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紫外可見分光光度法課詳解演示文稿當(dāng)前第1頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)1(優(yōu)選)紫外可見分光光度法課當(dāng)前第2頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)2可見吸收光譜:電子躍遷光譜,吸收光波長(zhǎng)范圍400750nm,主要用于有色物質(zhì)的定量分析。二、吸光光度法的特點(diǎn):(1)靈敏度高;(2)準(zhǔn)確度高;(3)操作簡(jiǎn)便快速;(4)應(yīng)用廣泛。當(dāng)前第3頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)3三、光的基本性質(zhì)
光是一種電磁波,具有波粒二象性。光的波動(dòng)性可用波長(zhǎng)、頻率、光速c、波數(shù)(cm-1)等參數(shù)來描述:
=c;波數(shù)=1/=/c光是由光子流組成,光子的能量:
E=h=hc/
(Planck常數(shù):h=6.626×10-34J×S)光的波長(zhǎng)越短(頻率越高),其能量越大。白光(太陽光):由各種單色光組成的復(fù)合光
單色光:?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)的光(由具有相同能量的光子組成)
可見光區(qū):400-750nm
紫外光區(qū):近紫外區(qū)200-400nm遠(yuǎn)紫外區(qū)10-200nm(真空紫外區(qū))當(dāng)前第4頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)4四、物質(zhì)的顏色
物質(zhì)的顏色是由于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光具有選擇性吸收而產(chǎn)生的。表1-1物質(zhì)的顏色與吸收光顏色的互補(bǔ)關(guān)系當(dāng)前第5頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)5五、物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收及吸收曲線M+
h
M*M+熱M+熒光或磷光基態(tài)激發(fā)態(tài)E1(△E)E2E=E2-
E1=h
量子化;選擇性吸收;分子結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性使其對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收程度不同;用不同波長(zhǎng)的單色光照射,測(cè)吸光度—
吸收曲線與最大吸收波長(zhǎng)
max;當(dāng)前第6頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)6六、光吸收曲線
用不同波長(zhǎng)的單色光照射某一物質(zhì)測(cè)定吸光度,以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),繪制曲線,描述物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收能力。圖1-1吸收曲線當(dāng)前第7頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)7吸收曲線的討論:(1)同一種物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸光度不同。吸光度最大處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)稱為最大吸收波長(zhǎng)λmax(2)不同濃度的同一種物質(zhì),其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對(duì)于不同物質(zhì),它們的吸收曲線形狀和λmax則不同。(3)吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息,并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。當(dāng)前第8頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)8
(4)不同濃度的同一種物質(zhì),在某一定波長(zhǎng)下吸光度A有差異,在λmax處吸光度A的差異最大。此特性可作為物質(zhì)定量分析的依據(jù)。(5)在λmax處吸光度隨濃度變化的幅度最大,所以測(cè)定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長(zhǎng)的重要依據(jù)。當(dāng)前第9頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)9
七、光吸收的基本定律1.朗伯—比耳定律
布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。A∝b
1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有類似的關(guān)系。A∝c二者的結(jié)合稱為朗伯—比耳定律,其數(shù)學(xué)表達(dá)式為:當(dāng)前第10頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)10朗伯-比耳定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式為:
A=lg(I0/I)=εbc
或:A=lg(I0/I)=abc
式中A:吸光度;I0
:入射光強(qiáng)度;I:透射光強(qiáng)度;
b:液層厚度(光程長(zhǎng)度),通常以cm為單位;ε:摩爾吸光系數(shù),單位L·mol-1·cm-1;溶液的濃度c單位mol·L-1;a:吸光系數(shù),單位L·g-1·cm-1;
溶液的濃度c單位g·L-1。
當(dāng)前第11頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)11
ε與a的關(guān)系為:
ε=Ma(M為物質(zhì)的摩爾質(zhì)量)摩爾吸光系數(shù)ε(L·mol-1·cm-1)在數(shù)值上等于濃度為1mol·L-1、液層厚度為1cm時(shí)該溶液在某一波長(zhǎng)下的吸光度。吸光系數(shù)a(L·g-1·cm-1)相當(dāng)于濃度為1g·L-1,液層厚度為1cm時(shí)該溶液在某一波長(zhǎng)下的吸光度。當(dāng)前第12頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)12吸光度A描述溶液對(duì)光的吸收程度:
A=lg(I0/I)透過度T描述入射光透過溶液的程度:
T=It/I0吸光度A與透光度T的關(guān)系:
A=-lgT
A、T、c三者的關(guān)系如右圖所示。吸光度A具有加和性:A總=A1+A2A1、A2分別為兩種吸光物質(zhì)的吸光度。ATATC圖8-3A,T,C關(guān)系曲線當(dāng)前第13頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)13
朗伯-比耳定律的物理意義:當(dāng)平行單色光通過單一均勻的、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí),溶液的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。朗伯-比耳定律是吸光光度法的理論基礎(chǔ)和定量測(cè)定的依據(jù)。廣泛地應(yīng)用于紫外光、可見光、紅外光區(qū)的吸收測(cè)量,也適用于原子吸收測(cè)量。當(dāng)前第14頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)142.摩爾吸光系數(shù)ε的討論(1)吸收物質(zhì)在一定波長(zhǎng)和溶劑條件下的特征常數(shù);(2)不隨濃度c和光程長(zhǎng)度b的改變而改變。在溫度和波長(zhǎng)等條件一定時(shí),ε僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān),與待測(cè)物濃度無關(guān);(3)可作為定性鑒定的參數(shù);(4)同一吸收物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的ε值是不同的。在最大吸收波長(zhǎng)λmax處的摩爾吸光系數(shù),常以εmax表示。εmax表明了該吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力,也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。
當(dāng)前第15頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)15(5)εmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng),用光度法測(cè)定該物質(zhì)的靈敏度越高。
ε>105:超高靈敏;ε=(6~10)×104:高靈敏;
ε=(2~6)×104:中等靈敏;
ε<2×104:不靈敏。(6)ε在數(shù)值上等于濃度為1mol/L、液層厚度為1cm時(shí)該溶液在某一波長(zhǎng)下的吸光度。
當(dāng)前第16頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)163.偏離朗伯—比耳定律的原因
標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定未知溶液的濃度時(shí),發(fā)現(xiàn):標(biāo)準(zhǔn)曲線常發(fā)生彎曲(尤其當(dāng)溶液濃度較高時(shí)),這種現(xiàn)象稱為對(duì)朗伯—比耳定律的偏離。引起這種偏離的因素(兩大類):(1)物理性因素,即儀器的非理想引起的;(2)化學(xué)性因素。
當(dāng)前第17頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)17(1)物理性因素難以獲得真正的純單色光。
朗伯—比耳定律的前提條件之一是入射光為單色光。分光光度計(jì)只能獲得近乎單色的狹窄光帶。復(fù)合光可導(dǎo)致對(duì)朗伯—比耳定律的正或負(fù)偏離。非單色光、雜散光、非平行入射光都會(huì)引起對(duì)朗伯—比耳定律的偏離,最主要的是非單色光作為入射光引起的偏離。
圖8-4-1工作曲線當(dāng)前第18頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)18
|Δε|很小時(shí),則可近似認(rèn)為是單色光。為克服非單色光引起的偏離,首先應(yīng)選擇比較好的單色器。此外還應(yīng)將入射光波長(zhǎng)選定在待測(cè)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)且吸收曲線較平坦處。(2)化學(xué)性因素朗伯-比耳定律假定:所有的吸光質(zhì)點(diǎn)之間不發(fā)生相互作用,實(shí)驗(yàn)證明,這種假定只有在稀溶液時(shí)才基本符合。
當(dāng)前第19頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)19
當(dāng)溶液濃度c>10-2mol·L-1時(shí),吸光質(zhì)點(diǎn)間可能發(fā)生締合等相互作用,直接影響了對(duì)光的吸收。朗伯-比耳定律只適用于稀溶液。溶液中存在著離解、聚合、互變異構(gòu)、配合物的形成等化學(xué)平衡時(shí),使吸光質(zhì)點(diǎn)的濃度發(fā)生變化,影響吸光度。(3)工作曲線不過原點(diǎn)存在系統(tǒng)誤差:吸收池不完全一樣;參比溶液選擇不當(dāng)?shù)?。圖8-4-2工作曲線當(dāng)前第20頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)20
§1-2紫外可見分光光度計(jì)
一、主要部件光源單色器樣品室檢測(cè)器顯示
當(dāng)前第21頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)211.光源:2.單色器:包括狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件棱鏡——對(duì)不同波長(zhǎng)的光折射率不同色散元件分出光波長(zhǎng)不等距光柵——衍射和干涉分出光波長(zhǎng)等距鎢燈或鹵鎢燈——可見光源350~1000nm氫燈或氘燈——紫外光源200~360nm當(dāng)前第22頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)22續(xù)前3.吸收池:玻璃——能吸收UV光,僅適用于可見光區(qū)石英——不能吸收紫外光,適用于紫外和可見光區(qū)要求:匹配性(對(duì)光的吸收和反射應(yīng)一致)4.檢測(cè)器:將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置5.記錄裝置:訊號(hào)處理和顯示系統(tǒng)光電池光電管光電倍增管二極管陣列檢測(cè)器當(dāng)前第23頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)23類型:
1.單光束分光光度計(jì):特點(diǎn):使用時(shí)來回拉動(dòng)吸收池→移動(dòng)誤差對(duì)光源要求高比色池配對(duì)當(dāng)前第24頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)24續(xù)前2.雙光束分光光度計(jì):
特點(diǎn):不用拉動(dòng)吸收池,可以減小移動(dòng)誤差對(duì)光源要求不高可以自動(dòng)掃描吸收光譜當(dāng)前第25頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)25續(xù)前3.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)特點(diǎn):利用吸光度差值定量消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差當(dāng)前第26頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)26當(dāng)前第27頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)27
§1-3顯色反應(yīng)及顯色條件的選擇一、顯色反應(yīng)的選擇
選擇顯色劑選擇顯色反應(yīng)時(shí)應(yīng)考慮的因素:靈敏度高、選擇性高、生成物穩(wěn)定、顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無明顯吸收,與有色物最大吸收波長(zhǎng)之差(對(duì)比度),應(yīng)滿足>60nm。常用配位顯色反應(yīng)或氧化還原顯色反應(yīng)對(duì)待測(cè)離子進(jìn)行顯色后測(cè)定。例如:鋼中微量錳的測(cè)定,Mn2+不能直接進(jìn)行光度測(cè)定,可將其氧化成紫紅色的Mn(Ⅶ),在525nm處
當(dāng)前第28頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)28二、顯色條件的選擇1.顯色劑用量:吸光度A與顯色劑用量cR的關(guān)系曲線如圖12-8所示。選擇曲線變化平坦處作為顯色條件。2.溶液的pH值在相同實(shí)驗(yàn)條件下,分別測(cè)定不同pH值條件下顯色溶液的吸光度。選擇曲線中吸光度較大且恒定的平坦區(qū)所對(duì)應(yīng)的pH范圍。3.顯色時(shí)間與溫度顯色反應(yīng)一般在室溫下進(jìn)行,有的反應(yīng)需加熱,應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)找出適宜的溫度范圍。圖8-10吸光度與顯色劑用量關(guān)系曲線cRcRcRAAA當(dāng)前第29頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)29pHA
圖8-11吸光度與pH關(guān)系曲線三、干擾的消除
1.加入掩蔽劑選擇掩蔽劑的原則是:掩蔽劑不與待測(cè)組分反應(yīng);掩蔽劑本身及掩蔽劑與干擾組分的反應(yīng)產(chǎn)物不干擾待測(cè)組分的測(cè)定。例:測(cè)定Ti4+,當(dāng)前第30頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)30
加入H3PO4掩蔽劑使Fe3+(黃色)成為[Fe(PO4)2]3-(無色),消除Fe3+的干擾;又如用鉻天菁S光度法測(cè)定Al3+時(shí),加入抗壞血酸作掩蔽劑將Fe3+還原為Fe2+,消除Fe3+的干擾。2.選擇適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)條件通過控制適宜的顯色條件,消除干擾組分的影響。3.選擇適宜的波長(zhǎng)避開干擾物的最大吸收,配制適當(dāng)?shù)膮⒈纫?,消除干擾組分的影響。
當(dāng)前第31頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)31
4.提高顯色反應(yīng)的選擇性利用被測(cè)物能形成三元絡(luò)合物的特點(diǎn),提高顯色反應(yīng)的選擇性。5.分離干擾離子
采用適當(dāng)?shù)姆蛛x方法預(yù)先除去干擾物質(zhì)。當(dāng)前第32頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)32§1-4吸光光度測(cè)量條件的選擇1.選擇適當(dāng)?shù)娜肷洳ㄩL(zhǎng)一般應(yīng)該選擇λmax為入射光波長(zhǎng)。但如果λmax處有共存組分干擾時(shí),則應(yīng)考慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長(zhǎng)。2.選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤何粘乇砻鎸?duì)入射光有反射和吸收作用;溶液的不均勻性所引起的散射;過量顯色劑、其它試劑、溶劑等引起的吸收,這些因素影響待測(cè)組分透光度或吸光度的測(cè)量。采用參當(dāng)前第33頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)33
比溶液校正的方法消除或減小這些影響。在相同的吸收池中裝入?yún)⒈热芤?又稱空白溶液),調(diào)節(jié)儀器使透過參比池的吸光度為零(稱為工作零點(diǎn))。在此條件下測(cè)得的待測(cè)溶液的吸光度才真正反映其吸光強(qiáng)度。當(dāng)前第34頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)34圖8-12吸光度測(cè)定條件的選擇曲線A為鈷絡(luò)合物的吸收曲線曲線B為顯色劑的吸收曲線當(dāng)前第35頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)35
參比溶液的選擇一般遵循以下原則:⑴若僅待測(cè)組分與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)物在測(cè)定波長(zhǎng)處有吸收,其它所加試劑均無吸收,用純?nèi)軇ㄋ?作參比溶液;⑵若顯色劑或其它所加試劑在測(cè)定波長(zhǎng)處略有吸收,而試液本身無吸收,用“試劑空白”(不加試樣溶液)作參比溶液;⑶若待測(cè)試液在測(cè)定波長(zhǎng)處有吸收,而顯色劑等無吸收,則可用“試樣空白”(不加顯色劑)作參比溶液;⑷若顯色劑、試液中其它組分在測(cè)量波長(zhǎng)處有吸收,則可在試液中加入適當(dāng)掩蔽劑將待測(cè)組分掩蔽后再加顯色劑,作為參比溶液。當(dāng)前第36頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)360.20.80.40.6A012
345C/mg·L-1分光光度法三、標(biāo)準(zhǔn)曲線法繪圖示例:當(dāng)前第37頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)37
§8-5吸光光度法的應(yīng)用
一、示差分光光度法(示差法)普通分光光度法一般只適于測(cè)定微量組分,當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí),將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。示差法需要較大的入射光強(qiáng)度,并采用濃度稍低于待測(cè)溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。設(shè):待測(cè)溶液濃度為cx,標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs(cs<cx)。則:
Ax=εbcx
As=εbcs
當(dāng)前第38頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)38ΔA=Ax-As=εb(cx-cs)=εbΔc
測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔA。示差法測(cè)得的吸光度與Δc呈直線關(guān)系。由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的Δc值,則待測(cè)溶液濃度cx:
cx=cx+Δc
當(dāng)前第39頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)39示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理:
普通法:cs的T=10%;cx的T=5%示差法:cs做參比,調(diào)T=100%則:cx的T=50%;標(biāo)尺擴(kuò)展10倍當(dāng)前第40頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)40
圖8-13是不同As的溶液作參比時(shí)相對(duì)誤差函數(shù)曲線。由圖可見,隨著參比溶液濃度增加,濃度相對(duì)誤差減小。若參比溶液選擇適當(dāng),則示差法測(cè)定的準(zhǔn)確度可與滴定法接近。二、多組分的同時(shí)測(cè)定
1.若各組分的吸收曲線互不重疊,則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。這本質(zhì)上與單組分測(cè)定沒有區(qū)別。2.若各組分的吸收曲線互有重疊,則可根據(jù)吸光度的加和性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。
當(dāng)前第41頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)41Aλ1=εaλ1bCa+εbλ1bCb
Aλ2=εaλ2bCa+εbλ2bCb
圖8-13相對(duì)誤差函數(shù)曲線AAλλλ1λ1λ2λ2圖8-14雙組分的吸收曲線當(dāng)前第42頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)42§1-6紫外吸收光譜簡(jiǎn)介
一、有機(jī)化合物電子躍遷的類型
有機(jī)化合物的紫外—可見吸收光譜,是其分子中外層價(jià)電子躍遷的結(jié)果(三種):σ電子、π電子、n電子。分子軌道理論:一個(gè)成鍵軌道必定有一個(gè)相應(yīng)的反鍵軌道。通常外層電子均處于分子軌道的基態(tài),即成鍵軌道或非鍵軌道上。
外層電子吸收紫外或可見輻射后,就從基態(tài)向激發(fā)態(tài)(反鍵軌道)躍遷。主要有四種躍遷所需能量ΔΕ大小順序?yàn)椋簄→π*<π→π*<n→σ*<σ→σ*當(dāng)前第43頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)43⑴σ→σ*躍遷
所需能量最大,σ電子只有吸收遠(yuǎn)紫外光的能量才能發(fā)生躍遷。飽和烷烴的分子吸收光譜出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)(吸收波長(zhǎng)λ<200nm,只能被真空紫外分光光度計(jì)檢測(cè)到)。如甲烷的λ為125nm,乙烷λmax為135nm。⑵n→σ*躍遷
所需能量較大。吸收波長(zhǎng)為150~250nm,大部分在遠(yuǎn)紫外區(qū),近紫外區(qū)仍不易觀察到。含非鍵電子的飽和烴衍生物(含N、O、S和鹵素等雜原子)均呈現(xiàn)n→σ*躍遷。如一氯甲烷、甲醇、三甲基胺n→σ*躍遷的λ分別為173nm、183nm和227nm。當(dāng)前第44頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)44⑶π→π*躍遷
所需能量較小,吸收波長(zhǎng)處于遠(yuǎn)紫外區(qū)的近紫外端或近紫外區(qū),摩爾吸光系數(shù)εmax一般在104L·mol-1·cm-1以上,屬于強(qiáng)吸收。不飽和烴、共軛烯烴和芳香烴類均可發(fā)生該類躍遷。如:乙烯π→π*躍遷的λ為162nm,εmax為:1×104L·mol-1·cm-1。⑷n→π*躍遷
需能量最低,吸收波長(zhǎng)λ>200nm。這類躍遷在躍遷選律上屬于禁阻躍遷,摩爾吸光系數(shù)一般為10~100L·mol-1·cm-1,吸收譜帶強(qiáng)度較弱。分子中孤對(duì)電子和π鍵同時(shí)存在時(shí)發(fā)生n→π*躍遷。丙酮n→π*躍遷的λ為275nmεmax為22L·mol-1·cm-1(溶劑環(huán)己烷)。當(dāng)前第45頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)45紅移與藍(lán)移有機(jī)化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩL(zhǎng)λmax和吸收強(qiáng)度發(fā)生變化:
λmax向長(zhǎng)波方向移動(dòng)稱為紅移,向短波方向移動(dòng)稱為藍(lán)移(或紫移)。吸收強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)ε增大或減小的現(xiàn)象分別稱為增色效應(yīng)或減色效應(yīng),如圖所示。當(dāng)前第46頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)46二、影響紫外吸收光譜的因素1.溶劑的影響溶劑極性的變化會(huì)使化合物的紫外吸收光譜形狀改變。例如,在非極性的庚烷溶劑中,苯酚在270nm處出現(xiàn)中等強(qiáng)度的吸收峰并有精細(xì)結(jié)構(gòu);但在極性的乙醇溶劑中,這些精細(xì)結(jié)構(gòu)變得不明顯或消失。2.溶劑pH的影響當(dāng)被測(cè)物質(zhì)具有酸性或堿性基團(tuán)時(shí),溶劑的pH值的變化對(duì)光譜的影響較大。3.空間效應(yīng)若存在空間阻礙,影響較大共軛體系的生成,則最大吸收波長(zhǎng)較短,吸光系數(shù)小。當(dāng)前第47頁\共有51頁\編于星期四\10點(diǎn)47三、紫外吸收光譜法的應(yīng)用
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