植物體內(nèi)可溶性糖含量的測(cè)定

植物體內(nèi)可溶性糖含量的測(cè)定（蒽酮法）糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。不同載培條件，不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中糖類的含量。因此對(duì)水果、蔬菜中可溶性糖的測(cè)定，可以了解和鑒定水果、蔬菜品質(zhì)的高低。一、 目的：糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。不同載培條件，不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中糖類的含量。因此對(duì)水果、蔬菜中可溶性糖的測(cè)定，可以了解和鑒定水果、蔬菜品質(zhì)的高低。二、 原理糖類遇濃硫酸脫水生成糖醛或其衍生物，反應(yīng)如下:1i敝HsSO4 —H1i敝HsSO4 —H(_H.CH11OHOHHOOH(THOH| I 報(bào)HzlSOjHO—CH3— CH—CH(>- —\I 4OMOH—CHCH UNO十常醛長(zhǎng)￡i卩真槪醛已俯糠醛或羥甲基糠醛進(jìn)一步與蔥酮試劑縮合產(chǎn)生藍(lán)綠色物質(zhì)，其在可見(jiàn)光區(qū)620nm波長(zhǎng)處有最大吸收，且其光吸收值在一定范圍內(nèi)與糖的含量成正比關(guān)系。此法可用于單糖、寡糖和多糖的含量測(cè)定，并具有靈敏度高，簡(jiǎn)便快捷，適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。三、實(shí)驗(yàn)材料、儀器及試劑1材料：植物組織葉片儀器：分光光度計(jì)恒溫水箱20ml具塞刻度試管（3支）漏斗100ml容量瓶刻度試管試管架剪刀研缽3?試劑:(1)200yg/ml標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖：AR級(jí)葡萄糖lOOmg,蒸餾水溶解，定容至500ml。蒽酮試劑：lg蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml,棕色瓶避光處貯藏;濃硫酸四、實(shí)驗(yàn)方法1?葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取6支20ml具寒試管，編號(hào)，按下表數(shù)據(jù)配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。在每管中均加入0.5ml蒽酮試劑，再緩慢地加入5ml濃H2SO4，搖勻后，打開(kāi)試管塞，置沸水浴中煮沸10分鐘，取出冷卻至室溫，在620nm波長(zhǎng)下比色，測(cè)各管溶液的光密度值(OD),以標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，光密度值為縱坐標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。管號(hào)12*56I標(biāo)淮葡萄糖原液(ml)(200g/ml)00.204Q.60.81.0蒸懈水2.01.81.61.41.21.0401201602002?樣品中可溶性糖的提取稱取1克葉片，剪碎，置于研缽中，加入少量蒸餾水，研磨成勻漿，然后轉(zhuǎn)入20ml刻度試管中，用10ml蒸餾水分次洗滌研缽，洗液一并轉(zhuǎn)入刻度試管中。置沸水浴中加蓋煮沸10分鐘，冷卻后過(guò)濾，濾液收集于100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。糖含量測(cè)定用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度試管中，加1ml水和0.5ml蒽酮試劑。再緩慢加入5ml濃H2SO4(注意：濃硫酸遇水會(huì)產(chǎn)生大量的熱！)，蓋上試管塞后，輕輕搖勻，再置沸水浴中10分鐘(比色空白用2ml蒸餾水與0.5ml蒽酮試劑混合，并一同于沸水浴保溫10分鐘)。冷卻至室溫后，在波長(zhǎng)620nm下比色，記錄光密度值。查標(biāo)準(zhǔn)曲線上得知對(duì)應(yīng)的葡萄糖含量(gg)o

五、結(jié)果計(jì)算五、結(jié)果計(jì)算樣品件糖最（g/ioog鮮重）查表所得糖含気（Pg）K稀釋倍數(shù)

樣品重（戸X10e樣品件糖最（g/ioog鮮重）六、附注（