維生素類藥物的分析

1第十三章維生素類藥物的分析2維生素：是維持人體正常代謝機(jī)能所必需的微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，人體不能合成維生素。各種維生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)以及性質(zhì)雖然不同，但它們卻有著以下共同點(diǎn)：①維生素大多以維生素原（維生素前體）的形式存在于食物中。7-脫氫膽固醇

β-胡蘿卜素維生素A代謝維生素D3代謝3②維生素不是構(gòu)成機(jī)體組織和細(xì)胞的組成成分，它也不會(huì)產(chǎn)生能量，它的作用主要是參與機(jī)體代謝的調(diào)節(jié)。③大多數(shù)的維生素，機(jī)體不能合成或合成量不足，不能滿足機(jī)體的需要，必須經(jīng)常通過(guò)食物中獲得。④人體對(duì)維生素的需要量很小，日需要量常以毫克（mg）或微克（μg）計(jì)算，但一旦缺乏就會(huì)引發(fā)相應(yīng)的維生素缺乏癥，對(duì)人體健康造成損害。4

維生素A、D2、D3、E、K1等脂溶性水溶性維生素B族（B1、B2、B6、B12）

維生素C、葉酸、煙酸、煙酰胺、泛酸維生素M維生素PP維生素分類（按溶解性分）：5-H維生素A醇-COCH3維生素A醋酸酯-COC15H31維生素A棕櫚酸酯R:第一節(jié)維生素A的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)環(huán)己烯共軛多烯醇側(cè)鏈1.溶解性不溶于水，乙醇中微溶，與三氯甲烷、乙醚、環(huán)己烷和石油醚任意互溶（二）性質(zhì)71.具有共軛多烯側(cè)鏈（二）性質(zhì)存在多種立體異構(gòu)化合物8維生素A325.5新維生素Aa328新維生素Ab320.5新維生素Ac310.5異維生素Aa323異維生素Ab324具有UV吸收特性：在325～328nm間有最大吸收9易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)去氫維生素A（A2）去水維生素A（A3）鯨醇10

易被氧化△或有金屬離子存在時(shí)氧化↑113.與三氯化銻發(fā)生呈色反應(yīng)三氯甲烷中紫紅藍(lán)色?CHCl3??3SbCl維生素A12三氯化銻反應(yīng)UVTLC

二、鑒別試驗(yàn)13（一）三氯化銻反應(yīng)（Carr-Price反應(yīng)）條件：無(wú)水、無(wú)醇藍(lán)色紫紅維生素ASbCl514方法取維生素A油溶液1滴，加氯仿10ml，振搖溶解，取出兩滴，加氯仿2ml，與25%三氯化銻氯仿溶液0.5ml反應(yīng)，成藍(lán)色，漸成紫紅色。155個(gè)共軛雙鍵λmax為326nm一個(gè)吸收峰（二）UV法6個(gè)共軛雙鍵λmax為350～390nm三個(gè)吸收峰，且在332nm的波長(zhǎng)處有較低的吸收峰或拐點(diǎn)。溶劑：無(wú)水乙醇-鹽酸（100:1）16（三）TLC法對(duì)照品法USP顯色劑磷鉬酸

規(guī)定斑點(diǎn)顏色和Rf值BP

顯色劑三氯化銻17紫外分光光度法三氯化銻比色法HPLC法三、含量測(cè)定18（一）UV法（三點(diǎn)校正法）測(cè)定依據(jù)：維生素A分子結(jié)構(gòu)中多烯共軛體系，具有紫外吸收特性，在325-328nm處有最大吸收。立體異構(gòu)體（新維生素Aa、Ab和Ac，異維生素Aa和Ab）、氧化產(chǎn)物（環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素A酸）、光照產(chǎn)物（鯨醇）、合成中間體、去氫維生素A、去水維生素A等雜質(zhì)會(huì)有紫外吸收，干擾維生素A在紫外區(qū)的測(cè)定。為了得到準(zhǔn)確的測(cè)定結(jié)果，消除非維生素A產(chǎn)生的無(wú)關(guān)吸收所引起的誤差，故采用“三點(diǎn)校正法”測(cè)定。19物質(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。雜質(zhì)的吸收在310～340nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)呈一條直線，隨波長(zhǎng)的增大而吸收度變小。

1.測(cè)定原理雜質(zhì)維生素A純品維生素A樣品21（三）生物效價(jià)及換算因數(shù)維生素A含量是用生物效價(jià)表示

單位

IU/g（國(guó)際單位）221g維生素A醋酸酯相當(dāng)?shù)膰?guó)際單位數(shù)為1g維生素醇相當(dāng)?shù)膰?guó)際單位數(shù)為23(VitA酯)(VitA醇)242.波長(zhǎng)的選擇（1）三點(diǎn)波長(zhǎng)的選擇原則為：一點(diǎn)選擇在維生素A的最大吸收波長(zhǎng)處（即1）維生素A的max（2）23

分別在1的兩側(cè)各選一點(diǎn)25測(cè)定對(duì)象：純度高的維生素A醋酸酯第一法等波長(zhǎng)差法3-1=1-21=328nm2=316nm3=340nm△=12nm26第二法等吸收度法(皂化法)測(cè)定對(duì)象：維生素A醇1=325nm2=310nm3=334nm273.測(cè)定方法和計(jì)算方法（1）第一法：直接測(cè)定法 ——純度高的維生素A醋酸酯

方法：28

判斷是否在326～329nm之間改用第二法是否

求算并與規(guī)定值比較29

規(guī)定值差值30

判斷差值是否超過(guò)有一個(gè)以上超過(guò)無(wú)超過(guò)計(jì)算A328（校正）用A328計(jì)算3103%－15%－3%第二法第二法32（2）第二法：皂化法——維生素A醇的測(cè)定水溶性脂溶性第一法無(wú)法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法33

判斷max是否在323～327nm之間取未皂化樣品采用色譜法純化后再測(cè)定

計(jì)算是否34

判斷A300/A325是否小于或等于0.73是否取未皂化樣品采用色譜法純化后再測(cè)定計(jì)算A325(校正)3503%－3%36色譜條件：固定相：硅膠流動(dòng)相：正己烷-異丙醇（997:3）流速：1ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：325nm（二）HPLC法適用于維生素A醋酸酯原料及其制劑中維生素A的含量測(cè)定系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：維生素A醋酸酯主峰與其順式異構(gòu)體峰的分離度應(yīng)大于3.037（三）三氯化銻比色法原理：維生素A與三氯化銻的無(wú)水氯仿溶液作用，產(chǎn)生不穩(wěn)定的藍(lán)色，在618nm~620nm波長(zhǎng)處有最大吸收，符合Beer定律。方法：取維生素A對(duì)照品，制成系列濃度的氯仿溶液，加入一定量的三氯化銻無(wú)水氯仿溶液，在5s～10s內(nèi)，于620nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。按同法測(cè)定供試液的吸收度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量。38注意事項(xiàng)：①呈色不穩(wěn)定，要求操作迅速，一般規(guī)定加入三氯化銻后應(yīng)在5s~10s內(nèi)測(cè)定。②水分干擾測(cè)定，三氯化銻水解產(chǎn)生SbOCl而使溶液渾濁，影響比色。③溫度影響較大，樣品測(cè)定時(shí)的溫度與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線溫差≤1℃。④專屬性差，常使測(cè)定結(jié)果偏高。⑤三氯化銻有腐蝕性。39維生素A脫氫——去氫維生素A氧化——環(huán)氧化物立體異構(gòu)體UV——鑒別和含量測(cè)定與三氯化銻呈色——鑒別和含量測(cè)定脫水——去水維生素A氧化——維生素A醛、酸40第二節(jié)維生素B1的分析廣泛存在于米糠、麥麩和酵母中。具有維持糖代謝及神經(jīng)傳導(dǎo)與消化的功能，主要用于治療腳氣病、多發(fā)性神經(jīng)炎和胃腸道疾病。41一、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一)結(jié)構(gòu)氨基嘧啶環(huán)－CH2－噻唑環(huán)（季銨堿）鹽酸硫胺42（二）性質(zhì)1.溶解性維生素B1為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。水溶液呈酸性。2.硫色素反應(yīng)噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中開環(huán)，再與嘧啶環(huán)上的氨基環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀等氧化劑氧化成具有熒光的硫色素。

3.UV共軛λmax=246nm434.堿性與酸成鹽與生物堿沉淀試劑（碘化汞鉀、三硝基酚、碘溶液、硅鎢酸等）反應(yīng)，生成組成恒定的沉淀，可用于鑒別和含量測(cè)定。5.鹽酸根呈氯化物的特性反應(yīng)，用于鑒別嘧啶環(huán)——伯氨噻唑環(huán)——季銨44二、鑒別試驗(yàn)（一）硫色素反應(yīng)——維生素B1的專屬反應(yīng)熒光消失正丁醇藍(lán)色熒光H+OH-45[O]-2H硫色素46方法取本品約5mg，加氫氧化鈉2.5ml，加鐵氰化鈉試液0.5ml與正丁醇5ml,強(qiáng)烈振搖2min,放置分層，上面醇層顯強(qiáng)烈藍(lán)色熒光。加酸消失，再加堿又重現(xiàn)。47（二）沉淀反應(yīng)維生素B1具有嘧啶環(huán)和氨基，顯生物堿特征，可與生物堿沉淀或顯色劑反應(yīng)。48（三）氯化物反應(yīng)49（四）硫元素反應(yīng)（五）IR本品的紅外光譜圖應(yīng)與對(duì)照?qǐng)D譜一致50三、含量測(cè)定非水溶液滴定法——原料藥UV法——制劑硫色素?zé)晒夥ā猆SP51（一）非水溶液滴定法原理：維生素B1分子含有2個(gè)堿性的已成鹽的伯胺和季銨基團(tuán)，在非水溶液中均與HClO4作用，根據(jù)消耗HClO4的量可以計(jì)算維生素B1的含量。反應(yīng)摩爾比1:252（二）UV法共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，UV特征紫外吸收峰隨PH變化而變化

溶劑pHλmax

水7232-3345鹽酸2246421ChP片劑、注射劑含量計(jì)算（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的%=規(guī)格g/片g54NaOH（三）硫色素?zé)晒夥ㄔ砑ぐl(fā)波長(zhǎng)365nm發(fā)射波長(zhǎng)435nm通過(guò)與對(duì)照品熒光強(qiáng)度的比較即可測(cè)得供試品含量可用于維生素B1及其制劑的含量測(cè)定55SdAb+NaOH+鐵氰化鉀+異丁醇+NaOH+異丁醇對(duì)照液+NaOH+鐵氰化鉀+異丁醇+NaOH+異丁醇供試液計(jì)算56特點(diǎn)專屬性反應(yīng)靈敏度高，線性范圍寬代謝產(chǎn)物不干擾，適用于體液分析可用CNBr為氧化劑，反應(yīng)定量完全，適合于生物樣本分析。57維生素B1嘧啶環(huán)與生物堿沉淀劑或顯色劑反應(yīng)——鑒別UV——鑒別和含量測(cè)定氨基堿性——和酸成鹽非水滴定——含量測(cè)定噻唑環(huán)季銨堿——和酸成鹽，含量測(cè)定硫色素反應(yīng)——鑒別和含量測(cè)定硫元素反應(yīng)——鑒別鹽酸鹽——鑒別58L－抗壞血酸第三節(jié)維生素C的分析γ-內(nèi)酯**一、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一)結(jié)構(gòu)烯二醇結(jié)構(gòu)59(二)性質(zhì)1.溶解性維生素C易溶于水，微溶于乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚。2.酸性C3－OH的酸性較強(qiáng)pK1=4.17，C2－OH的酸性較弱pK2=11.57。故表現(xiàn)為一元酸的性質(zhì)，能與碳酸氫鈉成鈉鹽。3.旋光性維生素C有2個(gè)手性碳原子，有4個(gè)光學(xué)異構(gòu)體。604.還原性維生素C中的烯二醇基具有強(qiáng)還原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗壞血酸。烯二醇結(jié)構(gòu)二酮基結(jié)構(gòu)[o]-2H+2H61有生物活性無(wú)生物活性L－抗壞血酸去氫抗壞血酸二酮古洛糖酸[O]H+OH-625.水解性維生素C中的內(nèi)酯環(huán)在強(qiáng)堿中可水解，生成酮酸鹽。Na2CO3NaOH636.糖類的性質(zhì)

維生素C結(jié)構(gòu)與糖類相似，有糖類的顯色反應(yīng)。7.UV具有共軛雙鍵，其稀HCl溶液在243nm處有最大吸收。在中性或堿性條件下，紅移至265nm。64二、鑒別試驗(yàn)（一）與氧化劑反應(yīng)651.與AgNO3反應(yīng)維生素C中有烯二醇基，具有強(qiáng)還原性，可被AgNO3氧化，產(chǎn)生黑色金屬銀沉淀。

方法：取本品0.2g，加水l0ml溶解。取該溶液5m1，加硝酸銀試液0.5m1，即生成銀的黑色沉淀。662.與2,6-二氯靛酚反應(yīng)氧化型玫瑰紅色還原型藍(lán)色OHˉ（玫瑰色）（無(wú)色）方法：取本品0.2g，加水l0ml溶解。取該溶液5m1，加2,6-二氯靛酚試液1～2滴，試液的顏色即消失。673.與其他氧化劑反應(yīng)亞甲藍(lán)或高錳酸鉀維生素C褪色堿性酒石酸銅維生素C磚紅色Cu2O沉淀磷鉬酸維生素C鉬藍(lán)68（三）糖類的反應(yīng)或鹽酸吡咯50℃（二）薄層色譜法ChP2010采用TLC對(duì)維生素C制劑進(jìn)行鑒別69-3H2O70（四）UV維生素C在0.0lmol/L鹽酸液中，在243nm波長(zhǎng)處有惟一的最大吸收，利用此特征進(jìn)行鑒別。

BP中采用該法，并規(guī)定其百分吸收系數(shù)應(yīng)為545-585。71三、雜質(zhì)檢查（一）溶液的澄清度與顏色檢查： ——有色雜質(zhì)，分光光度法（二）鐵、銅離子：原子吸收分光光度法（三）草酸的檢查：與鈣形成沉淀72（一）碘量法四、含量測(cè)定1.原理：維生素C在醋酸酸性條件下，可被碘定量氧化。根據(jù)消耗碘的體積，可以計(jì)算維生素C的含量。淀粉指示液，終點(diǎn)至藍(lán)色不消失反應(yīng)摩爾比1∶1732.方法：取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過(guò)的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6。743.討論（1）酸性環(huán)境

——減慢VitC被O2氧化速度（2）新沸冷H2O ——趕走水中O2（3）立即滴定 ——減少O2的干擾75（4）附加劑干擾的排除片劑——滑石粉——過(guò)濾注射劑——抗氧劑——丙酮Na2SO3NaHSO3

Na2S2O3Na2S2O576（二）2,6-二氯靛酚滴定法1.原理自身指示終點(diǎn)法終點(diǎn)：顯示過(guò)量的2,6-二氯靛酚的顏色（粉紅色）2.方法（1）酸性環(huán)境HPO3-HAc ——穩(wěn)定VitC（2）快速滴定2min內(nèi)

——防止其他還原性物質(zhì)干擾（3）滴定液需經(jīng)常標(biāo)定 ——2,6-二氯靛酚不穩(wěn)定，貯存≤一周（4）剩余比色測(cè)定77（定量過(guò)量）（測(cè)剩余染料）3.討論78（三）HPLC法79維生素C烯二醇基酸性——可與堿成鹽與硝酸銀反應(yīng)——鑒別與二氯靛酚鈉反應(yīng)——鑒別和含量測(cè)定碘量法——含量測(cè)定共軛雙鍵——UV，鑒別酯鍵——水解糖的性質(zhì)——鑒別旋光性**HPLC——含量測(cè)定80第四節(jié)維生素D的分析維生素D是一類抗佝僂病維生素的總稱。ChP2010主要收載有：維生素D2、D3原料藥，維生素D2膠丸和注射劑，維生素D3注射劑等。81一、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一)結(jié)構(gòu)維生素D2（9,10-開環(huán)麥角甾-四烯-3β-醇）（骨化醇）維生素D3（9,10-開環(huán)膽甾-三烯-3β-醇）（膽骨化醇）開環(huán)的甾體：具有甾類化合物的顯色反應(yīng)。1234567810982(二)性質(zhì)1.性狀

維生素D2、D3均為無(wú)色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，無(wú)味。2.溶解性

維生素D2、D3不溶于水，溶于三氯甲烷、乙醇、乙醚和丙酮。3.不穩(wěn)定性

維生素D2、D3含多個(gè)雙鍵，不穩(wěn)定，遇光或空氣及其他氧化劑易氧化變質(zhì)。4.旋光性

維生素D2有6個(gè)手性碳原子

維生素D3有5個(gè)手性碳原子5.顯色反應(yīng)

甾醇類化合物共有6.UV共軛多烯83二、鑒別試驗(yàn)（一）顯色反應(yīng)三氯化銻反應(yīng)橙紅色漸變粉紅三氯化鐵反應(yīng)橙黃色二氯丙醇和乙酰氯反應(yīng)綠色84（二）比旋度鑒別維生素D2維生素D3溶劑

濃度比旋度值無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇40mg/ml5mg/ml+102.5°～+107.5°注意事項(xiàng)：應(yīng)于容器開啟30分鐘內(nèi)取樣在溶液配制后30分鐘內(nèi)測(cè)定+105°～+112°85（三）區(qū)別反應(yīng)以96%乙醇為溶劑，加乙醇和85%硫酸D2顯紅色，在570nm處有最大吸收D3顯黃色，在495nm處有最大吸收（四）其他方法

TLC、HPLC、制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)86三、雜質(zhì)檢查維生素D2中麥角甾醇的檢查：加洋地黃皂苷溶液，混合，放置18h不得發(fā)生渾濁或沉淀。前維生素D的光照產(chǎn)物87四、含量測(cè)定方法ChP：采用正相高效液相色譜法測(cè)定維生素D的含量，定量方法為內(nèi)標(biāo)法。內(nèi)標(biāo)物：鄰苯二甲酸二甲酯

固定相：硅膠

流動(dòng)相：正己烷-正戊醇（997：3）USP：化學(xué)法、色譜法和微生物法BP：化學(xué)法、色譜法和光譜法88第五節(jié)維生素E的分析維生素E是α-生育酚及其各種酯類。一、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)(一)結(jié)構(gòu)苯并二氫吡喃醇α-生育酚12345678α-生育酚醋酸酯89（二）性質(zhì)1.溶解性

維生素E為微黃色或黃色透明的粘稠液體，易溶于乙醇、丙酮和乙醚等有機(jī)溶劑，不溶于水。2.水解性

H+或OH-Δ游離生育酚[O]3.氧化性

生育醌904.UV特征芳環(huán)其無(wú)水乙醇溶液在284nm處有最大吸收，吸收系數(shù)為41.0-45.0。91（一）硝酸反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)HNO3水解維生素Eα-生育酚HNO375℃，[O]生育紅方法：取本品30mg，加無(wú)水乙醇l0ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃。加熱約15分鐘，溶液應(yīng)顯橙紅色。本法簡(jiǎn)便、快速，呈色反應(yīng)明顯。ChP2010和JP15均采用本法鑒別。92（二）三氯化鐵反應(yīng)KOHΔ維生素Eα-生育酚Fe3+對(duì)-生育醌Fe2++紅色93方法：取本品10mg，加乙醇KOH試液2ml，煮沸5分鐘，放冷，加水4ml和乙醚10ml，振搖，靜置分層；取乙醚液2ml，加2,2’-聯(lián)吡啶的乙醇溶液數(shù)滴和FeCl3的乙醇溶液數(shù)滴，應(yīng)顯血紅色。94

=41.0～45.5λmax=284nmλmin=254nm0.01%無(wú)水乙醇溶液（三）UV法95薄層板硅膠G展開劑環(huán)己烷-乙醚（4：1）顯色劑硫酸（105℃5′）VitERf

=0.7（四）TLC法（五）GC、IR96三、雜質(zhì)檢查ChP規(guī)定本品須檢查酸度、游離生育酚、有關(guān)物質(zhì)和殘留溶劑。（一）酸度

目的：檢查維生素E制備過(guò)程中引入的游離醋酸。

方法：以NaOH滴定液（0.1mol/L）滴定。971.原理利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰（二）生育酚

鈰量法檢查游離生育酚反應(yīng)摩爾比1:2試劑：硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黃→灰紫）+2Ce4++2Ce3+982.方法取本品0.10g，加無(wú)水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用0.01mol/L硫酸鈰液滴定，消耗硫酸鈰液≤1.0ml。99（三）有關(guān)物質(zhì)

方法取本品，用正己烷稀釋成每1ml含2.5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，用正己烷稀釋成1ml含25μg的溶液，作為對(duì)照溶液。用氣相色譜測(cè)定。限量α-生育酚的峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.5倍各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2.5倍(1.0%)(1.5%)(2.5%)100（四）殘留溶劑（正己烷）

方法取本品，用二甲基甲酰胺稀釋成每1ml含50mg的溶液，作為供試品溶液；另取正己烷，加二甲基甲酰胺稀釋成1ml含10μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照殘留溶劑測(cè)定法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法）試驗(yàn)，含正己烷應(yīng)符合規(guī)定。101四、含量測(cè)定硫酸鈰直接滴定法比色法GCHPLC熒光分光光度法102（一）GC法特點(diǎn)選擇性好靈敏度高速度快分離效能好ChP收載的維生素E原料藥及其制劑均采用本法測(cè)定103內(nèi)標(biāo)法加校正因子載氣：氮?dú)夤潭ㄏ啵汗柰∣V—17）檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器柱溫：265℃柱效：理論塔板數(shù)按維生素E峰計(jì)算應(yīng)不低于500分離度：維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于2內(nèi)標(biāo)物：正三十二烷

104（二）HPLC法JP15采用HPLC法測(cè)定維生素E含量，以外標(biāo)法定量。固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相：甲醇-水（49:1）檢測(cè)波長(zhǎng)：292nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：R＞2.6，RSD≤0.8%1.色譜條件2.方法取維生素E供試品和生育酚對(duì)照品各0.05g，溶于無(wú)水乙醇，并稀釋至50ml，即得供試品溶液和對(duì)照品溶液；精密吸取兩種溶液各20μl，注入HPLC儀，記錄色譜圖。105（三）熒光分光光度法采用同步熒光掃描法測(cè)定血清中VitE的含量常用熒光測(cè)定方法：是確定激發(fā)（或發(fā)射）波長(zhǎng)在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描發(fā)射（或激發(fā)）光譜。同步熒光掃描技術(shù)：是同時(shí)掃描激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，由此測(cè)得熒光強(qiáng)度與對(duì)應(yīng)的激發(fā)波長(zhǎng)（或發(fā)射波長(zhǎng)）構(gòu)成的圖譜。維生素E的熒光峰和溶劑的拉曼光譜重疊，影響測(cè)定的靈敏度和準(zhǔn)備度。可消除溶劑拉曼光譜的干擾，提高測(cè)定的靈敏度和準(zhǔn)備度。106激發(fā)波長(zhǎng)

295nm發(fā)射波長(zhǎng)325nm普通熒光同步熒光(恒波長(zhǎng)，Δλ=40nm)107維生素E水解性氧化性與硝酸反應(yīng)——鑒別與三氯化鐵反應(yīng)——鑒別和含量測(cè)定與硫酸鈰反應(yīng)——雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定UV——鑒別108維生素A維生素B維生素C維生素E

A.氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)

B.共軛多烯側(cè)鏈

C.苯并二氫吡喃

D.烯二醇和內(nèi)酯環(huán)

E.β-內(nèi)酰胺環(huán)和氫化噻唑環(huán)練習(xí)題BADC1092.維生素A的含量測(cè)定方法有A.汞量法

B.三點(diǎn)校正紫外分光光度法

C.碘量法D.雙相滴定法

E.三氯化銻比色法

1103.下列藥物的堿性溶液，加入鐵氰化鉀后，再加正丁醇，顯藍(lán)色熒光的是A.維生素AB.維生素B1

C.維生素CD.維生素D