止瀉退熱分散片主要藥效學(xué)實驗研究

止瀉退熱分散片主要藥效學(xué)實驗研究【摘要】目的對止瀉退熱分散片進(jìn)行主要藥效學(xué)研究，為進(jìn)一步開發(fā)該藥提供實驗依據(jù)。方法通過止瀉實驗，腸功能實驗，解熱實驗考察止瀉退熱分散片的藥理作用。結(jié)果止瀉退熱分散片高、中、低劑量都能夠降低腹瀉小鼠的腹瀉指數(shù)；能夠減少小鼠小腸推進(jìn)功能，能夠?qū)剐滤沟拿魉滦∈笮∧c推進(jìn)功能的亢進(jìn)；能夠降低發(fā)熱大鼠的體溫。結(jié)論止瀉退熱分散片具有止瀉、抑制腸蠕動、解熱作用。

【關(guān)鍵詞】止瀉退熱分散片藥效

止瀉退熱分散片是本實驗室研發(fā)的中藥新藥，主要藥物是黃芩、黃連。本實驗的研究目的是考察該新藥的主要藥理作用，為臨床應(yīng)用提供實驗數(shù)據(jù)支持。

1器材1藥物止瀉退熱分散片由南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院中藥新藥實驗室提供。復(fù)方地芬諾酯，注射用活性碳(杭州木材廠)，羧甲基纖維素，啤酒酵母，甲硫酸新斯的明注射液。2動物SPF級昆明小鼠18～22g，雌雄各半，動物合格證號0016555；Wistar大鼠，體重(150±10)g，雌，動物合格證號0019732，由南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。動物實驗環(huán)境為南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院動物實驗室。環(huán)境溫度(22±2)℃，相對濕度70%。動物購進(jìn)后適應(yīng)環(huán)境3d。3儀器與材料燒杯，雙腳規(guī)，直尺，濾紙，眼科剪，彎嘴鑷，體溫計，無菌操作臺；HIRAYAMAHVE-50高溫消毒柜；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，湖北省黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司；CIRRUSMODELCR-70恒溫振蕩器。4方法止瀉實驗昆明小鼠18～22g，雌雄各半，禁食不禁水12h，隨機分組：模型對照組、復(fù)方地芬諾酯組、止瀉退熱分散片高、中、低組。各組灌蓖麻油ml/10g，h后給藥［1］，將動物置于墊有濾紙的燒杯下。觀察并統(tǒng)計小鼠的便數(shù)、稀便數(shù)，按照周氏法［2］確定稀便級，表示稀便的程度。每只動物的稀便率=稀便數(shù)/總便數(shù)×100%。腹瀉指數(shù)=稀便率×稀便級。每1h換1次濾紙，連續(xù)觀察4h。

級數(shù)1234污跡直徑＜1cm1～cm2～3cm3cm

干便與稀便的區(qū)分以濾紙上有無污跡為標(biāo)準(zhǔn)。級數(shù)直徑的測量:圓形測直徑，橢圓形或不規(guī)則形測最長和近似圓的直徑。二者取平均數(shù)。統(tǒng)計時先逐個統(tǒng)計每一堆稀便的級數(shù),然后將該鼠所有稀便級數(shù)相加除以稀便數(shù)得到稀便的平均級數(shù),簡稱稀便級。稀便次數(shù)以每一粒或每一堆(不能分清粒數(shù)者)為1次。腸功能實驗對正常小鼠小腸推進(jìn)功能影響實驗［3,4］：昆明小鼠18～22g，雌雄各半。動物禁食不禁水12h，然后隨機分正常組、復(fù)方地芬諾酯組、止瀉退熱分散片高、中、低劑量組，灌胃給藥，給藥后1h每鼠灌胃4%活性碳羧甲基纖維素溶液/只［5］。20min后脫頸椎處死，開腹分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將腸管拉直，測量總長度，將幽門至活性碳前沿的距離作為其在小腸內(nèi)推進(jìn)距離，按照活性碳推進(jìn)率=小腸推進(jìn)距離/小腸總長度×100%，計算推進(jìn)率。

對新斯的明造成小鼠小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)的影響實驗［3,4,6］：昆明小鼠18～22g，雌雄各半。動物禁食不禁水12h，然后隨機分正常組、模型組、復(fù)方地芬諾酯組，止瀉退熱分散片高、中、低劑量組，灌胃給予藥物。除正常對照組外，其余各組每只皮下注射甲硫酸新斯的明mg/kg，正常對照組皮下注射同體積生理鹽水，15min后，每只動物灌胃4%活性碳羧甲基纖維素溶液ml/只,20min后脫頸椎處死，開腹分離腸系膜。剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將腸管拉直，測量總長度，將幽門至活性碳前沿的距離作為其在小腸內(nèi)推進(jìn)距離，按照活性碳推進(jìn)率=小腸推進(jìn)距離/小腸總長度×100%，計算推進(jìn)率。解熱實驗［7］Wistar大鼠，體重150g，雌性。將體溫溫度計插入大鼠直腸，深度為2cm，記錄為實驗前直腸溫度。在大鼠頸部以下的背部皮下注射啤酒酵母懸液10ml/kg，引起動物發(fā)熱。按摩注射部位以使懸浮液在皮膚下擴(kuò)散。室溫保持在22～24℃，注射酵母后立即禁食。18h后記錄直腸溫度。30min后再次測量，體溫達(dá)不到38℃的大鼠不能用于實驗。合格的動物隨機分為模型組、安乃近組、止瀉退熱分散片高、中、低劑量組。同時設(shè)置正常對照組，然后灌胃給藥，給藥后60，120，180，240min后再次測定并記錄直腸溫度。

2結(jié)果

止瀉實驗結(jié)果采用統(tǒng)計軟件中重復(fù)測量數(shù)據(jù)兩因素多水平的統(tǒng)計方法進(jìn)行分析。實驗結(jié)果見表1。從表1中可以看出，給藥后1～4h以內(nèi)，止瀉退熱分散片高、中、低劑量以及陽性藥物復(fù)方地芬諾酯能夠抑制動物的腹瀉指數(shù)，與模型組相比差異有顯著性意義。同時還可以看出所有動物的腹瀉指數(shù)隨著時間的推遲都呈現(xiàn)減少的趨勢，這可能是因為動物在經(jīng)過12h的禁食之后，排便量高峰期主要在造模后2h以內(nèi)，隨后排便的次數(shù)和數(shù)量都減少了。表1小鼠止瀉實驗

小腸推進(jìn)功能實驗結(jié)果采用軟件按照Onewayanovo方法統(tǒng)計，分析不同組間小鼠活性碳推進(jìn)率的差異。結(jié)果見表2～3。實驗結(jié)果表明止瀉退熱分散片高、中、低劑量以及陽性藥物復(fù)方地芬諾酯能夠抑制正常小鼠的小腸推進(jìn)率。新斯的明能夠增強小鼠小腸的推進(jìn)率，與正常組相比差異有顯著性意義，說明造模成功。同時止瀉退熱分散片高、中、低劑量與陽性藥物復(fù)方地芬諾酯能夠抑制推進(jìn)功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)率，即具有減慢腸蠕動的作用。表2對正常小鼠小腸推進(jìn)率的影響表3對新斯的明致小鼠推進(jìn)機能亢進(jìn)的推進(jìn)率影響

解熱實驗結(jié)果采用軟件，按照重復(fù)測量數(shù)據(jù)的兩因素多水平統(tǒng)計分析方法進(jìn)行分析，比較正常動物、模型動物、陽性對照動物及受試藥物組之間的差異。結(jié)果見表4。表4大鼠解熱實驗

從表4可以看出給藥后，發(fā)熱大鼠體溫出現(xiàn)下降，安乃近組在給藥后1h動物體溫就顯著下降，與模型組相比。止瀉退熱分散片高、中劑量組動物體溫也下降，與模型組相比，差異有顯著性意義。在給藥后2h，止瀉退熱分散片低劑量組動物體溫下降，與模型組相比差異有顯著性意義。在給藥3，4h后，安乃近組與止瀉退熱分散片的3個劑量組的動物體溫仍下降，與模型組相比，差異有顯著性意義?？梢钥闯?，止瀉退熱分散片高中低劑量都有顯著的解熱作用。

3討論

止瀉退熱分散片是主要用于治療感染性腹瀉的中藥新藥制劑。感染性腹瀉從病因?qū)W角度可以分為細(xì)菌性和病毒性腹瀉兩種。臨床表現(xiàn)主要以嘔吐、腹瀉等消化道癥狀為主。細(xì)菌性感染還會引發(fā)高熱等癥狀。本研究的目的是評價止瀉退熱分散片的止瀉與解熱作用，從而為其臨床應(yīng)用提供實驗數(shù)據(jù)支持。關(guān)于該藥物的抑菌作用研究結(jié)果另外發(fā)表。通過本實驗結(jié)果，表明該止瀉退熱分散片能夠減緩正常小鼠和新斯的明造成小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)小鼠的小腸蠕動，降低蓖麻油所致腹瀉小鼠的腹瀉指數(shù)，能夠降低啤酒酵母造成的發(fā)熱大鼠的體溫，具有較好的解熱功效。本實驗研究表明該藥物藥理作用確切,具有良好的開發(fā)價值。

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［5］沃