熒光定量CR技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用

熒光定量PCR技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用中山大學(xué)臨床檢驗標準化研究中心主任中山大學(xué)達安基因股份有限公司首席科學(xué)家朱振宇醫(yī)學(xué)博士、教授、博士生導(dǎo)師Tel：，020－37656430九十年代中期PCR臨床應(yīng)用在國內(nèi)全面展開1998年熒光定量PCR技術(shù)開始在中國應(yīng)用于臨床檢測PCR發(fā)展簡史PCR

(Polymerase

ChainReaction)1983Cetus公司的KaryMullis于12月16日第一次成功實驗發(fā)明了PCR1985關(guān)于PCR的文章首次由KaryMullis及其同事等人在《Science》上發(fā)表198912月《Science》雜志將PCR和它所使用的TaqDNA聚合酶命名為第一個“年度分子”。1993KaryMullis，NobelPrizeinChemistry1995PerkinElmer公司研制出熒光定量PCR技術(shù)循環(huán)次數(shù)DNA的鏈數(shù)

1

2122

2243

23810

210102420

2201,048,57630

2301,073,741,82410億

PCR循環(huán)次數(shù)與DNA產(chǎn)量關(guān)系PCR循環(huán)PCR特點：高效擴增、忠實復(fù)制靈敏度高快捷簡便對樣品純度要求低可以相對定量PCR反應(yīng)的特點Ct值的意義Ct值與重復(fù)性同一樣本在相同條件下同時進行96次擴增FQ-PCRCt值與濃度不同的模板達到熒光域值時的Ct值不同感染性疾病的診斷母嬰傳播的控制與觀察遺傳疾病的診斷腫瘤的診斷法醫(yī)學(xué)鑒定熒光定量PCR的臨床應(yīng)用早期診斷（超早期診斷）病情評估和預(yù)后判斷抗病毒藥物療效的觀察、指導(dǎo)新藥驗證一嘆感染形性疾分病1.病原主體含升量與極病情誘之間罰的關(guān)馳系2.病原辨體含高量與載用藥牽之間練的關(guān)速系3.藥物復(fù)及療泳法的盆研究橫與開哈發(fā)4.新的屆病原奸體分圣子診烈斷標致準5.新的尋愈后笨指標6.傳染掏病發(fā)愚病的鹽監(jiān)控郵、預(yù)炊測與挑預(yù)防臨床藏應(yīng)用臨床呆應(yīng)用二弄腫角瘤(H鍋PV香-宮頸頃癌；EB殼V-鼻咽鍋癌；HP遣-胃癌)1.腫瘤備標志芳物：祥癌胚師抗原飾、同冊功酶妖、抗炮體、點激素監(jiān)、細估胞因陪子、朵受體筑等2.腫瘤銀相關(guān)肝基因芒表達細的檢胃測：止包括港癌基癢因抗框癌基稈因、課腫瘤籍轉(zhuǎn)移監(jiān)基因眨及轉(zhuǎn)汽移抑習(xí)制基澡因遺傳蒸?。╝、b-地中圖海貧挑血、熟唐氏劍綜合廢癥、凳性別票連鎖頑遺傳僵?。?.等位劑基因康檢測2.多基玩因遺迎傳病芹的突蒜變檢富測3.基因飄表達黎異常增所致勒遺傳裁病檢聚測熒光姻定量PC扯R在病罪原體陽檢測命中的旨應(yīng)用一污肝炎頸病毒工定量刻檢測二義性病渣病原許體檢醬測三租結(jié)役核桿驚菌及膽呼吸眾道病豬原體蘇檢測四稅優(yōu)概生優(yōu)路育(T愛OR疊CH他)相關(guān)悠項目另檢測臨床站應(yīng)用肝炎寺病毒甘定量且檢測HB飼VHC誤V臨床巨應(yīng)用（一奸）餓乙腰型肝郵炎病均毒結(jié)插構(gòu)及改特點HB槽sA嘗g：是HB永V感染些的主春要標招志HB峰sA啟b：保護刪性抗臨體HB特cA勒g：僅存大于感摘染的屬肝細嗎胞核漲內(nèi)，一般紋不存淡在于粒血循谷環(huán)中HB漂cA睬b:非保歉護性津抗體紛，HB兼cA育b-城Ig披M提示HB溝V處于垂復(fù)制題狀態(tài)HB鋪eA冠g：HB召V復(fù)制托及強家感染管性的靜指標HB癢eA模b：有一皂定的兔保護脹作用教，預(yù)錦后良款好HB納VHB春V（二孤）HB裳V-孔DN多A與“垂兩對鏈半”1.誘“兩對校半”能：主機體蓋的免襖疫反澡應(yīng)狀奧態(tài)；2.腳“攜帶陪者”委、“檔大三陳陽”甲、“萌小三野陽”閣等免再疫學(xué)對指標款不能反應(yīng)慣體內(nèi)狠病毒擁復(fù)制作水平篩與感撤染程偶度。FQ風(fēng)-P敬CR：檢頁測的區(qū)是HB功V本身將的遺殖傳物蜜質(zhì)—D沾NA，是病毒盡存在條和復(fù)僻制的袍最可逃靠、籍最直屆接的眨指標循。3.血清捎學(xué)指席標(－)不能料排除HB逐V感染。HB遇V（二油）HB訓(xùn)V-痰DN挨A與“爬兩對設(shè)半”HBsAg(－)

HBV-DNA(＋)

HBeAg(－)HBV-DNA(＋)4.也可見能出鴉現(xiàn)HB少sA婆g(＋)，HB冠V-父DN旁A(－)。5.押HB栗sA萬b航(＋)、HB累cA六b繞(＋)、HB托eA街b忽(＋)三抗倒體陽弱性與HB拜V江DN迫A蔽2.增5×103co陜py/m障l結(jié)果蛛解釋我。HB寶V(三)HB鼓V-老DN添A定量好檢測殿的臨牧床意序義3.香H慨BV討-D確NA定量卡與預(yù)為后a.含量他高者次急性溉肝炎冰患者凝易慢析性化b.癌變疼的幾泄率明梅顯高名于含箱量低隨者1.執(zhí)H厭BV和-D拘NA定量所與HB籌V復(fù)制詢水平末及傳切染性2.孩H材BV罩-D胳NA垃定量降與乙旱肝藥灰物療莊效a.歲專搏家提咳出<盲103co仍py炕/堵ml括做為袋陰性儲或臨暈床治眉愈標堅準b.印H帝BV潮-D規(guī)NA侵定量亮分析臺與干擾猴素治療捏(前被、中墨、后婦)c.拉咪伸呋啶HB懼V感染張與干擾炒素治療治療閃前：a:治療貼前HB有V低水賣平復(fù)遺制者豎對干險擾素老的反別應(yīng)性掘明顯優(yōu)霸于高邪水平淹復(fù)制償者。b:治療讓前HB烏V省DN學(xué)A含量校特別誼高者修大多取沒有砌療效木。c:烈H項Bs晌Ag轉(zhuǎn)陰膏的幾惹乎都坡是那劉些治達療前性血清HB兄VDN杰A含量殊較低武者。HB洽V感染辱與干擾蕉素治療治療棟中：a:病毒襖復(fù)制釘水平巴迅速菊降低夫者，孝有望峰治愈踐。b:相反駐，治纖療期叼間HB些V茶DN閃A復(fù)制使水平揉下降看較慢雞，或下爽降幅此度較蔬小，限或者陷變化妨不明攝顯者身，大典多是干擾眾素治定療無斯效。HB單V感染挺與干擾映素治療治療夸后：a:治療踐結(jié)束福后，哲采用PC塊R定量藥法檢遮測，HB寬VDN逮A哨<1殺03co犧py煎/m升l者，臣可能雨不再辯復(fù)發(fā)助。b:終止停治療認后HB套V聾DN套A仍保憑持較鄉(xiāng)豐低水痛平者權(quán)，反跳絲式的可環(huán)能性秤較大挖。ALTMonthsafterStartofTherapy0NormalAlt治療前1234561224HBVDNAHBeAgHBsAgPo箏or虛R蒼es努po霞ns此e泡to講I困FN融T任he刷ra口pyCH濁RO襲NI遺C在HE名PA約TI兵TI耽S危B拉咪笛呋啶：有顯弊著降浮低高聯(lián)病毒取載量瞇作用，近續(xù)期療謙效頗卵有優(yōu)緊勢，煩但是西長期仙使用庸可導(dǎo)搖致H詞BV揚變異襯，患遼者易幻玉出現(xiàn)卸耐受柿性，腎而且忌容易渣出現(xiàn)盆停藥幻玉后反澡彈。HB障V感評染與拉咪衰呋啶治療0-20-40-60-80-100治療周數(shù)拉米夫定安慰劑血清HBVDNA;中位%變化0481216202428323640444852n=192n=404n=171n=359拉米奔夫定徐抑制跳血清HB恭V搞DN燦AHB網(wǎng)V(三)HB夫V-緣瑞DN籮A定量歇檢測覆的臨符床意獻義4.拉H壁BV綢-D筋NA定量撓有助館于指膜導(dǎo)懷牧孕與賽孕期感，哺溉乳期歌檢查5.肝臟移植與HBV-DNAMazzaferro等報告：<103copy/ml無一例再發(fā)肝炎

>105copy/ml發(fā)生了嚴重HBV再感染6.血液他制品簡和獻眼血員圍的篩短選病毒遙特點辱：1.單正爸鏈RN采A病毒2.袍E權(quán)1和E2區(qū)基通因高乞度變鄰異性（一扁）丙我型肝牙炎病施毒特弟點HC勺V感染館特點摟：HC明V在血非中含蛙量極血微輸血炎后肝謙炎主崇要致障病因盲子免疫錘學(xué)標疑志僅犧有抗-HC蔽V，非悶中和間抗體淡，產(chǎn)錯生時蓄間不怒一有一側(cè)部分配人感徐染HC屠V后，朵不產(chǎn)概生抗-HC愚V感染喪易于怎慢性身化(5諒0-拔85葛%)疫苗勺研制撕尚不造成功單鏈RN套A(二)HC序V-R根NA定量起檢測撈的臨蟻床意妥義1.早期體診斷a.臨床鈔以<焰80舞c紋op桐y/槐ml做為踢無感慨染或禁治愈布標準行。b.風(fēng)H揪CV感染1-填3W，即茅可檢香出HC暫V-仇RN侍A的存臭在。c.嚴格膽篩選惠獻血做員,提高突對窗決口期冶感染紫者的將檢出廣率。d.醫(yī)療捕糾紛租中的滔“舉夫證倒竟置”笛，病犁人入育院前賄后進段行HC沾V-R地NA檢測濁。HC郵VHC畢V(二)HC桑V-率RN遣A定量估檢測孕的臨芹床意步義2.良HC蘆V-恒RN諷A載量呈與抗-H破CV滴度營、AL息T水平薯之間塔的相選關(guān)性理。抗-H深CV滴度搞和AL廢T異常帖率隨色著HC菊V-眾RN再A載量憑升高遺而增使加。3.兵HC炎V-眠RN膚A是評出價抗捷病毒絡(luò)治療幅效果系的重際要指龜標。4.慢性富丙型驕肝炎幸長期搶抗-H闖CV陽性課，這洞時如瘋果進云行HC諷V-短RN孫A定量直檢測誰可以沸鑒別綱活動幣性、際復(fù)制前程度衡。二政常見完性傳匆播疾黎病病施原體一咽淋球使菌（NG吐H）二束沙眼厚衣原鑒體（CT）三遮解脲療脲原究體（UU）四陣梅毒設(shè)螺旋爆體（TP）五者單純片庖疹減病毒晌（HS窮V）六懲乳頭嚴瘤病出毒（HP作V）七鑰人類析免疫妹缺陷獎病毒勇（HI昏V）八EV踢71撤A覽16通用收型ST勞D艾滋穴病艾滋偷病是衣英文AI妙DS（Ac究qu晉ir溉ed垃I餡mm罪un動it婆y巡壽De噸fi越ci巾en健cy價S姥yn芒dr爐om晃e)的中糞文譯駕音，辦全稱刮是“侄獲得裳性免銷疫缺乖陷綜瓣合征嗚”。飲它可廟以由磁人類可免疫蹈缺陷冰病毒挨（HI尸V,鮮Hu武ma個n-鐵be勤in例g濾Im屆mu擋ni刷ty棵D瓣ef牙ic尸ie拐nc丘y電Vi趟ru乖s），磨又稱切艾滋混病病稻毒引冶起的蘋疾病暑。當刻病毒叛侵入采人體志后，搬經(jīng)一濾段時散間的肢潛伏呼期，橫破壞獲人體堤的免蘋疫力原，從饑而發(fā)關(guān)病，吹病死喉率高異，是賢一種雨嚴重菠的傳望染病滾。艾滋適病是宮一種揮有明尸確病份原體漂的可寇通過黃人之某間一薄定傳夜播途蹈徑傳踐播的雙慢性奸傳染吊病，魯屬于《傳染桐病防皆治法》中規(guī)年定的奏乙類泰傳染喝病HI茫V病毒諒：多細亞型仁和多扣變異HI臭V-離1和HI逮V-秘2M組、O組和N組亞性辛型：A-戲KCR螞F：基貢因重艦組亞跌型，陣主要皺是HI鹽V-嫂1型毒株鵲亞型塔監(jiān)測鍬的意棟義不同釣亞型丸與不宣同傳吹播途臥徑的伯關(guān)系涂：B主要勸通過所男性杏同性摧性行睛為和筆靜脈孩注射謝吸毒禁傳播代，C主要撤異性音性接碼觸傳較播流行衛(wèi)地理能和傳硬播線消路的搶分析形：東徒南亞競區(qū)域召的C亞型搖和B亞型重組斑亞型拔傳播利效力梯變化予及對課流行朋的影母響：納東歐掃的B/價A重組季流行拜、泰他國的A/魄E重組艾滋漠病病盒毒在港外界脖的抵污抗力HI描V病毒存一旦綿離開斜宿主鑄細胞戀在外撒界環(huán)叢境中乓生存蠢能力咐很快嚇消失HI第V對環(huán)勸境中洋的物耗理因始素和延化學(xué)圖因素慚抵抗泛力均岸較弱匪，比鄙乙型臭肝炎沒病毒妖（HB薦V）的士抵抗甘力低擺得多對HB醉V有效憤得消腿毒和率滅活冠方法藏均適余用于HI舌V典型堡進展是者：8-才10年潛宏伏期素后成足為艾攀滋病場人，80叨%斥-9習(xí)0%快速令進展把者：CD照4細胞2-兆5年內(nèi)例迅速珍下降拉，HI末V病毒練載量設(shè)一直宏維持睡較高珍水平耕，而療且分斯離的HI惰V有均團一性嚷。長期壁存活秋者（戀又稱嗚長期老不進馳展者喊）：逆維持15年以櫻上，瞧而且CD轟4計數(shù)秋維持脈正常損，在峰所有算感染合者中符比例線一般妙在8%么-1道0%。HI直V感染益的三猜種結(jié)丸局艾滋晃病的叨診斷HI遍V感染炕者：菊確定HI壩V感染蠟的個群體抗體燃檢測捉：初仰篩和求確認輔助添診斷艾滋速病病足人：肚臨床茅診斷池標準氏見國岡家標站準《H蘆IV搞/A節(jié)ID困S的診喊斷標深準和憑防治柔原則》GB昏16媽00四0-番19悉95熒光左定量PC曬R的應(yīng)持用為咐艾滋名病的眨初篩德和輔牲助檢查衣提供老了有橡力的冬工具NG下H淋球穴菌感肯染與定致病1.人是悠淋球限菌的燭惟一仁宿主的。2.發(fā)病凳率最禾高，舅在所ST驗D疾病年中，必高達60局%左右甩。3.發(fā)病瞧趨勢脅：a.男性過多于斑女性笛。b.城市價走向口農(nóng)村攜，c.高收盆入階弄層向狗低收番入階交層擴焦展4.人對扮淋球灑菌感錄染無撓天然頁抵抗翁力，炮免疫散不持久，歲再感貌染和綠慢性微患者雖普遍柜存在擔(dān)。5.如母獻親為愛淋病招患者賽，嬰真兒出近生時擦易患戚上淋斑球菌舅性結(jié)炮膜炎CT沙眼胸衣原叢體感伶染與澆致病1.嚴格楊的細滅胞內(nèi)捕寄生逢。2.不僅睡可致光眼部蹄感染惕、肺聾部感拒染、也是ST屆D的主款要病原問體。3.近年您來在諷歐美暑等國免，沙兄眼衣菜原體幕的感純?nèi)韭士撕臀：π砸雅艹^賊淋球濃菌而焦居ST仿D之首鼠。4.在我沈國，軟在非濤淋球糞菌性查尿道良炎中塔，居摔首位涌。5.泌尿毫生殖枯道感著染，蝕妨礙宜妊娠場。6.盆腔策感染匹，可睛致生財殖能村力損殺害。UU解脲牧脲原調(diào)體感債染與俗致病合成煩尿素分酶，但分解敵尿素2.在非爛淋球妥菌性手尿道歉炎其巴感染勺率僅括次于蝕衣原體感壘染，羽居第席二位點。3.流產(chǎn)勢超過4次以信上者鍋，檢銷出率今高達80萄%。4.有30艙-4抄0%男性糠尿道儉炎是夫由感旬染UU所致半。5.與男胖性不余育相笨關(guān)。氣男性矮不育頓患者糊精液悅中，蒙脲原脖體檢恐出率視高達66匠.6％。棋檢出鐮率隨濕精子盆數(shù)減道少和平精子隨活動倒力下醋降而梯升高接。1.非培豈養(yǎng)或絞形態(tài)增學(xué)檢刃查的積診斷派技術(shù)恒，快岸速、抽特異飽、敏泉感。2.對無剛癥狀仰或癥叛狀輕恭者，控可以倡早期驕確診塌。3.對NG壇H、CT、UU等混燙合感柜染者貸，診胳斷和胖鑒別唯診斷較。4.指導(dǎo)參用藥牧、考螞核療亂效。熒光滋定量PC份R診斷NG吧H/悶CT嘆/U標U的意籃義NG衰H/刻CT險/U淘UNG省H/混CT危/U崖U熒光傍定量PC鏡R診斷NG啦H/叔CT墊/U研U的意鈴義5.不孕娃不育序、優(yōu)蹈生優(yōu)灶育。6.流行烈病學(xué)唇調(diào)查陣，為攜性傳皮播疾秘病的攤監(jiān)控鉗提供主依據(jù)溝。7.CT、UU是FD博A批準通的PC攔R檢測炕試劑庸盒，兆可作城為首奪選方法蹲，在次臨床駛推廣依應(yīng)用柔。人乳雅頭瘤尖病毒愚感染捎與致遠病1.特HP怨V具有品宿主偽和組級織特營異性稻，只譽能感冊染人城的皮考膚和鉆黏膜把上皮楚細胞煙，人旁是HP廈V的惟壟一宿他主。2.有10席0多個碗型。3.低危鉗型：HP侮V增6、11引起仰良性謎病變(尖銳銳濕疣、喉券乳頭拒瘤等)HP敲V人乳照頭瘤棟病毒愧感染攀與致縫病HP排V4.高危株型：HP佩V香16、18引起汗惡性找腫瘤(宮頸熄癌、肛門聚癌、告口腔船癌等)5.免疫綁原性誰低，攝易形每成持那續(xù)性痛感染越。6.新生今兒產(chǎn)杏道感貸染。HP代V1.對典穗型病置例可款以明數(shù)確診伏斷。2.對臨衡床表刮現(xiàn)和垂組織聲病理庸改變剩都不晚典型耍的病景例同棚樣可塞以做否出診徐斷。3.對亞乓臨床蛙和隱營性HP掘V感染的做出煮診斷康。4.基因吳分型繼。5.考核曾療效雕與預(yù)酷后。6.病毒疼載量釘與患罵癌癥丟風(fēng)險。HP餡V熒光窩定量PC堅R檢測HP痕V的意振義HP爐V手足土口病悅（ha孔nd愉-f寄oo泊t-捐mo搭ut屈h狗di咽se命as叨e，HF優(yōu)MD）為全延球性蓄傳染務(wù)病，知世界液大部絞分地籠區(qū)均禿有流急行的掙報道估。19存57花年在霸加拿部大首圓次報嗚告，案新西嶄蘭S頓ed控do框n于勾19它57信年最時早加災(zāi)以描進述，挖19禮58眠年加蹦拿大摟Ro推bi鑄ns膽on持從患提者糞市便和疏咽拭質(zhì)中分請離出勒Co死xA逮16耳，同糕時患醉者血雕清抗拍體有鑼四倍掘增長慕,初煩步查揭明C姑ox晃A1押6為闊本病五病原鉗；19俱59李年提脆出H篩FM杠D命月名，室HF鋼MD息在全御球廣熟泛流宵行，盈無明沈顯的鉛地域御分布恭。之后鉛世界落各地睬均經(jīng)再常發(fā)捷生由謙各型譜柯薩勒奇、制?？墒巢《拘院虴田V轎71津引起厚的手額足口久病流慈行。發(fā)熱波,粥不適耀,輪咽喉器腫痛恩,進口腔黑、手砌、腳聯(lián)側(cè)面紹及掌飾心、扶屁股正出現(xiàn)滑小泡傳染朵性極容高病程據(jù)約1春周HF恢MD的病原手足遠口病錘可由撐多種交腸道豈病毒濁所引飾起，捷其中骨包括Co講xA粒5,悲A1膨0,遍A沙16佛,蘋A農(nóng)19閉,EV委71紅,以及買部分漏?？刹げ《鞠雍涂孪壦_奇B辟組病節(jié)毒,尤以師Co餅xA鏡16啞和只E撞V7脅1最提為常右見傳播醋途徑鹽:鏟糞爭-口遺途徑衣傳播:唾液究與糞多便;呼吸疾道傳扇播:空氣移飛沫評;接觸苗傳播皰疹跳液中難含大擴量病蘆毒，釋皰疹他破潰法后病路毒排罩出。HF獸MD莊為全追球性律傳染誓病，恰在全庸球廣炊泛分楚布，棟無明耽顯的商地域屠分布鍛,造但近年剖EV休71踢在東身南亞殘一帶唇流行斑,部引起糧較多假的重肺癥和俊死亡搏病例脫。在8橋0年猛代和啊90謀年代濫，中溫國手旅足口測病的層流行牛主要褲以Co挺xA泊16置為主紡，2吹00晨8年克，C臨ox顛A1彩6橡和E綢V7炮1偽共皂循環(huán)蓄引起倆手足口予病爆疤發(fā),型E佳V7錄1在振大部腫分省邪市為航優(yōu)勢未病毒久。人腸瞞道病趣毒感研染的眠一般果致病岔機制進入途徑口腔/呼吸道咽喉及下腸胃道傳播扁桃體、深層淋巴結(jié)、腸道淋巴結(jié)微病毒血癥先天性感染神經(jīng)系統(tǒng)心臟肝臟、胰臟、腎上腺呼吸系統(tǒng)皮膚及黏膜病毒血癥神經(jīng)系統(tǒng)抗體產(chǎn)生、病毒血癥消失，病毒感染癥狀改善飛沫、接觸、飲食肌肉致病墻特點①隱性叨感染槽多見神，很啄少引蘿起腹其瀉，穩(wěn)嬰幼遣兒、虜免疫馳力低踏下的怨成人家易感歸。②病毒嗚在機芳體腸都道中狗增殖，很少蹲引起件腸道艘癥狀絕，是嘩以消就化道菊為原加發(fā)灶呆的全歪身感堵染。③不同候人腸探道病液毒可混引起副相同掌癥狀拿，同縮慧一種草人腸將道病彎毒可淋引起辱不同岸臨床賢表現(xiàn)啊。④感染匙過程間中形斜成病爹毒血蕉癥。中國HF蚊MD的流惹行19勉81年，利我國貓在上搶海首消次報代道了HF拜MD病例19扭87年在與中國絹分離聯(lián)到CV媽A1橋619喜95年以貧來，掃我國侄陸續(xù)俱在武躁漢、裝深圳留、上妙海、濟重慶根、山?jīng)]東和痕安徽輝等地剪的HF覽MD患者壞中分裹離到EV鈔71病毒贈。20拉07年，慎山東發(fā)生麗了手陪足口澤病爆筑發(fā)流據(jù)行，累送計報告HF賠MD病例39，60燥6例，聽其中14例病麗例死代亡。剃實驗耕室檢率測發(fā)舟現(xiàn)EV沙71是引罵起山癢東臨脹沂HF待MD的主冒要病昆原，瓣同時妖還檢隱測到Ec恥ho只3和/或CV江A1拔6。20喇08年全膽國出租現(xiàn)HF顧MD爆發(fā)陸流行,以HE持V7太1為優(yōu)刻勢,C困VA雅16還有耕其它EV共循喬環(huán)引窯起加強HF敏MD病原遇檢測佩和監(jiān)聽測的葬十分饅必要依據(jù)舌臺灣19車98導(dǎo)-2須00廢8和中謠國大輛陸20肥07暗-2亭00物8年的好經(jīng)驗掌握偉手足納口病鎖病原脂譜，罩特別刮是EV臂71感染桃所占忍的比拉例，保對析判斷HF懂MD疫情芬導(dǎo)致挎重癥濱和死沫亡的廊比例從有重撿要的介科學(xué)橡參考遣價值瞎。手足市口病及的實裂驗室櫻檢測手足捷口病扯的診腰斷一愉般是達通過它采集世適當皂的臨恒床標帆本后視進行?；蛉珯z測來、抗碰原檢南測、留血清搬學(xué)抗柱體檢深測、枯病毒擱分離蜂和病喊毒鑒故定，牽如果扯沒有獵采到冊合格族的臨抄床標津本，場或無莫法進浮行實篇驗室鉗檢測沾。很多炮血清祖型的殺腸道鹿病毒淘能引胳起手餃足口鄉(xiāng)豐病，評不同之細胞肺系對施不同亦病毒醒的敏亡感性懂是有須所不辛同的各，而蠶不同妙時期輝腸道撓病毒饅的流歸行株遼也不羅同。通常躁用于削腸道襲病毒升分離格的細栽胞系絹為RD、HE諷p-觀2、Ve般ro等，猴聯(lián)合團使用粱上述屯的兩命種或趕更多瓣細胞倆有助劇于分意離到煤更多甚的腸器道病厘毒。病毒贊實驗香室檢屯測類布型-病毒媽實驗勒室診潮斷方蕉法檢測館抗體/抗原檢測據(jù)病毒檢測福核酸EL濫IS捧A/嫩HI物/P唯A蛋白潛印跡病毒鐮分離EL爺IS領(lǐng)A電鏡中和鄙試驗RT狐-P當CR實時您熒光粘定量PC留R套式PC剛RLA蕩MP免疫愚熒光基因努芯片每種都方法各有院優(yōu)勢,依據(jù)吉病毒來定希檢測曉策略Ne圓w歌mo臨le捕cu解la汁r鏡to她ol服sfo礦r掛ep么id雞em推io井lo余gyst聲ud李ie融s波an遲d蛙di煎ag邀no夏si圣s三豪結(jié)核歉桿菌刻與呼唐吸道吉病原廈體檢軋測TB：Tu顛be燙rc劉le獵b翻ac部il速liCP：Ch蒼la按my堡di古a電pn功eu榴mo摔ni它aMP：My擺co狼pl肆as堅ma獅l逐pn場eu孕mo袍ni滅aSA散RS：se尤ve躬re狠a害cu敵te襖r牽es讓pi爭ra鋼to匯ry偉s道yn燈dr占om成eH1伯N1甲型扶流感呼吸炊道合寄胞病跟毒結(jié)核疤桿菌俘流行后現(xiàn)狀眠（1）羅伯貌特·科赫傾（１白８４紋３——１９令１０鼻），趣德國支細菌乏學(xué)家揪，結(jié)受核桿脆菌發(fā)仗現(xiàn)者結(jié)核搞病是帶一個悲全球心性的坦問題珍，近宋年來天在世宮界范敗圍內(nèi)尼出現(xiàn)絹流行屢，且距呈增排長的怖趨勢TB結(jié)核偏桿菌濾流行表現(xiàn)狀勿（2）我國丈結(jié)核屯病的半疫情葉僅次嫩于印瓦度而浮居世跨界第轉(zhuǎn)二位20廢00年，翠全國姥人口蒸結(jié)核答感染警率為44居.5躲%，其吐中15～44歲人盆群占邀了53％萌，每賽年約蛾有25萬人及死于思結(jié)核辯病結(jié)核臭桿菌鄉(xiāng)豐引起削的感魄染肺部假感染展：原紋發(fā)性釋肺結(jié)嶼核，竊開放呼性肺稠結(jié)核絹。肺外孩感染?。耗X獎、腎拌、骨稅、關(guān)踏節(jié)、犬生殖只結(jié)核蓮、腸流結(jié)核岡、結(jié)映核性界腹膜遼炎、父全身言性結(jié)手核。常規(guī)嶺結(jié)核果病實撿驗室虛診斷箏方法涌及不抗足1.痰涂沫片作半抗酸遲染色覺：陽性跑率低烤、曬費時2.細胞禮培養(yǎng)蝕“金醫(yī)標準削”：周期隔太長(3章-4討W)3.血清天學(xué)診叫斷：a.接種BC壩G可出遺現(xiàn)陽給性b.不能貼區(qū)分毅活動雪性結(jié)互核病待和治憶愈后菌留下屈損傷注灶的耐病人c.交叉籍反應(yīng)嘗，假幫陽性不能弓早期慕診斷收！容網(wǎng)易漏疼診、煎誤診枝！TB熒光轎定量PC攏R檢測TB怪-D晌NA的意擱義1.能穩(wěn)縣定檢域測10答co陸py的TB史-D危NA，靈致敏度開高址，特唐異性僵強2.早期芒、快綠速、歪準確許地診樹斷結(jié)現(xiàn)核病擊。痰液震、肺叼及支車氣管崖灌洗短液——肺結(jié)蘆核血液——播散辰性結(jié)殊核和舊各臟家器的育結(jié)核福病腦脊烤液——中樞絨神經(jīng)覆系統(tǒng)夫結(jié)核遺病宮頸洲拭子寒、尿集道拭仁子——泌尿野生殖抽道結(jié)油核病TB3.熒光諸定量PC種R檢出燃結(jié)核百桿菌疼陽性專率顯垃著高漁于痰惜涂片睜抗酸震染色笛和改粱良羅樂氏培阿養(yǎng)法堡。4.貢T在B-屯DN蹤蝶A濃度鳴可用濃于判參斷療遇效：痰標冰本中演結(jié)核仔桿菌黃的數(shù)薦量呈潤逐漸泛下降警趨勢彼，TB果-D藥NA拷貝離數(shù)下乳降。趴根據(jù)療病原影體DN得A濃度餃，對繞藥物煎治療章及療辰效觀呆察提擾供參嬌考依善據(jù)TB熒光命定量PC歸R檢測TB泊-D嫌NA的意唯義CP、MP感染川可致槽咽炎殘、支漸氣管漠炎和問肺炎塔，潛戒伏期牧約2-束3周，免通常肉起病土較緩泰慢。泰持續(xù)黃性咳勾嗽。肺炎村衣原剪體(C境P)、肺巖炎支掉原體(M戀P)感染微與致蔑病CP豬/M椒PMP肺炎彩約占邀非細惡菌性咱肺炎址的1/工3以上灣，或驚各種指原因引起折的肺蝕炎的l0％。MP感染丘與小役兒支脆氣管敗哮喘順密切評相關(guān)劇。CP感染恐與冠傷心病歸存在刊密切勵的關(guān)祝系肺癌旦、支舍氣管御擴張堆患者共中CP感染阿率相筑對較高熒光奴定量PC執(zhí)R用于僅非典酬型性農(nóng)肺炎近的診降斷意義霉：1.直接登檢測騾病原濁體，淹早期疼、快料速、豆特異國診斷彩非典型性鮮肺炎刃。2.治療始方案枯與細圈菌、銷病毒釋感染城的治淘療方畜案不嚷同3.流行叼病學(xué)線調(diào)查棉。TB、MP、CP已被榜許多議醫(yī)院店尤其桿是婦忍幼保紋健醫(yī)狀院和妨兒童貸醫(yī)院劍納為交肺部貸感染綁的常敗規(guī)檢愿測項輪目MP穗/C柏P/銀SA德RS甲型H1支N1流感流行旋性感粗冒簡抓稱流男感，師是由紅甲、根乙、必丙三治種流獵感病厲毒引餡起的壞急性壇呼吸暖道傳太染病隊。甲藝型流終感病刺毒根推據(jù)其剛表面(H和N)結(jié)構(gòu)財及其姜基因俊特性慰的不榜同又?？煞直稍S抱多亞媽型，氧至今姨甲型獨流感壯病毒勺已發(fā)神現(xiàn)的飯血凝扇素有16個亞殖型(H腎1-反H1派6)，神付經(jīng)氨顧酸酶9個亞箱型(N久1-憶N9破)?！柏i山流感曉”更令名為創(chuàng)“甲品型H1嚴N1流感籌”世界催衛(wèi)生膽組織4月30日宣摸布，插從當懸日起抗，該惜組織充不再獅使用躺“豬糠流感悅”一池詞指贊代當漠前疫掩情，班而開退始使地用“A（H1凡N1）型底流感喝”一芬詞。犬與之禍相對肥應(yīng)，蔑我國雷的官惹方文飛件從5月1日起緊相繼盲用“根甲型H1賞N1流感慰”代遵替原熔來的蛾“人套感染催豬流招感”禿。世界縮慧衛(wèi)生鋼組織慈發(fā)言刑人說勤，之調(diào)所以討更改鵲叫法牌，是肅因為渡“豬寇流感償”一鑄詞容票易誤棗導(dǎo)消妄費者診，美哈國和鋪墨西渴哥等歡國的纖豬肉慕及豬阿肉制寺品已渴明顯稼受到太其他礦國家但進口童禁令咳影響語。世界孤衛(wèi)生愚組織渣的聲冠明說拘，根辰據(jù)目稀前掌層握的窗科學(xué)旨依據(jù)湖，此從次流灘行的絲式病毒掙僅在勢人際草間傳朗播，漫尚無莊證據(jù)滑表明借它在貝豬群婦內(nèi)傳鄭播，昆或由參豬向改人傳露播，駁也無陵證據(jù)鍛表明陵人因肆食用藍豬肉記或相糖關(guān)產(chǎn)陣品染獄病。病專原喇學(xué)甲型H1卷N1流感睛病毒鄙屬于碑正粘壘病毒理科，鄉(xiāng)豐典型嗓病毒吊顆粒替呈球非狀，亂直徑麥為80狗n炮m~鄭12宮0脂nm，有撤囊膜移。囊正膜上采有許如多放壘射狀傍排列屬的突債起糖干蛋白散，分癥別是幟血凝懂素HA、神為經(jīng)氨頌酸酶NA和M2蛋白犬。病夢毒顆郊粒內(nèi)穴為核會衣殼,呈螺葉旋狀額對稱,直徑浸為10夢nm。甲支型H1引N1流感斗病毒述為單滴股負梢鏈RN貧A病毒童，基準因組顏約為13核.6鋤k瘋b，由播大小羽不等丟的8個獨植立片欲段組碎成。流行病學(xué)特寺點傳染某源主要姨為病象豬和啊攜帶對病毒池的豬糕，感化染豬睬流感尾病毒懷的人森也被紹證實欲可以寒傳播疫病毒侵。感們?nèi)具@金種病成毒的餃動物霸均可當傳播兼。傳播澤途徑主要挪為呼形吸道壩傳播藝，也納可通標過接或觸感言染的順豬或植其糞蛛便、廉周圍浴污染其的環(huán)貪境或撇氣溶源膠等蜘途徑僚傳播妖。某尊些毒貼株如H1仰N1可在沈人與魔人之特間傳券播，拐其傳明染途鉤徑與暮流感斜類似沈，通害常是演通過卸感染謙者咳再嗽或抖打噴拴嚏等慨。易感萌人群普遍京易感受?；紙稣叨鄧鴶?shù)年丹齡在25歲至45歲之螺間，框目前郊報道打以青狐壯年探為主踢，應(yīng)學(xué)注意偏老人質(zhì)和兒童。臨床砌表現(xiàn)潛伏助期一障般1至7天左木右，茅較流熊感、海禽流纏感潛幟伏期虹長。人感村染甲型H1業(yè)N1流感呀后的升早期女癥狀注與普角通人鑄流感嗓相似例，包際括發(fā)離熱、瘋咳嗽紫、喉并痛、第身體弱疼痛攔、頭照痛、憲發(fā)冷律和疲動勞等愚，有勢些還賴會出?，F(xiàn)腹做瀉或膠嘔吐鉛、肌淚肉痛而或疲倘倦、單眼睛變發(fā)紅蝦等。部分菊患者末病情糞可迅寸速進貼展，語來勢控兇猛寨、突濟然高滴熱、械體溫例超過39削℃，甚制至繼削發(fā)嚴宿重肺至炎、孩急性州呼吸敬窘迫圾綜合沾征、謎肺出節(jié)血、姨胸腔伐積液獄、全尾血細財胞減雨少、當腎功雙能衰壁竭、怠敗血竹癥、腳休克趟及Re弓ye綜合棚征、犁呼吸酸衰竭蟲及多負器官紐奉損傷醫(yī)，導(dǎo)賴致死雖亡。實驗阻室檢刪查外周宗血象賓：白院細胞捐總數(shù)剝一般隆不高迅或降鋪低。稿重癥疏患者若多有洋白細其胞總加數(shù)及北淋巴誕細胞奧減少纖，并融有血更小板葬降低饅；血清邊學(xué)診彼斷：咳可使古用間解接EL惰IS伴A、抗爺原捕眾捉EL哨IS淡A、熒蒸光免哈疫法墳等；反轉(zhuǎn)觸錄-聚合未酶鏈欠式反跡應(yīng)（RT帳-P背CR）：擴由于PC會R技術(shù)求具有扶簡便沃、快丟速、棉靈敏須、特銹異性躁強等績特點閣，已女用于冒豬流財感病廳毒基寒因的收檢測窩和分灰子流賣行病篇學(xué)調(diào)鑄查等帶；4病毒合分離峰：從預(yù)患者冶呼吸仇道標唯本中僑（咽俘拭子繩、口理腔含慮漱液惹、鼻裕咽或琴氣管匹吸出船物、證痰或依肺組爽織）參分離甲型H1煎N1流感奴病毒葛。常信用的噸方法暴有雞餅胚接慣種法嶼和細證胞培甩養(yǎng)法梁?，F(xiàn)撫有的拋診斷趴方法聽中，魚病毒數(shù)分離閘法是鄰較敏寧感的尿，但彼需要2-童3周時怒間。人感所染豬臥流感懶的診濱斷標臥準醫(yī)學(xué)播觀察顛病例全：曾炎到過崖甲型H1移N1流感匯疫區(qū)繞，或員與病度豬及壁甲型H1端N1流感績患者線有密叛切接嘆觸史絹，1周內(nèi)海出現(xiàn)土流感償臨床鬧表現(xiàn)聽者。諒列為侵醫(yī)學(xué)爸觀察店病例葡者，豈對其貫進行7天醫(yī)喬學(xué)觀隱察（唱根據(jù)共病情滋可以億居家掌或醫(yī)倆院隔沫離）葡。2疑似此病例什：曾永到過碑疫區(qū)允，或掃與病梁豬及瓜甲型H1路N1流感廉患者付有密憑切接瞧觸史睡（也聚可流幫行病趨學(xué)史嚴不詳柜），1周內(nèi)文出現(xiàn)夏流感臣臨床絮表現(xiàn)階，呼辭吸道疾分泌偷物、頌咽試淺子、羞痰液互、血扮清H亞型推病毒足抗體步陽性建或核繞酸檢謠測陽問性。臨床欄診斷否病例負：被支診斷桌為疑述似病眨例，寄且與家其有但共同柏暴露艘史的濟人被地診斷舌為確雅診病區(qū)例者脾。確診驗病例類：從羅呼吸洋道標軟本或搜血清護中分夜離到詞特定附病毒寬；RT盯-P覽CR對上抗述標增本檢裂測，鞠有甲衛(wèi)型H1檢N1病毒RN廁A存在洲，經(jīng)氣過測脾序證榜實，萬或兩剪次血比清抗型體滴聲度4倍升專高，磨可確紐奉診為瓣人感男染甲握型H1紀N1流感味。四TO滾RC直H感染句特點摸與檢折測TO黎X拳:To許xo寫pl毀as冷ma表go木nd睛iiRV那:Ru攝be揭ll筐a亞vi吃ru倦sCM前V:Hu妙ma床n歸cy廈to紋me乒ga鈔lo寬vi姐ru膀sHS莊V:He屑rp雅es欄s差im前pl娘ex瘋v跳ir勒usTO別RC效HTO什RC哄H感染交特點1.母-胎傳機播的暮主要涼病原魯體2.引起樹胎兒尖畸形價新生皮兒缺斯陷的仿重要逃原因3.自然針狀態(tài)轎下呈豆隱性矮感染4.懷孕暑、多扛次輸涂血、AI燥DS等易由發(fā)生購顯性擴感染5.可致把多發(fā)諸性、巴全身里性感絞染6.只有哈風(fēng)疹絨可獲梅得長嚼久的映免疫坑力，勒可用訂疫苗究預(yù)防TO柴RC旨H(一)弓形果蟲感酒染與秒致病滋養(yǎng)滿體如洲弓形靜，絕廣泛號分布騎，人徒獸共億患。寄生甜在有冤核細域胞中預(yù)，貓鼠和貓羞科動錦物是規(guī)終宿脂主易感潑者多蔑，免鋪疫者塵少我國珍智力碎低下劫兒的駱弓形廈蟲感貌染率28％畸形如兒的確弓形蓄蟲抗件體Ig郊M陽性獄率12遷.2炭5％艾滋騾病患基者約蠶有20％～80％合僚并弓讓形蟲從感染蜻，賓造成敏艾滋腥病死病亡的劍一個僵重要檢并發(fā)俘病TO情RC大H–TO漿X人群忠自然槽感染肉率達每到60壯-9下0%，多門為隱饅性感播染免疫竹功能超低下(懷孕矮、多菊次輸網(wǎng)血、物器官比移植漂、AI敢DS挪)發(fā)生川顯性很感染可發(fā)借生垂激直傳謙播，榮是宮姓內(nèi)感革染和武胎兒夕畸形軟的主哀要病緒毒之址一圍生季期感普染血、國尿、宏乳汁狡、精梅液、擇分泌懇物中供都可汁檢出抖病毒(二)人巨帆細胞曲病毒燒感染與致顏病TO學(xué)RC宮H-怖CM駛V風(fēng)疹偏是一校種世圍界性倉的病柄毒傳熊染病鋪，土是造飼成畸璃胎及啟先天帳性疾古病的泰病毒丹之一出疹慮前1周至衣出疹謀后5天均休有傳扒染性人是逼風(fēng)疹蜓病毒院的唯扯一宿母主風(fēng)疹補感染和后可趁獲得宣持久灶的免雄疫力池，臨客床顯購性再油感染曠并不榆多見酸。(三)人風(fēng)乳疹病滔毒感虜染與曲致病TO曬RC游H-固RV先天別性風(fēng)塘疹感葬染往搶往發(fā)牢生在某母體儀初次悔感染困之時不，可佩致先戰(zhàn)天性并風(fēng)疹扶綜合冒癥(C刷RS限)三聯(lián)紅癥：子白內(nèi)摧障、日耳聾把、心胸臟病曠。妊娠飄時體商內(nèi)皮勾質(zhì)類科固醇金激素蒼的增荒加以賭及細總胞免淹疫功燃能的恩減弱炊，這態(tài)種對霧正常紙人無挑害的蹦再感但染有趟可能醒造成鍛病毒占蔓延郵以至胡影響卵胎兒凍。TO竭RC旅H-蔬RV(三)人風(fēng)謎疹病需毒感運染與哭致病HS跳V原發(fā)嚇感染鈔多為絡(luò)隱性茂，大手多無訊臨床榮癥狀漏或呈喜亞臨找床表偵現(xiàn)HS送V-賀1主要肆引起口唇饞皰疹，皰擊疹性扁結(jié)膜輸炎、刮腦炎毫，皮傷膚性槍皰疹HS覆V-預(yù)2主要放引起原發(fā)劉性生殖遞器皰山疹(80適%)。HS服V感染患后大策多數(shù)搞個體逢不能唉徹底股消滅骨病毒危，也旗不能說阻止閱復(fù)發(fā)掘，病侍毒以墳潛伏批狀態(tài)碑長期魯存在軌宿主囑體內(nèi)廁。TO這RC惜H-粒HS綠V(四)人單沉純皰咳疹病乘毒感就染與賊致病妊娠梅期婦渴女因HS翁V-踐1被激爬活，暖可通匆過胎會盤感毒染胎珠兒，海引起術(shù)胎兒縮慧畸形非、智虎力低抖下、墳流產(chǎn)盾等。圍產(chǎn)炮期感育染可嫁引發(fā)浸新生史兒皰減疹，命死亡施率高