微生物細胞的大小測定

關(guān)于微生物細胞的大小測定第1頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三

一、目的要求

1.學習并掌握用測微尺測定微生物大小的方法;2.了解目鏡測微尺和鏡臺測微尺的原理;第2頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三二、實驗器材及用品1、菌種:酵母菌2、儀器或其它用具:

目鏡測微尺，鏡臺測微尺，顯微鏡。第3頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三

三、基本原理

微生物細胞大小，是微生物的形態(tài)特征之一，也是分類鑒定的依據(jù)之一。由于菌體很小，只能在顯微鏡下測量。用來測量微生物細胞大小的工具有目鏡測微尺和鏡臺測微尺。鏡臺測微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片。一般將1mm等分為100格，每格長度等于0．01mm（即10μm）。是專用于校正目鏡測微尺每格長度的。第4頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三目鏡測微尺是一塊可放在接目鏡內(nèi)的隔板上的圓形小玻片，其中央刻有精確的刻度，有等分50小格或100小格兩種，每5小格間有一長線相隔。由于所用接目鏡放大倍數(shù)和接物鏡放大倍數(shù)的不同，目鏡測微尺每小格所代表的實際長度也就不同，因此，目鏡測微尺不能直接用來測量微生物的大小，在使用前必須用鏡臺測微尺進行校正，以求得在一定放大倍數(shù)的接目鏡和接物鏡下該目鏡測微尺每小格的相對值，然后才可用來測量微生物的大小。第5頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三四、操作步驟1、裝目鏡測微尺2、校正目鏡測微尺（1）放鏡臺測微尺將鏡臺測微尺刻度面朝上放在顯微鏡載物臺上。（2）先用低倍鏡觀察，將鏡臺測微尺有刻度的部分移至視野中央，調(diào)節(jié)焦距，當清晰的看到鏡臺測微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動目鏡使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行。利用移動器移動鏡臺測微尺，使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩線完全重合，然后分別數(shù)出兩重合線之間鏡臺測微尺和目鏡測微尺所占格數(shù)。用同樣的方法換成高倍鏡和油鏡進行校正，分別測出在高倍鏡和油鏡下，兩重合線之間兩尺分別所占格數(shù)。第6頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三

顯微測微尺第7頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三第8頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三（3）計算

由于已知鏡臺測微尺每格長10um，根據(jù)公式

目鏡測微尺每格長度（um）=兩條重合線間鏡臺測微尺的格數(shù)×10/兩重合線間目鏡測微尺的格數(shù)

即可分別計算出在不同放大倍數(shù)下，目鏡測微尺每格所代表的長度。第9頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三低倍鏡下-------倍目鏡測微尺每格長度為----------高倍鏡下-------倍目鏡測微尺每格長度為----------油鏡下----------倍目鏡測微尺每格長度為----------第10頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三3、菌體大小測定先用低倍鏡和高倍鏡找到標本后，換高倍鏡測定酵母菌的直徑。測定時，通過轉(zhuǎn)動目鏡測微尺和移動載玻片，測出酵母菌直徑或?qū)捄烷L所占目鏡測微尺的格數(shù)。最后將所測得的格數(shù)乘以目鏡測微尺每格所代表的長度，即為該菌的實際大小。第11頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三注意事項1、鏡臺測微尺的玻片很薄，在標定油鏡時，要格外注意，以免壓碎鏡臺測微尺或損壞鏡頭；2、標定目鏡測微尺時，一定要準確對正目鏡測微尺與鏡臺測微尺的重合線。第12頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三

五、實驗報告

1.將目鏡測微尺校正結(jié)果填入表格中;2.在高倍鏡下測量酵母菌的大小,填入表格中;3.思考題:為什么更換不同放大倍數(shù)的目鏡和物鏡