動物疫病免疫抗體血清學(xué)檢測方法-血凝實驗與血凝抑制實驗(獸醫(yī)實驗室診斷技術(shù))_第1頁
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文檔簡介

血凝和血凝抑制實驗CONTENTS01血凝實驗02血凝抑制實驗原理Part-1血凝實驗一血凝與血凝抑制實驗(禽流感和雞新城疫):用已知抗原來檢測被檢血清中有無相應(yīng)的特異性抗體和滴定該特異性抗體的水平。血凝試驗:某種病毒的血凝素,能使雞、鵝或人的紅細(xì)胞發(fā)生凝集,叫做血凝試驗,也稱直接血凝反應(yīng),利用這種特性設(shè)計的試驗稱血凝試驗(HA)。常見于正粘病毒(禽流感)、副粘病毒(新城疫)和某些黃病毒、痘病毒等。

目的:測定病毒的血凝效價,通常采用4個血凝單位血凝實驗一刺突:亞型特異性抗原,易變異血凝素(HA,從H1—H15):呈柱狀

功能:①吸附細(xì)胞:與細(xì)胞上受體結(jié)合,使病毒侵入細(xì)胞②凝集多種動物的紅細(xì)胞(血凝試驗)③具抗原性:其抗體能中和病毒---中和抗體抑制血凝(血凝抑制試驗)血凝素(HA)柱狀原理一血凝實驗(HA)原理血凝抑制實驗Part-2血凝抑制實驗二血凝抑制試驗:當(dāng)病毒的懸液中先加入特異性抗體,且這種抗體的量足以抑制病毒顆?;蚱溲?,則紅細(xì)胞表面的受體就不能與病毒顆粒或其血凝素直接接觸。這時紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象就被抑制,稱為紅細(xì)胞凝集抑制反應(yīng),也稱血凝抑制反應(yīng),利用這種特性設(shè)計的試驗稱血凝抑制試驗(HI)。該試驗是目前WHO進(jìn)行全球流感監(jiān)測所普遍采用的試驗方法。目的:

檢測有無病毒感染和免疫狀態(tài)。血凝抑制實驗二血凝抑制試驗(HI)原理:病毒的懸液中加入特異性抗體,紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象被抑制,稱為紅細(xì)胞的血凝抑制。操作方法二血凝抑制試驗結(jié)果判定以完全抑制紅細(xì)胞凝集的血清最大稀釋度為該血清的HI滴度(注:看結(jié)果時96孔板傾斜45度)。確定度數(shù)的孔要與前一孔的流速及形狀完全一樣,即淚珠樣流掛。讀數(shù)要快,可以讀到結(jié)束,一組(一板)時間不要超過30秒。操作方法二血凝抑制效價:能完全抑制紅細(xì)胞凝集的最高血清稀釋度即為血清的血凝抑制效價臨床意義:禽流感:免疫21天后H

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