市售紅花藥材質量評價研究 論文

市售紅花藥材質量評價研究學生姓名指導教師專業(yè)學院成績：年月日成績：摘要目的：評價市售紅花的質量并且測定市售紅花中總黃酮的含量。方法：通過性狀鑒別和顯微鑒別的方法來評價紅花的質量。紫外－可見分光光度法測定紅花的總黃酮含量。結果：在顯微鑒別時看到黑圈，這黑圈既是雜質,實驗結果測得：海暉醫(yī)藥連鎖新疆紅花總黃酮含量為1.76%，紅旗大藥房新疆紅花總黃酮含量為１.22％。人民同泰新疆紅花總黃酮含量為１.08%。結論:在顯微鑒別是發(fā)現(xiàn)紅花有不同程度的摻假，海暉的黃酮含量最高。關鍵詞：紅花評價質量黃酮緒論1.1論文主要內容本論文先介紹紅花，了解紅花的化學成分及藥理作用,進一步研究紅花的臨床應用。通過性狀鑒別和顯微鑒別來評價市售紅花的質量,運用紫外分光光度法對新疆紅花中的總黃酮含量進行測定。1.2論文研究目的和意義?一方面為豐富紅花的質量標準提供實依據(jù)，另一方面闡明市售紅花質量情況,為紅花的研究、開發(fā)及臨床應用提供理論依據(jù)及檢測手段。1．３紅花概述紅花,又稱草紅花。雙子葉植物，菊科,干燥的管狀花，菊科植物紅花CaｒtｈａmustｉｎctｏriuｓL.的干燥花。(不帶子房的管狀花)長約１.5厘米,橙紅色，花管狹細，先端5裂,裂片狹線形，長5~7毫米,雄蕊5枚，花藥黃色,聯(lián)合成管,高出裂片之外,其中央有柱頭露出。具特異香氣,味微苦。以花片長、色鮮紅、質柔軟者為佳。主產河南、浙江、四川等地?；钛ń?去瘀止痛。１．3.1紅花的化學成分主要含有黃酮類和脂肪酸類化合物。1.3.1.1查爾酮類主要為紅花黃色素,它是含有多種成分的水溶性混合物。1.3．1.2其他黃酮類主要含有６羥基山奈酚3O葡萄糖苷、６羥基山奈酚7O葡萄糖苷，山奈酚、槲皮素、6羥基山奈酚、黃芩苷、槲皮素苷、山奈酚３蕓香糖苷和蘆丁;槲皮樹3葡萄糖苷、槲皮樹６葡萄糖苷、楊梅素及芹黃素,木樨草素,木樨草素７OβD葡萄糖苷。１．３．1.3脂肪酸紅花含棕櫚酸、肉豆蔻酸、月桂酸、二棕櫚酸、油酸和亞油酸，其中亞油酸含量高達80%。１.3．２紅花的藥理作用1.3.2.1抗凝血、抑制血栓紅花能阻止血栓進一步發(fā)展且可逐步緩解血栓、降低膽固醇,能較好地改善心肌及腦組織的微循環(huán)障礙,起到治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病及腦血栓的作用。紅花水煎劑能抑制血小板聚集，有效成分ＳY亦能抑制血小板聚集，對已聚集的血小板有非常明顯的解聚作用,且隨劑量的增加而逐漸增強；還能提高大鼠纖維蛋白的溶解活性,顯著降低血栓的長度和質量,防止血栓的形成和發(fā)展。SY還能延長家兔血漿的復鈣時間、凝血酶原時間和凝血酶時間。SY能顯著提高血漿纖溶酶原激活劑的活性,使局部血栓溶解，從而起到治療心腦血管疾病的作用。1．3．2.2對心血管系統(tǒng)的作用興奮心臟:小劑量紅花煎劑對蟾蜍心臟有輕微興奮作用,能使心跳有力、振幅加大,對心肌缺血有益；大劑量對蟾蜍反而有抑制作用。增加冠狀動脈血流量和降低冠狀動脈阻力,增加心肌營養(yǎng)性血流量:用犬冠脈竇插管法，靜脈注射紅花注射液（10mg/ｋg)能使犬在位心臟冠脈流量增加60.４%。擴張血管、改善微循環(huán)：用含微量去甲腎上腺素或腎上腺素的樂氏液灌流離體兔耳，紅花注射液有明顯的擴張血管作用。紅花亦可改善哮喘大鼠的器官微循環(huán)，使微循環(huán)增粗、流速加快、流態(tài)恢復正常。1.3.2.３抗腫瘤作用現(xiàn)代研究表明，腫瘤的生長需要血管為之提供營養(yǎng)和排除代謝產物。因此,如何阻斷腫瘤血管生成已成為當今世界治療腫瘤的新熱點。在血管生成過程中,血管內皮細胞增殖是血管發(fā)生的最基本和最重要的環(huán)節(jié)。陸梁等曾報道紅花黃色素對血管平滑肌細胞的增殖具有抑制作用。張前等通過雞胚尿囊膜血管實驗及RTPCＲ實驗，得出HYＳA能顯著抑制雞胚尿囊膜新生血管的生成,其作用機理之一是通過抑制bGF、ＶEＧF及VEＧFR（ｆlｔ1）的mRNA表達來實現(xiàn)。１.３.2.4耐缺氧紅花能解除血管平滑肌的痙攣并增強耐缺氧能力。紅花醇提液對結扎大鼠總動脈所致的急性缺血所致缺氧腦病有保護作用。sY具有緩解異丙腎上腺素所致心肌缺血大鼠心功能下降的作用,并有顯著的耐缺氧、抗疲勞作用，能明顯延長動物的存活時間,并增加離體家兔心臟和心肌缺氧的冠脈流量,改善心臟的缺氧、缺血病理狀態(tài)。1.3.3紅花的臨床應用1.３.3．1紅花制劑治療心血管疾病紅花注射液能改善血液黏度、血小板黏附率聚集率降低，抗凝、纖溶水平提高。臨床上紅花注射液可以明顯改善冠心病心絞痛的癥狀和缺血性心電圖改變。柳德學等用紅花注射液治療急性心肌梗死患者１58例,其中對照組７６例，應用一般擴血管抗心絞痛常規(guī)治療，治療組８2例,在常規(guī)治療的基礎上加用紅花注射液。結果顯示兩組心電圖恢復率分別為6２.9％和8５.7％;心絞痛緩解時間分別為(3．2±２.2)h和(2.0±１.1)h；并發(fā)癥發(fā)生率分別為31.6%和14.6％,差異均有顯著性(P<0.05）。王璦芬等觀察紅花注射液臨床療效，對1２6例冠心病心絞痛心肌缺血患者分紅花組和丹參組治療，療程2周。結果顯示紅花、丹參均可明顯改善冠心病心絞痛心肌缺血相應的臨床癥狀和心電圖改變，以紅花療效顯著。紅花還有降血糖、血脂的作用，顯著改善血液流變學指標。１.3.３.2紅花制劑治療糖尿病的并發(fā)癥糖尿病是由于胰島內分泌功能不足所致,其基礎病變是周圍小血管的病變。鑒于紅花制劑對血管內皮細胞增殖的抑制作用，毛林華報道用紅花注射液加用愛維治注射液治療３０例糖尿病并發(fā)周圍動脈粥樣硬化閉塞癥.并用愛維治注射液治療30例作對照。20ｄ療程后治療組顯效率為73.３％,對照組為5３．3%(P<0．05)。觀察到全血高切黏度、全血低切黏度、血漿比黏度、纖維蛋白原和血液流變學指標改善均優(yōu)于對照組。糖尿病腎病就其發(fā)病機制而言屬糖尿病合并小血管病變,趙弋于、王洪坤等應用紅花注射液治療糖尿病腎病，觀察到腎病改善外還分別觀察到高黏血癥改善和尿液中微量白蛋白排泄減少。應用紅花注射液治療糖尿病周圍神經病變，并觀察紅花注射液對患者肌電圖、空腹血糖、糖化血紅蛋白、6-酮前列環(huán)素Fla、內皮素、血栓素等指標的影響。結果顯示對糖尿病周圍神經病變的顯效率明顯高于用山莨菪堿治療的對照組，治療組在治療后周圍神經傳導速度明顯改善，空腹血糖、糖化血紅蛋白有所下降、內皮素和血栓素B２顯著下降。并推測其機制與改善患者血管內皮細胞功能有關。２儀器與藥品2.1實驗儀器CP224S型分析天平北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司高速萬能粉碎機天津泰斯特儀器有限公司T６新世紀紫外可見分光光度計北京普析通用儀器有限責任公司電熱恒溫水浴鍋上海躍進醫(yī)藥器械廠電熱恒溫鼓風干燥箱上海申賢恒溫設備廠循環(huán)水真空泵鄭州杜甫儀器廠２.2實驗試劑與藥品蘆丁對照品(中國生物制品鑒定所）新疆紅花（1號）購自寶豐藥店;新疆紅花(2號)購自海暉醫(yī)藥連鎖;新疆紅花(3號）購自紅旗大藥房。無水乙醇、石油醚、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁均為分析純。水為蒸餾水。3方法與結果3.1性狀3.１.1正品紅花性狀特征3.１．1鑒定評價市售紅花的質量不帶子房的管狀花,黃紅色或紅色,花冠筒細長,先端５列花藥聚合成筒狀,黃白色；柱頭長圓柱形，露出于花藥筒外，頂端微分叉。質輕，柔軟。氣微香，味微苦。將花浸入水中,水染成金黃色。3.1.2偽品紅花性狀特征表面橙黃色、深紅色或鮮紅色,黃色不顯明,大部分表面沾附有細小紅色顆粒狀物質，多數(shù)粘結成團，疏松性差手握無彈性,質較重,濕潤感明顯，有異樣氣味,用開水一沖即渾濁,放置后有白色沉淀析出。3．1.3鑒別方法氣味法:紅花微有清香氣味，無其它特殊怪味。摻假紅花清香氣味被掩蓋或減弱,伴隨有油臭腐敗味。如摻油量大,密封時間長,則腐味更濃。手摸：手握紅花較柔軟,手不染色，不粘附泥沙雜質。摻假紅花手握較油潤,手染有紅色斑點，并粘有較多的泥沙顆粒（重金屬粉)。取摻假紅花少許用放大鏡觀察，其間夾附很多灰白色或黑色顆粒(重金屬粉）。水試法:取紅花及其偽品粉末各0.5g,分別加水１5ml,浸漬數(shù)分鐘,濾過。濾液置比色管中,日光下檢視,紅花濾液顯黃色，偽品紅花濾液顯橘紅色。3.2顯微鑒別評價市售紅花的質量3.２.1正品紅花顯微特征 分泌細胞：呈長管道狀,胞腔內充滿黃棕色至紅棕色分泌物?；ü诹哑砥ぜ毎?表面觀呈長方形或長條形，頂端表皮細胞呈短絨毛狀。花柱碎片:表皮細胞分化成單細胞毛，呈圓錐形，先端尖?；ǚ哿?類球形或長球形,具３個萌發(fā)孔，外壁有刺齒及疣狀雕紋。3．2.２偽品紅花顯微特征 紅花有其獨特的花粉粒及表皮外壁突出呈乳頭狀或絨毛狀，這些都是偽品沒有的。３．2.３鑒別方法 表皮細胞表面觀長條形,壁薄，微彎曲,有的外壁突出成乳頭狀或絨毛狀,表面隱約可見纖細紋理。柱頭頂端表皮細胞絨毛狀，表面有稀疏紋理。草酸鈣結晶聚集于壁薄細胞中，呈顆粒狀圓柱狀梭形或類方形,直徑2—１4

。花粉粒少見，成圓球形。3．3紫外-可見分光光度法測定市售紅花中總黃酮的含量3.3.1對照品和供試品溶液制備3.３．1.1對照品溶液制備精密稱取蘆丁對照品5．0０mg,置50ml容量瓶中，用60％乙醇溶液溶解定容，配成濃度為0．１ｍg／m~的對照品溶液。3.3.１.2供試品溶液制備從3個紅花樣品中各取１g，粉碎(40目),得紅花粗粉。在2５0ｍl圓底燒瓶中加入經稱量的1.0０ｇ的紅花粉末,并標號1，2,3。加入60%的乙醇溶液加至瓶頸處,超聲分離三十分鐘，冷卻至室溫,用60%的乙醇定容至1０0ml容量瓶備用。3．3.2線性關系考察?精密移取蘆丁對照品溶液1.0,2．０,3.０，4.0,5.０mＬ分別置于10mL比色管中，加60%乙醇稀釋至5.0ｍｌ。以６0%乙醇溶液5ml為空白,分別加入5％的亞硝酸鈉0.３ml,搖勻，靜置６min，加入１0%硝酸鋁溶液0.3ｍl,搖勻,靜置6min后再加入4%的氫氧化鈉溶液4ml，再加60％的乙醇0.４ml，搖勻,靜置12min后,在51０nｍ下測定。以吸光度值A為縱坐標,蘆丁濃度Ｃ（ｍｇ/mＬ）為橫坐標,進行線性回歸,得回歸方程y=１２.16x-０．0１38,Ｒ2＝０．９９77。結果表明蘆丁在0.0１~0.０５mg/ml范圍內線性關系良好。蘆丁標準曲線數(shù)據(jù)１2345吸光度A0.１10．23５0.3350．４790.5９６濃度Ｃ（mg/ｍl）0.０１0.０2０.030.040.0５3．3.3方法學考察3．３.3.1精密度試驗 取蘆丁對照品實驗,加６0%乙醇稀釋至5．0mｌ,加入5%ＮａNO２0.3ｍl，搖勻,靜置6mｉn,再加1０%AlＮＯ30．３ml，搖勻，靜置6miｎ,再加4%NaOH4.0ｍl，再加０.４ml60％乙醇，搖勻，靜置12ｍｉｎ。于5１0nm波長下測定吸光度值,重復測定6次,計算其相對標準偏差。結果為RSＤ為0．2．0０％,本實驗精密度良好。精密度試驗數(shù)據(jù)（選取紅旗紅花樣品，２ｍｌ）1２3４56RSD（%）吸光度A０．2７40．2730.2730.2740.274０.2７３０.200%3．3．3．2穩(wěn)定性試驗 以海暉藥店紅花所制溶液做穩(wěn)定性測試，用3．3．2方法進行測定，在６０ｍin內,每隔１０ｍin測定一次其吸光度。由其數(shù)據(jù)可以看出在5１０nm波長測定黃酮總含量時,吸光度穩(wěn)定,說明實驗的穩(wěn)定性良好。穩(wěn)定性實驗結果(以人民暉輝為標準)穩(wěn)定性試驗數(shù)據(jù)(選取海暉紅花樣品，２ml）,每隔１０min測一次01０20３0405０6０RSD(％）吸光度A0.4３7０.４１３0．40７0.4６00.4０９0.404０.4003.06%３.3.3.3重復性試驗以人民同泰藥店紅花所制溶液做重復性測試,用3.3.2方法進行測定,在其最大吸收波長處測定吸光度值，由其數(shù)據(jù)可以看出在51０nm波長測定黃酮總含量時，吸光度穩(wěn)定,說明實驗的重復性良好。穩(wěn)定性實驗結果(以人民同泰為標準）序號12345６RSD(%)A0.2６１０.248０．2390．２3６0．2500．２3７3.96%3．３．３.4回收率試驗?以紅花總黃酮提取物制備的樣品溶液為供樣液，精密量取已知總黃酮含量的樣品溶液110ｍl、115ｍl、２mｌ、２15ml、３ml,分置10mｌ比色管中,加入蘆丁對照品溶液１１0ml?；靹蚝?按3.3.２方法測定．序號123456RSＤ(%）稱取樣品量(g)0.1０．120．１1０．120．1０.１１.１1%供試品中含有量（mg）2．6３.１２2.8６3．１22.62.6對照品加入量（ｍg）2．53２.8３.１２．62.5測定總黃酮的量（mｇ)5.0786.0０695.6194６.14８45.1３４55.0７３回收率(％）99.１２%96．23%9８.５5%９7.69％97.48％98.９2％3.3.4市售紅花含量測定取已制備好的３份樣品溶液測定，以60%乙醇為空白溶液，在5１0nｍ處測定。每個樣品重復測定3次?？傸S酮含量以蘆丁計，根據(jù)標準曲線計算總黃酮含量。結果為人民同泰新疆紅花總黃酮含量為１.48％,海暉醫(yī)藥連鎖新疆紅花總黃酮含量為1.85%,紅旗大藥房新疆紅花總黃酮含量為1．2８%。三家藥店中海暉的紅花總黃酮含量較高。表2；紅花總黃酮含量測定結果樣品吸光度Ａ1吸光度A２吸光度A3平均值Ａ總黃酮含量(%)海暉0.4370.438０.44００.4381.７６%人民同泰0．261０.2480.25００.2531．0８%紅旗0.２73０．2950.2900.2861.2２%４討論紅花是臨床中常用的一種中藥材，由于其價格較高,市場上不法分子不顧藥材的質量,不擇手段，造假作假。黃酮類化合物是紅花中最主要的化學成分之一。本文建立采用分光光度法測定紅花中總黃酮的含量，精密度、穩(wěn)定性良好，結果可信，為新疆紅花中總黃酮的含量測定提供了一種簡便可行的方法,為新疆紅花的質量控制提供了評價手段。三家藥店中海暉的紅花總黃酮含量較高。海暉醫(yī)藥連鎖新疆紅花總黃酮含量為1.７6%，紅旗大藥房新疆紅花總黃酮含量為1．２2％，人民同泰新疆紅花總黃酮含量為1.0８