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第二十章高效液相第一頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四定義:以高壓輸送流動相,采用高效固定相,及高靈敏度檢測器,發(fā)展而成的現(xiàn)代液相色譜分析方法。優(yōu)點:1、柱效高,分離效率高。2、分析速度快(幾-幾十分鐘內(nèi)即可完成)3、大大提高了靈敏度(紫外檢測器最小檢測限可達10-9g,熒光檢測器最小檢測限可達10-12g。4、應(yīng)用范圍廣5、分離選擇性高第二頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四第一節(jié)高效液相色譜法的主要類型和原理一、高效液相色譜法的主要類型LLC,LSC最長見的:化學(xué)鍵合相色譜法離子抑制色譜法離子對色譜法二、化學(xué)鍵合相色譜法(BPC)以化學(xué)鍵合相為固定相的色譜法(鍵合相色譜法)適用于分離幾乎所有類型的化合物。第三頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四(一)正相化學(xué)鍵合相色譜法采用極性鍵合相為固定相,以非極性或弱極性溶劑作流動相(二)反相化學(xué)鍵合相色譜法(三)反相離子對色譜法三、其他高效液相色譜法(一)離子色譜法(二)手性色譜法(三)親合色譜法第四頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四第二節(jié)高效液相色譜法的固定相和流動相及其選擇一、化學(xué)鍵合相色譜法的固定相二、化學(xué)鍵合相色譜法的流動相三、分離條件的選擇(一)高效液相色譜中的速率理論H=A+Cmu+smuu(二)正相鍵合相色譜法的分離條件(三)反相鍵合相色譜法的分離條件(四)反相離子對色譜法的分離條件四、其他固定相第五頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四第六頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四1、鍵合型離子交換劑2、手性固定相3、親和色譜固定相第三節(jié)高校液相色譜儀一、輸液系統(tǒng)(一)高壓輸液泵(二)梯度洗脫裝置二、分離和進樣系統(tǒng)(一)進樣器(二)色譜柱第七頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四高效液相色譜儀方框圖柱恒溫箱自動進樣器樣品進樣器預(yù)柱分析柱檢測器級分收集器記錄器

微機貯液瓶泵第八頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四三、檢測系統(tǒng)(一)檢測器的主要性能(二)紫外檢測器(三)熒光檢測器第九頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四四、數(shù)椐記錄處理和計算機控制系統(tǒng)第四節(jié)高校液相色譜分析方法一、定性分析方法1、色譜鑒定法2、化學(xué)鑒定法3、兩譜聯(lián)用鑒定法二、定量分析方法1、外標法2、內(nèi)標法第十頁,共十二頁,編輯于2023年,星期四

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