限制性核酸內(nèi)切酶

限制性核酸內(nèi)切酶第一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四第二頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)（一）獲得目的基因（二）形成重組DNA分子（三）將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞（四）目的基因的檢測和表達(dá)第2節(jié)基因工程的原理和技術(shù)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)第三頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四步驟一獲得目的基因人工合成利用PCR技術(shù)擴(kuò)增已知序列：從基因文庫獲得未知序列：(DNAlibrary)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)第四頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。在酶的作用下，不斷延伸，合成雙鏈DNA。多次循環(huán)，獲得大量雙鏈DNA分子。PCR技術(shù)擴(kuò)增第五頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四鳥槍法：散彈射擊法供體細(xì)胞DNA限制酶許多DNA片段載入運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞擴(kuò)增產(chǎn)生特定性狀分離目的基因從基因文庫獲得第六頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四目的基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA合成雙鏈DNA（目的基因）蛋白質(zhì)氨基酸序列推測mRNA的核苷酸序列推測結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列化學(xué)合成目的基因人工合成法逆轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸序列直接合成DNA第七頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四步驟二形成重組DNA分子第八頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四步驟三將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞第九頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四1.基因工程中常用的受體細(xì)胞有哪些？2.導(dǎo)入過程如何？大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑受體細(xì)胞：細(xì)菌CaCl2細(xì)胞壁的通透性增大重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制第十頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四步驟四目的基因的檢測和表達(dá)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)通過檢測標(biāo)記基因的有無，來判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)特定的性狀。第十一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期四練習(xí)2．有關(guān)基因工程的敘述正確的是()A.限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基因時才用

B.重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成

C.質(zhì)粒都可以作為運(yùn)載體

D.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料D1.有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是（）

A、DNA連接酶將黏性末端的堿基對連接起來

B、限制性核酸內(nèi)切酶用于目的基因的獲得

C、目的基因須由載體導(dǎo)入受體細(xì)胞

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