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酸談輔修課主講 貓大信息科 酸RbG0M

CyclinA/B

CyclinDCyclinA

RNAandProteinG1CyclinG1CyclinEG1/Scheck-G2/Mcheck-

S 2N<S期G2RNAandProtein

DNA檢測DNA以確定細(xì)胞周期:PI 酸 酸

酸→消化收集細(xì)胞:將單細(xì)胞懸液加入2ml圓底離心管中,1500rpm離心5min,→PBS洗:加入1mlPBS重懸細(xì)胞沉淀,1500rpm離心5min,→→→→固定:加入2ml預(yù)冷的70% ,4℃固定30min或-20℃固定過夜后1500rpm離心5min,棄上清。PBS洗:加入1mlPBS重懸細(xì)胞沉淀,1500rpm離心5min,棄上清后500ulPBS重懸細(xì)胞。RNA去除:加入RNaseA(工作濃度20μg/ml),37℃孵育30min后1500rpm離心5min,棄上清。PI染色:500μlPBS重懸細(xì)胞沉淀,加入PI(工作濃度50μg/ml),室溫避光孵育30min?!魇郊?xì)胞儀檢測:過300目篩,置流式管中,4℃冰箱保存待測?!?/p>

PI,eBioscience00- 酸未

未做處理的細(xì) 轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒的細(xì)

或用藥物處理的細(xì) 酸 軟件分析流式數(shù)據(jù)(可以使用flowJo),得到細(xì)胞周期比例。PBS

酸談

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