控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程

PAGEPAGE1控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程GMP管理文件題目控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程編碼：頁序/總頁1/1制定審核批準(zhǔn)制訂日期審核日期批準(zhǔn)日期頒發(fā)部門質(zhì)量部生效日期分發(fā)部門化驗(yàn)室一、目的：為使控制菌檢查的操作規(guī)范化、制度化，故建立此規(guī)程二、適用范圍：控制菌檢查必須按本規(guī)程執(zhí)行。三、責(zé)任者：微生物限度檢查化驗(yàn)員，質(zhì)量檢測(cè)中心主任。四、正文：1、控制菌檢查方法適應(yīng)性試驗(yàn)1、1供試液的制備取樣品10g，用胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在20XX5℃培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)使供試品中的細(xì)菌充分恢復(fù)但不增殖（約2小時(shí)）。1.2試驗(yàn)菌大腸埃希菌和銅綠假單胞菌1.3適用性試驗(yàn)取相當(dāng)于1mL供試品的上述預(yù)培養(yǎng)物及不大于100cfu的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌分別接種至適宜體積腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)24小時(shí)后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，30～35℃培養(yǎng)18小時(shí)。應(yīng)能分別檢出所加大腸埃希菌和銅綠假單胞菌相應(yīng)的反應(yīng)特征.1.4結(jié)果判斷上述試驗(yàn)若檢出試驗(yàn)菌，按此供試液制備法和控制菌檢查方法進(jìn)行供試品檢查；若未檢出試驗(yàn)菌，應(yīng)消除供試品的抑菌活性，并重新進(jìn)行山GMP管理文件題目控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程編碼：頁序/總頁：2/2方法適用性試驗(yàn)。1.5耐膽鹽革蘭氏陰性菌的檢查供試液的制備和預(yù)培養(yǎng)：取樣品10g，用胰酪大豆胨肉湯瓊培養(yǎng)基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在20XX5℃培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)使供試品中的細(xì)菌充分恢復(fù)但不增殖（約2小時(shí)）1.5.1定性試驗(yàn)：除另有規(guī)定外，取相當(dāng)于1g或ml供試品的預(yù)培養(yǎng)物接種至適應(yīng)體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道增菌液培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)24～48小時(shí)后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板上，30～35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)。判斷結(jié)果：如果平板上無菌生長(zhǎng)，判供試品未檢出耐膽鹽革蘭氏陰性菌。1.5.2定量檢查：選擇和分離培養(yǎng)：取相當(dāng)于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1ml、0.01、0.001ml）供試品的預(yù)培養(yǎng)物或其稀釋劑分別接種至適應(yīng)體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道增菌液體培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)24～48小時(shí)后，上述每一培養(yǎng)物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板上，30～35℃培養(yǎng)