高中生物專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課件新人教版選修

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)學(xué)習(xí)目標(biāo)知識(shí)體系1.闡述培養(yǎng)基的種類(lèi)和成分。(重點(diǎn))2.說(shuō)出無(wú)菌操作技術(shù)的方法。3.闡述制備培養(yǎng)基的步驟和注意事項(xiàng)。(難點(diǎn))4.理解平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法的步驟和注意事項(xiàng)。(重點(diǎn)、難點(diǎn))01探新知自主梳理02破重難講練互動(dòng)03固雙基當(dāng)堂達(dá)標(biāo)04課后鞏固提升一、培養(yǎng)基1．概念：人們按照微生物對(duì)

的不同需求，配制出供其

的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。2．種類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖3．營(yíng)養(yǎng)組成：各種培養(yǎng)基一般都含有

、

、

和無(wú)機(jī)鹽，此外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)

、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及

的要求。水碳源氮源pH氧氣二、無(wú)菌技術(shù)1．關(guān)鍵：防止

的入侵。2．具體操作(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的

、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和

。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行

。(3)為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在

附近進(jìn)行。(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與

相接觸。外來(lái)雜菌空間消毒滅菌酒精燈火焰周?chē)奈锲?．消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為

的物理或化學(xué)方法殺死物體

或內(nèi)部的部分微生物(不包括

)使用

的理化因素殺死物體內(nèi)外

的微生物(包括

)常用方法

消毒法、巴氏消毒法、

消毒法、紫外線(xiàn)消毒法

滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對(duì)象操作空間、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等溫和表面芽孢和孢子強(qiáng)烈所有芽孢和孢子煮沸化學(xué)藥劑灼燒牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方黏稠玻棒在稱(chēng)量紙迅速瓊脂高壓蒸汽干熱50℃酒精燈火焰2．純化培養(yǎng)大腸桿菌以及菌種的保藏(1)純化培養(yǎng)的原理：設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由

繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的

。(2)純化培養(yǎng)方法：最常用的方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法。(3)平板劃線(xiàn)法：通過(guò)

在瓊脂固體培養(yǎng)基表面

的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。具體操作是：灼燒接種環(huán)→

→第一次平板劃線(xiàn)操作→→培養(yǎng)大腸桿菌。(4)稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的

，然后將不同稀釋度的菌液分別

到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。一個(gè)細(xì)胞菌落接種環(huán)連續(xù)劃線(xiàn)沾取菌液連續(xù)劃線(xiàn)操作梯度稀釋涂布操作步驟是：①系列稀釋(梯度稀釋)操作：②涂布平板操作：a．取菌液：取少量菌液(不超過(guò)0.1mL)，滴加到

表面。b．涂布器滅菌：將沾有少量酒精的涂布器在

，待酒精燃盡后，冷卻8～10s。c．涂布過(guò)程：用

將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。(5)菌種的保藏①對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用

的方法。②對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用

的方法。培養(yǎng)基火焰上引燃涂布器臨時(shí)保藏甘油管藏

[預(yù)習(xí)小測(cè)]1．連一連2．判一判(1)液體培養(yǎng)基含有水，而固體培養(yǎng)基不含水()(2)純化大腸桿菌可選用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基()(3)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌()(4)平板冷凝后應(yīng)將平板倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染()(5)轉(zhuǎn)換劃線(xiàn)角度后需要灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線(xiàn)()×√×√√材料牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水用量5g10g5g20g1000mL(1)根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基，理由是________。提示：固體該培養(yǎng)基的配方中含有凝固劑瓊脂(2)該培養(yǎng)基中主要提供碳源和氮源的物質(zhì)分別是什么？屬于有機(jī)物還是無(wú)機(jī)物？提示：牛肉膏主要提供碳源，蛋白胨主要提供氮源。二者均屬于有機(jī)物。(3)該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類(lèi)型是________，理由是___________。提示：異養(yǎng)型微生物該微生物的碳源和氮源是有機(jī)物1．培養(yǎng)基的種類(lèi)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)應(yīng)用物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)、保藏菌種分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)應(yīng)用成分來(lái)源天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類(lèi)、鑒定2.培養(yǎng)基的成分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作用主要來(lái)源碳源有機(jī)碳源構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有機(jī)碳源還是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)CO2、NaHCO3等無(wú)機(jī)碳源糖類(lèi)、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源無(wú)機(jī)氮源將無(wú)機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等有機(jī)氮源合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物尿素、牛肉膏、蛋白胨等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作用主要來(lái)源特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定外界攝入無(wú)機(jī)鹽細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑無(wú)機(jī)化合物[易錯(cuò)警示]

有關(guān)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的四點(diǎn)提醒(1)培養(yǎng)不同的微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可能不同①自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。②異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。(2)對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源、能源。(3)微生物需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。(4)微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有機(jī)物的是自養(yǎng)型，反之則為異養(yǎng)型。1．不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但所有培養(yǎng)基都含有(

)A．碳源、磷酸鹽和維生素B．氮源和維生素C．水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽D．水、碳源、氮源和氧氣解析：雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無(wú)機(jī)鹽。在某些特定培養(yǎng)基中需要維生素等特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或氧氣等條件。答案：C2．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基種類(lèi)及配制原則的表述，正確的是(

)A．任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子B．液體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，固體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)C．微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外，還受到pH、O2、滲透壓等的影響D．培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)到中性或微堿性解析：A項(xiàng)，培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，有的微生物還需要生長(zhǎng)因子；B項(xiàng)，一般固體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，液體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)；C項(xiàng)，微生物的培養(yǎng)過(guò)程中除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外，還受到pH、O2、滲透壓的影響；D項(xiàng)，培養(yǎng)霉菌需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性。答案：C提示：(1)消毒和滅菌的原理都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。(2)滅菌可殺死處理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子)，而消毒僅能殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。(3)不是，無(wú)菌技術(shù)既要考慮效果，又要考慮操作對(duì)象的承受能力。例如，活體生物材料、操作者的雙手等只能消毒，而不能滅菌。2．無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？提示：還能有效避免污染環(huán)境以及操作者自身被微生物感染。消毒和滅菌的比較條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不包括芽孢和孢子煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體紫外線(xiàn)消毒、化學(xué)藥劑消毒用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬工具等高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器的滅菌[易錯(cuò)警示]

(1)酒精消毒液中酒精濃度對(duì)殺菌效果的影響：70%的酒精殺菌效果最好。原因是濃度過(guò)高，菌體表面蛋白質(zhì)變性過(guò)快而凝固成一層保護(hù)膜，酒精不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌能力減弱。(2)無(wú)菌技術(shù)措施的選擇原則①考慮效果：滅菌的效果比消毒要好。②考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法，而不能采用滅菌的方法。1．下列關(guān)于滅菌和消毒的理解，不正確的是(

)A．滅菌是指殺滅物體內(nèi)外一切微生物，包括芽孢和孢子B．實(shí)驗(yàn)者的雙手用酒精消毒C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌和紫外線(xiàn)照射等解析：滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括芽孢和孢子)，A正確；實(shí)驗(yàn)者的雙手用酒精消毒，B正確；金屬接種工具常用灼燒滅菌法滅菌，C正確；微生物的培養(yǎng)過(guò)程中常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等，紫外線(xiàn)照射屬于消毒方法，D錯(cuò)誤。答案：D2．在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)____(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是______________________________________________。

(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線(xiàn)照射消毒，其原因是紫外線(xiàn)能____________________。在照射前，適量噴灑______________________，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠(chǎng)供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)______________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是______________________。解析：(1)玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具可以通過(guò)干熱滅菌的方法來(lái)滅菌。(2)巴氏消毒法是在70～75℃煮30min或在80℃下煮15min，可以殺死牛奶中的微生物，并使牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞；高溫瞬時(shí)消毒是在較短的時(shí)間內(nèi)利用高溫殺死微生物，由于時(shí)間較短，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)紫外線(xiàn)有消毒、滅菌的作用，在照射前，適量噴灑消毒液，可以強(qiáng)化消毒效果。(4)自來(lái)水消毒通常采用“氯氣”或“紫外線(xiàn)”等方法。(5)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，但沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是鍋內(nèi)冷空氣沒(méi)有排盡。

答案：(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡(1)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？提示：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(2)從防止雜菌污染的角度思考，平板冷凝后將平板倒置的原因是什么？提示：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。

倒平板操作的注意事項(xiàng)(1)培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右時(shí)才能倒平板，原因是瓊脂在44℃以下凝固。(2)培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開(kāi)。(3)整個(gè)操作過(guò)程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。(4)平板冷凝后要倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。(5)若倒平板時(shí)，培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部位，這個(gè)平板應(yīng)丟棄。1．下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是(

)A．操作順序?yàn)橛?jì)算→稱(chēng)量→溶化→倒平板→滅菌B．將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)倒平板D．待平板冷卻凝固后，將平板倒置解析：操作順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板，A錯(cuò)誤；牛肉膏比較黏稠，將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯，B正確；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板，C正確；待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置，D正確。答案：A2．以下關(guān)于倒平板的操作，錯(cuò)誤的是(

)A．在火焰旁取下裝有培養(yǎng)基的瓶塞B．倒平板前，讓錐形瓶的瓶口迅速通過(guò)火焰C．倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿的蓋拿開(kāi)，以方便將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D．平板冷卻凝固后要倒過(guò)來(lái)放置解析：為防止雜菌污染，應(yīng)當(dāng)在火焰旁取下裝有培養(yǎng)基的瓶塞，A正確；倒平板前，為防止雜菌污染，應(yīng)當(dāng)讓錐形瓶的瓶口迅速通過(guò)火焰，B正確；倒平板時(shí)左手拿起一套培養(yǎng)皿，用中指、無(wú)名指和小指托住培養(yǎng)皿底部，用食指和大拇指夾住皿蓋并開(kāi)啟一縫，恰好能讓三角瓶伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；為防止水蒸氣凝集滴落到培養(yǎng)基上，應(yīng)該將冷凝后的培養(yǎng)皿倒置放置，D正確。答案：C提示：接種環(huán)棉塞火焰沾取左手右手平板內(nèi)最后一區(qū)第一區(qū)倒置2．結(jié)合示意圖，完成下列稀釋涂布平板操作(1)系列稀釋操作①將分別盛有9mL水的6支試管________，并按101～106的順序編號(hào)。②用________吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入101倍稀釋的試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使__________________。③從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管內(nèi)吹吸均勻，獲得________倍菌液。依次類(lèi)推，直到完成最后一支試管的稀釋。提示：(1)滅菌移液管菌液與水充分混勻102(2)酒精0.1mL培養(yǎng)基表面1．平板劃線(xiàn)法操作的注意事項(xiàng)(1)第一次劃線(xiàn)及每次劃線(xiàn)之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線(xiàn)操作結(jié)束后仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表所示。項(xiàng)目第一次灼燒每次劃線(xiàn)之前灼燒劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線(xiàn)的菌種來(lái)自上次劃線(xiàn)的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)后，要待其冷卻才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(3)劃線(xiàn)時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。(4)劃線(xiàn)時(shí)用力要大小適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。2．平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法的比較項(xiàng)目平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法優(yōu)點(diǎn)可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征缺點(diǎn)不能計(jì)數(shù)吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延相同點(diǎn)都使用固體培養(yǎng)基，若沒(méi)有特殊要求，兩種方法都可以用來(lái)分離微生物[易錯(cuò)警示]

單細(xì)胞菌落的獲得(1)利用平板劃線(xiàn)法接種時(shí)，單細(xì)胞菌落從后劃線(xiàn)的區(qū)域挑取。(2)利用稀釋涂布平板法接種時(shí)，只有合適的稀釋度才能得到單細(xì)胞菌落。1．下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線(xiàn)法操作結(jié)果。甲乙下列敘述中，錯(cuò)誤的是(

)A．甲中涂布前要將涂布器在火焰上引燃，冷卻后才能取菌液B．對(duì)于濃度較高的菌液，如果甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成C．乙中培養(yǎng)皿中所得的菌落都符合要求D．乙中的連續(xù)劃線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的末端解析：引燃后的涂布器如果沒(méi)有冷卻就接觸菌種，會(huì)將菌體殺死，A正確；稀釋倍數(shù)過(guò)低，會(huì)導(dǎo)致多個(gè)菌體聚集在一起繁殖成菌落，B正確；平板劃線(xiàn)法中最后一次劃線(xiàn)的末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，這種菌落才符合要求，C錯(cuò)誤；連續(xù)劃線(xiàn)中，除了第一次劃線(xiàn)外，每一次劃線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的末端，目的是使得菌體密度越來(lái)越小，保證最后劃線(xiàn)末端處的菌落是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，D正確。答案：C2．臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)胈_______法接種于固體培養(yǎng)基表面，而在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿(mǎn)平板。

(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A________；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該病菌對(duì)抗生素B________；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明__________________________；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素________。解析：微生物的純化的方法主要為平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法。根據(jù)微生物的特點(diǎn)對(duì)其進(jìn)行系列濃度梯度稀釋?zhuān)缓笥猛坎挤ń臃N于固體培養(yǎng)基表面，然后在適宜條件下培養(yǎng)；抗生素是由真菌產(chǎn)生的，可以抑制生長(zhǎng)、繁殖或殺死細(xì)菌等致病菌的一類(lèi)物質(zhì)，含A的濾紙周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明有抗生素A的地方該致病菌受到抑制；B的周?chē)鷽](méi)有透明圈說(shuō)明致病菌對(duì)抗生素B不敏感，通過(guò)C的透明圈要比A的透明圈的小，說(shuō)明該致病菌對(duì)C的敏感性比A的弱；D出現(xiàn)了透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)D敏感，但是在透明圈上出現(xiàn)一個(gè)菌落，又排除雜菌污染，判斷此菌落的微生物對(duì)抗生素D產(chǎn)生了耐藥性。根據(jù)以上分析，為達(dá)到抗菌的目的，最好選擇抗生素A。答案：(1)平板劃線(xiàn)稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比A的弱耐藥菌(4)A[夯實(shí)生命觀念]1．培養(yǎng)基中含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2．實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等。3．固體培養(yǎng)基的配制過(guò)程為：計(jì)算―→稱(chēng)量―→溶化―→滅菌―→倒平板。4．平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法是微生物接種的常用方法。5．消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括孢子和芽孢。

[注重語(yǔ)言表達(dá)]1．怎樣判斷培養(yǎng)基的制作是否合格？提示：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。2．教材P17倒平板操作，討論：培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。3．教材P18平板劃線(xiàn)操作的討論：在第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？提示：劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少。每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐漸減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌落。1．不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)型微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的描述，錯(cuò)誤的是(

)A．氮源為該微生物提供必要的氮元素B．碳源也是該微生物的能源物質(zhì)C．無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D．水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一解析：碳源分為有機(jī)碳源和無(wú)機(jī)碳源。當(dāng)有機(jī)物作為碳源時(shí)，既是碳源，又可作為能源。當(dāng)無(wú)機(jī)物作為碳源時(shí)，只能作為碳源，不能作為能源。該微生物的碳源是CO2，CO2屬于無(wú)機(jī)物，不能作為微生物的能源物質(zhì)。答案：B2．培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是(

)①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線(xiàn)消毒⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤解析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч?；?shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；對(duì)空氣可用紫外線(xiàn)消毒；為了不破壞牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分，可采用巴氏消毒法對(duì)其進(jìn)行消毒。答案：A3．培養(yǎng)基配制需要運(yùn)用滅菌和消毒技術(shù)，但兩者消滅的微生物種類(lèi)和數(shù)量是不同的，下列哪一項(xiàng)能正確表示消毒結(jié)果和滅菌結(jié)果之間的關(guān)系(

)解析：消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括