枸杞果柄對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響

枸杞果柄對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響【摘要】目的探討枸杞果柄水煎劑對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響。方法制備四氧嘧啶糖尿病小鼠模型，將其分為降糖靈治療組、低劑量枸杞果柄治療組、高劑量枸杞果柄治療組、模型對(duì)照組，另設(shè)正常對(duì)照組。前3組小鼠分別以25mg·kg-1·d-1降糖靈水溶液、g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎劑、g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎劑灌胃，后2組小鼠均灌服等量的生理鹽水。14d后測(cè)定小鼠空腹血糖。結(jié)果給藥14d后降糖靈治療組、低劑量枸杞果柄治療組小鼠血糖較治療前有極顯著下降()，高劑量枸杞果柄治療組小鼠血糖較治療前有顯著下降()；降糖靈治療組、不同劑量枸杞果柄治療組血糖降低平均值與模型對(duì)照組、正常對(duì)照組血糖變化平均值之間均存在極顯著差異()。結(jié)論一定劑量的枸杞果柄水煎劑對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖有降低作用。

【關(guān)鍵詞】枸杞果柄；糖尿病小鼠；降血糖

Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectoffruitpedicelsofLyciumbarbarumL.decoctiononbloodglucoseinalloxan-induceddiabeticdiabetesmellitusmicewerefedwithther25mg·kg-1·d-1Jiangtangling,aclinicmedicinefordiabetes,ordifferentconcentrationsofdecoctaoffruitpedicelsofLyciumbarbarumL.(lowdosage:g·kg-1·d-1orhighdosage:g·kg-1·d-1.Forcontrols,bothAlloxan-induceddiabeticmiceornormalmicewerefedwithequalamountofsaline.Thebloodglucoselevelofallfivegroupmicewasmeasured14daftertreatment.Micewerefastedbeforebloodsampleswereobtained.ResultsBothJiangtanglingandlowdoseoffruitpedicelsofLyciumbarbarumL.couldsignificantlydecreasemousebloodsugarcomparedtopretreatment(),sodidhighdosedecotaoffruitpedicelsofLyciumbarbarumL.().BothJiangtanglinganddifferentdosesoffruitpedicelsofLyciumbarbarumL.couldsignificantlyreducebloodglucoselevelsascomparedtomodelgroupornormalgroup().ConclusionThedecoctionoffruitpedicelsofLyciumbarbarumL.canreducebloodglucoselevelinalloxan-induceddiabeticmice.

Keywords:FruitpedicelsofLyciumbarbarumL.;DiabeticMice;Hypoglycemic

寧夏枸杞LyciumbarbarumL.是一種常用的補(bǔ)益類中藥。研究證明，枸杞具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗脂肪肝、降血脂、增強(qiáng)機(jī)體免疫作用等多種功能［1］。枸杞藥用部位主要包括枸杞果實(shí)、枸杞根皮、枸杞果柄、枸杞葉等部分。

田麗梅等［2］研究報(bào)道，中藥枸杞能明顯降低糖尿病小鼠的血糖()，對(duì)血清胰島素水平有提高的趨勢(shì)。王玲等［3］研究表明枸杞多糖對(duì)糖尿病小鼠的胰島β細(xì)胞可能有保護(hù)作用，并對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠有治療效應(yīng)。地骨皮為常用中藥，具有涼血、除熱、清肺降火的功效。現(xiàn)代藥理研究表明，地骨皮提取物有解熱、降壓、降血糖及抗微生物等作用。方志偉等［4］研究證實(shí)，地骨皮可顯著降低四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖值，對(duì)正常大鼠的血糖也有一定的降低作用。地骨皮還可提高糖尿病大鼠的血清胰島素及肝臟糖元的含量，表明地骨皮具有改善胰島功能、促進(jìn)肝糖元合成的作用，對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥防治有益。

枸杞葉俗稱天精草,是一味重要的中藥材,具有補(bǔ)虛益精、清熱止渴、養(yǎng)肝明目之功效。有學(xué)者關(guān)于枸杞葉活性成分、營(yíng)養(yǎng)成分和常微量元素的含量明顯優(yōu)于枸杞果實(shí)的報(bào)道［5］,一直未能引起人們的關(guān)注。枸杞果柄所含的營(yíng)養(yǎng)成分和氨基酸含量與枸杞葉相當(dāng)，而枸杞果柄的相關(guān)研究則更少。有關(guān)枸杞葉降血糖的研究，國(guó)內(nèi)僅見的報(bào)道認(rèn)為枸杞葉蛋白具有降血糖作用［6］。枸杞果柄在內(nèi)蒙古自治區(qū)等地被作為糖尿病人的保健品使用，但未見相關(guān)研究報(bào)道。

因此進(jìn)一步開展枸杞果柄降血糖作用及其有效成分的研究，對(duì)于寧夏枸杞傳統(tǒng)非藥用部位的開發(fā)利用具有重要的理論及意義。

1材料與儀器

藥物與試劑

四氧嘧啶，美國(guó)sigma公司產(chǎn)品。枸杞果柄，采自內(nèi)蒙古自治區(qū)烏拉特前旗白彥花鎮(zhèn)。將烘干的枸杞果柄50g加水1000ml煎煮1h，過(guò)濾；藥渣再加水500ml煎煮h，過(guò)濾。合并濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至100ml，使枸杞果柄生藥濃度為g/ml。制得的枸杞果柄水煎劑置于冰箱中備用。苯乙雙胍，又名降糖靈，南通制藥廠出品，批號(hào)070107。將苯乙雙胍片研碎，以煮沸過(guò)的蒸餾水溶解，配制成5mg/ml的水溶液置于冰箱中備用。

動(dòng)物

昆明種雄性小鼠及飼料均由寧夏醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，在實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)1周后開始實(shí)驗(yàn)。小鼠初始體重為g。

儀器

血糖儀及血糖試條，均為北京怡成生物電子技術(shù)有限公司產(chǎn)品。

2方法

四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立小鼠禁食12h后，尾靜脈注射新配制的5％四氧嘧啶溶液(80mg/kg)，恢復(fù)進(jìn)食；于48h后再禁食12h，斷尾取血，用血糖儀測(cè)定血糖值。測(cè)定結(jié)果大于mmol/L的小鼠為合格的四氧嘧啶糖尿病小鼠模型。動(dòng)物出現(xiàn)明顯的多飲、多食、多尿癥狀為標(biāo)準(zhǔn)，確認(rèn)模型，未達(dá)標(biāo)動(dòng)物不納入實(shí)驗(yàn)。將糖尿病小鼠按空腹血糖水平高低進(jìn)行隨機(jī)分組，同時(shí)兼顧各組動(dòng)物體重均值盡量接近。另設(shè)1組體重相近的非糖尿病小鼠，作為以上各組糖尿病小鼠的對(duì)照組，同時(shí)測(cè)定其血糖值。

分組及處理方法選取合格的四氧嘧啶糖尿病小鼠分為4組，分別以生理鹽水、降糖靈水溶液〔25mg/進(jìn)行方差分析，同一列數(shù)字右側(cè)小寫字母相同者表示差異不顯著(),不同者表示差異顯著()；同一列數(shù)字右側(cè)大寫字母相同者表示差異達(dá)不到極顯著(),不同者表示差異極顯著()。

3結(jié)果

實(shí)驗(yàn)小鼠的行為變化

小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶后，由于體內(nèi)代謝紊亂，致使部分小鼠死亡。給藥后降糖靈治療組、枸杞果柄治療組小鼠死亡數(shù)低于模型對(duì)照組，說(shuō)明降糖靈、枸杞果柄在降血糖的同時(shí)提高了動(dòng)物的生存率。實(shí)驗(yàn)期除正常對(duì)照組小鼠外，其余各組小鼠均出現(xiàn)明顯的多飲、多食、多尿、消瘦，即“三多一少”的癥狀，活動(dòng)減少、精神萎靡等癥狀。到實(shí)驗(yàn)?zāi)?，除模型?duì)照組外，降糖靈治療組和兩個(gè)枸杞果柄治療組糖尿病小鼠癥狀明顯好轉(zhuǎn)，個(gè)別小鼠上述癥狀消失。表1實(shí)驗(yàn)小鼠死亡數(shù)與降糖率

枸杞果柄對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響

由表2可知，給藥前各四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的血糖均大于mmol/L，為合格的糖尿病小鼠模型，給藥前各組糖尿病小鼠間的血糖差異不顯著，但與正常對(duì)照組相比差異極顯著()。給藥后，低、高劑量枸杞果柄治療組除與降糖靈治療組血糖降低值之間無(wú)顯著差異外，與模型對(duì)照組、正常對(duì)照組血糖變化值之間達(dá)到極顯著差異。可見低、高劑量枸杞果柄均有降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的作用，且與降糖靈有相同的降糖效果。表2枸杞果柄對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響

經(jīng)t檢驗(yàn)，給藥前各組糖尿病小鼠間的血糖差異不顯著，但與正常對(duì)照組相比差異極顯著()；“*”代表給藥前后的血糖達(dá)到顯著水平，“**”代表給藥前后的血糖達(dá)到極顯著水平()

4討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，低劑量枸杞果柄治療組和降糖靈治療組小鼠給藥前后血糖值有極顯著差異，高劑量枸杞果柄治療組給藥前后有顯著差()。血糖降低率分別為%，%，%,可見一定劑量枸杞果柄水煎劑有明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的作用。而兩組枸杞果柄治療組與降糖靈治療組小鼠血糖降低值比較無(wú)顯著差異，說(shuō)明一定劑量枸杞果柄水煎劑降低血糖作用與降糖靈的降糖效果相似。

目前發(fā)現(xiàn)的植物天然降血糖成分主要包括黃酮、生物堿、皂苷、鞣質(zhì)、多糖、萜、蛋白質(zhì)與氨基酸、不飽和脂肪酸、硫鍵化合物、苯丙素酚和其它化合物等十一大類［7］，但這些成分在不同植物體內(nèi)有著不同的種類?，F(xiàn)有較多的研究已經(jīng)認(rèn)為枸杞子、地骨皮可以降血糖，枸杞子降血糖的有效成分主要有枸杞多糖等［2］。周晶等［8］研究表明地骨皮降低實(shí)驗(yàn)性小鼠血糖的有效部位是水溶性小分子。李康等［9］以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)，認(rèn)為地骨皮降血糖的有效組分是酸性組分。楊涓等［10，11］測(cè)定了枸杞子、地骨皮均含有?；撬幔延写罅垦芯孔C明?；撬峥梢越笛牵?2］，但?；撬崾遣皇氰坭阶印⒌毓瞧そ笛堑挠行С煞种恢两裎匆妶?bào)道。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明枸杞果柄水煎劑的降糖效果已經(jīng)達(dá)到了目前治療糖尿病所使用的降糖西藥降糖靈的降糖效果。就枸杞果柄中已有測(cè)定成分來(lái)看［6］，有生物堿、類脂及香豆精、酚類、有機(jī)酸、黃酮、蛋白質(zhì)及氨基酸等，可見枸杞果柄并不含有已知的枸杞降血糖的有效成分。枸杞果柄作為枸杞葉和根向果實(shí)輸送營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及果實(shí)中合成的物質(zhì)向植物體運(yùn)輸?shù)耐ǖ溃茰y(cè)枸杞果柄中可能也含有?；撬?，那么?；撬峋涂赡苁氰坭焦笛浅煞种?。

黃酮類主要影響胰島β細(xì)胞功能，作用緩慢而持久。有報(bào)道從芥菜中分離得到黃酮類化合物異鼠李素二葡萄糖苷，其降血糖機(jī)制與異鼠李素二葡萄糖苷的體內(nèi)抗氧化活性有關(guān)［13］。蕎麥種子［14］、廣西藤茶［15］、桑葉［16］中的總黃酮都對(duì)高血糖小鼠也有明顯的降血糖作用。寧夏枸杞葉黃酮類化合物含量高于其果實(shí)［17］，推測(cè)黃酮類化合物可能是枸杞葉、果柄降血糖的有效成分之一。

對(duì)幾乎作為廢棄物的枸杞果柄資源的開發(fā)研究具有深刻的意義。本實(shí)驗(yàn)僅證實(shí)一定劑量枸杞果柄具有降血糖的作用，但枸杞果柄降血糖作用的最佳濃度范圍、降血糖的有效成分及其作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

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