外周血細胞形態(tài)檢驗

外周血細胞形態(tài)檢驗當前第1頁\共有86頁\編于星期三\22點當前第2頁\共有86頁\編于星期三\22點以紅細胞系統(tǒng)的成熟過程為例當前第3頁\共有86頁\編于星期三\22點

單個細胞觀察順序細胞大小、形狀胞漿量多少、顏色、顆粒細胞核形狀、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)（粗細、凝聚）、核仁數(shù)目、大小。核、漿比例。當前第4頁\共有86頁\編于星期三\22點當前第5頁\共有86頁\編于星期三\22點●

外周血細胞檢驗程序

涂片、染色與鏡檢；外周血細胞形態(tài)檢驗報告方式

●外周血紅細胞異常形態(tài)檢驗

大小、形態(tài)、染色與結(jié)構(gòu)異常；點彩紅細胞

●

外周血白細胞異常形態(tài)檢驗

中性粒細胞異常變化；異常淋巴細胞

●

血小板形態(tài)與寄生蟲檢驗

血小板大小、形態(tài)、數(shù)量變化；寄生蟲當前第6頁\共有86頁\編于星期三\22點外周血細胞檢驗程序當前第7頁\共有86頁\編于星期三\22點血涂片的制備●

器材

清潔、干燥、無塵、無油脂的載玻片。●

操作

在玻片近一端1/3處，加一滴血液，握住另一張邊緣光滑的推片，以30o~45o角使血滴沿推片迅速散開，快速、平穩(wěn)地推動推片至載玻片的另一端。當前第8頁\共有86頁\編于星期三\22點●

注意事項

★血膜呈舌狀，頭、體、尾分明

★空氣中晃動，盡快干燥；37℃恒溫箱中促干

★涂片的厚薄、長度與血滴大小（10~20μl）與血片質(zhì)量

★1h內(nèi)染色或在1h內(nèi)甲醇固定

★正確清潔玻片

★抗凝血或毛細血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集

★抗凝血液4h內(nèi)涂片當前第9頁\共有86頁\編于星期三\22點血涂片染色●

原理瑞氏（Wright）染色法（經(jīng)典染色法）瑞氏染色法使細胞著色既有化學親和反應(yīng)，又有物理吸附作用。瑞氏染液含美藍和伊紅兩種成分：美藍偏堿性，與細胞內(nèi)酸性物質(zhì)有親和力（胞漿），染成蘭色；伊紅偏酸性，與細胞內(nèi)堿性物質(zhì)有親和力（胞核），染成紫紅色。

●

試劑

★瑞氏染液瑞氏染料

0.1g甲醇（AR）60ml當前第10頁\共有86頁\編于星期三\22點★pH6.8磷酸鹽緩沖液（pH6.4~6.8）磷酸二氫鉀（KH2PO4）0.3g磷酸氫二鈉（Na2HPO4）0.2g加少量蒸餾水溶解，再加至1000ml。當前第11頁\共有86頁\編于星期三\22點●

操作★加瑞氏染液數(shù)滴，固定血膜約1min?！锏渭蛹s等量的緩沖液與染液混合，★室溫下染色5~10min?！镉昧魉疀_去染液,待干燥后鏡檢。當前第12頁\共有86頁\編于星期三\22點●

注意事項★pH對細胞染色有影響?！镂锤赏傅难げ荒苋旧！锶旧珪r間與染液濃度、染色時溫度成反比。★不能先倒掉染液，用流水沖去。★血膜上有染料顆粒沉積，可加少許甲醇。當前第13頁\共有86頁\編于星期三\22點

涂抹標本的觀察方法:

肉眼觀察低倍鏡下觀察油鏡下觀察血涂片鏡檢當前第14頁\共有86頁\編于星期三\22點★先在低倍鏡下瀏覽全片，了解染色好壞和細胞分布情況，觀察有無異常細胞。★選擇涂片體尾交界處染色良好的區(qū)域，在油鏡下計數(shù)100個白細胞，按其形態(tài)特征進行分類計數(shù)。求出各類細胞所占百分數(shù)。血涂片鏡檢當前第15頁\共有86頁\編于星期三\22點當前第16頁\共有86頁\編于星期三\22點當前第17頁\共有86頁\編于星期三\22點當前第18頁\共有86頁\編于星期三\22點A：染色偏酸，細胞核、顆粒結(jié)構(gòu)不清楚，紅細胞染色偏紅。B：染色較好，細胞結(jié)構(gòu)、顆粒、胞漿清晰，紅細胞染粉紅色。C：染色偏堿，細胞核、胞漿染色太深，細胞不易辨認，紅細胞染成藍色。當前第19頁\共有86頁\編于星期三\22點●

注意事項★分類時應(yīng)從血膜體尾交界處邊緣向中央依次上下呈城垛狀迂回移動，計數(shù)使不能重復(fù)和遺漏?！锇准毎麛?shù)明顯減少的血片，應(yīng)檢查多張血片?！锓诸愐娪泻思t細胞，不計入100個白細胞內(nèi)，以分類100個白細胞過程中見到多少有核紅細胞報告，并注明所屬階段。當前第20頁\共有86頁\編于星期三\22點★除慢淋外，破碎細胞或不能識別細胞不超過白細胞總數(shù)的2%。若破碎細胞仍能明確鑒別，如破碎的嗜酸性粒細胞，應(yīng)包括在分類計數(shù)中。在結(jié)果報告中應(yīng)對破碎細胞或不能識別細胞作適當描述?！锓诸愔袘?yīng)注意觀察成熟紅細胞、血小板的形態(tài)、染色及分布情況，注意有無寄生蟲和其他異常所見?！锇准毎螒B(tài)變化較大，遇有疑問應(yīng)請示上級主管或主任進行核實，以減少錯誤。當前第21頁\共有86頁\編于星期三\22點異常紅細胞形態(tài)檢查當前第22頁\共有86頁\編于星期三\22點大小異常

正常紅細胞大小較為一致，直徑6~9um在各種貧血時，紅細胞可出現(xiàn)大、小不一。直徑>10um為大紅細胞，>15um為巨紅細胞，常見于巨幼貧、肝臟疾病等，直徑<6um為小紅細胞，多見于缺鐵性貧血等。直徑相差1倍以上為大小不均

右圖：大紅細胞（上）小紅細胞（下）(中央蒼白區(qū)擴大）當前第23頁\共有86頁\編于星期三\22點形態(tài)異常

RBC直徑通常<6um、厚度>2.6um，呈小圓形，細胞中心區(qū)蛋白含量較正常多。見于遺傳性球形紅細胞增多癥（25%以上）、自身免疫性溶貧和異常Hb?。℉BS、HBC病等）。

球形紅細胞當前第24頁\共有86頁\編于星期三\22點

紅細胞呈橢圓形，橫短，長大，有時呈畸形。正常人可見到，<15%。見于以下疾病:

1、遺傳性橢圓性RBC增多癥，高于25~50%才有診斷價值。

2、大細胞性貧血時可達25%。

3、其他各類貧血有不同程度的增多。

橢圓形紅細胞當前第25頁\共有86頁\編于星期三\22點

比正常紅細胞扁薄，中心有少許血紅蛋白，部分可與周圍的血紅蛋白連接，邊緣部染色較中央深，故呈靶狀。主要見于以下疾病:

1、珠蛋白生成障礙性貧血

2、嚴重缺鐵性貧血

3、一些血紅蛋白病（血紅蛋白C、D、E、S?。?/p>

4、肝病、脾切除后及阻塞性黃疸等。

靶形紅細胞當前第26頁\共有86頁\編于星期三\22點

細胞狹長似鐮刀，也可呈麥粒狀或冬青葉樣，主要見于遺傳性鐮形紅細胞增多癥

鐮形紅細胞當前第27頁\共有86頁\編于星期三\22點

紅細胞淡染區(qū)呈裂口狀狹孔，正常<4%。增多見于以下疾病:

1、口形紅細胞增多癥

2、急性乙醇中毒口形紅細胞當前第28頁\共有86頁\編于星期三\22點

棘形紅細胞是一種帶刺狀的紅細胞，刺呈針刺狀或尖刺狀，見于以下疾?。?/p>

1、棘細胞增多癥：遺傳性血漿β脂蛋白缺乏癥時，棘形紅細胞可高達70%~80%

2、

嚴重肝病或制片不當棘形紅細胞當前第29頁\共有86頁\編于星期三\22點

鋸齒細胞也稱短棘形細胞。細胞突出較棘細胞短，但分布均勻。主要見于尿毒癥、微血管病性溶血性貧血、丙銅酸激酶缺乏癥、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥等。

鋸齒細胞當前第30頁\共有86頁\編于星期三\22點

裂紅細胞指紅細胞碎片，包括盔形紅細胞等，多見于DIC和心源性溶血性貧血等。其他也多見于化學中毒、腎功能不全、血栓性血小板減少性紫癜等。

裂紅細胞

當前第31頁\共有86頁\編于星期三\22點

紅細胞中心淡染區(qū)擴大，多見于缺鐵性貧血、地中海貧血及其他血紅蛋白病

著色過淺染色異常當前第32頁\共有86頁\編于星期三\22點

中心淡染區(qū)不見，著色較深，多見于溶血性貧血及大細胞性貧血著色過深當前第33頁\共有86頁\編于星期三\22點

紅細胞經(jīng)瑞氏染色染成灰藍色、灰紅色、淡灰色，包體較正常紅細胞稍大，這是一種尚未完全成熟的網(wǎng)織紅細胞，多染性物質(zhì)是核糖體，隨著細胞的成熟而逐漸消失，主要見于各種增生性貧血

嗜多色性紅細胞當前第34頁\共有86頁\編于星期三\22點結(jié)構(gòu)異常

用亞甲藍染色，成熟紅細胞內(nèi)有散在的深藍色嗜堿性顆粒，外周血中點彩紅細胞增多，表示貧血時骨髓再生旺盛或有紊亂現(xiàn)象，某些重金屬中毒時可大量出現(xiàn)嗜堿性點彩紅細胞當前第35頁\共有86頁\編于星期三\22點

成熟紅細胞內(nèi)有染成紫紅色的細線狀環(huán)，呈圓形或8

字形，可能是殘留核膜所致，見于惡性貧血、溶血性貧血、鉛中毒等?？úōh(huán)當前第36頁\共有86頁\編于星期三\22點

成熟紅細胞中含有紫紅色圓形小體，大小不等（1~2μm），數(shù)量不一，可能是殘留的核染色質(zhì)微粒。見于增生性貧血、脾切除后、巨幼紅細胞性貧血、惡性貧血等。（注意與血小板區(qū)別）豪喬氏小體（染色質(zhì)小體）當前第37頁\共有86頁\編于星期三\22點有核紅細胞

正常成人血片中不會出現(xiàn)，新生兒出生1周內(nèi)可能有少量有核紅細胞出現(xiàn)。溶貧、急、慢性白血病、紅白血病、髓外造血及嚴重缺氧等常見有核紅細胞（主要是晚幼紅）。右圖：中幼紅（上）晚幼紅（下）當前第38頁\共有86頁\編于星期三\22點紅細胞形態(tài)異常：球形紅細胞（左上），橢圓形紅細胞（上），口形紅細胞（左下），棘形紅細胞（右下）。當前第39頁\共有86頁\編于星期三\22點

紅細胞形態(tài)異常：可見紅細胞碎片，淚滴形紅細胞，鋸齒形紅細胞，盔形紅細胞，鐮刀狀紅細胞。當前第40頁\共有86頁\編于星期三\22點紅細胞形態(tài)異常：可見靶形紅細胞，半島形紅細胞，半月形紅細胞，拖鞋形紅細胞，環(huán)形紅細胞，淚滴形紅細胞。當前第41頁\共有86頁\編于星期三\22點異常白細胞形態(tài)檢驗當前第42頁\共有86頁\編于星期三\22點

白細胞粒細胞

中性粒細胞：中性粒細胞核分葉情況

1葉<5-8%2葉20-35%3葉40-50%4葉15-20%5葉<0.5%6葉0%

核左移：外周血中性桿狀核細胞增多或出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒，甚至早幼粒細胞的現(xiàn)象。核右移：外周血中性分葉核粒細胞增多，并以

5葉核以上的中性粒細胞>3%的現(xiàn)象。

當前第43頁\共有86頁\編于星期三\22點中性粒細胞的異常變化

核象變化

包括核左移和核右移，反映中性粒細胞的成熟程度。正常血象中有少量桿狀核細胞出現(xiàn)，它與分葉核細胞之間的比值約為1:13。

當前第44頁\共有86頁\編于星期三\22點核左移

外周血液中出現(xiàn)不分葉粒細胞（指桿狀核粒細胞，正常：1~5%、幼稚粒細胞，正常：不出現(xiàn)）>5%。常見于感染（特別是急性化膿性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等細胞增多為極度左移，多見于類白血病反應(yīng)或白血病。當前第45頁\共有86頁\編于星期三\22點

具體表現(xiàn)為：

★伴白細胞總數(shù)增高的核左移稱再生性移，常見于急性化膿性感染，如大葉性肺炎等。

★白細胞總數(shù)不增加或減低的核左移稱退行性左移，常見于嚴重感染、機體抵抗力低下時，如傷寒、感染中毒性休克的敗血癥等。當前第46頁\共有86頁\編于星期三\22點

中性粒細胞核出現(xiàn)4、5葉（正常時多為3葉，占50~70%）或更多，其百分數(shù)>

3%。這是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)。常見于巨幼細胞性貧血和使用抗代謝藥物后。此外，在疾病進行期突然出現(xiàn)核象右移，提示預(yù)后不良。核右移當前第47頁\共有86頁\編于星期三\22點毒性變化

嚴重感染、惡性腫瘤、各種重金屬或藥物中毒、大面積燒傷等，中性粒細胞可出現(xiàn)形態(tài)變化。具體表現(xiàn)為：

①

細胞大小不均：為骨髓內(nèi)幼稚粒細胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。

②

中毒顆粒：細胞質(zhì)中部分或全部顆粒變粗，著色深，顆粒的分布及大小等，可能為中性顆粒成熟過程中發(fā)生變性所致

當前第48頁\共有86頁\編于星期三\22點

可在細胞質(zhì)或核中出現(xiàn)，常為多個，被認為是細胞脂肪變性后未能著色所致。空泡當前第49頁\共有86頁\編于星期三\22點

細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)嗜堿性多呈斑塊、梨形或云霧狀，可能為核漿發(fā)育不平衡所致，為細胞嚴重毒性變的表現(xiàn)杜勒小體當前第50頁\共有86頁\編于星期三\22點

胞核有各種形態(tài)的芽狀突出，臨床意義尚不明確，可能與中毒、癌轉(zhuǎn)移、嚴重的放射損傷等有關(guān)。

核棘突當前第51頁\共有86頁\編于星期三\22點退行性變表現(xiàn)為胞體腫大，結(jié)構(gòu)模糊，邊緣不清。胞核可呈固縮、腫脹、破碎、溶解等變化，退行性變是細胞衰老死亡的表現(xiàn)。當前第52頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：粒細胞中毒性顆粒，中性桿狀細胞胞漿內(nèi)充滿粗大著色深染顆粒。當前第53頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：粒細胞中毒性顆粒，中性桿狀核細胞內(nèi)充滿粗大染色深的顆粒。當前第54頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：中性粒細胞胞漿空泡變性（左上），胞漿出現(xiàn)Dohle小體，核棘突和退行性變(右上、左下)，核分葉過多，核右移（右下）。當前第55頁\共有86頁\編于星期三\22點

粒細胞異常：中性粒細胞核棘突和核碎裂，核固縮。當前第56頁\共有86頁\編于星期三\22點

粒細胞異常：中性粒細胞巨幼變，細胞分葉過多，見8葉。當前第57頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：中性粒細胞巨幼變，細胞分葉過多，呈7葉狀。當前第58頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-Huet)異常，細胞分葉到2葉為止，圓形或卵圓形，染色質(zhì)明顯濃縮。當前第59頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細胞分兩葉，核染色質(zhì)明顯濃縮，如眼鏡狀。當前第60頁\共有86頁\編于星期三\22點

粒細胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常。當前第61頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細胞分葉到2葉為止，核染色質(zhì)固縮。當前第62頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：佩爾格爾休特（Peger-huet）異常，細胞分葉障礙，核染色質(zhì)固縮。當前第63頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細胞分葉困難，核染色質(zhì)固縮。當前第64頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：假性佩爾格爾休特（Pelger-huet）異常，細胞分兩葉，核染色質(zhì)較疏松。當前第65頁\共有86頁\編于星期三\22點

粒細胞異常：異常白細胞包涵體Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細胞胞漿中含有明顯紫紅色的巨大顆粒。當前第66頁\共有86頁\編于星期三\22點

粒細胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細胞胞漿內(nèi)含有明顯紫紅色巨大顆粒。當前第67頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細胞胞漿內(nèi)含有明顯紫紅色巨大顆粒。。當前第68頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細胞胞漿內(nèi)含有明顯紫紅色巨大顆粒。。當前第69頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：Chediak-Higashi綜合癥，中性粒細胞胞漿內(nèi)含有兩個紫紅色巨大顆粒。。當前第70頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：Chediak-Higashi綜合癥的淋巴細胞，淋巴細胞內(nèi)也可見紫紅色巨大顆粒。當前第71頁\共有86頁\編于星期三\22點粒細胞異常：梅-黑格林May-Hegglin異常，中性粒細胞胞漿內(nèi)有淡藍色的Dohle小體，伴有巨大血小板。當前第72頁\共有86頁\編于星期三\22點Alder-Reiily異常:中性粒細胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。當前第73頁\共有86頁\編于星期三\22點Alder-Reiily異常:淋巴細胞胞漿中有暗紫紅色顆粒。當前第74頁\共有86頁\編于星期三\22點Alder-Reiily異常:單核細胞胞漿中有大量暗紫紅色顆粒。當前第75頁\共有86頁\編于星期三\22點Alder-Reiily異常:中性粒細胞和單核細胞胞漿中有大量暗紫紅色顆