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文檔簡(jiǎn)介
蛋白質(zhì)的生物合成
ProteinBiosynthesis,Translation(翻譯)第十章本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第1頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分蛋白質(zhì)的生物合成,即翻譯,就是將核酸中由4種核苷酸序列編碼的遺傳信息,通過(guò)遺傳密碼破譯的方式解讀為蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)中20種氨基酸的排列順序。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第2頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分蛋白質(zhì)合成體系
ProteinBiosynthesisSystem
第一節(jié)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第3頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分20種氨基酸(AA)作為原料酶及眾多蛋白因子,如IF、eIF
ATP、GTP、無(wú)機(jī)離子參與蛋白質(zhì)生物合成的物質(zhì)包括
三種RNAmRNA(messengerRNA,信使RNA)rRNA(ribosomalRNA,核糖體RNA)tRNA(transferRNA,轉(zhuǎn)移RNA)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第4頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分一、翻譯模板mRNA及遺傳密碼1.mRNA是遺傳信息的攜帶者順?lè)醋?cistron)編碼一個(gè)多肽的遺傳單位。多順?lè)醋?polycistron)數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)基因常串聯(lián)為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,轉(zhuǎn)錄生成的mRNA可編碼幾種功能相關(guān)的蛋白質(zhì)。單順?lè)醋?singlecistron)mRNA只編碼一種蛋白質(zhì)。
真核原核本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第5頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分原核生物的多順?lè)醋诱婧松锏膯雾樂(lè)醋臃蔷幋a序列核蛋白體結(jié)合位點(diǎn)起始密碼子終止密碼子編碼序列PPP53蛋白質(zhì)PPPmG-53蛋白質(zhì)目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第6頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分2.mRNA上存在遺傳密碼mRNA分子上從5至3方向,由AUG開(kāi)始,每3個(gè)核苷酸為一組,決定肽鏈上某一個(gè)氨基酸或蛋白質(zhì)合成的起始、終止信號(hào),稱為三聯(lián)體密碼(tripletcoden)。起始密碼(initiationcoden):AUG,GUG
終止密碼(terminationcoden):UAA,UAG,UGA
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第7頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分3.核酸蛋白本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第8頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分4.本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第9頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分5.
遺傳密碼的發(fā)現(xiàn)1961年,M.Nirenberg等人提出。43=64大腸桿菌中,以多聚U做為mRNA,即polyU+20種放射性同位素標(biāo)記的氨基酸,大腸桿菌合成體系,在外界環(huán)境合適下,合成了一條多聚苯丙氨酸(phe)肽鏈。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第10頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分6.本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第11頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分破譯遺傳密碼本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第12頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分UUU為phe的三聯(lián)體密碼。發(fā)現(xiàn)具有密碼子功能的最短鏈為三個(gè)核苷酸,并且含3-OH和5-磷酸基的三核苷酸最有效。閱讀方向?yàn)?-3
。至1966年,20中氨基酸對(duì)應(yīng)的61個(gè)密碼子和三個(gè)終止密碼子全部被查清。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第13頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分
在遺傳密碼的破譯中,美國(guó)科學(xué)家等人做出了重要貢獻(xiàn),并于1968年獲得了諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng).
HolleyKhoranaNirenberg本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第14頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第15頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第16頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第17頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(1)連續(xù)性(commaless)7.
遺傳密碼的特點(diǎn)
編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)閱讀,密碼間既無(wú)間斷也無(wú)交叉、無(wú)標(biāo)點(diǎn)符號(hào)。
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第18頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第19頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(2)簡(jiǎn)并性(degeneracy)目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第20頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分簡(jiǎn)并性本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第21頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分目錄一個(gè)氨基酸有幾個(gè)不同的密碼子的現(xiàn)象叫簡(jiǎn)并性。
編碼同一個(gè)氨基酸的一組密碼子被稱為同義密碼子。
意義:維持生物物種的穩(wěn)定性。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第22頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(3)通用性(universal)和例外少數(shù)例外,如動(dòng)物細(xì)胞的線粒體、植物細(xì)胞的葉綠體。密碼的通用性進(jìn)一步證明各種生物進(jìn)化自同一祖先。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第23頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分線粒體本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第24頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(4)
擺動(dòng)性(wobble)轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的tRNA的反密碼需要通過(guò)堿基互補(bǔ)與mRNA上的遺傳密碼反向配對(duì)結(jié)合,但反密碼與密碼間不嚴(yán)格遵守常見(jiàn)的堿基配對(duì)規(guī)律,稱為擺動(dòng)配對(duì)。
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第25頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分U擺動(dòng)配對(duì)目錄U?變偶性增大了tRNA的閱讀速度與閱讀能力?變偶性可減少tRNA的種類321本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第26頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分密碼子、反密碼子配對(duì)的擺動(dòng)現(xiàn)象tRNA反密碼子第1位堿基IUGACmRNA密碼子第3位堿基U,C,AA,GU,CUG1966年Crick提出擺動(dòng)假說(shuō)(wobblehypothesis)識(shí)別1個(gè)識(shí)別2個(gè)識(shí)別3個(gè)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第27頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分識(shí)別1個(gè)識(shí)別2個(gè)識(shí)別3個(gè)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第28頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分8.本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第29頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分9.本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第30頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分①10.本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第31頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分l-pyrrolysine②本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第32頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分二、本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第33頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(一)rRNA與核蛋白體1.rRNA
與蛋白質(zhì)一起構(gòu)成核糖體——蛋白質(zhì)合成“工廠”存在:核糖體可游離存在,真核中,也可同內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合,形成粗糙的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。原核中,與mRNA形成串狀——多核糖體本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第34頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分2、核蛋白體的組成目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第35頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(二)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第36頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第37頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分核糖體RNA三維折疊本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第38頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分電鏡圖片本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第39頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分X射線衍射結(jié)構(gòu)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第40頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(三)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第41頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分rRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第42頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分核糖體的蛋白R(shí)NA組成比較原核真核大亞基小亞基本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第43頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分原核生物翻譯過(guò)程中核蛋白體結(jié)構(gòu)模式:A位:氨?;?aminoacylsite)P位:肽?;?peptidylsite)、起始氨?;籈位:排出位(exitsite)目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第44頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分三、tRNA與氨基酸的活化反密碼環(huán)氨基酸臂本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第45頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第46頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分
結(jié)合氨基酸:一種氨基酸有幾種tRNA攜帶,結(jié)合需要ATP供能,氨基酸結(jié)合在tRNA3‘-CCA的位置。
反密碼子:每種tRNA的反密碼子,決定了所帶氨基酸能準(zhǔn)確的在mRNA上對(duì)號(hào)入座。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第47頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分tRNA氨酰-tRNA合成酶ATP
tRNA與酶結(jié)合的模型本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第48頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分識(shí)別配對(duì)對(duì)號(hào)入座本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第49頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分氨酰-tRNA合成酶對(duì)底物氨基酸和tRNA都有高度特異性。氨酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreadingactivity)。氨酰-tRNA的表示方法:Ala-tRNAAla
Ser-tRNASerMet-tRNAMet
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第50頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第51頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分激活氨酰-AMP過(guò)渡態(tài)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第52頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分激活氨酰-AMP過(guò)渡態(tài)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第53頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分氨酰-AMP氨酰-tRNA本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第54頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第55頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分真核生物:Met-tRNAiMet原核生物:fMet-tRNAifMet起始肽鏈合成的氨酰-tRNA
(AUG-第一個(gè)氨基酸Met)
甲酰甲硫氨酸本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第56頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分起始內(nèi)部本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第57頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分區(qū)別本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第58頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第59頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分起始延伸古細(xì)菌應(yīng)用區(qū)別本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第60頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程
TheProcessofProteinBiosynthesis
第二節(jié)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第61頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分氨基酸的活化翻譯的起始(initiation)翻譯的延長(zhǎng)(elongation)翻譯的終止(termination)整個(gè)翻譯過(guò)程可分為:翻譯過(guò)程從閱讀框架的5′-AUG開(kāi)始,按mRNA模板三聯(lián)體密碼的順序延長(zhǎng)肽鏈,直至終止密碼出現(xiàn)。
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第62頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分氨基酸+tRNA氨酰-tRNAATP
AMP+PPi氨酰-tRNA合成酶
氨酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase)tRNA氨基酸臂的3'-OH與氨基酸的羧基形成活化酯-氨基酰-tRNA。一、氨基酸的活化:本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第63頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分氨基酸+ATP-E—→氨酰-AMP-E
+AMP+PPi
目錄第一步反應(yīng)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第64頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分第二步反應(yīng)氨酰-AMP-E+
tRNA↓氨酰-tRNA+AMP
+
E目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第65頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分二、肽鏈合成起始指mRNA和起始氨基酰-tRNA分別與核蛋白體結(jié)合而形成翻譯起始復(fù)合物
(translationalinitiationcomplex)。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第66頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(一)原核生物翻譯起始復(fù)合物形成核蛋白體大小亞基分離;mRNA在小亞基定位結(jié)合;起始氨酰-tRNA的結(jié)合;核蛋白體大亞基結(jié)合。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第67頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分起始復(fù)合物小亞基起始因子小亞基起始因子起始因子本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第68頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分IF-3IF-11.核蛋白體大小亞基分離目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第69頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分AUG5'3'IF-3IF-12.mRNA在小亞基定位結(jié)合目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第70頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(mRNA上位于起始位點(diǎn)上游
4-13個(gè)富含嘌呤的核苷酸序列)S-D序列
識(shí)別起點(diǎn)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第71頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分S-D
S-D序列
小亞基小亞基本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第72頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分S-D
S-D
小亞基小亞基本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第73頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分S-D
S-D
小亞基小亞基大亞基大亞基本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第74頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分IF-3IF-1IF-2GTP3.起始氨酰tRNA(fMet-tRNAimet)結(jié)合到小亞基AUG5'3'目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第75頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分IF-3IF-1IF-2GTPGDPPi4.核蛋白體大亞基結(jié)合起始復(fù)合物形成AUG5'3'目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第76頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分IF-3IF-1AUG5'3'IF-2GTPIF-2-GTPGDPPi目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第77頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(二)真核生物翻譯起始復(fù)合物形成核蛋白體大小亞基分離;起始氨酰-tRNA結(jié)合;mRNA在核蛋白體小亞基就位;核蛋白體大亞基結(jié)合。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第78頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分met40S60SMetMet40S60SmRNAeIF-2B、eIF-3、
eIF-6①elF-3②GDP+Pi各種elF釋放elF-5④ATPADP+PielF4E,elF4G,elF4A,elF4B,PAB③MetMet-tRNAiMet-elF-2
-GTP真核生物翻譯起始復(fù)合物形成過(guò)程大亞基大亞基大亞基小亞基小亞基小亞基小亞基小亞基本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第79頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分三、肽鏈合成延長(zhǎng)肽鏈延長(zhǎng)在核蛋白體上連續(xù)性循環(huán)式進(jìn)行,又稱為核糖體循環(huán)(ribosomalcycle),每次循環(huán)增加一個(gè)氨基酸,包括以下三步:進(jìn)位(entrance)成肽(peptidebondformation)轉(zhuǎn)位(translocation)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第80頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第81頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分延伸過(guò)程所需蛋白因子稱為延長(zhǎng)因子(elongationfactor,EF)原核生物:EF-T(EF-Tu,EF-Ts)EF-G真核生物:eEF-1、eEF-2
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第82頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(一)進(jìn)位目錄指根據(jù)mRNA下一組遺傳密碼指導(dǎo),使相應(yīng)氨酰-tRNA進(jìn)入核蛋白體A位。
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第83頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分目錄延長(zhǎng)因子EF-T催化進(jìn)位(原核生物)
進(jìn)位延長(zhǎng)因子循環(huán)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第84頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分進(jìn)位過(guò)程延長(zhǎng)因子循環(huán)進(jìn)位本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第85頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分TuTsGTPGDPAUG5'3'TuTsGTP目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第86頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分(二)成肽是由轉(zhuǎn)肽酶(transpeptidase)催化的肽鍵形成過(guò)程。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第87頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分延長(zhǎng)過(guò)程中肽鏈的生成PsitPsitAsitAsit肽基轉(zhuǎn)移酶本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第88頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分延長(zhǎng)因子EF-G有轉(zhuǎn)位酶(translocase)活性,可結(jié)合并水解1分子GTP,促進(jìn)核蛋白體向mRNA的3'側(cè)移動(dòng)。(三)轉(zhuǎn)位本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第89頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分fMetAUG5'3'fMetTuGTP目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第90頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分進(jìn)位轉(zhuǎn)位成肽本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第91頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分GTP水解推動(dòng)核糖體移位本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第92頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分EF-GGTP推動(dòng)核糖體移位本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第93頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分肽鏈合成延長(zhǎng)延伸過(guò)程本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第94頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第95頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分
四、肽鏈合成的終止當(dāng)mRNA上終止密碼出現(xiàn)后,多肽鏈合成停止,肽鏈從肽酰-tRNA中釋出,mRNA、核糖體等分離,這些過(guò)程稱為肽鏈合成終止。
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第96頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分與終止相關(guān)的蛋白因子稱為釋放因子(releasefactor,RF)
原核生物釋放因子:RF-1,RF-2,RF-3真核生物釋放因子:eRF本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第97頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分一是識(shí)別終止密碼RF-1特異識(shí)別UAA、UAG;
RF-2可識(shí)別UAA、UGA。釋放因子的功能本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第98頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分二是誘導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶改變?yōu)轷ッ富钚?,相?dāng)于催化肽?;D(zhuǎn)移到水分子-OH上,使肽鏈從核蛋白體上釋放。
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第99頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分原核肽鏈合成終止過(guò)程
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第100頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分UAG5'3'RFCOO-目錄本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第101頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分釋放因子模擬tRNA結(jié)構(gòu)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第102頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分目錄50S30S五、多聚核糖體(polysome)在細(xì)胞內(nèi)一條mRNA鏈上結(jié)合著多個(gè)核糖體,甚至可多到幾百個(gè)。原核本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第103頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分30S50S本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第104頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分真核本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第105頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分電鏡下的多聚核蛋白體現(xiàn)象本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第106頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第107頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分六、真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成主要有以下特點(diǎn):
1.核糖體更大
2.起始tRNA:起始氨基酸為甲硫氨酸。起始tRNA為Met-tRNAiMet。3.起始密碼子為AUG,它的上游5’—端也不含富含嘌呤的序列。4.80S起始復(fù)合物,真核細(xì)胞轉(zhuǎn)譯中涉及的蛋白因子更多。5.蛋白質(zhì)激酶參與真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的調(diào)節(jié)。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第108頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分
蛋白質(zhì)的合成是一個(gè)高耗能過(guò)程
AA活化2個(gè)高能磷酸鍵(ATP)肽鏈起始1個(gè)(70S復(fù)合物形成,GTP)進(jìn)位1個(gè)(GTP)移位1個(gè)(GTP
第一個(gè)氨基酸參入需消耗3個(gè)(活化2+起始1)以后每摻入一個(gè)AA需要消耗4個(gè)(活化2+進(jìn)位1個(gè)+移位1個(gè))。消耗能量計(jì)算=4n-1本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第109頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分蛋白質(zhì)合成后加工PosttranslationalProcessing第三節(jié)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第110頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分蛋白質(zhì)前體的加工內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,小的分泌性蛋白質(zhì)和病毒膜蛋白---帶有信號(hào)序列相對(duì)較長(zhǎng)、無(wú)活性的前體成熟、有活性的蛋白質(zhì)蛋白原(proprotein)初始合成蛋白酶切除信號(hào)序列成熟蛋白質(zhì)膜蛋白分泌性蛋白加工本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第111頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分主要包括多肽鏈折疊為天然的三維結(jié)構(gòu)肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)的修飾高級(jí)結(jié)構(gòu)修飾
本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第112頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分1.N端改造fMet的切除2.信號(hào)肽(能透膜,進(jìn)行蛋白質(zhì)的錨定)的切除3.氨基酸的修飾/改造肽鏈內(nèi)或肽鏈間的二硫鍵的形成、乙?;⒓谆被釟埢男揎棧≒ro-OH/Cys-OH)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第113頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分4.糖基化(Asp、Ser、Thr、Asn)5.某些多肽要經(jīng)特殊的酶切一段肽鏈后才有生物活性(如:胰島素)6.高級(jí)結(jié)構(gòu)的形成在分子伴侶的協(xié)助下形成正確的結(jié)構(gòu)本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第114頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分甲基化甲基化LysLysGluSerThrPheGlu羧基化本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第115頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第116頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分胰島素前胰島素原胰島素原胰島素ABCAB本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第117頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分進(jìn)入A位點(diǎn)接受肽?;怆x核糖體結(jié)果~提前成熟終止蛋白合成形成本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第118頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分氨酰tRNA肽?;Y(jié)構(gòu)比較本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第119頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分肽鏈本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第120頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分其他抗生素阻礙A位點(diǎn)(細(xì)菌)擬制50s亞基肽轉(zhuǎn)移酶活性本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第121頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分?jǐn)M制60s亞基肽轉(zhuǎn)移酶活性低濃度引起錯(cuò)讀,高濃度進(jìn)入P位點(diǎn)阻止起始本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第122頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分起始延伸終止本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第123頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分END本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第124頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分課后練習(xí)填空題1.蛋白質(zhì)的生物合成是以______作為模板,______作為運(yùn)輸氨基酸的工具,_____作為合成的場(chǎng)所。2.細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從_____端到______端,而閱讀mRNA的方向是從____端到____端。3.核糖體上能夠結(jié)合tRNA的部位有_____部位,______部位。4.蛋白質(zhì)的生物合成通常以_______作為起始密碼子,有時(shí)也以_____作為起始密碼子,以______,______,和______作為終止密碼子。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第125頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分
5.SD序列是指原核細(xì)胞mRNA的5ˊ端富含_____堿基的序列,它可以和16SrRNA的3ˊ端的_____序列互補(bǔ)配對(duì),而幫助起始密碼子的識(shí)別。7.原核生物蛋白質(zhì)合成中第一個(gè)被摻入的氨基酸是_____。8.無(wú)細(xì)胞翻譯系統(tǒng)翻譯出來(lái)的多肽鏈通常比在完整的細(xì)胞中翻譯的產(chǎn)物要長(zhǎng),這是因?yàn)開(kāi)____。12.某一tRNA的反密碼子是GGC,它可識(shí)別的密碼子為_(kāi)____和_____。13.環(huán)狀RNA不能有效地作為真核生物翻譯系統(tǒng)的模板是因?yàn)開(kāi)____。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第126頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分14.在真核細(xì)胞中,mRNA是由_____經(jīng)_____合成的,它攜帶著_____。它是由_____降解成的,大多數(shù)真核細(xì)胞的mRNA只編碼_____。15.生物界總共有_____個(gè)密碼子。其中_____個(gè)為氨基酸編碼16.氨酰-tRNA合成酶對(duì)_____和_____均有專一性,它至少有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)。17.原核細(xì)胞內(nèi)起始氨酰-tRNA為_(kāi)____;真核細(xì)胞內(nèi)起始氨酰-tRNA為_(kāi)____。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第127頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分19.許多生物核糖體連接于一個(gè)mRNA形成的復(fù)合物稱為_(kāi)____。20.肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化_____和_____。21.核糖體___亞基上的___協(xié)助識(shí)別起始密碼子。24.基因表達(dá)包括_____和_____。本文檔共133頁(yè);當(dāng)前第128頁(yè);編輯于星期三\17點(diǎn)58分25.遺傳密碼的特點(diǎn)有方向性、連續(xù)性_____和_____。26.氨酰-tRNA合成酶利用
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