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文檔簡介
第四章蛋白質(zhì)化學(xué)一、單項選擇題蛋白質(zhì)分子的元素組成特點是含大量的碳 B.含大量的糖含少量的硫 D.含少量的銅E.含氮量約16%一血清標(biāo)本的含氮量為5g/L,則該標(biāo)本的蛋白質(zhì)濃度是15g/L B.20g/LC.31/L D.45g/LE.55g/L下列哪種氨基酸是堿性氨基酸?亮氨酸 B.賴氨酸C.甘氨酸 D.谷氨酸E.脯氨酸下列哪種氨基酸是酸性氨基酸?天冬氨酸 B.丙氨酸C.脯氨酸 D.精氨酸E.甘氨酸含有兩個羧基的氨基酸是絲氨酸 B.蘇氨酸C.酪氨酸 D.谷氨酸E.賴氨酸在pH6.0的緩沖液中電泳,哪種氨基酸基本不移動?A.丙氨酸 B.精氨酸C.谷氨酸 D.賴氨酸E.天冬氨酸在pH7.0時,哪種氨基酸帶正電荷?A.精氨酸 B.亮氨酸C.谷氨酸 D.賴氨酸E.蘇氨酸蛋氨酸是支鏈氨基酸 B.酸性氨基酸C.堿性氨基酸 D.芳香族氨酸E.含硫氨基酸9.構(gòu)成蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)氨基酸有多少種?8種 B.15種20種 D.25種E.30種構(gòu)成天然蛋白質(zhì)的氨基酸除甘氨酸外,氨基酸的a碳原子均非手性碳原子除甘氨酸外,均為L-構(gòu)型 C.只含a羧基和a氨基均為極性側(cè)鏈 E.有些沒有遺傳密碼天然蛋白質(zhì)中不存在的氨基酸是A.瓜氨酸 B.蛋氨酸絲氨酸 D.半胱氨酸丙氨酸在中性條件下大部分氨基酸以什么形式存在?B.非極性分子D.B.非極性分子D.正離子B.茚三酮反應(yīng)D.米倫反應(yīng)C.負(fù)離子E.兼性離子所有氨基酸共有的顯色反應(yīng)是A-雙縮脲反應(yīng)C.酚試劑反應(yīng)E.考馬斯亮藍(lán)反應(yīng)蛋白質(zhì)分子中的肽鍵氨基酸的各種氨基和各種羧基均可形成肽鍵某一氨基酸的Y-羧基與另一氨基酸的a氨基脫水形成一個氨基酸的a-羧基與另一氨基酸的a氨基脫水形成D.肽鍵無雙鍵性質(zhì)
E.以上均不是15.維持蛋白質(zhì)分子一級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵是A.鹽鍵B.二硫鍵C.疏水鍵D.肽鍵E.氫鍵16蛋白質(zhì)分子中a-螺旋和B-片層都屬于A.一級結(jié)構(gòu)B.二級結(jié)構(gòu)C.三級結(jié)構(gòu)D.四級結(jié)構(gòu)E.高級結(jié)構(gòu)17.維持蛋白質(zhì)分子二級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵是A.肽鍵B.離子鍵C.氫鍵D.二硫鍵E.疏水鍵18.a螺旋母上升圈相當(dāng)于兒個氨基酸殘基?A.2.5B.2.6C.3.0D.3.6E.5.419.有關(guān)蛋白質(zhì)分子中a螺旋的描述正確的是A.一般為左手螺旋B.螺距為5.4nmC.每圈包含10個氨基酸殘基D.穩(wěn)定鍵為二硫鍵E.氨基酸側(cè)鏈的形狀大小及所帶電荷可影響a螺旋的形成20.主鏈骨架以180度返回折迭,在連續(xù)的四個氨基酸殘基中第一個與第四個形成氫鍵的是下列哪種類型:A.B轉(zhuǎn)角B.B片層C.a螺旋D.無規(guī)則卷曲E.以上都不是21.模體屬于:A.二級結(jié)構(gòu)B.超二級結(jié)構(gòu)C.三級結(jié)構(gòu)D.四級結(jié)構(gòu)E.以上都不是關(guān)于蛋白質(zhì)分子三級結(jié)構(gòu)的描述,其中錯誤的是天然蛋白孩子分子均有這種結(jié)構(gòu)具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈都具有生物學(xué)活性三級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性主要是次級鍵維持親水基團聚集在三級結(jié)構(gòu)的表面決定盤曲折疊得因素是氨基酸殘基具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)特征是分子中必定含有輔基B.每條多肽鏈都具有獨立的生物學(xué)活性C.在兩條或兩條以上具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈的基礎(chǔ)上,肽鏈進一步折疊盤曲形成D.依賴肽鍵維系四級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性E.由兩條或兩條以上具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈組成維持蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵是A.鹽鍵 B.氫鍵C.二硫鍵 D.范德華力E.次級鍵25.蛋白質(zhì)分子中兩個半胱氨酸殘基間可形成A.肽鍵 B.鹽鍵C.二硫鍵 D.疏水鍵E.氫鍵分子病患者體內(nèi)異常蛋白質(zhì)是由于一級結(jié)構(gòu)中某一氨基酸被另一氨基酸取代一級結(jié)構(gòu)中相鄰的兩個氨基酸正常順序被顛倒蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變一級結(jié)構(gòu)中某一氨基酸缺失以上都不是蛋白質(zhì)分子中引起280nm光吸收的主要成分是A.苯丙氨酸的苯環(huán) B.半胱氨酸的巰基C.肽鍵 D.色氨酸的吲哚環(huán)和酪氨酸的酚基E.氨基酸的自由氨基
28.將蛋白質(zhì)溶液的pH值調(diào)節(jié)到其等電點時A.可使蛋白質(zhì)表面的凈電荷不變B.可使蛋白質(zhì)表面的凈電荷增加C.可使蛋白質(zhì)穩(wěn)定性增加D.可使蛋白質(zhì)穩(wěn)定性降低,易沉淀析出E.對蛋白質(zhì)表面水化膜無影響29.等電點分別是4.9和6.8的兩種不同蛋白質(zhì)混合液,在哪種pH條件下電泳分離效果最好?A.pH3.5B.pH4.9C.pH5.9D.pH6.5E.pH8.630.蛋白質(zhì)變性是由于A.蛋白質(zhì)空間構(gòu)象破壞B.蛋白質(zhì)水解C28.將蛋白質(zhì)溶液的pH值調(diào)節(jié)到其等電點時A.可使蛋白質(zhì)表面的凈電荷不變B.可使蛋白質(zhì)表面的凈電荷增加C.可使蛋白質(zhì)穩(wěn)定性增加D.可使蛋白質(zhì)穩(wěn)定性降低,易沉淀析出E.對蛋白質(zhì)表面水化膜無影響29.等電點分別是4.9和6.8的兩種不同蛋白質(zhì)混合液,在哪種pH條件下電泳分離效果最好?A.pH3.5B.pH4.9C.pH5.9D.pH6.5E.pH8.630.蛋白質(zhì)變性是由于A.蛋白質(zhì)空間構(gòu)象破壞B.蛋白質(zhì)水解C.肽鍵斷裂D.氨基酸組成改變E.氨基酸排列順序改變31.蛋白質(zhì)所形成的膠體顆粒,在下列哪種條件下不穩(wěn)定A.溶液pH值大于pI溶液pH值小于pl溶液pH值等于plD.溶液pH值等于7.4E.在水溶液中32.變性蛋白質(zhì)的主要特點是A.黏度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解D.生活學(xué)活性喪失E.容易被鹽析出沉淀33.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是A.中和電荷B.去掉水化膜C.蛋白質(zhì)變性D.中和電荷和去掉水化膜E.蛋白質(zhì)凝固34.若用重金屬沉淀pl為8的蛋白質(zhì)時該溶液的pH值應(yīng)為A.8C.V8D.W8E.N8從組織提取液沉淀活性蛋白而又不使之變性的方法是加入A.高濃度HCl B.硫酸銨C.三氯醋酸 D.氯化汞E.鎢酸下列哪種方法不能將谷氨酸和賴氨酸分開?A.電泳 B.陽離子交換層析C.陰離子交換層析 D.紙層析E.凝膠過濾下列蛋白質(zhì)通過凝膠過濾層析柱時最先被洗脫的是A.過氧化氫酶(分子量247500) B.肌紅蛋白(分子量16900)C.血清清蛋白(分子量68500) D.牛B-乳球蛋白(分子量35000)E.牛胰島素(分子量5700)有一蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物在pH6用陽離子交換劑層析時,第一個被洗脫下來的氨基酸是A.纈氨酸(pI5.96) B.精氨酸(pI10.76)C.賴氨酸(pI9.74) D.酪氨酸(pI5.66)E.天冬氨酸(pI2.77)下列關(guān)于人胰島素的敘述哪項是正確的?由60個氨基酸殘基組成,分為A、B和C三條鏈由51個氨基酸殘基組成,分為A和B兩條鏈由46個氨基酸組成,分為A和B兩條鏈D.由65個氨基酸組成,分為A、B、C三條鏈E.由86個氨基酸組成,分為A和B兩條鏈下列關(guān)于HbA的敘述哪項是正確的?A.是由2a和2B亞基組成 B.是由2a和2Y亞基組成C.是由2B和2y亞基組成 D.是由2B和25亞基組成E.是由2a和25亞基組成鐮刀型紅細(xì)胞性貧血是由于HbA的結(jié)構(gòu)變化引起的,其變化的特點是HbA的a鏈的N-末端第六位谷氨酸殘基被纈氨酸所取代HbA的a鏈的C-末端第六位谷氨酸殘基被纈氨酸所取代
HbA的B鏈的N-末端第六位谷氨酸殘基被纈氨酸所取代HbA的B鏈的C-末端第六位谷氨酸殘基被纈氨酸所取代以上都不是二、多項選擇題穩(wěn)定蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用力是B.疏水鍵DB.疏水鍵D.二硫鍵B.含氮量約為16%D.由a氨基酸組成B.谷氨酸D.亮氨酸C.鹽鍵E.范得華引力關(guān)于蛋白質(zhì)基本組成正確的是A.由C、H、O、N等多種元素組成C.可水解成肽或氨基酸E?組成蛋白質(zhì)的氨基酸均為D型下列哪些氨基酸具有親水側(cè)鏈?A.絲氨酸C.蘇氨酸E.苯丙氨酸蛋白質(zhì)在280nm波長處的最大光吸收是由下列哪些氨基酸引起?B.色氨酸DB.色氨酸D.賴氨酸B.B片層。.雙螺旋B.溶解度不同D.粘度不同C.酪氨酸E.纈氨酸蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)包括A.a螺旋C.B轉(zhuǎn)角E.以上都是分離純化蛋白質(zhì)主要根據(jù)哪些性質(zhì)?A.分子的大小和形狀C.電荷不同E.以上都是含硫氨及酸包括
A.蛋氨酸C.組氨酸E.絲氨酸下列哪些是堿性氨基酸A.組氨酸C.精氨酸E.谷氨酸芳香族氨基酸是A.苯丙氨酸C.色氨酸E.組氨酸B.蘇氨酸D.半胱氨酸B.B.蘇氨酸D.半胱氨酸B.蛋氨素D.賴氨酸B.酪氨酸D.脯氨酸A.是一種伸展的肽鏈結(jié)構(gòu)B.肽鍵平面折疊成鋸齒狀C.兩鏈間形成離子鍵維持穩(wěn)定 D.可由兩條以上多肽鏈順向或逆向排列而成E.以上都正確下列哪種蛋白質(zhì)在pH5的溶液中帶正電荷?A.pI為A.pI為4.5的蛋白質(zhì)C.pI為3.4的蛋白質(zhì)E.pI為6.5的蛋白質(zhì)使蛋白質(zhì)沉淀但不變性的方法有A.中性鹽沉淀蛋白質(zhì)C.低溫乙醇沉淀蛋白質(zhì)E.以上方法均可以變性蛋白質(zhì)的特性有A.凝固C.溶解度顯著下降E.易被蛋白酶水解14.谷胱甘肽A.可用GSSG表示其還原型C.可進行氧化還原反應(yīng)B.pl為7.4的蛋白質(zhì)D.pl為7的蛋白質(zhì)鞣酸沉淀蛋白質(zhì)重金屬鹽沉淀蛋白沉淀生物學(xué)活性喪失B.由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成GSH具有解毒作用由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸組成下列哪些方法可用于蛋白質(zhì)的定量測定?A.Folin酚試劑法 B-雙縮脲法紫外吸收法 D.茚三酮法考馬斯亮藍(lán)法關(guān)于蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的敘述,下列哪項是正確的?A.親水基團及可解離基團位于表面 B.親水基團位于內(nèi)部疏水基團位于內(nèi)部 D.羧基多位于內(nèi)部球狀蛋白質(zhì)分子表面的洞穴常常是疏水區(qū)三、填空題組成蛋白質(zhì)的主要元素有,,,。在各種蛋白質(zhì)中含量相近的元素是,測得蛋白質(zhì)樣品中其含氮量為12.8克,樣品中蛋白質(zhì)含量彳克。蛋白質(zhì)的具有兩性電離性質(zhì),當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于某一pH值溶液中時,它所帶的正負(fù)電荷數(shù)相等,此時的蛋白質(zhì)成為,該溶液的pH值稱為蛋白質(zhì)的。蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是指在蛋白質(zhì)多肽鏈中的、。在蛋白質(zhì)分子中,一個氨基酸的a碳原子上的與另一個氨基酸a碳原子上的脫去一分子水形成的鍵叫,它是蛋白質(zhì)分子中的基本結(jié)構(gòu)鍵。蛋白質(zhì)顆粒表面的和是蛋白質(zhì)親水膠體穩(wěn)定的兩個因素。蛋白質(zhì)變性主要是因為破壞了維持和穩(wěn)定其空間構(gòu)象的各種鍵,使天然蛋白質(zhì)原有的與性質(zhì)改變。穩(wěn)定蛋白質(zhì)的次級鍵包括、、等。構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸有種,其中堿性氨基酸有、、;酸性氨基酸有、。在pH6.0時將一個丙、精、谷3種氨基酸的混合液進行紙上電泳,移向正極的,移向負(fù)極的是,原點的是。球狀蛋白質(zhì)中有側(cè)鏈的氨基酸殘基常位于分子而與水結(jié)合。HbS與HbA的區(qū)別在于HbA的鏈的端的位的殘基被殘基所取代。沉淀蛋白質(zhì)的主要方法有:由一條多肽鏈組成的蛋白質(zhì)沒有,由幾條多肽鏈通過連接的蛋白質(zhì)也沒有一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。標(biāo)準(zhǔn)氨基酸中,含羥基的氨基酸是:、、。標(biāo)準(zhǔn)氨基酸中,、、是芳香族氨基酸。按照分子形狀分類,蛋白質(zhì)分子形狀的長短軸之比小于10的稱為,蛋白質(zhì)分子形狀的長短之比大于10的稱為。按照組成成分分類,分子組成中僅含氨基酸的稱,分子組成中除了蛋白質(zhì)部分還有非蛋白質(zhì)部分的稱,其中非蛋白質(zhì)部分稱。四、名詞解釋標(biāo)準(zhǔn)氨基酸等電點肽鍵肽肽鍵平面多肽氨基酸殘基蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)a—螺旋超二級結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)域亞基分子病蛋白質(zhì)的變性透析鹽析蛋白質(zhì)的沉淀蛋白質(zhì)的凝固層析電泳沉降系數(shù)茚三酮反應(yīng)離子交換層析凝膠過濾層析28.親和層析凝膠電泳SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳等電聚焦電泳雙向電泳五、問答題1.組成蛋白質(zhì)的元素和基本單位分別是什么?分別有何特點?何謂蛋白質(zhì)的兩性解離?蛋白質(zhì)的一、二、三、四級結(jié)構(gòu)及其維持各級結(jié)構(gòu)的作用力是什么?如果一個人發(fā)高燒(40°C以上)幾小時就會發(fā)生細(xì)胞內(nèi)部可逆的損傷。對這種高溫?fù)p傷有一種可能的解釋是什么?什么是蛋白質(zhì)的變性作用?引起蛋白質(zhì)變性的因素有哪些?有何臨床意義?沉淀蛋白質(zhì)的主要方法有哪些?各有何特點?組成蛋白質(zhì)的氨基酸只有20種,為什么蛋白質(zhì)的種類卻極其繁多?變性后蛋白質(zhì)有何特點?舉例說明蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。舉例說明蛋白質(zhì)構(gòu)象與功能的關(guān)系。比較蛋白質(zhì)的沉淀與變性。簡述a螺旋的結(jié)構(gòu)特點。簡述離子交換層析的原理。簡述凝膠過濾層析的原理。參考答案一、單項選擇題1.E2.C3.B4.A5.D6.A7.D8.E9.C10.B11.A12.E13.B14.C15.D16.B17.C18.D19.E20.A21.B22.B23.E24.E25.C26.A27.D28.D29.C30.A31.C 32.D 33.D41.C二、多項選擇題1.ABCDE5.ABC9.ABC13.CDE34.B 35.B2.ABCD6.ABC10.ABD14.BCD36.E37.A38.E3.ABC7.AD11.BDE15.ABCE39.B40.A4.BC8.ACD12.AC16.ACE三、填空題CHONN80兼性離子等電點氨基酸組成排列順序羧基氨基肽鍵同種電荷水化膜次級生物學(xué)活性物理化學(xué)氫鍵鹽鍵疏水鍵20精氨酸組氨酸賴氨酸谷氨酸天冬氨酸谷氨酸精氨酸丙氨酸極性表面BN六谷氨酸纈氨酸鹽析有機溶劑沉淀法重金屬鹽沉淀法生物堿試劑沉淀法四級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu)基本空間絲氨酸蘇氨酸酪氨酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸球狀蛋白纖維狀蛋白單純蛋白結(jié)合蛋白輔基四、名詞解釋1.具有相應(yīng)的遺傳密碼、用于合成蛋白質(zhì)的20種氨基酸。當(dāng)氨基酸或蛋白質(zhì)在溶液中所帶正負(fù)電荷相等時,此時溶液的pH值即氨基酸或蛋白質(zhì)的等電點。一個氨基酸的a羧基與另一氨基酸的a氨基脫水縮合形成的酰胺鍵。氨基酸通過肽鍵連接而成的化合物由于肽鍵具有部分雙鍵的性質(zhì),使得與肽鍵相連的6個原子(CCONHC)構(gòu)成一個剛性的平面。多個氨基酸分子縮合而成的肽多肽鏈中每個氨基酸單位多肽鏈中氨基酸的組成和排列順序蛋白質(zhì)分子中由于肽鍵平面的相對旋轉(zhuǎn)構(gòu)成的局部空間構(gòu)象在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,多肽鏈中相距較遠(yuǎn)的側(cè)鏈通過相互作用進一步盤繞而成的特定空間構(gòu)象,包括主鏈和側(cè)鏈所有原子的空間排布。兩條或兩條以上具有獨立三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈,通過非共價鍵連接形成的空間構(gòu)象。肽鍵平面圍繞a碳原子的旋轉(zhuǎn)而形成的右手螺旋。2個或3個二級結(jié)構(gòu)肽段在空間上進一步聚集和組合形成的空間結(jié)構(gòu),又稱模體。超二級結(jié)構(gòu)的進一步組合、折疊,形成緊密、穩(wěn)定而且在蛋白質(zhì)分子構(gòu)象上明顯可區(qū)分的、相對獨立的區(qū)域性結(jié)構(gòu)。在蛋白質(zhì)分子的四級結(jié)構(gòu)中,具有獨立三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈為一個亞基。由于蛋白質(zhì)分子的變異或缺失而產(chǎn)生的疾病在理化因素的作用下,使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)破壞,導(dǎo)致理化性質(zhì)改變和生物學(xué)活性喪失的過程。用半透膜將大小分子分開的方法在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的中性鹽使蛋白質(zhì)從溶液中析出沉淀的方法蛋白質(zhì)分子相互聚集從溶液中析出的現(xiàn)象21.蛋白質(zhì)發(fā)生熱變性后,多肽鏈相互纏繞形成固體狀態(tài)的過程。按照在移動相(可以是氣體或液體)和固定相(可以是液體或固體)之間的分配比例將混合成分分開的技術(shù)。帶電粒子在電場中向相反電極移動的現(xiàn)象對于特定蛋白質(zhì)顆粒,其在重力場中的沉降速度與離心加速度之比為一常數(shù),稱為沉降系數(shù)。在加熱條件下,氨基酸或肽與茚三酮反應(yīng)生成紫色(與脯氨酸反應(yīng)生成黃色)化合物的反應(yīng)。使用帶有固定的帶電基團的聚合樹脂或凝膠層析柱分離離子化合物的層析方法也叫做分子排阻層析(molecular-exclusionchromatography)o一種利用帶孔凝膠珠作基質(zhì),按照分子大小分離蛋白質(zhì)或其它分子混合物的層析技術(shù)。利用共價連接有特異配體的層析介質(zhì)分離蛋白質(zhì)混合物中能特異結(jié)合配體的目的蛋白或其它分子的層析技術(shù)。以凝膠為介質(zhì),在電場作用下分離蛋白質(zhì)或核酸等分子的分離純化技術(shù)。在有去污劑十二烷基硫酸鈉存在下的聚丙烯酰胺凝膠電泳。SDS只是按照分子大小分離的,而不是根據(jù)分子所帶的電荷和大小分離的。利用特殊的一種緩沖液(兩性電解質(zhì))在聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)制造一個pH梯度,電泳時每種蛋白質(zhì)就將遷移到它的等電點(pI)處,即梯度中的某一pH時,就不再帶有凈的正或負(fù)電荷了。是等電聚焦電泳和SDS的組合,即先進行等電聚焦電泳(按照pI分離),然后再進行SDS(按照分子大?。?,經(jīng)染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質(zhì)圖。五、問答題組成蛋白質(zhì)的元素有碳、氫、氧、氮和硫等,其中氮是蛋白質(zhì)的特征性元素,平均含量為16%。氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸,都屬于L-a-氨基酸(甘氨酸除外)。蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。在蛋白質(zhì)分子可解離的基團中,除每條肽鏈上的氨基末端和羧基末端外,還有側(cè)鏈上可解離基團。蛋白質(zhì)分子在溶液中的解離程度,取決于其分子上酸性基團和堿性基團的相對比例,以及溶液pH的影響。在酸性較強的溶液中,蛋白質(zhì)分子解離成正粒子;在堿性較強的溶液中,蛋白質(zhì)分子解離成負(fù)離子。這種現(xiàn)象稱蛋白質(zhì)的兩性解離。一級結(jié)構(gòu)是指多肽鏈中氨基酸的組成和排列順序;二級結(jié)構(gòu)是指肽鍵平面的相對旋轉(zhuǎn)所形成的空間結(jié)構(gòu);三級結(jié)構(gòu)是指在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進一步盤繞折疊所形成的空間構(gòu)象;四級結(jié)構(gòu)是指亞基間的相互作用形成的空間結(jié)構(gòu)。維持蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的作用力是肽鍵;維持二級結(jié)構(gòu)的作用力使氫鍵;維持三級結(jié)構(gòu)的作用力是氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華力、二硫鍵;維持四級結(jié)構(gòu)的作用力是氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華力。高溫可以引起蛋白質(zhì)(酶)的變性,導(dǎo)致細(xì)胞生化反應(yīng)能力的損傷。在某些理化因素作用下,使蛋白質(zhì)嚴(yán)格的空間結(jié)構(gòu)破壞,引起蛋白質(zhì)理化性質(zhì)改變和生物學(xué)活性喪失的現(xiàn)象。引起蛋白質(zhì)變性的因素有:物理因素,如紫外線照射、加熱煮沸等;化學(xué)因素,如強酸、強堿、重金屬鹽、有機溶劑等。臨床上常常利用加熱或某些化學(xué)士及使病原微生物的蛋白質(zhì)變性,從而達(dá)到消毒的目的,在分離、純化或保存活性蛋白質(zhì)制劑時,應(yīng)采取防止蛋白質(zhì)變性的措施。沉淀蛋白質(zhì)的主要方法有:鹽析、有機溶劑沉淀、重金屬鹽沉淀、生物堿試劑沉淀。鹽析特點:利用中性鹽破壞蛋白質(zhì)的膠體穩(wěn)定性(電荷和水化膜)而使其從溶液中析出。蛋白質(zhì)不變性。不同蛋白質(zhì)鹽析時所需鹽的濃度不同,故可用逐漸加大鹽濃度的辦法使溶液中混合的蛋白質(zhì)先后分離不發(fā)生變性(分段鹽析)。有機溶劑沉淀的特點:與水親和性強,破壞蛋白質(zhì)表面的水化膜,但不能中和電荷,因此需在等電點附近沉淀蛋白質(zhì),且在低溫下進行以防止蛋白質(zhì)變性。重金屬鹽沉淀的特點:調(diào)節(jié)溶液pH大于蛋白質(zhì)的等電點,蛋白質(zhì)帶負(fù)電,與重金屬結(jié)合而沉淀,一般使蛋白質(zhì)變性。生物堿試劑沉淀特點:調(diào)節(jié)溶液?日小于蛋白質(zhì)的等電點,蛋白質(zhì)帶正電,與某些酸的酸根結(jié)合而沉淀,一般使蛋白質(zhì)變性。組成蛋白質(zhì)的氨基酸雖然只有20種,但由于氨基酸在蛋白質(zhì)多肽鏈中的種類、數(shù)目、比例、排列順序及組合方式的不同,所以可構(gòu)成種類繁多,結(jié)構(gòu)各異的蛋白質(zhì)。(1)生物學(xué)活性喪失(2)溶解度下降(3)易形成沉淀(4)易被蛋白酶水解蛋白質(zhì)特定的構(gòu)象和功能是由其一級結(jié)構(gòu)所決定的。多肽鏈中各氨基酸殘基的數(shù)量、種類及它們在肽鏈中的順序主要從兩方面影響蛋白質(zhì)的
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