微生物的實驗室培養(yǎng)一輪演示文稿

微生物的實驗室培養(yǎng)一輪演示文稿本文檔共18頁；當前第1頁；編輯于星期二\1點44分微生物的實驗室培養(yǎng)一輪本文檔共18頁；當前第2頁；編輯于星期二\1點44分1、形態(tài)：球形、桿形、螺旋形。螺旋菌球菌桿菌一、細菌本文檔共18頁；當前第3頁；編輯于星期二\1點44分2、繁殖——二分裂20分鐘——30分鐘，分裂一次本文檔共18頁；當前第4頁；編輯于星期二\1點44分

無鞭毛的球菌：菌落較小較厚、邊緣整齊.

有鞭毛的細菌：菌落大而扁平、邊緣波狀或鋸齒狀.問：菌落在生態(tài)學上屬于什么單位？二、菌落菌落可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。單個或者少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，會形成一個肉眼可見的、具有一定形態(tài)結構的子細胞群體。本文檔共18頁；當前第5頁；編輯于星期二\1點44分幾種菌落本文檔共18頁；當前第6頁；編輯于星期二\1點44分一、微生物的實驗室培養(yǎng)（一）培養(yǎng)基人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水等。1、培養(yǎng)基的基本成分＊不同培養(yǎng)基要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的需求。本文檔共18頁；當前第7頁；編輯于星期二\1點44分2、培養(yǎng)基的種類（1）按物理狀態(tài)來分：分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基(還有半固體)。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。（2）按功能來分：分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。（3）按成分來分：分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。本文檔共18頁；當前第8頁；編輯于星期二\1點44分（二）無菌技術消毒滅菌使用較為溫和的方法來殺死部分對人體有害的微生物。對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行

；將培養(yǎng)皿、接種用具進行

；接種的過程要在

附近進行。使用較為強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。清潔消毒滅菌酒精燈本文檔共18頁；當前第9頁；編輯于星期二\1點44分1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線消毒……(1)消毒的方法：本文檔共18頁；當前第10頁；編輯于星期二\1點44分1.灼燒滅菌：接種用具和接種過程中的試管口或瓶口放在酒精燈火焰的充分燃燒層中進行灼燒滅菌。（2）常用的滅菌方法2.干熱滅菌：將玻璃器皿、金屬用具等能耐高溫并需要保持干燥的物品放到干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170OC中加熱1～2h即可。3.高壓蒸汽滅菌：將需滅菌的物品放到盛有水的高壓滅菌鍋內(nèi)（見教材16頁圖2-4）煮沸，待冷空氣排盡后，密閉繼續(xù)加熱至鍋內(nèi)壓力到100kPa，溫度到121OC后，維持15～30min即可。本文檔共18頁；當前第11頁；編輯于星期二\1點44分本文檔共18頁；當前第12頁；編輯于星期二\1點44分二、實驗操作（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計算2.稱量3.溶化4.滅菌5.倒平板：待培養(yǎng)基冷卻到50OC左右（P17）平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。本文檔共18頁；當前第13頁；編輯于星期二\1點44分（二）純化大腸桿菌1.平板劃線法

在數(shù)次劃線后可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體稱菌落。

1、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環(huán)？殺滅殘留在接種環(huán)的微生物。本文檔共18頁；當前第14頁；編輯于星期二\1點44分

2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？

3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。本文檔共18頁；當前第15頁；編輯于星期二\1點44分2.稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法操作過程分兩個步驟，即系列稀釋操作和涂布平板操作。系列稀釋操作101102103104105106(1)將分別盛有9mL水的試管滅菌并編號。(2)用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。(3)從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入第三支試管中，重復步驟2，直至到第六支試管。本文檔共18頁；當前第16頁；編輯于星期二\1點44分涂布平板操作（P19）(1)將涂布器浸在盛有70％的酒精的燒杯中。(2)取少量菌液（不超0.1mL），滴加到培養(yǎng)基表面。(3)將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷卻8～10s。(4)用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作后，37度恒溫培養(yǎng)，如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落，請分析其可能的原因。

無菌操作未達到要求：可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底；可能是接種時發(fā)生了污染；也可能是在培養(yǎng)的過程中受到了污染。本文檔共18頁；當前第17頁；編輯于星期二\1點44分兩種