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培養(yǎng)基與設(shè)備滅菌第一頁,共十頁,編輯于2023年,星期日3.1培養(yǎng)基的滅菌3.1.1消毒與滅菌滅菌:用物理或化學方法殺死或除去環(huán)境中所有微生物,包括營養(yǎng)細胞、細菌芽孢和孢子。工業(yè)規(guī)模的液體培養(yǎng)基滅菌,殺滅雜菌比除去雜菌更容易實現(xiàn),因而最為常用。消毒:用物理或化學方法殺死物料、容器、器皿內(nèi)外的病源微生物。第二頁,共十頁,編輯于2023年,星期日3.1.2培養(yǎng)基滅菌的目的
1.如果不對培養(yǎng)基進行滅菌會產(chǎn)生什么后果?生產(chǎn)菌和雜菌同時生長,生產(chǎn)菌喪失生產(chǎn)能力;在連續(xù)發(fā)酵過程中,雜菌的生長速度有時會比生產(chǎn)菌生長得更快,結(jié)果使發(fā)酵罐中以雜菌為主;雜菌及其產(chǎn)生的物質(zhì),使提取精制發(fā)生困難雜菌會降解目的產(chǎn)物;雜菌會污染最終產(chǎn)品,雜菌會污染最終產(chǎn)品;發(fā)酵時如污染噬菌體,可使生產(chǎn)菌發(fā)生溶菌現(xiàn)象;因此,滅菌的目的:殺滅培養(yǎng)基中的微生物,為后續(xù)發(fā)酵過程創(chuàng)造無菌的條件。第三頁,共十頁,編輯于2023年,星期日怎樣保證“無菌條件”?2.工業(yè)上具體措施包括:(1)使用的培養(yǎng)基和設(shè)備須經(jīng)滅菌;(2)好氧培養(yǎng)中使用的空氣應經(jīng)除菌處理;(3)設(shè)備應嚴密,發(fā)酵罐維持正壓環(huán)境;(4)培養(yǎng)過程中加入的物料應經(jīng)過滅菌;(5)使用無污染的純粹種子。第四頁,共十頁,編輯于2023年,星期日3.培養(yǎng)基滅菌的要求(1)達到要求的無菌程度(10-3)(2)盡量減少營養(yǎng)成分的破壞,在滅菌過程中,培養(yǎng)基組分的破壞,是由兩個基本類型的反應引起的:培養(yǎng)基中不同營養(yǎng)成分間的相互作用;對熱不穩(wěn)定的組分如氨基酸和維生素等的分解。第五頁,共十頁,編輯于2023年,星期日4.滅菌的方法(1)化學法化學藥品滅菌法(2)物理法干熱滅菌法濕熱滅菌法射線滅菌法過濾除菌第六頁,共十頁,編輯于2023年,星期日5.濕熱滅菌的原理每一種微生物都有一定的最適生長溫度范圍。當微生物處于最低溫度以下時,代謝作用幾乎停止而處于休眠狀態(tài)。當溫度超過最高限度時,微生物細胞中的原生質(zhì)膠體和酶起了不可逆的凝固變性,使微生物在很短時間內(nèi)死亡,加熱滅菌即是根據(jù)微生物這一特性而進行的。第七頁,共十頁,編輯于2023年,星期日6.濕熱滅菌中的基本概念殺死微生物的極限溫度稱為致死溫度。在致死溫度下,殺死全部微生物所需的時間稱為致死時間;在致死溫度以上,溫度愈高,致死時間愈短。微生物的熱阻:是指微生物在某一特定條件(主要是溫度和加熱方式)下的致死時間。相對熱阻是指某一微生物在某條件下的致死時間與另一微生物在相同條件下的致死時間的比值。第八頁,共十頁,編輯于2023年,星期日第九頁,共十頁,編輯于2023年,星期日8.濕熱滅菌的優(yōu)點蒸汽來源容易,操作費用低,本身
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