2023版高考生物一輪總復(fù)習(xí)第10單元生物技術(shù)與工程第38課動(dòng)物細(xì)胞工程

第38課動(dòng)物細(xì)胞工程

M學(xué)業(yè)質(zhì)量水平要求V

1.結(jié)合具體實(shí)例，說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)原理。(生命觀念、科學(xué)思維)

2.針對(duì)生產(chǎn)生活中的實(shí)際問(wèn)題，從動(dòng)物細(xì)胞工程出發(fā)，嘗試提出解決方案并進(jìn)行設(shè)計(jì)。

(生命觀念、科學(xué)探究)

:構(gòu)建必備知識(shí)培養(yǎng)關(guān)鍵能力

考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

「概念梳理」

i.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及其條件

(D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的

培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。

(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

①營(yíng)養(yǎng)：除糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素之外，通常還需加入血清等一些天然成分。

②無(wú)菌、無(wú)［培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理及在無(wú)菌環(huán)境

毒環(huán)境［下操作定期更換培養(yǎng)液,清除代謝物

③溫度、pH和滲透壓

適宜的溫度：36.5+0.5℃；適宜的pH：7.2-7.4；滲透壓也是需要考慮的一個(gè)重要

環(huán)境參數(shù)。

95%的空氣:其中Oz為細(xì)胞代謝必需的

④氣體環(huán)境?

5%的COz：維持培養(yǎng)液的pH

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程

(1)過(guò)程

I動(dòng)物組織I-----機(jī)械的方法或-----I單個(gè)細(xì)胞

.培養(yǎng)液

|傳代培養(yǎng))分瓶培養(yǎng)|原代培養(yǎng)〉適宜條件嬴］

(2)體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞類型

①一類細(xì)胞能夠懸浮于培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖。

②另一類則需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)繁殖，而且還會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象,從而

使細(xì)胞停止分裂增殖。

(3)生長(zhǎng)特點(diǎn)

①細(xì)胞貼壁：將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，懸液中分散的細(xì)胞很快

就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。

②接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象稱為細(xì)

胞的接觸抑制。

(4)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)

①原代培養(yǎng)：通常指分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng),即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。

②傳代培養(yǎng)：指分瓶之后的細(xì)胞培養(yǎng)。

3.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

(1)分布：存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。

(2)類型：胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。

(3)胚胎干細(xì)胞：簡(jiǎn)稱啦細(xì)胞，存在于早期胚胎中,具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一

種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至包的潛能。

(4)成體干細(xì)胞

①分布：成體組織或器官內(nèi)。

②類型：骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞和睪丸中的精原干細(xì)胞等。

③特性：一般認(rèn)為，成體干細(xì)胞具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具

直發(fā)育成完整個(gè)體的能力。

(5)應(yīng)用

①有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞,與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相

關(guān)，因而在醫(yī)學(xué)上有著廣泛的應(yīng)用。

②胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,這涉及倫理問(wèn)題，因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。

③誘導(dǎo)多能干細(xì)胞

a.概念：通過(guò)體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞,所獲得的類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，簡(jiǎn)稱iPS

細(xì)胞。

b.優(yōu)點(diǎn)：不涉及倫理問(wèn)題；理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。

r概念辨析」

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。(V)

2.體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞，只需給予充足的營(yíng)養(yǎng)即可。(X)

3.在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需置于含有95%0z和5%C()2的混合氣體環(huán)境中。(X)

4.進(jìn)行傳代培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞均可直接用離心法收集。(X)

5.已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。(V)

【教材細(xì)節(jié)命題】

1.(選擇性必修3P44旁欄思考)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用胰蛋白能分散細(xì)胞，這說(shuō)明

細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。用胃蛋白酶行嗎？胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于

6時(shí)，胃蛋白酶就會(huì)失去活性。而多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4,胃蛋白酶在此

環(huán)境中沒(méi)有活性，所以用胃蛋白酶不行。

2.（選擇性必修3P44正文）細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中分裂受阻的原因是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因

細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻；對(duì)于貼壁細(xì)胞

來(lái)說(shuō)，除上述因素外，還會(huì)因?yàn)榻佑|抑制而停止分裂增殖。

概念涂研」

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較

比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

生物學(xué)原理細(xì)胞增殖細(xì)胞全能性

培養(yǎng)基性質(zhì)液體固體

培養(yǎng)結(jié)果子代細(xì)胞新的植株

①快速繁殖；

②培育作物新品種；

應(yīng)用是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)

③細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；

④作物脫毒

培養(yǎng)條件無(wú)菌、適宜的溫度和pH、營(yíng)養(yǎng)等

取材新鮮的動(dòng)物組織離體的植物器官、組織或細(xì)胞

培養(yǎng)對(duì)象分散的單個(gè)細(xì)胞離體的植物器官、組織或細(xì)胞

過(guò)程原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)脫分化、再分化

細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、①貼壁生長(zhǎng)；①脫分化形成愈傷組織；

分化特點(diǎn)②接觸抑制②再分化形成根、芽等

「案例導(dǎo)引」

考向11動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分析

1.下圖所示是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，下列相

關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

7

T

F

9

0

;

)

、

虺

邂

國(guó)

患

A.實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白醐溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞

B.培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素，以避免雜菌污染

C.曲線be段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累

D.培養(yǎng)至第6天時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)

D解析：實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞，A正確；培養(yǎng)

液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素，以避免雜菌污染，B正確；曲線be段表示活細(xì)胞密度降

低而死細(xì)胞密度增加，產(chǎn)生的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C

正確；培養(yǎng)至第6天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，而不是新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù),

D錯(cuò)誤。

2.為檢測(cè)某藥物X的抗癌活性，在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞，

使其貼壁生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞磯的藥物X,培養(yǎng)72小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，比較實(shí)驗(yàn)

組和對(duì)照組每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)目。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分

B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)

C.對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無(wú)菌蒸儲(chǔ)水，其他條件一致

D.若實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)低于對(duì)照組，可初步判斷此藥物有抗癌效果

C解析：培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清，A正確；對(duì)于已經(jīng)貼壁

生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞，可用胰蛋白酶處理，使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；實(shí)驗(yàn)組加

入溶于二甲基亞磯(溶劑)的藥物X,對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞磯(溶劑)，C錯(cuò)誤；

分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目比對(duì)照組少，可以初步判斷藥物X

有抗癌效果，D正確。

【技法總結(jié)】有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí)點(diǎn)可歸納為4個(gè)“2”

(1)培養(yǎng)材料為“2”：即動(dòng)物胚胎、幼齡動(dòng)物的組織和器官。

(2)培養(yǎng)過(guò)程為“2”：即原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)。

(3)胰蛋白酶使用“2”次：即原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)中均使用，目的是使細(xì)胞分散開。

(4)細(xì)胞生長(zhǎng)特點(diǎn)有“2”個(gè)：即貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制。

考向2|干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用的分析

3.干細(xì)胞的培養(yǎng)成功是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域重大的成就之一，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

()

A.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中

B.胚胎干細(xì)胞具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞的潛能

C.成體干細(xì)胞是成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞，具有組織特異性

D.iPS細(xì)胞只能由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化形成

D解析：iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的，后來(lái)發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞

等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。

4.現(xiàn)在有一個(gè)嬰兒在出生后醫(yī)院為他保留了臍帶血，在他以后生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中如果出

現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過(guò)血液中的干細(xì)胞來(lái)為他治病，關(guān)于這個(gè)實(shí)例說(shuō)法正確的

是()

A.用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的所有全能性

B.用臍帶血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子所有的疾病

C.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

D.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長(zhǎng)期給他使用免疫抑制藥物

C解析：用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治療，只要誘導(dǎo)細(xì)胞分化成該組織、

器官即可，不需激發(fā)其所有全能性，A錯(cuò)誤；臍帶血中含有大量未成熟的造血干細(xì)胞，將臍

帶血細(xì)胞移植，對(duì)白血病、再生障礙性貧血等惡性血液病的治療具有療效，B錯(cuò)誤；臍帶血

移植屬自體移植，基本不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，不需要長(zhǎng)期給他使用免疫抑制藥物，D錯(cuò)誤。

考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體

「概念梳理」

1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

(1)概念：使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。

(2)結(jié)果：形成雜交細(xì)胞,且具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。

(3)誘導(dǎo)方法：噠融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。

(4)意義：突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

(5)應(yīng)用

①是研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。

②雜交瘤技術(shù)為制造單克隆抗體開辟了新途徑。

2.單克隆抗體及其應(yīng)用

(1)單克隆抗體的制備

①制備原理

a.B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：每個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。

b.骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能在體外大量增殖。

c.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖,又能產(chǎn)生特定抗體。

②制備過(guò)程

注射特定培養(yǎng)骨髓

的抗原瘤細(xì)胞

免疫

小鼠

多種B淋巴細(xì)胞/骨籟瘤細(xì)胞

誘導(dǎo)融合

尤回渡器

用特定選擇培養(yǎng)基篩選,未融合或同種

,融合的細(xì)胞死亡

（?），雜交瘤細(xì)胞

I克隆上述雜交細(xì)胞

專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性

將不同雜交細(xì)胞分開,并克隆6—抗體

檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞

注射到小

鼠腹腔內(nèi)戔\體外

單克隆抗體

（2）單克隆抗體的應(yīng)用

①作診斷試劑,在多種疾病的診斷和病原住鑒定中發(fā)揮重要作用。

②用于運(yùn)載藥物和治療疾病。

「概念辨析」

1.動(dòng)物體細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞仍然是二倍體細(xì)胞。（X）

2.與植物原生質(zhì)體融合相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素有滅活的病毒。（V）

3.單克隆抗體的制備可從未經(jīng)免疫的小鼠體內(nèi)提取B淋巴細(xì)胞。（X）

4.單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選目的相同。（X）

【教材細(xì)節(jié)命題】

1.（選擇性必修3P48相關(guān)信息）病毒滅活的含義是信活是指用物理或化學(xué)手段使病毒

或細(xì)菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。

2.（選擇性必修3P49圖2-16拓展）B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞各有何特點(diǎn)？

免疫的B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無(wú)限增殖。骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，不能產(chǎn)

生抗體。雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生特定的抗體，又能在培養(yǎng)條件下進(jìn)行無(wú)限增殖。

3.（選擇性必修3P50思考?討論拓展）抗體一藥物偶聯(lián)物中真正起治療作用的物質(zhì)是

相關(guān)藥物。是單克隆抗體嗎？為什么？不是，單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細(xì)

胞所在位置，借助其導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥

劑量。

概念深研」

1.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較

項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合

原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性

酶解法去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形

分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)

步驟成雜種體細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)形成雜種

胞融合

植株

誘導(dǎo)方物理法：電融合法、離心法等；化學(xué)法：PEGPEG融合法、電融合法、滅

法融合法、高Ca＞一高pH融合法等活病毒誘導(dǎo)法等

結(jié)果形成雜種植株形成雜種細(xì)胞

2.單克隆抗體制備的兩次篩選

項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選

篩選原誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外由于小鼠在生活中還受到其他抗原的

因還有未融合的細(xì)胞刺激，所以需經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)

用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的

用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一

細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞

篩選方個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培

（“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞）都會(huì)死亡,

法養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)

只有融合的雜交瘤細(xì)胞（“B瘤”細(xì)胞）

生特異性抗體的細(xì)胞群

才能生長(zhǎng)

篩選目

得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞

的

「案例導(dǎo)引」

考向1|動(dòng)物細(xì)胞融合分析

1.下圖為動(dòng)物細(xì)胞融合示意圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.圖中C為滅活的病毒，此外還可用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合

B.圖中過(guò)程①發(fā)生了細(xì)胞膜的融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性

C.圖中過(guò)程②表示有絲分裂

D.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)可用于制備單克隆抗體

B解析：圖中C為滅活的病毒，此外還可用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，A正確;

圖中過(guò)程①發(fā)生了細(xì)胞膜的融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，B錯(cuò)誤；圖中過(guò)程②表示有絲分

裂，C正確；利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)可獲得雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)而制備單克隆抗體，D正確。

2.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的說(shuō)法正確的是（）

A.基本原理相同

B.誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法相同

C.細(xì)胞融合前的處理過(guò)程相同

D.融合后都需要進(jìn)行篩選

D解析：植物體細(xì)胞雜交的原理為細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性，而動(dòng)物細(xì)胞

融合利用的是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的病毒誘導(dǎo)，而

植物體細(xì)胞雜交不能，B錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理使細(xì)胞分

散開，植物體細(xì)胞雜交時(shí)常用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，C錯(cuò)誤；誘導(dǎo)融合后會(huì)形成多

種融合細(xì)胞，還有未融合細(xì)胞，因此都要進(jìn)行篩選，D正確。

【易錯(cuò)提醒】

（1）滅活的病毒能使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)

生融合。

（2）就目前常用的細(xì)胞融合方法來(lái)看，不管是用物理方法、化學(xué)方法，還是生物方法，

其融合率都未達(dá)到100%。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得到融合細(xì)胞。更重

要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，也并不一定是研究者期望得到的細(xì)胞類型。

考向2|單克隆抗體的制備過(guò)程、特點(diǎn)及其應(yīng)用的分析

3.（2021?湖北名校模擬）隨著單克隆技術(shù)與分子生物學(xué)的發(fā)展，單克隆技術(shù)在植物研

究中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。在對(duì)植物成分進(jìn)行定性和定量研究中，科學(xué)家制備了甘草酸

一人血清白蛋白的融合蛋白，以此為抗原制備了抗甘草酸的單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確

的是（）

A.甘草酸一人血清白蛋白的融合蛋白可使植物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，分離出相應(yīng)的B淋巴細(xì)

胞

B.誘導(dǎo)融合后，培養(yǎng)基中漿細(xì)胞、漿細(xì)胞一漿細(xì)胞這兩種細(xì)胞無(wú)需用特定培養(yǎng)基篩選

C.雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要加入生長(zhǎng)素等激素、血清

D.單克隆抗體不能從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中直接獲得

B解析：植物沒(méi)有免疫反應(yīng)，A錯(cuò)誤；漿細(xì)胞、漿細(xì)胞一漿細(xì)胞這兩種細(xì)胞不能增殖,

自動(dòng)凋亡，因此不需要篩選，B正確；生長(zhǎng)素是植物激素，不能用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，C錯(cuò)誤;

單克隆抗體屬于分泌蛋白，能從動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中直接獲得，D錯(cuò)誤。

4.（2021?山東煙臺(tái)模擬）科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上，將兩種雜交瘤細(xì)胞融合獲

得了雙雜交瘤細(xì)胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可同時(shí)結(jié)合a、B兩種抗原。下列說(shuō)法

錯(cuò)誤的是（）

A.制備雙特異性抗體時(shí)需將抗原a、B分別注射到小鼠體內(nèi)，獲得免疫小鼠的脾臟細(xì)

胞

B.用解離液處理免疫小鼠的脾臟細(xì)胞獲得單細(xì)胞，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合后可獲

得兩種雜交瘤細(xì)胞

C.可用PEG試劑促進(jìn)兩種雜交瘤細(xì)胞的融合，成功融合后經(jīng)過(guò)篩選可獲得雙雜交瘤細(xì)

胞

D.在腫瘤治療方面研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，能特異性殺死

腫瘤細(xì)胞

B解析：將抗原a、B分別注射到小鼠體內(nèi)，獲得免疫小鼠的脾臟細(xì)胞，引起機(jī)體的

體液免疫，使?jié){細(xì)胞分泌相應(yīng)抗體，A正確；解離液能固定并殺死細(xì)胞，故不能用解離液處

理，應(yīng)該用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，才能達(dá)到將脾臟細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞的目的，B錯(cuò)

誤；PEG為細(xì)胞融合劑，能夠促進(jìn)兩種雜交瘤細(xì)胞融合，成功融合后，還要進(jìn)行篩選，獲得

所需的雙雜交瘤細(xì)胞，C正確；結(jié)合雙特異性抗體的特點(diǎn)，研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)

合的雙特異性抗體，能夠特異性殺死腫瘤細(xì)胞，D正確。

考點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

r概念梳理」

1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的概念和類型

(1)概念

①供體：動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核。

②受體：去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞。

③結(jié)果：重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。

⑵類型

哺乳動(dòng)物核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。

2.體細(xì)胞核移植的過(guò)程

I生出與⑤供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體-----1代孕母體I

3.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問(wèn)題

（1）應(yīng)用前景

①畜牧生產(chǎn)中：加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。

②醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域：轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。

③治療人類疾?。恨D(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官作為異種移植等。

④使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程。

⑤保護(hù)瀕危物種方面：增加動(dòng)物的存活數(shù)量。

（2）存在問(wèn)題

①體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率非常低。

②研究相對(duì)落后。

③克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題，表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。

「概念辨析」

1.減數(shù)分裂II期（MH期）卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是紡錘體一染色體復(fù)合物。文中所說(shuō)

的“去核”是去除該復(fù)合物。（V）

2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中利用顯微操作法去核沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶。（X）

3.動(dòng)物細(xì)胞核移植的實(shí)際上移入的是整個(gè)供體細(xì)胞。（V）

4.體細(xì)胞核移植流程中重構(gòu)胚的形成與激活操作方法沒(méi)有區(qū)別。（X）

【教材細(xì)節(jié)命題】

1.（選擇性必修3P52正文）在動(dòng)物體細(xì)胞核移植中，非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植

非常困難的主要原因是一方面是供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化

前的功能狀態(tài)，這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低；另一方面是對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)

尚不完善。

2.（選擇性必修3P54思考?討論）核移植技術(shù)中必須先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的

原因是保證核移植動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自供體細(xì)胞。

概念涿研」

1.動(dòng)物體細(xì)胞核移植過(guò)程分析

（D原理：動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

（2）受體細(xì)胞：MII期的卵母細(xì)胞。選用該細(xì)胞的原因：

①卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表現(xiàn)的物質(zhì)。

②卵母細(xì)胞體積大，便于操作。

③卵母細(xì)胞內(nèi)卵黃多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富。

(3)將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞

①細(xì)胞核移植技術(shù)中注入去核卵母細(xì)胞中的不是供體細(xì)胞核，而是整個(gè)細(xì)胞，伴隨著兩

細(xì)胞融合，體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。

②核移植時(shí)，一般先用電融合法使供體和受體細(xì)胞融合形成重構(gòu)胚，再用物理或化學(xué)方

法激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。

(4)涉及的生物技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、核移植技術(shù)、胚胎移植

技術(shù)等。其中，核移植是核心技術(shù)。

2.克隆動(dòng)物的遺傳特點(diǎn)

克隆動(dòng)物的親本有3個(gè)，即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體。

(1)體細(xì)胞核供體：克隆動(dòng)物細(xì)胞核基因來(lái)自體細(xì)胞核供體，克隆動(dòng)物的性狀與體細(xì)胞

核供體基本相同。

(2)卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體：克隆動(dòng)物的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，克隆動(dòng)物的性狀與卵

母細(xì)胞供體部分相同。

(3)代孕母體：沒(méi)有為克隆動(dòng)物提供遺傳物質(zhì)，克隆動(dòng)物的性狀與代孕母體沒(méi)有直接關(guān)

系。

「案例導(dǎo)引」

1.下列對(duì)動(dòng)物核移植技術(shù)的描述錯(cuò)誤的是()

A.體細(xì)胞核移植的過(guò)程中可通過(guò)顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核

B.用于體細(xì)胞核移植的卵母細(xì)胞通常要在體外培養(yǎng)到Mil期

C.通過(guò)體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物與核供體性狀并不完全相同

D.非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植非常困難，至今沒(méi)有成功實(shí)例

D解析：體細(xì)胞核移植的過(guò)程中可通過(guò)顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核，A正確;

用于體細(xì)胞核移植的卵母細(xì)胞通常要在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂II期，B正確；體細(xì)胞核移植中，

重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有部分來(lái)自去核卵母細(xì)胞，因此克隆動(dòng)物的性狀與核供體性狀不完全相

同，C正確；在動(dòng)物體細(xì)胞核移植中，非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植非常困難，我國(guó)科學(xué)

家經(jīng)過(guò)多年努力，攻克了障礙，成功獲得了體細(xì)胞克隆猴，D錯(cuò)誤。

2.下列敘述中，不屬于動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景的是()

A.加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育

B.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)許多珍貴的醫(yī)用蛋白

C.可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性

D.利用自身細(xì)胞核移植培育相應(yīng)的組織器官

c解析：“用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性”是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用之一,

不是動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用。

3.（2021?遼寧卷）下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程圖，有關(guān)敘

述正確的是（）

甲牛一

①供體細(xì)胞培養(yǎng)融合激活并培養(yǎng)

?小C去核C2一U③

乙牛-"匚2而*u重組細(xì)胞

代孕丙牛移巨植巴重組胚胎一

I

生出后代丁牛

A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定

B.過(guò)程①需要提供95%空氣和5機(jī)。2的混合氣體

C.過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理

D.過(guò)程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植

B解析：后代丁的細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)自甲，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來(lái)自乙，則丁的遺傳

性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中需要提供95%空氣（保證細(xì)胞的

有氧呼吸）和5骯0式維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣體，B正確；過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)

卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯(cuò)誤；過(guò)程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至囊胚或桑甚胚后移植，D錯(cuò)

誤。

展級(jí)之凝練學(xué)科素養(yǎng)探析高考命題

【命題動(dòng)態(tài)】針對(duì)人們生產(chǎn)或生活的某一需求，考查動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)條件及過(guò)程，考查

單克隆抗體的制備及應(yīng)用，考查體細(xì)胞核移植及克隆動(dòng)物。難度中檔，呈現(xiàn)形式為選擇題或

非選擇題。

「對(duì)接高考真題」

1.（2021?浙江1月選考）下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述正確的

是（）

①切取組織②制備細(xì)胞懸浮液③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)

A.步驟①的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行

B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離

C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化

［思維培養(yǎng)］

一

lf.息il

次根據(jù)圖東信息明確①?③④操作過(guò)程

取

一

制成細(xì)胞標(biāo)分瓶前要?jiǎng)游锛?xì)胞的正常

動(dòng)物細(xì)胞

液常用胰蛋將貼壁細(xì)分裂是有限的，

培養(yǎng)過(guò)程

白梅、膠原蛋胞重新用但如果受到致癌

必須在無(wú)

白酶等處理胰蛋白酶因子的影響，細(xì)

菌、無(wú)毒

動(dòng)物組織使等處理使胞內(nèi)遺傳物質(zhì)改

的環(huán)境中

其成為分散之成為單變，正常細(xì)胞會(huì)

進(jìn)行

的單個(gè)細(xì)胞個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)化為癌細(xì)胞

C解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌操作，故步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，A

錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理動(dòng)物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞,

制成細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，使之分散成單個(gè)

細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，C正確；步驟④為傳代培養(yǎng)過(guò)程，該過(guò)程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化,

核型改變，D錯(cuò)誤。

2.（2021?山東卷）一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激

機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白

P72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中

直接分離出多抗。下列說(shuō)法正確的是（）

A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大

B.單抗制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合

C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗

D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況

［思維培養(yǎng)］

-根據(jù)題「信息“一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,

信

息一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體”，非洲豬

獲瘟病毒衣殼蛋白p72I:有多個(gè)抗原決定簇，所以可以刺

取激機(jī)體產(chǎn)生多種抗體每個(gè)抗原決定簇刺激產(chǎn)生的抗體

是單抗

用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,并從該小鼠的脾臟中得

到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，這里從脾臟獲得的是

多種B淋巴細(xì)胞

D解析：?jiǎn)慰沟闹谱餍枰Y選，而多抗不需要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度

越高，因此抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響小，A錯(cuò)誤；單抗制備過(guò)程中通

常將分離出的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；非洲豬瘟病毒衣殼蛋白P72上有多種

抗原決定簇，一個(gè)抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以向小鼠體內(nèi)注入p72后，可以

刺激小鼠產(chǎn)生多種抗P72的單抗，C錯(cuò)誤；p72部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決定簇，因

此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效，但由其他抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體有效，所

以多抗仍有效，D正確。

3.(2021?湖南卷，節(jié)選)M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?現(xiàn)設(shè)

計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等

技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

早期胚胎

I胚胎移植

代孕母親

1

克隆動(dòng)物A

(1)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期

更換培養(yǎng)液，目的是_____________________________________________

⑵與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是

(3)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融

合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體，簡(jiǎn)要寫出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否

失活的實(shí)驗(yàn)思路：_____________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

［思維培養(yǎng)］

-

信

息

獲

取

-

定期更換培養(yǎng)液的目的是清除代謝物.防止細(xì)胞代謝物

積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害；

工與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比,體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功

知率更低，原因是動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能

識(shí)性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性卜

調(diào)分困難；

則

制備單克隆抗體的過(guò)程是先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)

生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴

細(xì)胞，誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨眈瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基

篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體

解析：(1)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需

要定期更換培養(yǎng)液，目的是清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（2）由

于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能

性十分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。（3）先給小鼠

注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞。誘導(dǎo)B

淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。

如果M基因已經(jīng)失活，則克隆動(dòng)物A中無(wú)法產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，則可利用抗原一抗體

雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè).

答案：（1）清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害（2）動(dòng)物胚胎細(xì)胞

分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難（3）B

用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出的雜交瘤

細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說(shuō)明M基因在克隆動(dòng)物A中已失活

「情