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降低化學(xué)反應(yīng)活化能的酶第2課時甲組:某種酶+蛋白酶加入酶的底物底物沒有被催化→該酶是蛋白質(zhì)底物被催化→該酶是RNA酶本質(zhì)的探究,可采取減法原理(A.酶解法)
某科研小組經(jīng)研究得知X酶存在于人的肝細(xì)胞中,能將糖原分解為還原糖。酶必須保持正常的結(jié)構(gòu)才能發(fā)揮催化作用,請利用這一原理設(shè)計實驗,探究X酶的化學(xué)本質(zhì)究竟是蛋白質(zhì)還是RNA。簡要寫出實驗思路,并預(yù)期實驗結(jié)果及結(jié)論(要求:實驗包含可相互印證的甲、乙兩個組)。1.探究酶本質(zhì)的實驗設(shè)計方法乙組:某種酶+RNA酶加入酶的底物底物被催化→該酶是蛋白質(zhì)底物沒有被催化→該酶是RNA四、酶的相關(guān)實驗B.試劑檢測法
從酶的化學(xué)本質(zhì)上來講,絕大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì),少數(shù)的酶是RNA。
因此可利用雙縮脲試劑與蛋白質(zhì)作用產(chǎn)生紫色反應(yīng),RNA與吡羅紅染液作用顯紅色的原理。例.豬籠草是一種食蟲植物,為了驗證豬籠草分泌液中有蛋白酶,某學(xué)生設(shè)計了兩組實驗,如圖所示,在35℃水浴中保溫一段時間后,甲、乙試管中加入適量的雙縮脲試劑,丙、丁試管中不加任何試劑,下列對實驗現(xiàn)象的預(yù)測正確的是()A.甲和乙中溶液都呈紫色;丙和丁中蛋白塊消失B.甲中溶液呈紫色,乙中溶液不呈紫色;丙中蛋白塊消失,丁中蛋白塊不消失C.甲和乙中溶液呈紫色;丙中蛋白塊消失、丁中蛋白塊不消失D.甲和乙中溶液都不呈紫色;丙中蛋白塊消失、丁中蛋白塊不消失E.只需實驗②就可以證明分泌液中含有蛋白酶CE2.探究酶高效性實驗的設(shè)計方法分組編號對照組實驗組說明1號2號3號4號相同處理2mL過氧化氫溶液無關(guān)變量不同處理常溫90℃水浴2滴FeCl3溶液2滴肝臟研磨液自變量氣泡產(chǎn)生不明顯少量較多大量因變量衛(wèi)生香復(fù)燃不復(fù)燃不復(fù)燃變亮復(fù)燃結(jié)果過氧化氫在不同條件下的分解速率不一樣自變量:
(1、2號)、
(1、3、4號)因變量:無關(guān)變量:是否加熱催化劑H2O2分解的速率a與c比較:酶具有催化作用,但酶只能縮短達(dá)到化學(xué)平衡所需的時間,不能改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點。a與b比較:與無機(jī)催化劑相比,酶的催化效率更高。bcaH2O2的量/濃度3.探究酶專一性實驗的設(shè)計方法實驗步驟一取兩支試管,編號1、2二1號試管中加入2mL淀粉溶液2號試管中加入2mL蔗糖溶液三加入淀粉酶溶液2滴,振蕩,試管下半部分浸入60℃的水浴中,反應(yīng)5min。四加入斐林試劑→振蕩→60℃水浴2min實驗現(xiàn)象磚紅色沉淀無變化結(jié)論淀粉酶只能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解實驗步驟一取兩支試管,編號1、2二向兩支試管中各加入2mL淀粉溶液三1號試管加入2滴淀粉酶溶液2號試管加入2滴蔗糖酶溶液四反應(yīng)5min后,向兩支試管中加入等量的碘液實驗現(xiàn)象不變藍(lán)變藍(lán)結(jié)論淀粉酶只能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解。能不能用碘液鑒定?能不能用斐林試劑鑒定?酶相同,底物不同底物相同,酶不同自變量:因變量:無關(guān)變量:底物種類底物是否分解底物的量/濃度、酶的量/濃度等自變量:因變量:無關(guān)變量:酶的種類底物是否分解底物的量/濃度、酶的量/濃度等①曲線②每一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng),這就是酶的專一性。4.探究溫度影響酶活性實驗的設(shè)計方法
溫度對酶活性的影響實驗步驟一1號2號3號二各加入2mL淀粉溶液三0℃保溫60℃保溫100℃保溫四加入0℃保溫的淀粉酶2滴加入60℃保溫的淀粉酶2滴加入100℃保溫的淀粉酶2滴五在各自的溫度條件下反應(yīng)約5min六各加入兩滴碘液→振蕩實驗現(xiàn)象藍(lán)色不變藍(lán)藍(lán)色結(jié)論溫度對酶的活性有影響,溫度偏低或偏高都會降低酶活性思考:①為何不選斐林試劑鑒定?實驗要嚴(yán)格控制溫度,斐林試劑需加熱H2O2常溫常壓可分解,加熱分解更快②實驗底物可不可以選H2O2?自變量:溫度;因變量:酶的活性;無關(guān)變量:pH、酶濃度等實驗時,應(yīng)先控制好變量,再讓底物與酶混合反應(yīng)5.探究pH影響酶活性實驗的設(shè)計方法
pH對酶活性的影響實驗步驟一1號2號3號二各加入肝臟研磨液2滴三加蒸餾水1mL等量的5%HCl等量的5%NaOH三各加入3%過氧化氫2mL四反應(yīng)約5min,記錄氣泡產(chǎn)生情況實驗現(xiàn)象幾乎無氣泡較多氣泡幾乎無氣泡結(jié)論過酸、過堿會影響酶的活性,適宜pH下酶的催化效率最高思考:為什么實驗不選用淀粉和淀粉酶而選H2O2和肝臟研磨液?酸性條件下淀粉會分解實驗時,應(yīng)先控制好變量,再讓底物與酶混合反應(yīng)自變量:pH;因變量:酶的活性;無關(guān)變量:溫度、酶濃度等小結(jié):若要研究最適溫度和最適PH,我們可以通過預(yù)實驗,先在一定范圍內(nèi)設(shè)置一系列梯度溫度(PH),然后以效果最佳的一組為中心,前推一組后推一組,縮小變量范圍,并減小溫度(PH)梯度,重做實驗。注意:先設(shè)置變量,再混合。影響酶活性的曲線
例.溫度會影響酶促反應(yīng)速率,其作用機(jī)理可用下圖坐標(biāo)曲線表示。其中a表示底物分子具有的能量,b表示溫度對酶空間結(jié)構(gòu)的影響,c表示酶促反應(yīng)速率與溫度的關(guān)系。下列說法正確的是()A.隨著溫度的升高,底物分子具有的活化能增加B.處于曲線c中1、2位點酶分子活性是相同的C.酶促反應(yīng)速率是底物分子的能量與酶空間結(jié)構(gòu)共同作用的結(jié)果D.酶適于低溫保存,原因是底物分子的能量低C①溫度升高,反應(yīng)物分子所具有的能量增加,反應(yīng)速度加快。【A】②酶分子本身具有熱變性,會隨溫度的升高而發(fā)生空間結(jié)構(gòu)的改變。溫度升的越高,酶變性的速率越快,升到一定程度,酶將完全失活?!綛】③曲線c是曲線a與曲線b的綜合題后總結(jié)溫度對酶促反應(yīng)速率的影響的兩個方面例.某學(xué)習(xí)小組通過實驗探究在不同pH和溫度下,一定濃度的底物X與相關(guān)酶的催化反應(yīng),在相同的時間內(nèi)得到如圖所示的曲線。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是()A.隨pH升高,該酶催化反應(yīng)的最適溫度也逐漸升高B.T1溫度時,底物X與酶的pH從14降到8,底物的剩余量不變C.當(dāng)pH為8時,影響酶促反應(yīng)速率的主要因素是底物濃度和酶濃度D.當(dāng)pH為任何一固定值時,實驗結(jié)果都可以證明溫度對酶促反應(yīng)速率的影響B(tài)例.為探究影響酶活性的因素、驗證酶的專一性和高效性等,某同學(xué)設(shè)計了4套方案,如表所示。B方案催化劑底物pH溫度①胃蛋白酶、胰蛋白酶蛋白塊中性室溫②淀粉酶淀粉、蔗糖適宜適宜③蛋白酶蛋白質(zhì)適宜不同溫度④
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