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文檔簡介
原交H用DNA探針與組的DA雜交過反因況。章病理檢驗技術(shù)概述病理學(xué)的作用:1、研識律2、為臨床診斷疾預(yù)。:----病的方法稱為病理檢驗。一、病理檢驗的主要任務(wù)(一)確定疾病的診斷)擇案據(jù)供息)解療效料)臨水務(wù)病分類針)(二)組織驗-斷驗三尸剖驗理技:術(shù)是中之”第二節(jié)、病理檢驗技術(shù)常規(guī)工作發(fā)作取剖作片資理索物儀護大體標(biāo)本的收集和制作章術(shù)P9常規(guī)石蠟切片制作程序1/8片察節(jié)組織塊的處理組作種:1、取材;2;4、浸蠟;5、切片、貼片(:6、封片:長期保。一取材:-----切片過程。注意:向液固定使胞盡活時的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置過程。(一)固定目的:(1);(2);(3);(4觀辨。
生理或10%。4物、;(三)固定液的特性:1部2脹3置4率(四)組織固定注意事項:二固定方法: 1定1;2或的;3固,組要固質(zhì)用
2、固定容大3的1020倍4、防止組形5的間(五)組織固定液固:1%甲醛(的4%醛1份加水9份混;2用%數(shù)用9;3。4、酒-(F固定液:5ener固液:1、4林:久置能產(chǎn)生醛。2/8固定陳舊多血。2、精醇:高用80%再用9%;%。中甲醛液配置:4醛1500m蒸水800-5m二鈉g二鈉1g。常用的固定液。:1;2液3、醋酸:不,酸pH23可抑制細(xì)菌和;4;5、氯化汞:只宜固定薄片組織m~m厚定68小時;6;7、鋨酸:濃為1~電;:在脫成4mm厚充后行鈣。組織脫鈣的方法及應(yīng)用:(一)酸性溶液脫鈣:1:(1)%~1%酸5mll蒸至100m;(2酸1ml,%林l;(3)Schde液:濃硝酸20l,10%林1l。全;(4)%~1%酸5ml~1l至100ml(5)。(6)Pla-co液比5%硝酸液快3。Jekins混等2。(二)螯合劑脫鈣:速度很慢,但對組。1脫(EAg于200l蒸餾水中(NO)調(diào)整H至0(大約加2.5gNHDA與。2要~8有。:此。1:2%酸50ml,%酸200ml水750m;2徑30cm電解量將在一個四周多孔容器3/8解,通入V直度A~2A調(diào)節(jié)兩電極的距離來控制超0~5,般~6小時即可脫盡。理1、脫洗42小時,除去殘留的脫鈣劑;2;3;4加%~%之粘牢固。三、洗滌、脫水、透明(一)組織的洗滌1、洗滌的目的:防止組織中留有較多的固定液而影響脫水;2:(1(%大組織洗4小洗~4小。(2)略酒洗。)組織脫水1石火的。2:;劑二蠟;。劑二蠟;脫織價。:水價。脫。。。透作。(三)組織透明或媒浸浸。1以0。2。3。4。4/8四、組織浸蠟(透蠟)P48(一)浸蠟的目的明。(二)浸蠟劑的種類:1經(jīng)6~8存可靠,為3-4小時。2、火棉膠:目前使。;4。組織包埋P49石:包。1規(guī)法;2。(二)快速石蠟包埋法:10~0分完成(1片m0.mⅹ0.3cm,在快固液9%甲沸~2分鐘(度不超1.5酮5~l沸~6分鐘3熱~2分鐘(4):埋卻。3包為3℃和左為1500和4000兩種。于脂的。4、明膠包埋:5。6。節(jié)切片器具與切片機片備。(一)切片機的種類及使用:1、石蠟切片機:式最旋。2、冷機:多為恒冷箱。3:多達20μm~50μ。、切刀P58(一)切片刀的種類:其般有4mm1mm、2cm2m等。1蠟。2雙兩無面。3用。4。刀制料制兩種。)與:1、手工磨刀:刀試石;滴;從到左5/8全磨完。2、被刀:用;作 P60(一)切片前的準(zhǔn)備:然冷;毛彎;占23;片節(jié)2~8)(6-;速片 P3過m正至1.mm左,,埋蠟卻可材、。經(jīng)9%水即速色。凍作 P4,。、備求:置:1;2導(dǎo);冷:過冷。冰凍切片機制程(一)取材、固定:選取有代表性的組織制片,厚度1m顯和理熒體,用織凍后行、化定。(二)冷凍切片方法:1法(1)前~3小溫度:)淋、腎睪丸、甲子巢、、腺
1-6122--8(2用T凍1~2分;(3;(4)為4μm~8μ展,;(5)切片。6/82法3碳法(三)冷凍切片粘片法1:過0%和后即染色。2Llie入%%甲醛水溶定5分鐘,水洗0分鐘。3、酒精明膠入0.1或0.7%用4%玻片撈起后,仿1分經(jīng)%和7精即染。三、注意事項1;2入0水析造壞;3埋;4;5片;6、一般來說。察第七章組織切片染色技術(shù)第一節(jié)病理片色概述P68組理使不上色產(chǎn)不同于。三、染色的原理染色。酸的堿物酸性核胞性伊紅染色。(二)染色的物理作用:12面上過程3。:或物1;2。)的:1、據(jù)染料來源:天然、合成染料和無機物2、根據(jù)染料化學(xué)反應(yīng):酸性、堿性和中料3、據(jù)染色對:(1:7/81:;2);(2等。五、常用染色術(shù)語的概念一、普最的-稱E染。定。單選染。料。染以法。節(jié)染色前后的處理P74染的:1、脫蠟至水(%、%、8%、%過。2、脫切片在用0.2%~0.5%碘酒精處理5~15分鐘,使汞鹽沉淀物溶解。3用Verocay%氫氧化鉀水液1l%精100ml)處理0分洗5分鐘。(二)染色后的處理:1、分化作用用1酸附。2。3、染色后的脫水:低度到高度酒精逐步。4。:1:(1)劑配制膠10g水60ml油70m酸0.2g溫。(2中液固,接。七、染色的注意事項(1)作(2);(3)。章組織切片常染色技術(shù)第一節(jié)常規(guī)染色的概念染理染鋁的藍色色精,帶正色氫色木液以胞被染藍。(二紅Y紅Y使8/8中正電染或胞。制 P80(一)蘇木素液:從蘇木素的樹中提煉的天然染料。1、Haris蘇液常。素 g 水 0l精 0l 汞 g鉀 2g配置方書1頁色34分。:0%伊液紅Y0.5g5酒精100m間13分鐘。性酒:沉淀酸紅Y酒精液:2、Mayr蘇木素改良配法:(1A液:蘇木素g精40ml加熱溶解;(2B液鋁鉀100,水600稍加熱使硫酸鋁鉀在水中溶解,將A與B液混合2分鐘足600l加入400mg碘。為1~0。3、Ehrlh蘇木素素2g精10l,甘油100m鉀1g蒸水100醋酸10ml染為0~0。4ll改良蘇素g精250ml鉀17.g水750m,碘酸鈉0.2,酸2l。染色時間為5分鐘。).%~%:酸0.5~1l,75%精99ml分間。四藍液弱體的。1、5水(%氫氧)3水100m水1l。法P83(一)人工操作蘇木素:1脫:(1蠟5;(2)二(5;(3)(2分;(4)95%精1分鐘;(5)85%精1分鐘;(6)75%精1分鐘;(7)洗2分鐘;2、蘇木素染色5-10分鐘;自來水洗1分鐘;3.%~%鹽酸酒精至0分鐘呈紫紅色水1分鐘水0℃)藍化~5分(化0秒,洗0鐘);9/84、伊紅染色,1分鐘洗1分鐘;5、脫水、透:(1)85%0秒;(2)95%(1分;(3)1;(4)二(12分鐘;(5)二(12分鐘。6、固:(1);(2)。(二片HE染色:用%酒精和酸5ml的混合定1洗0~1,E染色。切、E色節(jié)染色中常見問題及注意事項P85HE染:;。章組織切片特殊色P87胞。節(jié)色8、膠維色VnGiesn染色(稱VG染色(書)1染:(1)鐵蘇見Masson色色(2)Vanin苦液::12液9ml,液:1%液10m。。2染:(1)水蒸水洗(3)Weigert鐵蘇染50鐘(4)洗2鐘(5)據(jù)用0.5%酸化(6)自來水洗(7)VanGin液色~5鐘(8用9%水(9)水0透明(11)膠封。3、染色,肌色,細(xì)核黑.10/184維用8(1);(中含量與分的;(3);(4)。、網(wǎng)狀纖維染色Gomoi銀染法:21銀10.2g水100m液氫納3.1g,蒸餾水10l2、染1(鉀0.5g水95m,加%酸5ml)5鐘()洗1鐘()2漂白2分鐘水洗2鐘()2%染2鐘()洗)銀色1分()洗3(920%原5分鐘(1)蒸餾水洗21)入0.2%化金液調(diào)色2分鐘餾水洗2次(122固定2鐘(3用G(4(5甲苯透(1。3。4維用(1)區(qū)分上;(2);(3);(4)。四、多色:P93(一)Masn三色:P31染:(1紅0.7g紅0.3g酸1l水99m先好醋酸溶綠1.0g酸l水99l。(2)藍g,醋酸2ml至100ml。(3)Weigert鐵蘇木素素1g,9%精100ml液氯化鐵液4l酸1ml水l4小用)2、Masson三色的染色步驟:(1;(2)Weigert鐵蘇色50分;(3)稍(;(5);(6色5;(7;(8)%理5分鐘,鏡下見肌肉纖維呈紅;(9)不經(jīng)染5分鐘;11/18(101%理1分鐘;(11%無;(12)二甲(1封。3、染色結(jié)果:膠原纖維呈藍色(用苯胺)色亮,藍。(二)May三色染色法P41染:(1)0.5;(2)苯黃G液:苯胺藍0.5黃G2g,酸g水100ml將%磷鎢酸黃濾,存合。(3);2染:(1)切片脫蠟至水(Znkr固定液固定1;(3)充分水()05處理50分鐘;(5)0.5理25分鐘;(6)充分水;(7)染5(8;(9)苯黃-G液染0~0分鐘;(10接%酒精快速化;(11)()二苯明;(13)膠封。3、染色結(jié)果:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維呈藍纖,色色。組色用(1;(2);(3)鑒別某些斷(4)用于。節(jié)肌肉組織染色P5(一Malory磷鎢酸蘇木素染色法(簡稱PTAH:1制(1素0,酸2,水10ml。入20ml蒸餾中于80ml蒸冷卻后置33月后使用。此液可保存數(shù)年。急鉀0.1g促成熟2~4小用。(2):液5l;05硫酸水液50。12/182染:(1)以Zenkr液固定最佳;如用甲醛固定則先要用Zenkr液處理(℃溫箱內(nèi)3小時;(2)切片用9%;(3)充分水(理50鐘(5)洗2分鐘)%白1分鐘;(7洗2;(8染~8;(9)用95%(水;(11)二甲(1封。3、染色結(jié)果:橫紋肌纖維、細(xì)胞核呈紫,、色。4肉色常用于Mallory磷鎢酸蘇木素染:()橫紋肌纖;)診;)用,)用。節(jié)色P6丹染法:(書)1染:(1Ⅲ0.15g,60~%精100l于60%~%精用上密容器備。(膠5油35,水35l熱溶解,再混加~2粒石炭后4℃保存,用時。2:(1厚81;(2)3)Hs蘇素12分鐘;(4;(5))%;(7)蘇液30~0分鐘(如置于6℃;(8)70%9蒸;(10)在空1)甘油明膠液。3揮發(fā)。在封固放置6切不應(yīng)相。4、染色結(jié)果:脂肪呈橘紅色,脂肪酸不,淡。5肪用13/18(1);(2)。(3)。(胞胞別。節(jié)糖原染色與粘液色過染S法:81染:(1)過酸0.5g水100g放4℃冰。(2Scif液性紅1g1mo/L鹽酸20m重水200l。(先水200ml煮沸,加入g堿性沸2分鐘至50加1mol/L的鹽酸20ml降至25g~1.5g,室2小時后堿帶5活炭g~1.,于棕色磨口瓶內(nèi),入。2染:(1)切片脫蠟至水(餾(3%過氧化液0~0分;)水洗(入Schiff色10于5可(洗0分鐘;(7用Mayer或Hars明礬蘇木核35分鐘(8(9水;(10)()二苯明(1。3、染色結(jié)果它PS反應(yīng)質(zhì)色成。4原用(細(xì)的貯尿某細(xì)斷。(中的。(肉胞結(jié)。(4)。液色稱AB染P91染:(1)B(H)奧辛藍8GS水97ml酸3l酚2好3%冰醋酸,然后溶藍后pH值2.5~3.0間.(2)0.5%液:紅0.5至1ml。2:(1)B液染色2~0;(3)快速蒸餾水洗(0.5%染~2分;(5);(6)95%;(7)8。14/183、染色結(jié)果:酸性粘液物質(zhì)(及真菌菌隱膜性混合呈,呈。4液用(1)、黏纖;(2)。節(jié)病色0品染:11染:石炭紅1g,精10,石炭(%液100。前。2菌:(1;(2)染5~0分鐘;(3;(4)%;(5)蒸餾水()1染2分;(7)95%;(8)無水酒精脫水(;(10)性。3果菌桿菌呈細(xì)淡。4用用于結(jié)核病麻(點較(為風(fēng)。物書)Bennhola剛果紅染色法:1、染色配制:(1)%:紅g,蒸餾水100l。(2)鋰125g,蒸餾水100l。2、染色結(jié)果:淀粉樣物質(zhì)呈紅色,其它組織呈淺紅色,細(xì)胞核呈藍色。3、Bennhola剛果紅染色步驟:(1;15/18(2)明核35分鐘;(3)%液洗12分鐘;(4)充分水洗返藍(;(6)%色0~0分鐘或;(7)經(jīng)理12分鐘;(8)80%;(9)洗1~2分鐘;(10%;(11)二甲(1封。4、淀粉樣物質(zhì)的染色的應(yīng)用(1):;(2):;(3斷:腺胰胞質(zhì)斷;(4據(jù)化上瘤、帶息等?,F(xiàn)淀樣變,為斷據(jù)。黑素染色Masson-Fontana染色法:1、染液配制:(1)Ma
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