液顯藍(lán)紫色－紅色棕色暗紫色目前五十四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(三）氧化反應(yīng)

本類藥物具有Ar-OH，易被氧化劑I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而顯色，例如：腎上腺素在中性或酸性條件下，被I2,H2O2

氧化后，生成腎上腺素紅；鹽酸異丙腎上腺素在酸性條件下，被I2氧化，生成異丙腎上腺素紅。目前五十五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜例如：

鹽酸異丙腎上腺素0.05mg/mlλmax=280nmA=0.50這一類藥物均可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別目前五十六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(五）與亞硝基鐵氰化鈉(Rimini試驗(yàn)）是鑒別脂肪伯氨基的特殊反應(yīng)；可用于重酒石酸間羥胺鑒別。D＋亞硝基鐵氰化鈉＋丙酮＋Na2CO3紅紫色目前五十七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(六)雙縮脲反應(yīng)

是鑒別芳環(huán)氨基醇的特殊反應(yīng)；可用于鹽酸麻黃堿，鹽酸偽麻黃堿鑒別：D＋CuSO4+NaOH顯藍(lán)紫色＋乙醚，醚層(紫紅色)水層(藍(lán)色)目前五十八頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

(一)酮體檢查

本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。

采用UV法檢查：

利用酮體在310nm有吸收，本類藥物無吸收。例如：腎上腺素本項(xiàng)檢查配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.05

鹽酸去氧腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.02鹽酸異丙腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.15

三、特殊雜質(zhì)檢查目前五十九頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(二)有關(guān)物質(zhì)的檢查

采用TLC法中的高低濃度對(duì)比法進(jìn)行檢查。

(三)鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查

采用PC法中的雜質(zhì)對(duì)照法進(jìn)行檢查。目前六十頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

(一)非水溶液滴定法

本類藥物的原料藥多采用此法。本法重點(diǎn)將在第八章討論。

1.重酒石酸去甲腎上腺素的測(cè)定

相當(dāng)于［B］的有機(jī)酸鹽可直接滴定。

2.鹽酸克侖特羅的測(cè)定

相當(dāng)于［B］的HX酸鹽不能直接滴定，需加Hg(Ac)2處理后滴定。

3.硫酸沙丁醇的測(cè)定

相當(dāng)于［B］的H2SO4鹽可直接滴定,也可處理后滴定。四、含量測(cè)定目前六十一頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(二)溴量法本類藥物重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液用此法。基本原理：目前六十二頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(三)比色法

利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-OH與Fe3＋絡(luò)合顯色，進(jìn)行比色測(cè)定；也可利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-NH2重氮化偶合顯色，進(jìn)行比色。目前六十三頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)例如：鹽酸克倫特羅栓的含量測(cè)定

上述偶合劑可與HNO2顯色，干擾比色測(cè)定，可先加氨基磺酸銨分解過量的HNO2。HNO2＋2H2NSO3NH42N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O目前六十四頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

(四)提取酸堿滴定法硫酸苯丙胺的含量測(cè)定：［B］H2SO4+NaOH+NaCl乙醚提?。跙］+H2SO4蒸去乙醚NaOH標(biāo)準(zhǔn)液滴定終點(diǎn)目前六十五頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(五)熒光分光光度法腎上腺素測(cè)定：λex410nm、λem520nm處測(cè)定熒光強(qiáng)度，對(duì)照法定量。腎上腺素+I2

腎上腺紅一定條件下N-甲基-3,5,6-三羥基吲哚目前六十六頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)(六)HPLC法

例一、重酒石酸去甲腎上腺素注射液的測(cè)定采用RPIP-HPLC-UV法；用外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行定量測(cè)定。

例二、血漿中兒茶酚胺類（腎上腺素類）藥物的測(cè)定采用RPIP-HPLC-EChD法；用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量測(cè)定。目前六十七頁(yè)\總數(shù)七十五頁(yè)\編于二點(diǎn)

(七)衍生化GC法（GC-FID以鹽酸美西律作內(nèi)標(biāo)物)

應(yīng)用示例：鹽酸芬氟拉明片的含量測(cè)定鹽酸芬氟拉明＋三氟乙酰肝衍生物返回目前六十八頁(yè)\總數(shù)七十