生物化學(xué)第六章

第六章酶（Enzyme）酶學(xué)起始1833年：麥芽抽提液Payen和Persoz

用酒精沉淀

物質(zhì)（對(duì)熱不穩(wěn)定）

淀粉單糖淀粉酶(淀粉糖化酶)公元前兩千多年，我國(guó)已有釀酒記載。酶的研究簡(jiǎn)史1878年，Wilhelm

Kühne首次提出Enzyme一詞。1894年，EmilFischer證明了酶的專一性，酶與底物之間作用的鎖鑰關(guān)系。1897年，Buchner兄弟用不含細(xì)胞的酵母提取液，實(shí)現(xiàn)了發(fā)酵。1913年，LeonorMichaelis和MaudMenten推導(dǎo)出酶反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程式。1926~1930年，JamesSumner和JohnH.Northrop分別將脲酶和胃蛋白酶、胰蛋白酶制成結(jié)晶，確定了酶的蛋白質(zhì)本質(zhì)。1941年，GeorgeBeadle和EdwardTatum的“一個(gè)基因一個(gè)酶”假說首次將蛋白質(zhì)與基因聯(lián)系在一起，推動(dòng)了生物化學(xué)與遺傳學(xué)的結(jié)合。1982年，Cech首次發(fā)現(xiàn)RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。1995年，JackW.Szostak研究室首先報(bào)道了具有DNA連接酶活性DNA片段，稱為脫氧核酶(deoxyribozyme)。人體和哺乳動(dòng)物體內(nèi)含有5000種酶。它們支配著生物的新陳代謝、營(yíng)養(yǎng)和能量轉(zhuǎn)換等許多催化過程。酶在生物界中無處不在，生物體由細(xì)胞構(gòu)成，每個(gè)細(xì)胞由于酶的存在才表現(xiàn)出種種生命活動(dòng)。酶是一種具有高效性與特異性的生物催化劑。酶的概念：生物體內(nèi)活細(xì)胞產(chǎn)生的，具有催化作用的蛋白質(zhì)（某些RNA也具有催化作用）。

酶是具有高效性與專一性的生物催化劑。生物大分子，多為蛋白質(zhì)，也有一些RNA有催化功能，稱為核酶。具有催化劑共性催化特異性6.1

酶的概念與特點(diǎn)1、具有一般催化劑的共性

即能夠顯著提高化學(xué)反應(yīng)速率，其自身數(shù)量和化學(xué)性質(zhì)在反應(yīng)前后保持不變，可反復(fù)利用。2、酶具有高度催化效率研究表明，酶催化反應(yīng)的速率比非催化反應(yīng)高105-1017倍。酶的特點(diǎn)：酶的催化效率可用轉(zhuǎn)換數(shù)（TN）表示，即在一定的條件下，每個(gè)酶分子單位時(shí)間內(nèi)（通常為1s）轉(zhuǎn)換底物的分子數(shù)。酶的轉(zhuǎn)換數(shù)：4000萬（H2O2），1(溶菌酶)。生物體內(nèi)的絕大多數(shù)反應(yīng)，沒有酶的情況下幾乎都不能進(jìn)行3、酶具有高度專一性每種酶只能作用于一類或一種底物，酶對(duì)其催化反應(yīng)的類型和反應(yīng)物有嚴(yán)格的選擇性。

酶催化的化學(xué)反應(yīng)稱為酶促反應(yīng)，酶促反應(yīng)中的反應(yīng)物稱為酶的底物。淀粉酶只能催化淀粉的水解反應(yīng)纖維素酶只能催化纖維素的水解反應(yīng)4、酶容易失活5、酶活性的可調(diào)控性生物體可對(duì)酶活性調(diào)節(jié)控制，使其適應(yīng)生理功能的需要。酶的化學(xué)本質(zhì)6.2

酶的化學(xué)本質(zhì)與組成除核酶外，酶都是蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)證據(jù)：

從生物材料中分離出某些純的蛋白質(zhì)，溶解后有酶的活性。

對(duì)酶進(jìn)行酸堿水解處理，最終產(chǎn)物經(jīng)分析為氨基酸。

用蛋白酶降解待研究的酶，發(fā)現(xiàn)酶失去活性。

用蛋白質(zhì)變性劑處理酶，可使酶失活。酶的催化活性要依賴于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的完整性，當(dāng)酶的一級(jí)結(jié)構(gòu)或二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)改變時(shí)，酶會(huì)失活。根據(jù)化學(xué)組成分為：?jiǎn)渭兊鞍酌福▎渭兠福┚Y合蛋白酶（結(jié)合酶）單純酶：僅有氨基酸組成

如：脲酶、淀粉酶、核糖核酸酶等結(jié)合酶：除氨基酸殘基，還有金屬離子、有機(jī)小分子等化學(xué)成分，這類酶又被稱為全酶（holoenzyme）。酶的化學(xué)組成作為電子、原子或基團(tuán)的載體參與反應(yīng)，并促進(jìn)反應(yīng)單獨(dú)存在無催化活性，二者結(jié)合而成的全酶分子才具有催化活性單體酶：只有一條多肽鏈組成；寡聚酶：由兩個(gè)或兩個(gè)以上的亞基(相同或不同)組成；多酶復(fù)合體：幾種酶形成的復(fù)合體。根據(jù)酶蛋白分子結(jié)構(gòu)不同，酶分為：酶的類型不能解離為更小的單位。如：核糖核酸酶、蔗糖酶、羧肽酶A亞基間以非共價(jià)鍵結(jié)合，易在酸堿或變性劑作用下彼此分離，使酶失去活性，因此寡聚酶完整的四級(jí)結(jié)構(gòu)是酶活性所必需的。有利于細(xì)胞中系列反應(yīng)的連續(xù)進(jìn)行，以提高酶的催化效率，便于機(jī)體對(duì)酶的調(diào)控。單體酶寡聚酶1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶多酶復(fù)合體丙酮酸脫氫酶復(fù)合體

習(xí)慣命名：系統(tǒng)命名：6.3

酶的命名和分類根據(jù)酶的底物和酶促反應(yīng)的類型命名如：蔗糖酶、麥芽糖酶、淀粉酶如：水解酶、轉(zhuǎn)移酶、脫氫酶當(dāng)酶促反應(yīng)具有相同名稱的底物時(shí)，還需標(biāo)出酶的來源。如：胃蛋白酶、胰蛋白酶酶的名稱需標(biāo)示酶的底物與酶促反應(yīng)的類型。如一種酶催化兩個(gè)底物，命名時(shí)用“：”將兩個(gè)名稱隔開；若底物之一是水，則水可省略。如

乙醇脫氫酶乙醇：NAD+氧化還原酶脂肪酶脂肪（：水）水解酶，此處水略去不寫酶學(xué)委員會(huì)國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)(I.E.C)規(guī)定，按酶促反應(yīng)的性質(zhì)，可把酶分成六大類：1.氧化還原酶類(oxidoreductases)：指催化底物進(jìn)行氧化還原反應(yīng)的酶類。如：乳酸脫氫酶、細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶。

氧化酶催化反應(yīng)通式：

A?2H+O2A+H2O2或2（A?2H）+O22A+2H2O脫氫酶催化反應(yīng)通式：

A?2H+NAD（P）+

A+NAD（P）H+H+2.轉(zhuǎn)移酶類(transferases)：指催化底物之間進(jìn)行某些基團(tuán)的轉(zhuǎn)移或交換的酶類。轉(zhuǎn)移不同的基團(tuán)的反應(yīng)由不同的轉(zhuǎn)移酶催化。如：轉(zhuǎn)甲基酶、轉(zhuǎn)氨酸、己糖激酶、磷酸化酶等。轉(zhuǎn)移酶催化反應(yīng)通式：

A?X+B

A+B?X

3.水解域酶類(hy落dr傻ol慰as蔬es)：指具催化鐵底物鬧發(fā)生技水解盲反應(yīng)伯的酶暗類。例如皂：淀掠粉酶戚、蛋貌白酶翅、脂旁肪酶競(jìng)、磷煎酸酶抗等。水解慌酶催梢化反取應(yīng)通綢式：A?BA+幕B4.裂合娃酶類(ly做as憑es)：指雀催化有一個(gè)對(duì)底物體裂解證為幾榮種化外合物用，或煩由幾懷種化景合物蔽縮合挺為一秩種化鈴合物駐的酶遍類。警這益些反售應(yīng)均碧涉及詢從一藏個(gè)化樂合物混移去民一個(gè)暑基團(tuán)紋形成途雙鍵纖的反每應(yīng)或鞠逆反列應(yīng)。例如:檸檬灘酸合夾成酶防、醛剝縮酶?jìng)虻取Ａ押系衙复呃セ疵?yīng)通微式：A-棟B+顛HO糠HAO茫H+吵BH5.異構(gòu)警酶類(is竄om摔er更as河es)：指催籍化各鎮(zhèn)種同糠分異灶構(gòu)體意（分喚子式復(fù)相同冒，結(jié)饅構(gòu)式謠不同稈的化兇合物)之間麗相互拼轉(zhuǎn)化培的酶曲類。異構(gòu)突反應(yīng)潛是分惹子內(nèi)咐部基暢團(tuán)進(jìn)哨行重好新排雪列的群反應(yīng)侮。例如環(huán)：磷更酸丙躬糖異妨構(gòu)酶氣、消菠旋酶虹等。異構(gòu)胳酶催也化反卸應(yīng)通蝴式：A彼B6.合成廊酶類(連接府酶類奇，li棗ga共se如s)：指萌催化治兩分叮子底備物合霸成為曠一分透子化碼合物飄的酶搶類。由合裳成酶頁催化域的反朵應(yīng)一巷般是佛吸能冊(cè)反映狡，需搖要有AT鋼P(yáng)等高侄能物阻質(zhì)參收與，遵這是奔區(qū)分品合成披酶和捎裂解嚼酶的無重要譯依據(jù)擔(dān)。例如勵(lì)，谷丑氨酰充胺合祝成酶漿、氨牧基酸書：tR肯NA連接鬧酶等予。合成旬酶催透化反癥應(yīng)通潑式：A+B扇+A粥TPAB仍+A搞DP宰+P屯i或A+巖B+裝AT典PAB安+A要MP事+P罰Pi6.會(huì)4酶的材專一負(fù)性蔗糖酶底物：蔗糖如：糖*“鎖轟與鑰霧匙”橡假說(l乞oc氧k敏an班d戚ke第y狡hy扛po混th艙es冠is否)認(rèn)為卵底物杏分子佩或底遞物分槐子的似一部艱分象惹鑰匙么那樣競(jìng)，專待一地喂楔入留到酶腰的活瞇性中蝕心部報(bào)位，萬底物件分子諷與酶蠻分子祝在結(jié)悶構(gòu)上須具有輩緊密會(huì)互補(bǔ)勞的關(guān)都系。酶的口專一毯性假股說該假券說的局限腦性：不柔能解沉釋如礎(chǔ)何能籮同時(shí)燦催化頓可逆玩反應(yīng)爬的正趴、逆矮反應(yīng)估。*誘導(dǎo)萬契合刪假說(i甘nd沸uc芹ed拐-f餅it派h胡yp滅ot主he浮si狂s)酶底加物復(fù)戰(zhàn)合物E+SE+PES認(rèn)為游酶分許子的聯(lián)結(jié)構(gòu)削并非嘩與底安物分殼子正聰好互蓋補(bǔ)，袋當(dāng)酶垃分子脆與底畝物分瓦子接塔近時(shí)櫻，酶冷蛋白健受底寶物分余子的金誘導(dǎo)延，其閃構(gòu)象辭發(fā)生淹有利耀于底碑物結(jié)島合的忘變化賺，酶漿與底運(yùn)物在宿此基采礎(chǔ)上易互補(bǔ)帖楔合棉，進(jìn)椒行反些應(yīng)。該假說更接近酶與底物相互作用的真實(shí)情況羧肽枝酶的廣誘導(dǎo)繼契合刪模式底物6.弱5酶的陵作用越機(jī)制反應(yīng)踐物若糟要轉(zhuǎn)刻化為桿產(chǎn)物培，必箱須首頸先進(jìn)栽入一寫種能種量更堤高的箱狀態(tài)味，稱久為過渡眠態(tài)?；罨啄?底物和分子扇從初謀態(tài)轉(zhuǎn)排變到輩過渡森態(tài)所芒需的峽能量幅。過渡態(tài)?G酶催零化作妨用的太本質(zhì)灘：降數(shù)低反川應(yīng)的構(gòu)活化嘆能。酶與壁底物護(hù)復(fù)合糕物的側(cè)形成6.裂5.影1酶的鳴活性桂部位整個(gè)狂酶分圓子中丙，只珠有一然小部腐分區(qū)腔域的虛氨基稅酸殘聞基參興與對(duì)處底物偶的結(jié)孝合與潑催化謠作用羊，這摩些特軌異的辨氨基按酸殘繳基比冬較集慈中的暗區(qū)域糧稱為倉(cāng)酶的活性膊部位，或活性撐中心。酶的挖活性埋中心（ac椒ti忘ve糟ce拆nt革er）胰凝乳蛋白酶的一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)活性游部位豆的組往成：位于活性中心以外，還存在維持酶活性中心應(yīng)有的空間構(gòu)象和（或）作為調(diào)節(jié)劑的結(jié)合部位所必需的基團(tuán)?；钚灾行耐獾谋匦杌鶊F(tuán)結(jié)合部位與底物相結(jié)合催化部位催化底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物

每種酶可以有1個(gè)或幾個(gè)結(jié)合部位，每個(gè)結(jié)合部位至少結(jié)合一種底物。決定酶的催化能力和酶促反應(yīng)的性質(zhì)。決定誘酶的專一是性底叮物活性盞中心速以外匙的必動(dòng)需基濁團(tuán)結(jié)合熄基團(tuán)催化葉基團(tuán)活性中心

活性快部位小的特暈點(diǎn)肽鏈折疊酶活性部位的形成酶的活性部位在酶分子整體結(jié)構(gòu)中只占很小的部分其體積通常只占酶總體積的1-2%酶活污性部課位氨通基酸肺殘基夸一級(jí)荒結(jié)構(gòu)貿(mào)相距畏很遠(yuǎn)在高級(jí)結(jié)構(gòu)中相互靠近II隸.酶的密活性桂部位惰具有莊三維粥立體剃結(jié)構(gòu)II劣I.酶的服活性叉部位引含有特特定晨的催無化基愈團(tuán)

催化基團(tuán)

氨基酸側(cè)鏈的化學(xué)功能團(tuán)

輔因子的化學(xué)功能團(tuán)如：痛羥基喊、巰甚基、四氨基秤、羧捐基等史。如：與丙酮?dú)崦摌I(yè)羧酶忘的硫攜胺素禍焦磷您酸等IV.酶的活性部位具有柔性己糖激酶與其底物之一葡萄糖結(jié)合后構(gòu)象的改變活性部位兩個(gè)結(jié)構(gòu)域靠近V.酶的池活性針部位禍通常程是酶獨(dú)分子黨上的拾一個(gè)婦裂隙結(jié)合爹基團(tuán)催化多基團(tuán)他將項(xiàng)底物呆分子異包圍鄙起來勺，為鄙即將餅發(fā)生銹的反敗應(yīng)提索供了鄙一個(gè)驕微環(huán)錦境（政通常偷是疏瞎水環(huán)搭境）佛。酶尚的活薯性部隙位對(duì)潛酶的榴整體飯結(jié)構(gòu)需有較類高的廉依賴零性，似一旦甲酶的洲整體懷空間年結(jié)構(gòu)晴被破偶?jí)模拭傅脑禄钚孕虏课蝗幸簿吞澅黄聘笁?，歡酶就腸會(huì)失洗活。溶菌漢酶的候活性催中心歡是一枕裂隙喜，可寨以容撐納肽避聚糖紫的6個(gè)單翠糖基丙（A，B，C，D，E，F(xiàn)）。催化喜基團(tuán)幅是35位谷秤氨酸究，52位天匪冬氨業(yè)酸；結(jié)合倒基團(tuán)觀是10瘡1位天色冬氨叮酸和10抗8、62、63位色鑼氨酸擊。溶菌菌酶的狂活性番中心6.好5.酬3酶具謎有高烘催化默效率禍的分這子機(jī)濱制鄰近跌效應(yīng)貝與定絹向效恒應(yīng)促進(jìn)凝底物筒過渡飽態(tài)形擠成的扯非共輔價(jià)作碧用酸堿卡催化串作用共價(jià)堅(jiān)催化遵作用金屬籃離子院催化：（一樹）鄰佳近效這應(yīng)與剃定向露效應(yīng)反應(yīng)謹(jǐn)速度嗽上升鄰近效應(yīng)與定向效應(yīng)示意圖兩者共同作用可使反應(yīng)速率升高約108倍當(dāng)酶渣與底腫物結(jié)令合后故，酶勾與底浸物之吩間的指非共形價(jià)作遲用（白如氫洲鍵、信疏水乎相互極作用圾等）窩可使定底物傻分子罵繞其詢敏感叢鍵發(fā)誰生形變，同敏時(shí)酶法活性訂部位辭的構(gòu)鋒象也堵在底鄭物的廢影響輪下發(fā)托生改演變，懇從而腐促使示底物院過渡練態(tài)的鼠形成線，反朵應(yīng)活性化能店被降今低，億反應(yīng)稿速率娃加快但。（二廚）促各進(jìn)底爪物過育渡態(tài)壟形成現(xiàn)的非亮共價(jià)乘作用（三綢）酸診堿催厲化作敬用廣義懷的酸針堿催釘化指通俗過質(zhì)子鋒、氫膏氧根繡離子以及蛇其他圍能提鞠供質(zhì)匹子和楚接受畏質(zhì)子反的物堡質(zhì)進(jìn)蛾行的番催化漿。生破物體遷內(nèi)的呈反應(yīng)綢以廣云義酸餡堿催案化為載主。在酶愛分子淋中有貨許多酸性炮或堿庭性氨兆基酸拍殘基，它打們可粘作為滅質(zhì)子市受體步或質(zhì)溉子供史體，毛在特?cái)囟ǖ脑簵l件區(qū)下起鹽催化呢作用懸。如：谷氨閉酸/天冬赴氨酸熟殘基努側(cè)鏈拼的羧困基，寄賴氨繁酸殘融基側(cè)越鏈的縱氨基小等影響紗酸堿爽催化怨反應(yīng)尿速度添的因額素有搏兩個(gè)凱：1、欠酸堿灣的強(qiáng)踩度2、辛酸堿春基團(tuán)詠供出敞質(zhì)子義或接畏受質(zhì)兇子的獨(dú)速度惹。狹義穴概念這一反應(yīng)也可通過廣義堿催化而發(fā)生，催化劑從酮得到質(zhì)子導(dǎo)致另一種新的過渡態(tài)產(chǎn)生而提高反應(yīng)速率。酮–烯醇酷互變稀異構(gòu)研反應(yīng)讀中，么在無絨催化薄劑參貧與時(shí)壩，由被于生芹成類爪似碳亮負(fù)離慢子過聽渡態(tài)景所需僻的自絞由能宅高，喉故反伸應(yīng)速樣率極御慢。在酸催化時(shí)，催化劑（酶）的質(zhì)子被提供給酮，導(dǎo)致一種新的過渡態(tài)產(chǎn)生，形成該過渡態(tài)所需活化能較低，因此提高了反應(yīng)速率。（四茅）共翼價(jià)催就化作熔用共價(jià)井催化：指貧催化最劑通脆過與貓底物枝形成宅相對(duì)躺不穩(wěn)昂定的快共價(jià)碧中間緣瑞復(fù)合柳物，著改變歸了反垃應(yīng)歷良程，纖由于方新歷姻程所期需活孩化能歷更低棚，因努此反畝應(yīng)速立率得校以提刊高。親核巴催化共價(jià)土催化親電模催化參與困共價(jià)屢催化繭的基盆團(tuán)有頃：組晴氨酸域殘基厘側(cè)鏈搭的咪癢唑基炮，半倍胱氨果酸殘類基側(cè)需鏈的疫巰基船，絲傻氨酸染殘基機(jī)側(cè)鏈彎的羥推基等1、親核國(guó)催化井作用：指仔催化憂劑作垂為提內(nèi)供電您子的親親核僵試劑絞，攻巡壽擊反甲應(yīng)物壯的缺樣電子惰中心咬，與喚反應(yīng)早物形茂成共時(shí)價(jià)中粒間復(fù)蟲合物算。非催化反應(yīng)：酶分殿子親政電子馬的基超團(tuán)有方親核笑堿基注被質(zhì)區(qū)子化布的共各軛酸梯。如：NH3+、在酶擁的親辮電子在催化畝過程中中，降有時(shí)睛其必纏需的慢親電凱子物百質(zhì)不酸是上角述的東共軛羨酸，伏而是貨由酶屯分子木中非診蛋白勝組成工的輔析助因抬子提監(jiān)供，匪其金蘋屬陽郊離子夏是很慌重要土的一碌類。2、親電吸催化膊作用：指?jìng)愦呋e劑作備為吸自取電雁子的塔親電精試劑慢，攻燦擊反皮應(yīng)物波的負(fù)觀電中病心，縫與反鎮(zhèn)應(yīng)物厲形成粱共價(jià)戶中間旦復(fù)合屋物。（四商）金制屬離渴子催扣化作墻用1、提柳高水漏的親堅(jiān)核性件能如：碳酸捎酐酶活性秩部位窄的鋅劈燕離子曠可與境水分避子結(jié)辣合，犬產(chǎn)生花羥基脾，成丈為強(qiáng)統(tǒng)的親叉核試?yán)蟿?、通過靜電再作用璃屏蔽陵負(fù)電荷煙，利于潮下一敵步反詢應(yīng)如：焦激酶訂底物Mg2+-A竟TP復(fù)合魄物，Mg2+屏蔽AT膀P磷酸綁基的耳負(fù)電付荷，牌使其幅不排蔽斥親給核試代劑的涌攻擊3、通過結(jié)合老底物犧為反存應(yīng)定沾向4、在謝氧化虧還原序反應(yīng)證中起猜傳遞貧電子斃的作孕用在需輸要金盆屬離她子的亂酶促行反應(yīng)疲中，國(guó)金屬劇離子簡(jiǎn)可通替過多有種途芒徑參閱加催叉化過閥程。酶的灘活性融部位庸一般冒都含筍有多珠個(gè)起舟催化姜作用廊的基統(tǒng)團(tuán)，決這些廟基團(tuán)麥在空遼間上給有特逆殊的舌排列禍和取疲向，姑可以疾通過糖協(xié)同睛的方錢式共大同作孕用于蔽底物燒，提槍高底價(jià)物的羞反應(yīng)爹速率冊(cè)。6.準(zhǔn)5.尺4酶作柄用機(jī)差制實(shí)輸例——胰凝守乳蛋仙白酶胰凝醉乳蛋尊白酶割：屬植于絲逢氨酸蛋白譯酶家倡族天然隨有活蹲性的重胰凝辯乳蛋夫白酶湯：由三陽段肽己鏈組航成其間規(guī)通過5個(gè)二焦硫鍵工連接活性再部位煮處于兩酶表盒面的墻一個(gè)檔裂隙寇中Se蓬r19老5,也Hi槐s57,廁As確p10洗2關(guān)鍵殼殘基橢球狀的三級(jí)結(jié)構(gòu)絲氨酸蛋白酶專一性：Se通r19葛5附近迎的疏煩水口憑袋，膛決定旦其只買容納封芳香貸族與凝大的饅疏水慶性氨仿基酸蘇的側(cè)資鏈第一尤階段椅：酰撒化反呼應(yīng)，次乙酰史化底特物形程成酶飽－底龍物共攏價(jià)中屆間復(fù)墻合物菠，并許釋放碑出第碌一種貝產(chǎn)物烈；第二攜階段由：脫券酰反偷應(yīng)，嘴水分昏子攻羅擊中煩間共蠶價(jià)復(fù)炸合物被，去購(gòu)乙酰差化，消并釋蕉放出灘第二儲(chǔ)種產(chǎn)攝物，悟酶回沫復(fù)到故初始藝狀態(tài)折。胰凝尊乳蛋酬白酶析催化夕底物樹的反享應(yīng)包薦括兩陡?jìng)€(gè)階攻段：底物ES共價(jià)但復(fù)合舅物結(jié)合焰底物釋放腸出胺止類產(chǎn)既物釋放抽出羰羊基產(chǎn)允物被水勇親核籃攻擊四面幸體中挪間物跳瓦解游離待酶此過程中，三種氨基酸殘基之間協(xié)同配合，His57的主要作用是堿催化作用,Ser195是親核催化作用。6.軌6酶促碗反應(yīng)乓動(dòng)力伍學(xué)酶促堡反應(yīng)段動(dòng)力勸學(xué)：刺研究酶促矮反應(yīng)財(cái)?shù)乃倬下室约坝绊懘怂俅实奶敻鞣N因素的科浩學(xué)。通常血酶促格反應(yīng)毅的速活率在師反應(yīng)跑早期鼠階段漲保持旗不變行，此濫后隨舞反應(yīng)姻時(shí)間醫(yī)增加企而逐銀漸降湖低。因此盼一般潛測(cè)定晨酶促棒反應(yīng)你的速慘率是填測(cè)定糧酶促對(duì)反應(yīng)紋的初塵速率倘。率酶促聰反應(yīng)川的影雄響因橫素包憑括：酶濃卻度、劣底物免濃度抗、抑柿制劑憲、溫窗度、pH擁、激活貪劑等?！芯科ヒ环N代因素模的影失響時(shí)中，其矛余各耳因素勾均恒價(jià)定。6.疲6.恭2底物想濃度非對(duì)酶它促反索應(yīng)速屋率的淹影響在酶制濃度眼保持違不變斃的情怖況下惡，以鐘反應(yīng)隨速率腿對(duì)底診物濃醉度作聰圖得蟲到動(dòng)閱力學(xué)鋒曲線亮。在其趣他因品素不影變的擁情況逗下，底物胸濃度挽對(duì)反唉應(yīng)速臟度的扔影響浸呈矩形加雙曲寧線關(guān)鵝系。當(dāng)?shù)着栉餄鈽范容^裕低時(shí)廉：反應(yīng)吸速率獨(dú)與底返物濃羽度成絡(luò)正比；反尾應(yīng)為一級(jí)士反應(yīng)。[S]VVmax19騾03年，吊蔗糖哨酶催錢化蔗票糖水允解實(shí)挺驗(yàn)：隨著劉底物墾濃度茅的增粉高：反應(yīng)努速率不再瓣成正仰比例加速引；反潛應(yīng)為混合刪級(jí)反臭應(yīng)。[S]VVmax當(dāng)?shù)讋偽餄馄雀咧┻_(dá)一芒定程族度：反應(yīng)聞速率不再私增加，達(dá)減最大獨(dú)速率窩；反棵應(yīng)為零級(jí)自反應(yīng)。[S]VVmax底物濃度反應(yīng)速率根據(jù)唇該實(shí)慌驗(yàn)結(jié)離果提菠出了酶底佛物中計(jì)間復(fù)消合物手學(xué)說，根濾據(jù)該歉學(xué)說惜，中解間復(fù)退合物立分解腸成產(chǎn)逆物的劑反應(yīng)堆速率娃可代際表酶振促反河應(yīng)速墾率，殲其與啄中間伙復(fù)合柄物濃堂度成錄正比栽。C復(fù)合片物與C底物呈線錫性關(guān)峰系酶數(shù)寒量有明限，C復(fù)合民物與C底物呈非最線性酶飽吹和，C復(fù)合胞物不隨C底物變化※19駱13年Mi達(dá)ch懇ae語li悼s和Me忙nt論en提出反應(yīng)初速度符與底拋物濃瘋度關(guān)俘系的山數(shù)學(xué)襪方程紙式，即米氏壁方程，簡(jiǎn)班稱米域氏方僻程式丈。V:瘋不藝同[S]時(shí)的稼反應(yīng)冤速度[S]:脾底膽物濃預(yù)度Vma逃x:駁最哪大反紗應(yīng)速閑度Ｋs:諷米瘡氏?？?cái)?shù)（塌酶底數(shù)物復(fù)布合物喉的解碎離常梨數(shù)）Ｖ──Vmax[S]Ks+[S]＝6.碌6.寄3酶促窯反應(yīng)駐的動(dòng)興力學(xué)私方程鳳式定量反映了酶促反應(yīng)速率與底物濃度的復(fù)雜關(guān)系。k1k2k3k4E+責(zé)SESE+軍P※1925年Br昆ig救gs和Ha蒙ld猜an筒e提出豪穩(wěn)態(tài)景理論求，對(duì)影米氏屈方程塌進(jìn)行寺了修茂正，禍將酶受促反察應(yīng)分耕為兩步步：ES推導(dǎo)酷基于全兩個(gè)挽假設(shè)獎(jiǎng)：1.糾E與S形成ES復(fù)合退物的桶反應(yīng)番是快工速平矮衡反選應(yīng)而ES分解栽為E及P的反派應(yīng)為植慢反痛應(yīng)，狹反應(yīng)歷速度日取決浩于慢逼反應(yīng)賊即V＝固K3[E左S]2.的S的總繼濃度借遠(yuǎn)遠(yuǎn)運(yùn)大于E的總秤濃度登，因索此在簡(jiǎn)反應(yīng)美的初倍始階判段，S的濃陣度可支認(rèn)為炕不變劉即[S]陷＝[罰St]穩(wěn)態(tài)慈：是指ES的生必成速搭率與寫分解芝速率笛相等遙，即[E屑S]恒定沖。k1k2k3k4E+或SESE+恢P在穩(wěn)態(tài)下，ES的生成速率為：V1=K1[Ef]

[Sf]+K4[Ef]

[Pf][Pf]:互很麻小，柔忽略洽不計(jì)[Ef]=[貧E]伍-[腸ES青][E很]：酶的差總濃潑度，[E茄S]：中間獅復(fù)合臉物的要濃度[Sf]=牌[染S]奧-[象ES義]-[Pf]≈[S錄]拒(百[S景]：底物軟的總物濃度)V1=K1([艦E]怖-[號(hào)ES削])跟[你S]ES的分解速率為：V2=K2[ES]+K3[ES]K1([瘡E]－[E床S]料)罵[S槳]＝K2[E果S]持+犬K3[E糧S]K2+K3＝Km

（米氏常數(shù)）K1令：則:[ES]=

K1[E][S][S]+(K2+K3)/K1整理得:[ES]=

[E][S][S]+Km酶促尋反應(yīng)例速率因用產(chǎn)濁物的臉生成兆速率羨表示首：V＝孫K3[E穿S]擺=K3[E][S]Km+[S](1勵(lì))k1k2k3k4E+鍋SESE+談P當(dāng)?shù)滓餄鈩?shì)度很架高，口將酶征的活拳性中給心全謊部飽韻和時(shí)拿，即[E夫]＝[E決S]，反應(yīng)趙達(dá)最梅大速懂度Vma餅x＝K3[E糞S]＝K3[E串](2殊)將(2饅)代入(1持)得經(jīng)婚穩(wěn)態(tài)單理論錄修正走過的吳米氏炸方程點(diǎn)式：Vmax[S]Km+[S]V＝[S識(shí)]很小巨時(shí)，[S齊]<帥<Km，則V資=Vma氧x[S]/話Km，一勒級(jí)反頭應(yīng)[S勉]很大叔時(shí)，[S地]>毅>緩Km，則V雹=Vma家x，零陽級(jí)反攀應(yīng)[S質(zhì)]冊(cè)=乒Km，則V畝=Vma弟x/2，反打應(yīng)速滔率為扛最大些反應(yīng)鍛速率啟的一主半，渠混合帖級(jí)反迷應(yīng)，Km值是反應(yīng)燒速率紙為最摸大值譯一半輸時(shí)的接底物鋤濃度(m知ol喝/L厲)Km與Vma字x的意晌義Km值：①Km等于題酶促夜反應(yīng)泛速度鬼為最遭大反攏應(yīng)速雀率一和半時(shí)爬的底曾物濃晉度。②意義嶄：a)飾Km是酶的衫特征寬性常趕數(shù)之角一；b)在固酬定的汽反應(yīng)瘦條件朗下，Km的大形小只講與酶覆的性啦質(zhì)有墨關(guān)，承與其墻濃度泉無關(guān)咳；c)當(dāng)K2>>宏K3時(shí)，Km≈Ks（=K2/K1）,可近似排表示豆酶對(duì)迅底物夠的親亡和程僵度；d)不同亮的酶赤對(duì)于不同斜底物怎有不爽同的Km值，頁因此善可以挺通過纖測(cè)定Km來鑒妻別酶膏和酶則的最階適底須物（Km最小縮慧的底構(gòu)物）懼。Vma捕x值：酶完傾全被博底物另飽和價(jià)時(shí)的滅反應(yīng)自速度奇，與酶擴(kuò)濃度置成正猾比。Km大表示親和程度小，Km小表示親和程度大。雙倒法數(shù)作快圖法(d倉(cāng)ou直bl員e咽re嫂ci衰pr點(diǎn)oc輩al耽p品lo筆t)，又腐稱為林-貝氏(Li封ne怒we率av貌er-各Bu喚rk桿)作圖萬法

Vmax[S]Km+[S]V=兩邊同取倒數(shù)米氏雄常數(shù)Km和Vma有x的求稀法-1床/Km1/桌Vma蠅x1/[S]1/V（林－貝氏方程）+1/V=KmVmax1/Vmax1/[S]通過郊試驗(yàn)穗方法陡測(cè)得V與[S逝]后，旬以1/蘭V對(duì)1/筑[S襲]作圖謊，得敏到一茶條直唉線。二、pH的影建響與旬最適興的pH最適pH：酶催愛化活性鏈最大時(shí)的對(duì)環(huán)境pH胃蛋白酶淀粉酶膽堿酯酶三、豪溫度餐的影犧響與售最適著溫度*散低溫悅的應(yīng)夠用雙重蜻影響：溫度嶄低時(shí)，升晶高溫啊度酶至促反鼓應(yīng)速度挖升高；溫度局高時(shí)，心升高膊溫度判可引染起酶前的變錫性，剛反應(yīng)速度金降低。最適顯溫度（op盡ti弓mu舌m作te擋mp姻er勞at漏ur娘e）功：酶促仗反應(yīng)愿速度最快時(shí)的沾環(huán)境溫度最適pH和最毯適溫威度都內(nèi)不是拍酶的特征聽常數(shù)偶。四、牌酶濃量度對(duì)播反應(yīng)菠速度浸的影賢響當(dāng)[S]肅＞＞周[E傳]，酶可抗被底喂物飽現(xiàn)和的串情況但下，脆反應(yīng)之速度逝與酶紛濃度弊成正察比。關(guān)系來式為扛：V所=預(yù)K3子[穗E]五、乳激活更劑的里影響凡能齒提高蛋酶活榮性，今加快缺酶促耗反應(yīng)秩的物四質(zhì)都曬稱為激活握劑（ac偽ti臉va掩to此r）。激活聰劑的繡作用徑機(jī)制享：①與酶柔分子葡中的承氨基的酸側(cè)匪鏈基炊團(tuán)結(jié)喝合，歉穩(wěn)定像酶催射化作欣用所津必需輪的構(gòu)帳象。②作埋為底遙物（位或輔酒酶）樸與酶雷蛋白尼之間錫聯(lián)系島的橋頓梁。③作鍛為輔秀酶或有輔基扶的一肚個(gè)組稀成部故分協(xié)泊助酶舞的催蛋化作翅用。六、膝抑制腫劑對(duì)歐反應(yīng)斬速度臥的影驢響酶的脹抑制涼劑(in悄hi妖bi鏈to蛇r)：凡能則使酶悲的催皆化活性舟下降而不引咐起酶變蛋白縣變性的物毯質(zhì)稱晨為酶店的抑窩制劑執(zhí)。※區(qū)別協(xié)于酶申的變叼性：抑制做劑對(duì)狗酶有逆一定綿選擇促性引起蠅變性剪的因?qū)懰貙?duì)苗酶沒這有選胳擇性抑制裕作用偏的類刺型：不可秤逆性予抑制吵（ir熔re除ve耗rs具ib有l(wèi)e換in館hi那bi叮ti王on）可逆世性抑還制（re栗ve向rs憤ib乒le瞧in感hi知bi郵ti約on）：競(jìng)爭(zhēng)性抑制；非競(jìng)爭(zhēng)性抑制；反競(jìng)爭(zhēng)性抑制；(一)白不咐可逆帆性抑廟制作艇用概念乏：抑制朝劑通設(shè)常以共閘價(jià)鍵盤與酶勿活性添中心襖的必掘需基僻團(tuán)相尿結(jié)合，使怨酶失險(xiǎn)活。舉例謎：有機(jī)樣磷化副合物羥基漿酶解毒挎-孕-炒--鑄-或-益解磷州定(PA碗M)重金蹈屬離住子及松砷化忍合物巰基悉酶解毒優(yōu)-讓-液--游-搖-適二巰漸基丙僑醇(BA椒L)1、難非專趁一性鐮不可弦逆抑巴制抑制聯(lián)劑與明酶分繡子中霧一類堂或幾團(tuán)類基扭團(tuán)共價(jià)蠻結(jié)合，使割酶失母去活田性。巧如金套屬離源子是冤多種便酶的折抑制功劑。2、鈴專一造性不地可逆欠抑制惠劑抑制轎劑專鉆一作蝴用于史酶的活性私中心或必需再基團(tuán)，以共價(jià)志鍵結(jié)估合，從排而抑馬制酶持的活絕性。（二遮）可巷逆性原抑制撇作用概念按：抑制丘劑通防常以非決共價(jià)藏鍵與災(zāi)酶或饅酶-注底物碎復(fù)合桿物可匠逆性叢結(jié)合圍,使灘酶的犯活性王降低引或喪猶失；抑制我劑可這用透昂析、澇超濾畫等方嶼法除甘去。競(jìng)爭(zhēng)巡壽性抑龜制(co囑mp娃et刺it失iv去e況in濫hi耗bi纖ti翼on)非競(jìng)紅爭(zhēng)性測(cè)抑制(no箱n-偉co但mp繭et縣it醫(yī)iv萬e攤in嗓hi像bi左ti獸on)反競(jìng)僑爭(zhēng)性凡抑制(un躲co腸mp料et睜it屯iv繪e喊