【知識解析】DNA的粗提取與鑒定

DNA的粗提取與鑒定1．提取思路DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)方法對它們進(jìn)行提取。2．提取原理

DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用此原理可以初步分離DNA與蛋白質(zhì)。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。（一）實(shí)驗(yàn)原理3．鑒定原理

DNA遇二苯胺，在沸水浴條件下，會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色。DNA的粗提取與鑒定（一）實(shí)驗(yàn)原理

注意事項(xiàng)：二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，鑒定時(shí)溶液藍(lán)色的深淺與溶液中含量的多少有關(guān)。DNA的粗提取與鑒定2．用具：天平、剪刀、研磨過濾器、注射器、試管、試管架、試管夾、酒精燈、石棉網(wǎng)、三腳架等。（二）材料用具1．材料：菜花、研磨液、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精、2mol/L的NaCl溶液、二苯胺試劑和蒸餾水等。（三）方法步驟1．研磨菜花

稱取5g花菜花，倒入研磨過濾器的套筒中，用研磨棒將套筒中的材料壓實(shí)，打開研磨棒上的蓋子，用注射器加入5mL的研磨液。蓋上蓋子，對材料進(jìn)行充分研磨。DNA的粗提取與鑒定（三）方法步驟2．吸取濾液

使用過濾研磨器研磨，當(dāng)聽到研磨齒的絞合聲后，說明已經(jīng)充分研磨。打開蓋子，用吸管將濾液吸出到試管中。DNA的粗提取與鑒定（三）方法步驟3．析出DNA在濾液中加入體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液（體積分?jǐn)?shù)為95%），靜置2~3min，溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去上面的水分；DNADNA的粗提取與鑒定4．DNA的鑒定試管編號對照組實(shí)驗(yàn)組步驟12mol/L的NaCl溶液2mol/L的NaCl溶液步驟2不進(jìn)行任何處理加絲狀物或沉淀步驟3加4mL二苯胺，混勻加4mL二苯胺，混勻步驟4沸水浴5min沸水浴5min實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象溶液不變藍(lán)色溶液逐漸變成藍(lán)色實(shí)驗(yàn)結(jié)論DNA在沸水浴的情況下遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色（三）方法步驟DNA的粗提取與鑒定1．你提取出白色絲狀物或沉淀物了嗎？用二苯胺試劑鑒定的結(jié)果如何？

觀察提取的DNA顏色，如果不是白色絲狀物，說明DNA中的雜質(zhì)較多。二苯胺試劑鑒定呈藍(lán)色說明實(shí)驗(yàn)基本成功；如果不呈藍(lán)色，可能的原因有：提取的DNA含量低，實(shí)驗(yàn)操作失誤等。2．你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些雜質(zhì)嗎?核蛋白、多糖等雜質(zhì)。（四）分析與評價(jià)DNA的粗提取與鑒定3．與其他同學(xué)提取的DNA進(jìn)行比較，看看實(shí)驗(yàn)結(jié)果有何不同，分析產(chǎn)生差異的原因。

對比各個(gè)小組DNA的純度、顏色、二苯胺試劑顯色的深淺等。如果為同一種實(shí)驗(yàn)材料卻出現(xiàn)較大差異