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氧的供需與傳遞第一頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日生化生產(chǎn)工藝課程教案2006年5月胡斌杰第二頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日第七章氧的供需與傳遞教學(xué)內(nèi)容
1、細(xì)胞對氧的需求2、培養(yǎng)過程中氧的傳質(zhì)理論3、溶解氧的測定方法4、氧傳遞系數(shù)的測定5、影響氧傳遞速率的主要因素6、控制溶氧的工藝手段
第三頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日一、細(xì)胞對氧的需求
1、三個基本概念
好氣性微生物的生長發(fā)育和代謝活動都需要消耗氧氣,因為好氣性微生物只有氧分子存在情況下才能完成生物氧化作用。因此,供氧對需氧微生物是必不可少的,在發(fā)酵過程中必須供給適量無菌空氣,才能使菌體生長繁殖積累所需要的代謝產(chǎn)物。而需氧微生物的氧化酶系是存在于細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)中,因此,微生物只能利用溶解于液體中的氧。發(fā)酵液中溶解氧的多少,一般以溶解氧系數(shù)表示。由于各種好氣微生物所含的氧化酶體系(如過氧化氫酶、細(xì)胞色素氧化酶、黃素脫氫酶、多酚氧化酶等)的種類和數(shù)量不同,在不同環(huán)境條件下,各種需氧微生物的吸氧量或呼吸程度是不同的。
飽和溶氧濃度:在一定溫度和壓力下,空氣中的氧在水中的溶解度。(mol/m3)例:P111(第二自然段)第四頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日比耗氧速率(呼吸強(qiáng)度):單位質(zhì)量的干細(xì)胞在單位時間內(nèi)消耗氧的量molO2/(kg干細(xì)胞·s)。用Qo2表示。臨界溶氧濃度:好氧性微生物生長繁殖所需要的最低溶解氧的濃度。(mol/m3)攝氧率:指單位體積培養(yǎng)液在單位時間內(nèi)的消耗氧的量,以r表示,單位為[molO2/m3·s]。第五頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日2、攝氧率與呼吸強(qiáng)度之間的關(guān)系
r=Qo2·X式中:r---微生物耗氧速率[molO2/(m3·s)];
Qo2---菌體呼吸強(qiáng)度(比耗氧速率),molO2/(kg干細(xì)胞·s);
X---發(fā)酵液中菌體濃度,(kg/m3);3、注意點(diǎn)(P115)
1)判斷:在生產(chǎn)中,要保證最高產(chǎn)物產(chǎn)量,供氧時必須使溶氧濃度大于臨界溶氧濃度()。溶氧濃度大于臨界溶氧濃度可以得到最高的微生物濃度()。2)碳源種類對細(xì)胞的耗氧速度沒有影響()。
第六頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日3)培養(yǎng)液中基質(zhì)濃度對細(xì)胞的耗氧速度有很大的影響()。
3)細(xì)胞的攝氧率與培養(yǎng)時間及細(xì)胞濃度有關(guān)
例如在鏈霉素的發(fā)酵過程中,初始的攝氧率為34molO2/m3·h,補(bǔ)料后(78h)升為40.9molO2/m3·h,隨著營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,在94h又降到15-20molO2/m3·h。Qo2干重PH疣孢漆斑霉在分批培養(yǎng)時比耗氧速率的變化Qo2干重r=Qo2·Xr請問攝氧率和比耗氧速率在細(xì)胞培養(yǎng)的哪一階段達(dá)到最高值?第七頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日4)培養(yǎng)條件(如PH、溫度等)對細(xì)胞的需氧要求也有影響,一些有害代謝產(chǎn)物的積累,也會抑制細(xì)胞的呼吸。閱讀課本P116回答問題何謂氧的滿足度?問題1舉例說說各種氨基酸的生產(chǎn)與最佳溶氧濃度的關(guān)系?為什么?問題2舉例說說微生物的次級代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)也與臨界溶氧濃度有關(guān)?問題31)判斷:在生產(chǎn)中,要保證最高產(chǎn)物產(chǎn)量,供氧時必須使溶氧濃度大于臨界溶氧濃度()。溶氧濃度大于臨界溶氧濃度可以得到最高的微生物濃度()。第八頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日213456789氣液界面氣泡液膜液相主體固液界面細(xì)胞團(tuán)液膜細(xì)胞膜細(xì)胞生物反應(yīng)氧從氣泡到細(xì)胞的傳遞過程示意圖
P117(劃線)二、培養(yǎng)過程中氧的傳質(zhì)理論
1、氧從氣泡到細(xì)胞的傳遞過程對于大多數(shù)微生物細(xì)胞的培養(yǎng)過程,細(xì)胞分散在培養(yǎng)液中,只能利用溶解氧,供氧都是在培養(yǎng)液中通往空氣來進(jìn)行。氧從空氣泡傳遞到細(xì)胞內(nèi)要克服一系列阻力,首先氧須從氣相溶解于培養(yǎng)基中,然后傳遞到細(xì)胞內(nèi)的呼吸酶位置上被利用。第九頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日213456789氣液界面氣泡液膜液相主體固液界面細(xì)胞團(tuán)液膜細(xì)胞膜細(xì)胞生物反應(yīng)氧從氣泡到細(xì)胞的傳遞過程示意圖
氧從空氣泡傳遞到細(xì)胞的過程中需要克服哪幾種阻力?問題1
氧的整個傳遞過程可分為供氧和耗氧兩個方面,請分別指出這兩個過程的傳氧路線?問題2第十頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日2、氧的傳遞速率總方程式OTR=KLα(c*-cL)式中:OTR---單位體積培養(yǎng)液中的傳氧速率,[mol/m3·s];
KL---以濃度差為推動力的總傳質(zhì)系數(shù)(m/s)
α–
比表面積(m2/m3)KLα---以濃度差為推動力的體積傳遞系數(shù),(s-1);
cL---溶液中氧的實際濃度,(mol/m3);
c*---與氣相中氧分壓p平衡時溶液中氧濃度,(mol/m3);例題第十一頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日三、溶解氧的測定方法1、化學(xué)法
化學(xué)法的優(yōu)點(diǎn)是測定比較準(zhǔn)確,能直接得到氧的濃度,往往是其他測定方法的基礎(chǔ),也常用于衡量其他方法的準(zhǔn)確性。2、極譜法3、復(fù)膜氧電極法4、壓力法復(fù)膜氧電極測定的是氧的分壓閱讀課本P123-126第十二頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日
KL---以濃度差為推動力的總傳質(zhì)系數(shù)(m/s)
α–
比表面積(m2/m3)KLα---以濃度差為推動力的體積傳遞系數(shù),(s-1);
復(fù)習(xí)OTR=KLα(c*-cL)氧的傳遞速率總方程式OTR---單位體積培養(yǎng)液中的傳氧速率,[mol/m3·s];cL---溶液中氧的實際濃度,(mol/m3);c*---與氣相中氧分壓p平衡時溶液中氧濃度,(mol/m3);測定氧濃度的方法有哪些1、化學(xué)法
2、極譜法3、復(fù)膜氧電極法4、壓力法第十三頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日四、氧傳遞系數(shù)的測定P126
1、亞硫酸鹽氧化法2、取樣極譜法3、物料衡算法4、動態(tài)法5、排氣法6、復(fù)膜電極法P128五、影響氧傳遞速率的主要因素根據(jù)氣液傳遞速率方程:
OTR=KLα(c*-cL)凡是影響推動力c*-cL、比表面積α和傳遞系數(shù)的因素都會影響氧傳遞速率。1、溶液的性質(zhì)對氧的溶解度的影響
隨溫度的升高而降低P129
與酸的種類及濃度有關(guān)P130表
電解質(zhì)溶液氧的溶解度降低P129
(為什么)
第十四頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日要提高氧在溶液中的溶解度的方法有多種,其中最簡單的方法是增加罐壓。但是要注意的是增加罐壓雖然提高了氧的分壓,從而增加了氧的溶解度,但其他氣體成分(如CO2)分壓也相應(yīng)增加,且由于CO2的溶解度比氧大得多,因此不利于液相中CO2的排出,而影響了細(xì)胞的生長和產(chǎn)物的代謝,所以增加罐壓是有一定限度的。
另一種方法是增加空氣中氧的含量,進(jìn)行富氧通氣操作。即通過深冷分離法、吸附分離法及膜分離法制得富氧空氣,然后通入培養(yǎng)液。目前由于這三種分離方法的成本都較高,富氧通氣還處于研究階段。2、氣液比表面積
比表面積:氣泡表面積與體積之比,比表面積越大,氧傳遞速率越大,主要體現(xiàn)以下三個方面:A、氣液比表面積的大小取決于截留在培養(yǎng)液的氣體體積以及氣泡的大小。截留在液體中的氣體越多,氣泡的直徑越小,那么氣泡比表面積就越小。B、攪拌對比表面積的影響較大。因為攪拌一方面可使氣泡在液體中產(chǎn)生復(fù)雜的運(yùn)動,延長停留時間,增大氣體的截留率,另一方面攪拌的剪切作用又使氣泡粉碎,減小氣泡的直徑。提高氧在溶液中的溶解度的最直接方法方法有哪些?問題說說攪拌對比表面積的影響?問題第十五頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日C、增大通氣量可增加空氣的截留率,從而使比表面積增大。
3、攪拌
攪拌的作用:P133
把通入的氣體打碎,強(qiáng)化湍流程度,使空氣與發(fā)酵液充分混合,氣、液、固三相更好地接觸,增加了溶氧速率,使微生物懸浮混合均勻,促進(jìn)代謝產(chǎn)物的傳質(zhì)速率。攪拌器的型式、直徑大小、轉(zhuǎn)速、組數(shù)、攪拌器間距以及在罐內(nèi)的相對位置等對氧的傳遞速率都有影響。##攪拌器##第十六頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日1)攪拌能把大的空氣泡打碎成為微小氣泡,增加了氧與液體的接觸面積,而且小氣泡的上升速度要比大氣泡慢,相應(yīng)地氧與液體的接觸時間也就增長;2)攪拌使液體作渦運(yùn)動,使氣泡不是直線上升而是作螺旋運(yùn)動上升,延長了氣泡的運(yùn)動路線,增加了氣液的接觸時間;3)攪拌使發(fā)酵液呈湍流運(yùn)動,從而減少氣泡周圍液膜的厚度,減少液膜阻力,因而增大了KL值;4)攪拌使菌體分散,避免結(jié)團(tuán),有利于固液傳遞中的接觸面積的增加,使推動力均一,同時也減少了菌體表面液膜的厚度,有利于氧的傳遞。
攪拌器的型式、直徑大小、轉(zhuǎn)速、組數(shù)、攪拌器間距以及在罐內(nèi)的相對位置等對氧的傳遞速率都有影響。
采用機(jī)械攪拌是普通提高溶氧系數(shù)的行之有效的方法。它能從以下幾個方面改善溶氧速率:在發(fā)酵生產(chǎn)中,攪拌有何作用?問題1在發(fā)酵生產(chǎn)中,攪拌是如何改善溶氧速率的?問題2第十七頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日4、空氣的線速度
氧傳遞系數(shù)KLα是隨空氣量的增加而增大的,當(dāng)增加通風(fēng)量時,空氣的線速度也就相應(yīng)地增大,從而增加了溶氧,氧傳遞系數(shù)KLα相應(yīng)地也增大。當(dāng)然過大的空氣線速度會使攪拌槳葉不能打散空氣,氣流形成大氣泡在軸的周圍逸出,使攪拌效率和溶氧速率都大大降低。5、空氣分布管
空氣分布管的型式、噴口直徑及管口與罐底距離的相對位置對氧溶解速率有較大的影響。當(dāng)通風(fēng)量較小時,噴口的直徑越小,氣泡的直徑也就越小,相應(yīng)地溶氧系數(shù)就越大。而當(dāng)通風(fēng)量超過一定值后,氣泡的直徑與通風(fēng)量有關(guān),與噴口的直徑無關(guān)。
第十八頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日6、培養(yǎng)液的性質(zhì)
在發(fā)酵過程中,由于微生物的生命活動,分解并利用培養(yǎng)液中的基質(zhì),大量繁殖菌體,積累代謝產(chǎn)物等等都引起培養(yǎng)液的性質(zhì)的改變,特別是粘度、表面張力、離子液度、密度、擴(kuò)散系數(shù)等,從而影響到氣泡的大小、氣泡的穩(wěn)定性,進(jìn)而對氧傳遞系數(shù)KLα帶來很大的影響。此外,發(fā)酵液粘度的改變還會影響到液體的湍流性以及界面或液膜阻力,從而影響到氧傳遞系數(shù)KLα
。當(dāng)發(fā)酵液濃度增大時,粘度也增大,氧傳遞系數(shù)KLα就降低。發(fā)酵液中泡沫的大量形成會使菌體與泡沫形成穩(wěn)定的乳濁液,影響到氧傳遞系數(shù)。7、表面活性劑
培養(yǎng)液中消泡用的油脂等具有親水端和疏水端的表面活性物質(zhì)分布在氣液界面,增大了傳遞的阻力,使氧傳遞系數(shù)KLα等發(fā)生變化,說說培養(yǎng)液的哪些因素會影響氧傳遞系數(shù)?問題第十九頁,共二十三頁,編輯于2023年,星期日8、離子強(qiáng)度
一般在電解質(zhì)溶液中生成的氣泡比在水中小得多,因而有較大的比表面積。在同一氣液接觸的發(fā)酵罐中,在同樣的條件下,電解質(zhì)溶液的氧傳遞系數(shù)KLα比水大,而且隨電解質(zhì)濃度的增加,KLα也有較大的增加。
9、菌體濃度
培養(yǎng)液中的菌體濃度對K
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