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,讀首本 1、建議使用的蛋白質(zhì)溶系為8M尿素/4%CHAPS/40mMTris(Base)/65mM2、樣品濃度大于2μg/雙向電泳成功的關(guān)鍵在于建立一套有效的、可重復(fù)的樣品方法。樣品的影響因素包括蛋白質(zhì)的溶解性、分子量、電荷數(shù)及等電點等。對于不同的樣品性質(zhì)及研究目的,其方法也不盡相同。不同的樣品性質(zhì),強度的基礎(chǔ)上,既能保持蛋白質(zhì)的天然電荷。又能維持其溶解性。因此,絕大多數(shù)樣品往往都需要通過多次實驗才能摸索到最適ppp(pI)ppppI蛋白質(zhì)與十二烷基硫酸鈉()結(jié)合形成帶負電荷的蛋白質(zhì).復(fù)合物,由于是一種強陰離子去垢劑.所帶的負電荷發(fā)生有關(guān)。用雙向凝膠電泳可以進行翻譯后修飾的研究,如用32標(biāo)記可以研究磷酸化蛋白的變化。雙向凝膠電泳中??砂l(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)曳現(xiàn)很可能一個的不同譯后產(chǎn)物所成的曳圖像化在上能提要的信。3技術(shù)應(yīng) 量的數(shù)據(jù)進行歸類分析。目前應(yīng)用較為廣泛的圖像分析軟件有PDQuest、ImageMaster2DElite、Melanie、BioImage(16m20m)可分出3~4千個甚至1個可測蛋白斑,這10萬個可表蛋白數(shù)相比太少了80年始采用定化Hpp圍(0.05/m)對特感的區(qū)域在較的p生-101004ng20ppm“”的主是對雙向電泳分出來白,進定性量的分。最的方法先把的蛋白跡到F(povnydenedfuorde)可先45個循的末端量再做酸組成析;在電泳板上的等點和分,查對據(jù)庫中已知蛋的數(shù)即可作判斷文獻,端4合mg

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