河北醫(yī)大中藥藥理學實驗指導04基本實驗項目-21黨參對小鼠記憶獲得性障礙的改善作用跳臺法

實驗二十一

黨參對小鼠記憶獲得性障礙的改善作用（跳臺法)

【目的】

學習記憶獲得性障礙模型的制作方法，掌握用跳臺法觀察中藥的益智作用。

【原理】

小鼠跳臺儀底面可以通電，底面上放置1個絕緣的跳臺。當小鼠在一次訓練中受到電擊時，跳上跳臺可逃避電擊，從而獲得記憶。記憶障礙模型組動物在訓練前注射膽堿受體阻斷劑——\t"/kecheng/2013/_blank"樟柳堿或東\t"/kecheng/2013/_blank"莨菪堿造成記憶障礙，在一定時間內學習記憶能力下降，跳下潛伏期縮短，跳下次數(shù)增加。通過記憶障礙模型動物可觀察補益藥復方黨參對小鼠記憶障礙的改善作用。

\t"/kecheng/2013/_blank"智力低下多見于虛證，是由于氣血虧損，\t"/kecheng/2013/_blank"心脾兩虛導致\t"/kecheng/2013/_blank"腎精不足，髓海不充所致。許多具有補益作用的中藥及其復方制劑常有益智、增強記憶和填髓補腦等功效。

【器材】

小鼠跳臺儀：為一個60cm×12cm×18cm的被動回避反射箱，箱內用不透明的黑色塑料板分隔成5間，箱底鋪以銅柵，銅絲直徑為2mm，間隔為5mm。每間左后方放置一個高和直徑均為405cm的橡皮墊，作為跳臺?？烧{變壓器、秒表5只、1ml注射器3支。

【藥品】

黨參10g/ml、東\t"/kecheng/2013/_blank"莨菪堿1mg/ml、腦復康10mg/ml。

【動物】

小白鼠。

【方法】

用小鼠6只，雄性，體重為15±2g，按體重隨機分為3組，每組2只。分別為給藥組、模型組和對照組。首先將可調變壓器與跳臺儀相連，用變壓器控制電流強度。訓練前10min，模型組、給藥組小鼠分別腹腔注射\t"/kecheng/2013/_blank"東莨菪堿2mg/kg，對照組腹腔注射等量的生理鹽水。訓練時，同時將5只小鼠分別放入小室內，適應3min，然后通以36V電流。小鼠雙足同時接觸銅柵為觸電，視為錯誤反應。訓練5min并記錄觸電次數(shù)。2h后重新測試，觀察小鼠記憶情況。測試時，先把小鼠放在跳臺上，記錄并比較5min內跳下次數(shù)，作為記憶指標。統(tǒng)計、分析并比較3或5min內跳下次數(shù)及跳下潛伏期（將小鼠放到臺上開始計時，到第一次雙足觸電時間)作為記憶指標，比較各組間差異。

【結果】按表記錄。黨參對\t"/kecheng/2013/_blank"東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙的改善作用（±SD)組別5min內錯誤次數(shù)潛伏期（s)對照組模型組給藥組

【注意】

（1)實驗室應保持安靜，光線不宜過強，室溫應控制在20～25℃；實驗前動物應在實驗室適應2～3d。（2)實驗用動物應預先經過挑選，兩前肢間皮膚電阻在150～300kΩ之間為宜，實驗時各組間動物應交叉進行，以減少時辰的影響。（3)實驗過程中要及時清理動物大小便，實驗完成后跳臺儀底部要徹底清洗，擦干；銅柵上如污垢沉積會影響觸電效果。

此方法簡便易行，不需要復雜的技術設備，同時可以觀察5只小鼠的反應，適用于初篩。缺點是動物個體差異比較大。

【附】

記憶損傷模型的制備：中樞抑制藥、M受體阻斷劑、腦蛋白合成抑制劑以及缺氧均可制作各類型學習記憶缺損的動物模型。例如：用戊巴比妥鈉15～30mg/kg，訓練前30min腹腔給藥，或20～40%的乙醇0.1ml/10g訓練前30min灌胃，均可制作小鼠記憶獲得性障礙模型；腦蛋白質合成抑制劑環(huán)乙酰亞胺120mg/kg訓練后腹腔給藥，或致缺氧劑\t"/kecheng/2013/_blank"亞硝酸鈉120mg/kg訓練后皮下給藥，均可造成記憶鞏固障礙；上述乙醇于測試前30min灌胃給藥可造成小