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培養(yǎng)基與設(shè)備滅菌第一頁,共十頁,編輯于2023年,星期日3.1培養(yǎng)基的滅菌3.1.1消毒與滅菌滅菌:用物理或化學(xué)方法殺死或除去環(huán)境中所有微生物,包括營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌芽孢和孢子。工業(yè)規(guī)模的液體培養(yǎng)基滅菌,殺滅雜菌比除去雜菌更容易實(shí)現(xiàn),因而最為常用。消毒:用物理或化學(xué)方法殺死物料、容器、器皿內(nèi)外的病源微生物。第二頁,共十頁,編輯于2023年,星期日3.1.2培養(yǎng)基滅菌的目的
1.如果不對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌會(huì)產(chǎn)生什么后果?生產(chǎn)菌和雜菌同時(shí)生長(zhǎng),生產(chǎn)菌喪失生產(chǎn)能力;在連續(xù)發(fā)酵過程中,雜菌的生長(zhǎng)速度有時(shí)會(huì)比生產(chǎn)菌生長(zhǎng)得更快,結(jié)果使發(fā)酵罐中以雜菌為主;雜菌及其產(chǎn)生的物質(zhì),使提取精制發(fā)生困難雜菌會(huì)降解目的產(chǎn)物;雜菌會(huì)污染最終產(chǎn)品,雜菌會(huì)污染最終產(chǎn)品;發(fā)酵時(shí)如污染噬菌體,可使生產(chǎn)菌發(fā)生溶菌現(xiàn)象;因此,滅菌的目的:殺滅培養(yǎng)基中的微生物,為后續(xù)發(fā)酵過程創(chuàng)造無菌的條件。第三頁,共十頁,編輯于2023年,星期日怎樣保證“無菌條件”?2.工業(yè)上具體措施包括:(1)使用的培養(yǎng)基和設(shè)備須經(jīng)滅菌;(2)好氧培養(yǎng)中使用的空氣應(yīng)經(jīng)除菌處理;(3)設(shè)備應(yīng)嚴(yán)密,發(fā)酵罐維持正壓環(huán)境;(4)培養(yǎng)過程中加入的物料應(yīng)經(jīng)過滅菌;(5)使用無污染的純粹種子。第四頁,共十頁,編輯于2023年,星期日3.培養(yǎng)基滅菌的要求(1)達(dá)到要求的無菌程度(10-3)(2)盡量減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,在滅菌過程中,培養(yǎng)基組分的破壞,是由兩個(gè)基本類型的反應(yīng)引起的:培養(yǎng)基中不同營(yíng)養(yǎng)成分間的相互作用;對(duì)熱不穩(wěn)定的組分如氨基酸和維生素等的分解。第五頁,共十頁,編輯于2023年,星期日4.滅菌的方法(1)化學(xué)法化學(xué)藥品滅菌法(2)物理法干熱滅菌法濕熱滅菌法射線滅菌法過濾除菌第六頁,共十頁,編輯于2023年,星期日5.濕熱滅菌的原理每一種微生物都有一定的最適生長(zhǎng)溫度范圍。當(dāng)微生物處于最低溫度以下時(shí),代謝作用幾乎停止而處于休眠狀態(tài)。當(dāng)溫度超過最高限度時(shí),微生物細(xì)胞中的原生質(zhì)膠體和酶起了不可逆的凝固變性,使微生物在很短時(shí)間內(nèi)死亡,加熱滅菌即是根據(jù)微生物這一特性而進(jìn)行的。第七頁,共十頁,編輯于2023年,星期日6.濕熱滅菌中的基本概念殺死微生物的極限溫度稱為致死溫度。在致死溫度下,殺死全部微生物所需的時(shí)間稱為致死時(shí)間;在致死溫度以上,溫度愈高,致死時(shí)間愈短。微生物的熱阻:是指微生物在某一特定條件(主要是溫度和加熱方式)下的致死時(shí)間。相對(duì)熱阻是指某一微生物在某條件下的致死時(shí)間與另一微生物在相同條件下的致死時(shí)間的比值。第八頁,共十頁,編輯于2023年,星期日第九頁,共十頁,編輯于2023年,星期日8.濕熱滅菌的優(yōu)點(diǎn)蒸汽來源容易,操作費(fèi)用低,本身
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