高考生物真題分類匯編2019版十五：生物技術(shù)實踐

1.(2019北京卷?3)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若

細菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖)，實

驗結(jié)果見下表。

菌種菌落直徑：C(mm)透明圈直徑：H(mm)H/C

細菌15.111.22.2

細菌II8.113.01.6

有關(guān)本實驗的敘述，錯誤的是

A.培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)

B.篩選分解淀粉的細菌時，菌液應(yīng)稀釋后涂布

C.以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外

D.H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異

【答案】C

【解析】

【分析】該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生

物分解淀粉后，會產(chǎn)生透明圈。

【詳解】培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀

粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體

培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)

生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；H/C越大，說明該淀粉分解菌分解淀粉的能

力越強，D正確。因此，本題答案選C?

2.（2019江蘇卷-9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是

A.利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵

B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵

C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反

D.毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵

【答案】B

【解析】

【分析】

制作果酒的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，制作酸奶的乳酸菌屬于厭氧菌，只能

在無氧條件下繁殖，制作果醋的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需養(yǎng)型；腐乳是用豆腐發(fā)酵制

成，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達的白

色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的

肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

【詳解】乳酸菌是一種嚴格的厭氧菌，有氧氣存在時，其發(fā)酵會受到抑制，因此利用乳

酸菌制作酸奶的過程中，應(yīng)--致處于密閉狀態(tài)，否則會導致發(fā)酵失敗，A錯誤；家庭制作

果酒、果醋與腐乳過程中所用的菌種均來源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過程，因

此均不是純種發(fā)酵，B正確；果醋制作過程中，醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二

氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低；果酒制作過程

中，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的

增加，溶液的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，C錯誤；

毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯誤。

3.（2019江蘇卷?10）下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯誤的是

A.用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近

B.DNA析出過程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂

C.預冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA

D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱

【答案】A

【解析】

【分析1DNA粗提取選材的標準：DNA含量高，并且材料易得.由于哺乳動物成熟的紅細

胞中沒有細胞核和細胞器，因此不采用哺乳動物的血液。

DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶

液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但

細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇

二苯胺會被染成藍色。

【詳解】兔屬于哺乳動物，其紅細胞沒有細胞核及各種細胞器，提取不到DNA,而雞屬

于鳥類，其紅細胞內(nèi)含有細胞核與各種細胞器，DNA含量較多，A錯誤；DNA分子從細胞

中被釋放出來且除去蛋白后是非常容易斷裂的，如果太過劇烈的攪拌，DNA鏈可能會被破

環(huán)，因此輕柔攪拌的目的是為了獲得較完整的DNA分子，B正確；在冷的95%酒精溶液中

DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大。如果用熱的95%酒精會提高DNA的溶解度,不能

完全使DNA沉淀，C正確；將析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試

劑后需要水浴加熱才會呈現(xiàn)藍色，D正確。

4.（2019江蘇卷?13）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯誤的是

A.加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶

B.用加酶洗滌劑能減少洗滌時間并節(jié)約用水

C.含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物

D.加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對耐高溫的

【答案】A

【解析】

【分析】

加酶洗衣粉指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉

酶和纖維素酶。其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

【詳解】加酶洗衣粉中應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶，A錯誤；

加酶洗衣粉含酶制劑，酶具有高效性，故可以節(jié)約洗滌時間，B正確；棉織物的主要成分是

纖維素，纖維素酶可以使織物更蓬松，有利于洗去污漬，C正確；科學家通過基因工程生

產(chǎn)出了耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和較高溫度的酶，制作加酶洗衣粉，D正確。故選

A?

5.（2019江蘇卷?19）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運用的敘述，不合理的是

A.篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)

B.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌

C.在分離平板上長出的菌落需進一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力

D.用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價值

【答案】A

【解析】

【分析】

纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖甘酶，前兩種酶使纖維素分解成纖

維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

【詳解】應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，只有纖維素分解菌能

夠存活，A錯誤；木材、秸稈中富含纖維素，故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖

維素酶菌，B正確；用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，為了確定得到

的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，C正確；用產(chǎn)纖維素醵菌發(fā)酵處

理農(nóng)作物秸稈，可以把纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價值，D正確。故選Ao

6.（2019江蘇卷-20）為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實

驗過程如下圖。下列敘述正確的是

A

)

2

懸浮原生質(zhì)體愈傷組織叢生芽)

A.過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在3096蔗糖溶液中

B.過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化

C.過程③需用秋水仙素處理誘導細胞壁再生

D.原生質(zhì)體雖無細胞壁但仍保持細胞的全能性

【答案】D

【解析】

【分析】

由圖可知，①用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③再分化。

【詳解】原生質(zhì)體在30%的蔗糖溶液中會失水皺縮，A錯誤；②誘導芽分化時，需要提高細

胞分裂素的比例，B錯誤；③可以表示誘導根的分化形成幼苗，此時細胞壁已經(jīng)形成，C錯

誤；原生質(zhì)體無細胞壁，但由于含有一整套的遺傳物質(zhì)，故具有全能性，D正確。故選

D,

【點睛】植物組織培養(yǎng)時植物激素處理的不同處理：生長素與細胞分裂素比例適中時，

有利于愈傷組織的形成；生長素/細胞分裂素比例升高，利于根的分化；生長素/細胞分

裂素比例降低，利于芽的分化。

7.（2019全國卷I?37）

已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種

培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標菌）。

I號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基中加入x(5g/L).

II號培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L)，硝酸鏤(3g/L),其他無機鹽(適量)，X(15g/L)。

HI號培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L),硝酸鐵(3g/L),其他無機鹽(適量)。X(45g/L)?

回答下列問題。

(1)在I號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是。JI、III號培養(yǎng)基中為微生

物提供碳源的有機物是。

(2)若將土壤懸浮液接種在II號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比

例會,其原因是。

(3)II號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并

對菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是.

(4)假設(shè)從IH號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則

在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供和o

【答案】(1)牛肉膏、蛋白陳X

②下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖

(3)稀釋涂布平板法

④能量合成其他物質(zhì)的原料

【解析】

【分析】

1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止

其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題

中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是有機物X,這樣能分解X的微生物能夠從該有機物獲得

碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不能生存。

2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌

液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培

養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細

胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用稀釋涂布平板法。

【詳解】（1）氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生

長提供氮元素，牛肉膏、蛋白陳來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因

此在1號培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白陳。碳源也是微生物生長所需要

的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳元素，而有機物均含碳元素，n、III號培養(yǎng)基均

含有有機物X,因此，II、III號培養(yǎng)基為微生物的生長提供碳源的均為有機物X。

②由于II號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機物X,因此若將土壤懸浮液接種在II號液

體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導致其比

例減少。

（3）微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂

布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液

中的一個活菌繁殖而來，所以常用來進行微生物的計數(shù)。

④丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)

合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料

【點睛】選擇培養(yǎng)基能選擇特定的微生物。微生物的接種方法有多種，其中稀釋涂布平板

法常用來進行微生物的計數(shù)。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、碳源、氮源、無機鹽等。

8.（2019全國卷II?37）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定

量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）?；?/p>

答下列問題。

（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是o

（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成

菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應(yīng)該選擇菌落進一步純化，選擇

的依據(jù)是。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定

甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結(jié)果和結(jié)

論，即。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。

為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)

容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度

天然酶的緩沖液，C處滴加,三處滴加量相同。

②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明；若

A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明。

【答案】（1）W

⑵乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W

（3）將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空

氣中的氮氣作為氮源

⑷①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近

【解析】

【分析】篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W、物理因素的抗性

而設(shè)計的，能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目

標菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。

【詳解】（I）該研究小組的目標菌是能夠降解物質(zhì)W的細菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機

物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。

⑵研究小組的目標菌，是能夠降解物質(zhì)W的細菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明

圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)肌故乙菌落為該小組的目標細菌。

（3）目標菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠

在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙菌分別接種在

無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。

④①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C

處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處

不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)M若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說

明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。

【點睛】本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對不同要求的目標菌種，選擇不同物質(zhì)配

制不同篩選作用的培養(yǎng)基。并且要求學生理解識別目標菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)

果。

9.（2019全國卷m?37）回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。

（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是

（填“蛋白陳”“葡萄糖”或“NaNCV'）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細

菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的陰，其原因是o硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上

（填“能夠”或“不能”）生長，原因是

_______________________________________________________________________O

（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。

（3）單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特

征來初步區(qū)分不同種的微生物,原因是____________________________________

____O

（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過處理，這種處理可以

殺死丟棄物中所有的微生物。

【答案】（1）蛋白陳不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠

硝化細菌可以利用空氣中的CO?作為碳源

⑵倒置

（3）在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征

（4）滅菌

【解析】

【分析】1、微生物培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：①各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有

水、碳源、氮源和無機鹽；②不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以

及氧氣的要求。

2、配制牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的注意事項：①倒平板的溫度一般50℃左右適宜，溫

度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固；②平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好

地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

【詳解】（1）葡萄糖只能為細菌提供碳源，硝酸鈉為細菌提供無機鹽，而蛋白陳既可以為

細菌碳源，也可以為細菌提供氮源；由于不同的細菌生長繁殖的最適宜pH是不同的，因

此制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)的細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型

微生物，其可以利用氫氧化釋放的能量將空氣中的二氧化碳固定為有機物，因此硝化細菌

可以在無碳培養(yǎng)基中生長。

（2）用平板培養(yǎng)細菌時，一般需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，

造成污染。

（3）由于每一大類微生物都有其獨特的細胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此

根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

（4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境。

【點睛】解答本題的關(guān)鍵是識記微生物培養(yǎng)基的成分、培育條件、培養(yǎng)過程以及注意事

項，能夠根據(jù)不同微生物的代謝類型判斷其所需營養(yǎng)成分的種類，進而結(jié)合題干要求分

析答題。

10.（2018江蘇卷16,2分）某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究，下列

敘述錯誤的是

A.夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進行降溫處理

B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大

C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓

D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵

1.B葡萄酒發(fā)酵的原理是酵母菌的無氧呼吸，即葡萄糖在無氧條件下分解產(chǎn)生二氧化碳和

酒精并釋放少量的能量，發(fā)酵的溫度在18℃-25℃,因此夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進行降

溫處理，A正確；乙醇是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物，因此分解過程中不需要通入空氣，B錯誤；無

氧呼吸產(chǎn)生了二氧化碳，但是沒有消耗氧氣，因此發(fā)酵罐中的氣壓不會低于大氣壓，C正確；葡萄

酒發(fā)酵的原料是糖類，因此可以通過監(jiān)測發(fā)酹過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵，D正

確。

【點睛】解答本題的關(guān)鍵是了解與掌握果酒發(fā)酵的原理，明確無氧呼吸沒有消耗氧氣，但是產(chǎn)

生了二氧化碳，因此發(fā)酵罐中的氣壓可能升高。

11.（2018江蘇卷21,3分）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯誤的是

A.洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來

B.洗衣粉中的蛋白酶通常會將添加的其他酶迅速分解

C.在50。。熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶會迅速失活

D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不會影響其中酶的活性

2.BCD加配洗衣粉中加入的酶多是微生物發(fā)酵產(chǎn)生的，其本質(zhì)與生物體內(nèi)的酶無明顯差異，A

正確；洗衣粉中的蛋白酶通常不會將添加的其他酶迅速分解，這是因為加酶洗衣粉中的酶經(jīng)過了

特殊的化學物質(zhì)的包裹，使之與其他成分隔離，這些酶在遇水后，包裹層分解，酶才能發(fā)揮作用，B

錯誤；加酶洗衣粉的川值一般不大于10,在水溫45?60℃時，能充分發(fā)揮洗滌作用，因此在

50℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶不會失活，C錯誤；加酶洗衣粉受潮后重新晾干保

存，會導致其中酶的活性降低，D錯誤。

【點睛】解答本題的關(guān)鍵是了解加酶洗衣粉中酶制劑的種類以及作用機理，明確酶的來源、

酶的特殊處理以及影響酶活性的因素。

12.（2018全國卷I,15分）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出

液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。

回答下列問題：

（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長,加入了

鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。

（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外

還有（答出兩點即可）。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有

（答出兩點即可）。

（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯

色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微

生物的原理是。

（4）甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)

下得到以下結(jié)果：

甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學涂

布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學的

結(jié)果中，乙同學的結(jié)果可信度低,其原因是。

3.（1）細菌（1分）選擇（2分）（2）碳源、無機鹽（2分）蛋白質(zhì)、核酸（2分）（3）

碘液（2分）淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈（3分）

（4）乙同學的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復性差（3分）

【解析】本題考查微生物培養(yǎng)中選擇培養(yǎng)基的作用、培養(yǎng)基的營養(yǎng)耍素及作用、微生物的計

數(shù)等知識。（1）在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微

生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用于真菌的篩選，則應(yīng)加入鏈霉素以

抑制細菌的生長，其屬于選擇培養(yǎng)基。（2）馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無機

鹽、水等多種物質(zhì)，因此，除氮源外其中還有微生物生長所需要的碳源、無機鹽等營養(yǎng)要素。進入

細胞的氮源可參與合成蛋白質(zhì)、核酸（DNA、RNA）等含氮的生物大分子。（3）加入顯色劑碘液

后，淀粉遇碘變藍，而淀粉的水解產(chǎn)物則不發(fā)生這種反應(yīng)。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接

種土壤濾液并培養(yǎng)，土壤中能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉分解，菌落周圍就會出現(xiàn)透明圈，這

樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選能產(chǎn)淀粉酶的微生物了。（4）乙同學的結(jié)果中，1個

平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，結(jié)果的重復性太差，不

能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。

【高分必備】從近幾年高考對選修一的考查情況看，設(shè)題的靈活性越來越高。單純死記硬背

已經(jīng)很難在高考中取勝，想取得高分需要從以下幾方面下功夫：（1）實驗盡量做；（2）多

問為什么；（3）討論要常態(tài)。另外，必修知識中的實驗設(shè)計方法要在選修知識中多運用，

多反思，這樣才能應(yīng)對日益多變的選修試題。

13.（2018全國卷H,15分）在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污

染。

回答下列問題：

（1）在實驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具（填“可以”或“不可以”）放入干

熱滅菌箱中進行干熱滅菌。

⑵牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點

是一。

⑶密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能。在照射前,適

量噴灑,可強化消毒效果。

⑷水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過（填“氯氣”“乙醇”或“高鐳酸鉀”）消毒的。

⑸某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度,最

可能的原因是。

4.（1）可以（2分）（2）在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少（3分）（3）破壞DNA

結(jié)構(gòu)（3分）消毒液（2分）（4）氯氣（2分）（5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡（3分）

【解析】本題主要考查生產(chǎn)、生活和科研中的消毒滅菌方法及其原理。（1）在實驗室中,

能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬材質(zhì)的實驗器具等可以放入干熱滅菌

箱中進行干熱滅菌。（2）巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點表現(xiàn)為在

達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。（3）紫外線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生

物細胞中的DNA分子。在利用紫外線照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強

化消毒效果。（4）自來水通常采用氯氣消毒。（5）采用高壓蒸汽滅菌時，若壓力達到設(shè)定要

求，而溫度未達到相應(yīng)要求，最可能的原因是沒有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。

14.（2018全國卷HI,15分）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：

I分離培養(yǎng)酵母菌通常使用（填“牛肉膏蛋白陳”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)

基,該培養(yǎng)基應(yīng)采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后

可觀察到菌落,菌落的含義是?

T酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣，可促進（填"菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或

“乳酸產(chǎn)生”）；若進行厭氧培養(yǎng),可促進（填"菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳

酸產(chǎn)生

X制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的

原因是o

5.（1）麥芽汁瓊脂（3分）高壓蒸汽（2分）由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細

胞群體（3分）（2）菌體快速增殖（2分）乙醇產(chǎn)生（2分）（3）酵母菌分解葡萄

糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟（3分）

【解析】本題考查酵母菌代謝及微生物培養(yǎng)。（1）酵母菌為異養(yǎng)型生物，通常使用麥芽

汁瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細

胞群體稱為菌落。（2）酵母菌為兼性厭氧型生物，有氧條件利于其繁殖，無氧條件下其進行

酒精發(fā)酵。（3）酵母菌分解葡萄糖可產(chǎn)生二氧化碳，使面包松軟多孔。

15.（2018江蘇31,8分）酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有

些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人

員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進行大量培養(yǎng)。如圖所示為操作流程,請回答下列問題：

⑴配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基

的及時對培養(yǎng)基進行分裝,并進行滅菌。

（2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟③中將溫度約

（在25℃、50℃或80C中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。

⑶挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的

有一。

a.為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.

劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落

c.挑取菌落時,應(yīng)挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量

d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株

（4）步驟⑤中,為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和供應(yīng).為

監(jiān)測酵母的活細胞密度,將發(fā)酵液稀釋1000倍后,經(jīng)等體積臺吩藍染液染色,用25X16型血

細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù)，理論上色細胞的個數(shù)應(yīng)不少

于，才能達到每毫升3X109個活細胞的預期密度。

6.（除標明外，每空1分）（l）pll高壓蒸汽（濕熱）（2）50℃（3）a、b、d（4）氧氣無

30（2分）【解析】本題考查培養(yǎng)基的配制與滅菌，微生物的培養(yǎng)與分離等知識。（1）配

制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準確稱取各組分，之后溶解定容，再調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,一般情

況下，采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。（2）對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌后，需將溫

度降至50℃左右后倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。（3）在對酵母菌進行劃線純化時，為

保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌；且在劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以

免不能形成正常菌落本實驗是為了獲得能以工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母，故在實驗過程中可

以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇耐受株。（4）酵母菌是兼性厭氧型真菌，有氧

條件下大量繁殖。酵母菌擴大培養(yǎng)時，需保證充足的營養(yǎng)和氧氣供應(yīng)?！坝玫润w積臺盼藍染

液染色”，即計數(shù)室中培養(yǎng)液體積實際只有0.1+2=0.05mm：',設(shè)5個中方格中無色（活細胞

不被臺盼藍染色）的細胞數(shù)目為X個，則3X10"=x/5X25X1000X1000+0.05,解得六30。

【規(guī)律總結(jié)】

一個大方格

藍翌臼

一個小

細,X域

每個大格面積為l.omn/.容積為O.imn?（ul）

1基本構(gòu)造：不管計數(shù)區(qū)（大方格）是哪一種構(gòu)造，它們都有一個共同特點，即計數(shù)區(qū)都由

25X16=400個小方格組成。計數(shù)區(qū)邊長為1mm,則計數(shù)區(qū)的面積為Imn?,每個小方格的面

積為l/400mm2o蓋上蓋玻片后，計數(shù)區(qū)的高度為0.1mm,所以每個計數(shù)區(qū)的體積為0.lmm\

2計數(shù)公式：

使用血球計數(shù)板計數(shù)時，先要測定每個小方格中微生物的數(shù)量，再換算成每毫升菌液（或每

克樣品）中微生物細胞的數(shù)量。

紅細胞數(shù)（RBCs）/L=N/5X25X10X106X200

N為：五個中方格的RBC總數(shù)

N/5為：5個中方格（粉紅色區(qū)域）的平均RBC數(shù)量（然后推及至中央大方格中每一個中方

格RBC的數(shù)量）

N/5X25為：中央大方格RBC總數(shù)（即：0.Imn?（ul）的RBC總數(shù)）

N/5X25X10為：1mm3（ul）RBC總數(shù)

N/5X25X10X10,為：1L的RBC總數(shù)

200為：血液的稀釋倍數(shù)

公式簡化后：紅細胞數(shù)/L=NX5X1（）TX稀釋倍數(shù)

公式前面部分都是換算成每微升血多少該計數(shù)細胞；最后都是由微升換算到升，乘以10的

6次方

16.（2018海南卷,30,15分）葡萄酒是葡萄汁經(jīng)酵母菌發(fā)酵而成的，釀制葡萄酒的兩個簡

易裝置如圖所示。

回答下列問題：

0）試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩(wěn)定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制

葡萄酒的優(yōu)點是（答出兩點即可）。

0葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是（答

出兩點即可）。

0某同學若用乙裝置進行發(fā)酵，并設(shè)置兩個不同處理組（乙A和乙B）,乙A裝置中保留一

定量的氧氣，乙B裝置中沒有氧氣。在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段時間內(nèi)乙A和

乙B中酒精含量的變化趨勢及乙A中氧氣含量的變化趨勢如曲線圖所示。圖中曲線①、

②、③依次表示、、含量的變化趨勢。

。從細胞呼吸類型看，酵母菌屬于_________生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于

（填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”）生物。

7.（1）不需要開蓋放氣避免了因開蓋引起的雜菌污染（2）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣

防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出（3）乙A中的氧氣乙B中的酒精乙A中的酒精（4）兼性厭氧

異養(yǎng)

解析：（1）釀制葡萄酒的原理是利用了酵母菌的無氧呼吸，而酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物除了

酒精還有二氧化碳，所以釀酒裝置要及時排出二氧化碳，圖乙裝置排出二氧化碳需要擰松瓶蓋才

能排出，在擰松瓶蓋時會給雜菌污染培養(yǎng)液帶來機會，但裝置甲不會出現(xiàn)這些問題。（2）葡萄汁

裝入發(fā)酹瓶時，發(fā)酵瓶要留有大約1/3的空間，這樣既可以為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，

又可以防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出。（3）因乙A裝置中保留一定量的氧氣，所以在此裝置中酵母菌

先進行有氧呼吸消耗氧氣，然后才進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，所以曲線①為乙A中的氧

氣，曲線③為乙A中的酒精；乙B裝置中沒有氧氣，所以在此裝置中的酵母菌從開始就進行無氧

呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，所以曲線②為乙B中的酒精。（4）酵母菌的新陳代謝類型是異養(yǎng)兼

性厭氧型。

17.（2017江蘇，T12）固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)

敘述正確的是

A.在單寧酶純化時可采用透析法去除雜蛋白B.

化學結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小

C.溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性

D.酶的高效性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分

【解析】本題考查蛋白質(zhì)的分離、酶的固定化等知識。單寧酶和雜蛋白都是大分子，不能用透

析法進行分離，可用凝膠色譜法進行分離，A項錯誤；化學結(jié)合法可能影響酶的活性部位進而影

響反應(yīng)效果，而吸附法不影響酶的分子結(jié)構(gòu)，B項錯誤；影響酶活性的因素有溫度、pH和重金

屬離子等，C項正確；固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分取決于酶的專一性，D項錯

誤。

【答案】C

18.（2017江蘇，T17）為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能，研究性學習小組進行

了相關(guān)實驗，結(jié)果如圖。由圖中實驗結(jié)果能直接得出的結(jié)論是

90-----------------------------------------------------

□不加牌

rt

行布類型

洗衣粉類型

IW用量（U/L）30

A.堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最強B.

不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力

C.堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同

D.加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力

【解析】本題考查一種新型堿性纖維素酶的去污效能的探究實驗。對污布類型2、3處理，

洗衣粉類型、酶用量均相同，二者比較可以直接說明堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污

力不同，C項正確。由圖中實驗結(jié)果不能直接得出A、B、D三項所述的結(jié)論，原因是它們都

沒有單一變量的對照實驗來支持。

【答案】C

19.（2017江蘇，T20）下列關(guān)于“酵母細胞的固定化技術(shù)”實驗的敘述，正確的是

A.活化酵母時，將適量干酵母與蒸儲水混合并攪拌成糊狀

B.配制CaCL溶液時，需要邊小火加熱邊攪拌

C.將海藻酸鈉溶液滴加到CaCh溶液時，凝膠珠成形后應(yīng)即刻取出D.

海藻酸鈉溶液濃度過高時凝膠珠呈白色，過低時凝膠珠易呈蝌蚪狀

【解析】本題考查“酵母細胞的固定化技術(shù)”實驗的相關(guān)內(nèi)容。將適量干酵母與蒸儲水混合并

攪拌成糊狀，可以活化酵母，A項正確；配制海藻酸鈉溶液時需用小火間斷加熱，配制CaCk

溶液時不需加熱，B項錯誤；凝膠珠成形后應(yīng)在CaCk溶液中浸泡30分鐘左右，以便形成

穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，C項錯誤；海藻酸鈉溶液濃度過低時固定的酵母細胞數(shù)目少，凝膠珠呈白色，過

高時凝膠珠易呈蝌蚪狀，D項錯誤。

【答案】A

20.（2017江蘇，T25）（多選）如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述

正確的是

A.改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響

B.果酒發(fā)酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸

C.果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密切相關(guān)

D.氣體入口與氣體出口可以交換使用

【解析】本題考查果酒和果醋的發(fā)酵裝置與發(fā)酵條件，意在考查考生分析問題的能力。改變通

入氣體的種類，例如分別通入氮氣和氧氣，可研究無氧呼吸和有氧呼吸對發(fā)酵的影響，A項

正確：果酒發(fā)酵中期通入氮氣，更利于創(chuàng)造無氧條件，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸，B

項正確；果醋發(fā)酵的菌種是醋酸桿菌，其生長的適宜溫度是30?35℃,溫度能影響醋酸桿

菌的代謝，從而影響果醋的發(fā)酵周期，C項正確；氣體的入口必須伸入培養(yǎng)液中，氣體出口

不能伸入培養(yǎng)液中，如果氣體的入口和出口交換，會導致發(fā)酵液噴出，D項錯誤。

【答案】ABC

21.（2017江蘇，T10）下列關(guān)于“腐乳的制作”實驗，敘述正確的是

A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味

B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用

C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉

D.成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生

【解析】本題考查腐乳制作實驗分析。控制發(fā)酵溫度有利于菌種繁殖和代謝，A項錯誤；腐

乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用，B項正確；毛霉的作用主要是分解蛋白質(zhì)和脂肪，C項

錯誤；成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的菌絲，D項錯誤。

【答案】B

22.（2017全國卷I,T37）某些土壤細菌可將尿素分解成C02和NL,供植物吸收和利用。

回答下列問題：

由有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生________o能分解尿素的

細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO?作為碳源，原因是。但可用葡萄糖作為碳源，進入

細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是（答出兩點即可）。

0為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇（填“尿素”

“NHNV'或“尿素+NH,NOJ）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是。

9用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KHFO,和Na2Hp0”其作用有（答出兩點

即可）。

【解析】（1）土壤中的某些細菌之所以能夠分解尿素，是因為它們能產(chǎn)生麻酶。尿素分解

菌是異養(yǎng)生物，不能利用C02來合成有機物，必須利用現(xiàn)成的有機物（如葡萄糖）作為碳源；

葡萄糖通過呼吸作用被分解時，能為細胞生命活動提供能量，同時，葡萄糖還可以轉(zhuǎn)化成脂肪、某

些氨基酸等物質(zhì)，所以進入細菌體內(nèi)的葡萄糖能為其他有機物的合成提供原料。（2）選擇培養(yǎng)基是

只允許特定種類的微生物（目的微生物）生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。

本實驗的目的菌是可分解尿素的細菌，因此，配制的培養(yǎng)基應(yīng)只允許尿素分解菌生長，NHN&可

以作為所有細菌的氮源，培養(yǎng)基中如含有NH..N03,將不能起到篩選作用。（3）KH.PO,和

Na2HP0.）能為細菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2Po-/HPO?可以使培養(yǎng)基中pH保持相

對穩(wěn)定。

【答案】（1）胭酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用C0?來合成有機物為細胞生命活

動提供能量，為其他有機物的合成提供原料（2）尿素其他兩組都含有NHNOs,能分解尿

素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH.NO..,不能起到篩選作用（3）為細菌生長提

供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定

23.（2017江蘇，T31）苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴重危害。小明同

學準備依據(jù)如圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下

列問題：

活性污泥富集培養(yǎng)810-JQIL10-5

⑴酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白陳、LHPO,、MgSO,、苯酚和水，其中可作為碳源的

有一。

⑵將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸,以達到富

集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進一步,以便于菌落計

數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加o

⑶如圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中（填圖中序號）區(qū)域更易獲得單菌落。

⑷采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度

梯度并進行顯色反應(yīng)，下表中1?5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為o

管號123456

苯酚濃度（mgl）1

如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有2現(xiàn)的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋

（填序號：①5②10③20）倍后，再進行比色。

【解析】（D富集培養(yǎng)基中蛋白陳、苯酚都是含C的有機物，可作為碳源。（2）欲富集酚降解

菌，需隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加逐漸增加培養(yǎng)基中苯酚的含量；若接種培養(yǎng)后平板上菌落過于密集，

則應(yīng)進一步稀釋后再進行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計數(shù)與分離；平板培養(yǎng)基

是固體培養(yǎng)基，除含有水、營養(yǎng)物質(zhì)（碳源、氮源、無機鹽等）外，還需添加瓊脂作為凝固劑。（3）利

用連續(xù)劃線法接種時，最后的劃線區(qū)域（③）中，菌體的密度較小，容易獲得單菌落。（4）因系列濃

度梯度中6號比色管中苯酚濃度為1mg/L,故1?5號比色管中的苯酚濃度應(yīng)分別為0mg/L、

0.2mg/L,0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L；根據(jù)題意，廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約

有21%的苯酚殘留，要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于0?1mg/L,需將殘留液稀釋20倍左

右。

【答案】（D蛋白陳、苯酚（2）增加稀釋涂布凝固劑（3）③（4）0、0.2、0.4、0.6、

0.8③

24.（2017全國卷H,T37）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵

效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，

再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：

（1）該實驗的自變量是、o

⑵如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是。

⑶如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無

法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是?

⑷從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?，脂?/p>

轉(zhuǎn)變?yōu)閛

【解析】本題主要考查微生物的發(fā)酵，包括實驗變量、結(jié)果分析，微生物代謝類型及大分子物

質(zhì)的組成單體。（D實驗使用甲、乙兩種菌種，并在32h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果，所以該實

驗的自變量是菌種和發(fā)酵時間。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明

該發(fā)酵菌是好氧型微生物。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵

時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是

延長取樣觀測時間，觀測發(fā)酵結(jié)果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間。⑷從大豆

到豆豉，在相關(guān)微生物的作用下，大豆中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)殡暮桶被?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅帷?/p>

【答案】（1）菌種發(fā)酵時間（2）好氧菌（3）延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵

效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間（4）氨基酸和肽脂肪酸和甘油

25.（2017浙江，T32）（一）回答與泡菜腌制和亞硝酸鹽測定有關(guān)的問題：

0）制作泡菜時，為縮短發(fā)酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用無菌蒸儲水稀

釋后，再用蘸取少量的稀釋液，在MRS乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線，以獲得

乳酸菌單菌落。下圖所示的劃線分離操作，正確的是。

A.B.C.D.

⑵泡菜腌制過程中，會產(chǎn)生有機酸、醇類和亞硝酸鹽，其中醇類是由進行厭氧呼

吸產(chǎn)生。亞硝酸鹽對人體有害，為測定泡菜中亞硝酸鹽含量，從泡菜中提取要硝酸鹽，與

發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與NT-蔡基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物。然后用光程為1cm

的,在550nm光波下測定光密度值，與由一直濃度梯度亞硝酸鈉制作的比

對，計算樣品中亞硝酸鹽的含量。

（3）已知