SN-T 2775-2023 商品化食品檢測試劑盒評價方法

SN/T2775—2023商品化食品檢測試劑盒評價方法1

范圍本文件規(guī)定了用于食品檢測的商品化檢測試劑盒的術(shù)語與定義、通用要求、評價指標(biāo)、數(shù)據(jù)統(tǒng)計和結(jié)果評判的方法等。本文件適用于食品檢測用試劑盒生產(chǎn)者、采購者及使用者在生產(chǎn)或使用商品化試劑盒時對相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行評價以及檢測質(zhì)量控制。2

規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T4889

數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理和解釋 正態(tài)分布均值和方差的估計與檢驗1GB/T6379. 測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精確度)

第1部分:總則與定義1GB/T19489

實驗室生物安全通用要求GB/T27025

檢測和校準(zhǔn)實驗室能力的通用要求GB/T27403

實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測GB/T27404

實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測GB/T27405

實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測JJF1005—2016

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)常用術(shù)語和定義SN/T0001

出口食品、化妝品理化測定方法標(biāo)準(zhǔn)編寫的基本規(guī)定SN/T3266

食品微生物檢驗方法確認(rèn)技術(shù)規(guī)范3

術(shù)語和定義13.1

1JGB/T6379.、JF1005—2016界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件1Ji t et商品化食品檢測試劑盒

commercalkisi t et指對一種分析方法的主要或關(guān)鍵組成進(jìn)行了商品化包裝并可供銷售的檢測體系,用以確定一種或多種食品基體中目標(biāo)分析物的存在或含量。23.2i基質(zhì)

matrxi指樣本中除目標(biāo)分析物以外的一切組成。33.3參考方法

reference經(jīng)過全面研究,清楚而嚴(yán)密地描述所需條件和程序,用于對目標(biāo)分析物一種或多種特性值進(jìn)行測量的方法。該方法已經(jīng)證明具有與預(yù)期用途相稱的準(zhǔn)確度及其他性能,參考方法可以用來評價對同一測量過程所使用的其他方法。1SN/T2775—202343.453.563.673.783.893.9

iii特異性

specfctyiii指商品化食品檢測試劑盒區(qū)分目標(biāo)分析物與其他化合物或基質(zhì)的能力。i

t i檢出限

lmii

t i指在給定的置信水平上,樣品中目標(biāo)分析物能被可靠地與基質(zhì)干擾區(qū)分的最低濃度或含量。i

t i

i定量限

li

t i

i指樣品中目標(biāo)物在一個可接受的精密度與正確度水平上能被定量檢測的最低濃度或含量。s i假陰性率

falenegats i將陽性結(jié)果判斷為陰性的比率。s ii假陽性率

faleposts ii將陰性結(jié)果判斷為陽性的比率。t耐變性

robusnesst指商品化食品檢測試劑盒不受環(huán)境等條件的微小變化而影響檢測結(jié)論的能力。13.01e

l關(guān)注含量水平

lvee

l判斷樣品中分析物是否符合法規(guī)規(guī)定和要求的有決定性意義的含量水平(如:對某一定量特性規(guī)定和要求的物質(zhì)限值,包括最大殘留限量或其他最大容許量等)。4

通用要求14. 商品化食品檢測試劑盒1檢測試劑盒必須包裝完整,組成各部分外觀符合要求;標(biāo)簽、標(biāo)識清晰、規(guī)范;帶有使用說明書或等同指導(dǎo)性文件,文件內(nèi)容應(yīng)包括但不限于以下部分:a)

明確該檢測試劑盒的名稱及規(guī)格、生產(chǎn)批號、產(chǎn)品主要組成成分。b)

檢測試劑盒的應(yīng)用范圍:包括檢測的目標(biāo)物和適用的基質(zhì)范圍。c)

對檢測原理、技術(shù)參數(shù)及結(jié)果的表述與解釋。d)

操作指南:明確檢測所要求的樣本縮分、分析物提取等步驟,包括完整的檢測操作程序和質(zhì)控手段。e)

有效期:明確檢測試劑盒的保存時間與保存條件。f)

環(huán)境要求:明確使用檢測試劑盒時是否有環(huán)境溫度與濕度、實驗操作場所等的要求。g)

交叉反應(yīng):明確檢測試劑盒對目標(biāo)分析物的類似特征化合物、代謝產(chǎn)物或可能出現(xiàn)在基質(zhì)里的非目標(biāo)化合物的響應(yīng)情況。h)

抽樣原則:說明實驗室檢測需要的樣本量,明確在進(jìn)行分析前需進(jìn)行的采樣、處理、混合及二次抽樣步驟。i)

注意事項:包括安全提示、廢棄物處理、可能存在危害的操作步驟。j)

技術(shù)支持:提供用戶可獲得技術(shù)支持的聯(lián)系人、電話或傳真、郵箱地址。k)

質(zhì)量合格證書。l)

其它應(yīng)告知用戶的事項。2SN/T2775—202324. 評價實驗室2若評價結(jié)果用于商品化食品檢測試劑盒的上市流通或需要對此檢測試劑盒做出評價結(jié)論,則參與評價的實驗室至少需要3家,每個結(jié)果至少重復(fù)測定2次。評價實驗室開展檢測試劑盒評價工作時,應(yīng)符合

GB/T19489和

GB/T27025相關(guān)實驗室的安全規(guī)定和操作要求,質(zhì)量控制參照

GB/T27403、GB/T27404、GB/T27405中的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。34. 評價參數(shù)3評價實驗室應(yīng)根據(jù)所評價的檢測試劑盒的預(yù)期用途選擇合適的驗證參數(shù),并形成評價方案。對于定性(含半定量)檢測試劑盒,典型的評價參數(shù)包括方法的檢出限、特異性、假陰性率、假陽性率、相對準(zhǔn)確度(或與參考方法的一致性)、批間差異;必要時進(jìn)行耐變性評價。對于定量檢測試劑盒,典型的評價參數(shù)包括方法的定量限、線性和范圍、特異性、準(zhǔn)確度(正確度和精密度)、批間差異;必要時進(jìn)行耐變性評價。44. 評價樣品的選擇及制備4評價樣品包括陰性質(zhì)控樣品與陽性質(zhì)控樣品。陰性質(zhì)控樣品為經(jīng)參考方法確認(rèn)未檢出目標(biāo)分析物的樣品。陽性質(zhì)控樣品為具有確定含量目標(biāo)分析物的樣品,包括基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品與采用添加方式制備的樣品,也可采用參考方法進(jìn)行分析從而得到樣品中目標(biāo)分析物的含量。陽性質(zhì)控樣品中目標(biāo)分析物含量為指定值。采用添加方式制備陽性質(zhì)控樣品時目標(biāo)分析物或干擾化合物的添加體積應(yīng)盡可能少,以不影響樣品的組成,添加體積應(yīng)不大于樣品體積的1/100。用于評價準(zhǔn)確度的陽性質(zhì)控樣品宜與分析樣品一致。進(jìn)行實驗室內(nèi)評價的實驗樣品種類應(yīng)涵蓋分析方法的適用范圍,實驗室間評價的實驗樣品應(yīng)至少選擇3種代表性樣品(不同種類或不同來源)。食品理化項目檢測試劑盒評價樣品可參考SN/T0001的食品分類進(jìn)行選擇,食品微生物項目檢測試劑盒評價樣品可參考SN/T3266的食品分類進(jìn)行選擇。當(dāng)檢測試劑盒的適用范圍僅為某種樣品時,可選擇不同來源的樣品制備驗證樣品。54. 參考方法的選擇5參考方法優(yōu)先采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織標(biāo)準(zhǔn)方法、國際分析家協(xié)會方法,若以上方法均不能獲得,則可采用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或其他經(jīng)驗證的方法。5

技術(shù)指標(biāo)與評價方法15. 總則1本文件將商品化食品檢測試劑盒按檢測結(jié)果判定方式分為定性檢測試劑盒(含半定量檢測試劑盒)和定量檢測試劑盒兩類。定性檢測試劑盒僅報告陰性/陽性的判斷結(jié)果,不報送具體檢測數(shù)值;半定量檢測試劑盒一般用于判斷目標(biāo)分析物含量是否符合關(guān)注限量水平,可報告為大于關(guān)注含量水平或小于等于關(guān)注含量水平;定量檢測試劑盒報告定量限(含)以上的檢測數(shù)值。3a樣品情況b檢驗結(jié)果總數(shù)陽性陰性陽性aba+b陰性cdc+d總數(shù)a+cb+da+b+c+d+靈敏度(p

)+

+p

=a/(a+b),當(dāng)p

≥0.95時的含量水平設(shè)為檢出限-特異性(p

)-p

=d/(c+d)-假陰性率(pf

)-pf

=a/(a+c)=1-靈敏度+假陽性率(pf

)+pf

=d/(b+d)=1-特異性相對準(zhǔn)確度(a+

d)/(a+b+c+d)a

由參考方法檢驗得到的結(jié)果或者樣品中實際的公議值結(jié)果;b

檢測試劑盒測定的結(jié)果。靈敏度的計算使用陽性質(zhì)控樣品的實際的公議值結(jié)果或由參考方法檢驗得到的結(jié)果。SN/T2775—20232215. 定性(含半定量)檢測試劑盒的評價指標(biāo)2215.. 評價要求5采用陰性質(zhì)控樣品添加的方式制備評價樣品,添加水平至少包括檢測試劑盒標(biāo)稱檢出限的0.

倍、51倍及5倍水平。每種空白樣品及每個含量水平評價樣品不得少于40例。對于非法添加等重點項目的檢測,可考慮在檢出限水平設(shè)置80例,以便更好地評價假陽性率和假陰性率。若無法獲得陰性質(zhì)控樣品,可選擇含有可區(qū)分水平(不少于3個)目標(biāo)化合物的樣品、采用與參考方22221法比較的方式進(jìn)行評價。222215.. 性能指標(biāo)及計算5... 性能指標(biāo)對檢出限、特異性、假陰性率、假陽性率、相對準(zhǔn)確度等參數(shù)進(jìn)行評價時,可根據(jù)檢測試劑盒使用說明書進(jìn)行測試并獲得測試結(jié)果,統(tǒng)計針對每個食品類型和每個含量水平得到的檢驗結(jié)果,將試驗數(shù)據(jù)按表1填入,計算各性能指標(biāo)。表1

性能指標(biāo)的計算2225表1

性能指標(biāo)的計算222檢測試劑盒測定結(jié)果為陽樣的樣品數(shù)量除以實際樣品(或參考方法確認(rèn))為陽性的樣品總數(shù)為靈敏9度;當(dāng)靈敏度≥0.5時樣品中所含目標(biāo)分析物的含量水平即為檢出限。92235... 特異性223檢測試劑盒測定結(jié)果為陰性的樣品數(shù)量除以實際樣品(或參考方法確認(rèn))為陰性的樣品總數(shù)。2245... 假陰性率224檢測試劑盒測定為陰性而實際樣品為陽性(或參考方法確認(rèn)為陽性)的樣品數(shù)量除以實際樣品為陽4SN/T2775—2023性(或參考方法確認(rèn)為陽性)的樣品總數(shù),假陰性率=100-靈敏度。2255... 假陽性率225檢測試劑盒測定為陽性而實際樣品為陰性(或參考方法確認(rèn)為陰性)的數(shù)量除以實際樣品為陰性(或參考方法確認(rèn)為陰性)的樣品總數(shù),假陽性率=100-特異性。2265... 相對準(zhǔn)確度(或與參考方法的一致性)226檢測試劑盒對某個樣品的測定結(jié)果與樣品真實結(jié)果或與參考方法測試結(jié)果的一致程度。即檢測試劑盒檢測結(jié)果和樣品實際結(jié)果(或參考方法確證)均為陽性的數(shù)量與均為陰性的數(shù)量之和除以用于確證的樣品總數(shù)。檢測試劑盒與參考方法在檢測某種樣品中目標(biāo)分析物時,其測定結(jié)果之間在統(tǒng)計學(xué)上若不存在顯著性差異,則可認(rèn)為是一致的。一致性檢驗采用卡方檢驗進(jìn)行分析,以公式計算、EXCEL計算或如SPSS等統(tǒng)計軟件計算獲得結(jié)果。采用公式計算的定性(含半定量)檢測試劑盒與參考方法的一致性檢驗見附錄

A。235.. 批間(不同生產(chǎn)批號檢測試劑盒)差異23選取不同批號的檢測試劑盒,根據(jù)檢測試劑盒適用樣品選擇代表性樣品,制備目標(biāo)分析物含量為檢測試劑盒檢出限或關(guān)注濃度水平的評價樣品。針對每個批號試劑盒應(yīng)分析的樣本數(shù)不少于40例?？刹捎每ǚ綑z驗方法評價定性(半定量)檢測試劑盒的批間差異。卡方檢驗結(jié)果可通過多種方式獲得,如采用公式計算、采用EXCEL計算或采用如SPSS等統(tǒng)計軟件計算等。采用公式計算的檢測試劑盒批間差異的卡方檢驗方法見附錄

A。3315. 定量檢測試劑盒的評價指標(biāo)3315.. 定量限32制備具有一定含量目標(biāo)分析物的陽性質(zhì)控樣品,在給定的分析條件下進(jìn)行至少20次重復(fù)測試,方32法定量限水平應(yīng)至少有95%測試結(jié)果的響應(yīng)信號是空白樣本響應(yīng)信號的5倍,且其正確度與精密度應(yīng)滿足方法和法規(guī)的要求。5.. 線性和線性范圍9以標(biāo)準(zhǔn)溶液考察線性和線性范圍。標(biāo)準(zhǔn)濃度應(yīng)包括一定梯度的至少5個濃度(非線性者如免疫分9析可適當(dāng)增加)和零點;標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)覆蓋樣品可能的濃度范圍。線性要求可由根據(jù)檢測試劑盒給出的指標(biāo)制定,一般不低于0.90。335.. 特異性331制備或選擇目標(biāo)分析物含量為定量限與關(guān)注含量水平近的陽性質(zhì)控樣品,選擇至少3種與目標(biāo)分1析物相關(guān)或相似的干擾物質(zhì)(內(nèi)源性物質(zhì)、異構(gòu)體、或物理化學(xué)性質(zhì)類似化合物等)或干擾菌株,在各20份陽性質(zhì)控樣品中分別加入含量為定量限10倍、定量限100倍或更高的干擾化合物,采用檢測試劑盒測定目標(biāo)分析物含量,并與樣品指定值進(jìn)行比較,以相對誤差表示。相對誤差的計算公式見式(),一般相對誤差應(yīng)在±25%以內(nèi)。/相對誤差(%)=(測定值-指定值)指定值×100%

……(1)/5SN/T2775—2023343415.. 準(zhǔn)確度(正確度和精密度)343415... 正確度針對檢測試劑盒適用范圍的所有樣品基質(zhì),分別采用陰性質(zhì)控樣品制備定量限、關(guān)注含量水平與檢測試劑盒測定范圍最高含量水平。每種樣品的每個含量水平至少平行測定5次。2按式()計算正確度:2正確度(%)=檢測值/指定值

×100 …………(2)t也可采用與參考方法比較的方式評價檢測試劑盒正確度。選擇3個可區(qū)分含量(應(yīng)涵蓋定量范圍t的高、中、低水平)的樣品,采用檢測試劑盒與參考方法分別對同一份樣品進(jìn)行至少5次測試?？刹捎胻檢驗法進(jìn)行統(tǒng)計分析以證明兩種檢測方法結(jié)果之間是否存在顯著性差異,

檢驗結(jié)果可通過多種方式獲得,如采用公式計算、采用EXCEL計算或采用如SPSS等統(tǒng)計軟件計算等。檢測試劑盒與參考方法比較的t檢驗方法可參考附錄B。3425... 精密度3421實驗過程可與5.3.4.

合并,計算每一種樣品基質(zhì)每一濃度水平的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。1355.. 批間(不同產(chǎn)品批號的檢測試劑盒)差異35選取不同批號的試劑盒進(jìn)行測試。根據(jù)檢測試劑盒適用樣品范圍選擇代表性樣品,制備目標(biāo)分析物含量位于檢測試劑盒定量范圍的高、中、低水平(含關(guān)注含量水平)的評價樣品。每批檢測試劑盒對每種樣品的每個含量水平進(jìn)行至少5次重復(fù)測試?？刹捎脝我蛩胤讲罘治龇椒ㄔu價定量檢測試劑盒的批間差異。單因素方差分析可通過多種方式獲得,如采用公式計算、采用EXCEL計算或采用如SPSS等統(tǒng)計軟件計算等。單因素方差分析過程及采用EXCEL分析步驟見附錄C。6

耐變性若擬確定環(huán)境條件變化或檢測條件(如取樣量、培養(yǎng)基配比、緩沖液pH

值等)的微小變化是否會對檢測結(jié)果產(chǎn)生顯著影響,可進(jìn)行耐變性評價。耐變性評價由以下步驟組成:確定可能影響檢測結(jié)果的因素、對每一種因素稍作改變、采用合適的方法進(jìn)行耐變性檢驗、若發(fā)現(xiàn)某種因素可顯著影響檢測結(jié)果,應(yīng)進(jìn)一步實驗以確定該因素可接受的水平、在檢測方法中應(yīng)清楚說明可顯著影響檢測結(jié)果的因素。耐變性檢驗方法見附錄D。7

記錄和報告17. 評價記錄1商品化食品檢測試劑盒評價記錄至少包括:a)

評價方案;b)

評價用樣品制備記錄;c)

樣品測試記錄;d)

統(tǒng)計評價過程記錄。6SN/T2775—202327. 評價報告2商品化食品檢測試劑盒評價結(jié)束后,應(yīng)撰寫評價報告,評價報告內(nèi)容包括但不限于:a)

被評價試劑盒、參考方法以及其他參考資料;b)

樣品類型;c)

樣品制備方法,包括人工污染時的相關(guān)信息;d)

測試流程;e)

測試結(jié)果統(tǒng)計分析;f)

等效性聲明;g)

其他重要信息。7參考方法測試結(jié)果檢測試劑盒測試結(jié)果總數(shù)陽性陰性陽性aba+b陰性cdc+d總數(shù)a+cb+da+b+c+dx1[(×d)-(×c)]×(+b+c+d)2

卡方檢驗采用x 2

值表示觀察值與x1[(×d)-(×c)]×(+b+c+d)2

卡方檢驗采用x 2

值表示觀察值與理論值之間的偏離程度,

2=∑(

-T )2

T ,其中A 為實際頻數(shù)

n ,其中TRC 為第R 行C 列

x =n

(∑A

nRnC -1),自由度df=(行數(shù)R -1)(列數(shù)C -1)………………(A.

)

x =

(a+b)×(+d)×(+c)×(+d) ……(A.

)附 錄

A(資料性)采用卡方檢驗進(jìn)行樣本之間顯著性差異評價1A. 卡方檢驗方法111A.. 卡方檢驗的實驗設(shè)計11卡方檢驗是以x2

分布為基礎(chǔ)的一種常用假設(shè)檢驗方法,主要用于檢驗兩個或多個樣本之間差別的顯著性以及檢驗兩個雙向無序分類變量是否存在關(guān)聯(lián)。Aa r tiT(ctualfa r tiT12A.. 卡方檢驗的數(shù)據(jù)收集與計算12RC可采用行(

)×列(

)的列表形式收集數(shù)據(jù)資料。理論頻數(shù)TRC=nRnCRC 1nn的理論頻數(shù),R

為相應(yīng)的行和,C

為相應(yīng)的列和。R×C

表的x2

檢驗公式見公式

1nn22xxxP由卡方計算值可知,當(dāng)實際頻數(shù)與理論頻數(shù)一致時,

2

值為0;實際頻數(shù)與理論頻數(shù)越接近,兩者xxxP之間差異越小,2

值越小;反之,當(dāng)實際頻數(shù)與理論頻數(shù)相差越大時,

2

值越大。以卡方分布求出所對應(yīng)的P值(

value,指當(dāng)原假設(shè)為真時,比所得到的樣本觀察結(jié)果更極端的結(jié)果出現(xiàn)的概率)來確定是否存在顯著性差異。2x對于僅給出陰性、陽性結(jié)果的檢測試劑盒,可采用獨立樣本四格表進(jìn)行分析(自由度df=1),將檢2x測試劑盒和參考方法針對每種食品和每個含量水平得到的檢驗結(jié)果列入表

A1中,按公式

A.

進(jìn)行計算,采用卡方檢驗(

2

檢驗)來比較兩種方法。1表1表A. 獨立樣本四格表檢驗2c a b8如果x2<3.4,表示檢測試劑盒方法與參考方法的陽性檢出率在95%的置信區(qū)間內(nèi)沒有統(tǒng)計學(xué)差8異。每一類適用食品基質(zhì)的各含量水平均應(yīng)滿足此要求。8如果x2≥3.4,表示兩種方法的陽性檢出比率在95%的置信區(qū)間內(nèi)有統(tǒng)計學(xué)差異,在此情況下僅8允許檢測試劑盒方法比參考方法的陽性檢出率更高,否則應(yīng)從適用范圍中刪除該種食品基質(zhì),或者對試劑盒進(jìn)行改進(jìn),重新進(jìn)行驗證,以證明該結(jié)果可接受。8參考方法測試結(jié)果檢測試劑盒測試結(jié)果總數(shù)陽性陰性陽性242347陰性261945總數(shù)504292測定-+++合計檢測試劑盒3429972參考方法2935872合計636417144x 分布臨界值表(卡方分布)可參考

GB/T4889獲得或使用統(tǒng)計軟件得到。[(4×19)-(3×26)]×(4+23+26+19)8

x 分布臨界值表(卡方分布)可參考

GB/T4889獲得或使用統(tǒng)計軟件得到。[(4×19)-(3×26)]×(4+23+26+19)8

,表示檢測試劑盒方法與參考40x =

(24+23)×(6+19)×(4+26)×(3+19)=0.177<3.4

x =144(34 +

29 + 9 +

29 +

35 + 872×63

72×64

72×17

72×63

72×64

72×17-1)=1.2若在對某一食品基質(zhì)的分析中發(fā)現(xiàn)不明原因錯誤,可先假定為隨機錯誤。這種情況下,可根據(jù)上述方案對該食品基質(zhì)再檢測3批樣品,若能夠證實檢測試劑盒方法靈敏度優(yōu)于參考方法,則兩種方法陽性比例的顯著性差異可以接受。22A. 在商品化食品檢測試劑盒評價中應(yīng)用卡方檢驗的實例221A.. 采用卡方檢驗法評價檢測試劑盒與參考方法測定結(jié)果之間的一致性21例1:采用卡方檢驗法(獨立樣本四格表)評價檢測試劑盒與參考方法檢測結(jié)果在95%置信區(qū)間a2(=0.5)的顯著性差異。結(jié)果匯總見表

a22表2表A. 檢測試劑盒與參考方法的顯著性差異比較結(jié)果匯總表22 2 2方法的陽性檢出率在95%的置信區(qū)間內(nèi)沒有統(tǒng)計學(xué)差異。(例2:采用卡方檢驗法(多個值比較)評價檢測試劑盒與參考方法檢測結(jié)果在95%置信區(qū)間

a=(0.5)的顯著性差異。分別采用檢測試劑盒與參考方法對72份樣品進(jìn)行檢測,未檢出記為“-”,陽性結(jié)33果記為“+”,強陽性結(jié)果記為“++”,結(jié)果匯總見表

A.。33表A. 檢測試劑盒與參考方法的顯著性差異比較結(jié)果匯總表2 2 2 表A. 檢測試劑盒與參考方法的顯著性差異比較結(jié)果匯總表2( (df=

2-1)×( (79 7在查x2

分布臨界值表(卡方分布)表時,表中所給值直接只能查單側(cè)重概率值,雙側(cè)概率可以這79 7考慮:雙側(cè)概率指的是上端和下端各劃出概率相等的一部分,兩概率之和為給定的概率值,若a=0.5,則實際上端點以上以下的概率為0.5/2=0.25,記為x20.05/2(2)=2.7,下端點以下的概率也為0.25,因此可以用0.75查得下端為,記為x21-0.05/2(2)=0.2,0.02<1.2<2.7,不能認(rèn)為二者有顯著差異。22A.. 采用卡方檢驗法評價不同批號檢測試劑盒之間的顯著性差異實例22例:采用卡方檢驗法評價三個不同批號的定性檢測試劑盒在在95%置信區(qū)間是否存在批間差異。分別采用批號

等三個不同批號的定性檢測試劑盒檢測目標(biāo)分析物含量為檢出限水平的9試劑盒批號陽性陰性合計A7624100B5743100C6139100合計194106300x =300(

76 +

24 +

x =300(

76 +

24 +

57 +

43+

61+

39100×194

100×106

100×194

100×106

100×194

100×106-1)=8.674100份樣品,將檢測結(jié)果見表

A.。44表A. 三個批號定性檢測試劑盒檢測結(jié)果匯總表2 2 2 4表A. 三個批號定性檢測試劑盒檢測結(jié)果匯總表2( (df=

3-1)×( ( 9 7x查x2

分布臨界值表(卡方分布),20.05(2)=5. 9 7x10基體檢測方法添加水平測定結(jié)果平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差t值12345雞肉試劑盒低水平(LOG)5.0935.1435.1075.1495.2765.1540.0702.153參考方法5.6455.3145.3015.2305.2105.3400.180試劑盒中水平(LOG)5.3695.3185.3695.1145.3185.2980.1101.073參考方法5.2365.1885.2105.3225.2435.2400.050試劑盒高水平3(LOG)4.8264.7994.7634.8204.7404.7900.0403.600參考方法4.8694.8814.8334.8694.8574.8620.020t

=

|X

-Y

| ……(B.t

=

|X

-Y

| ……(B.

)n 1+n 2-2

×

1+

1附 錄 B(資料性)采用t檢驗方法進(jìn)行樣本之間顯著性差異評價1B.

t檢驗方法1t檢驗,主要用于樣本含量較小(例如n<30),總體標(biāo)準(zhǔn)差σ未知的正態(tài)分布?？刹捎秒p總體t檢驗以檢驗兩個樣本平均數(shù)與其各自所代表的總體的差異是否顯著。1t檢驗統(tǒng)計量計算見公式B.1nsns(1-1)12+

(2-1)22nsnsn1

n2式中:———s12

和s22

為兩樣本方差;———n1

和n2

為兩樣本容量。查t檢驗臨界值表,找到相應(yīng)的t臨界值,或根據(jù)t檢驗統(tǒng)計量確定雙側(cè)分布概率P值,作出判斷。若t在臨界值范圍內(nèi)或P>0.5,則表示在95%

置信水平上,被評估的樣本間無統(tǒng)計學(xué)差異。t檢驗臨界值表可參考

GB/T4889獲得或使用統(tǒng)計軟件得到。2B. 采用t檢驗方法評價定量檢測試劑盒與參考方法檢測結(jié)果的顯著性差異2 Ln( 2Sn例:采用t檢驗方法對采用參考方法(GB4789)與定量檢測試劑盒測定大腸菌群的結(jié)果進(jìn)行 Ln( 2Sn每種樣品、每個水平重復(fù)測定5次(=5),自由度f=4,將檢測結(jié)果轉(zhuǎn)化為對數(shù)(og10)匯總表B。計算公式按式

B.1),其中X為測試片檢測結(jié)果,Y為參考方法檢測結(jié)果;1

和S

分別為測試片和參考方法檢測結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差;1

和n2

分別為測試片和參考方法的平行檢測次數(shù)。3 3在95%置信水平上t0.05(8)=2.06,雞肉的低、高水平驗證所得t值>t0.05(8)=2.3 33性差異中水平驗證所得t值<t0.05(8)=2.06,表明無顯著性差異。31表1表B. 結(jié)果比較∑xni

(=1,,……,),式中ni為第i

個總體的樣本觀觀察值總和除以觀察值的個數(shù),計算公式xi =j2ik個數(shù),計算公式X =

∑∑xij∑xni

(=1,,……,),式中ni為第i

個總體的樣本觀觀察值總和除以觀察值的個數(shù),計算公式xi =j2ik個數(shù),計算公式X =

∑∑xijn

=

∑nxn

,式中n =n1+n 2+……+nk

;全部觀察值Xij 與總平均值x的離差平方和以反映全部觀察值的離散狀況,計算公式SST =∑∑(ij -x)2;各組平均值xi (=1,機誤差與系統(tǒng)誤差,計算公式SSA =∑∑(i

-x)2=∑ni (i

-x)2;每個水平或組的各樣本數(shù)據(jù)與其組平均值的離差平方和反映每個樣本各觀察值的離散狀況,又稱組內(nèi)平方和,反映隨機誤差的大小,計算公式SSE =

∑∑(ij -x)2。k -1,MSE =SSEn -k。MSE

,

(

-1,

-k),其中n 為全部觀察值的個數(shù),

為因素水平(總體)的個數(shù)。根附 錄 C(資料性)采用方差分析方法評價定量檢測試劑盒的批間差異(以EXCEL進(jìn)行計算)1C. 方差分析方法1i i方差分析(AnalyssofVarance)用于兩個及兩個以上樣本均數(shù)差別的顯著性檢驗i iS的檢驗統(tǒng)計量需計算水平的均值、全部觀察值的總均值、誤差平方和(S)、均方(MS)。S假定從第i個總體中抽取一個容量為ni

的簡單隨機樣本,第i個總體的樣本均值為該樣本的全部niij=1X察值個數(shù),

ij

為第i個總體的第j個觀察值;全部觀察值的總均值為全部觀察值的總和除以觀察值的總Xk ni ki

ii=1

j=1 i=1k nix ii=1

j=1k2……,)與總平均值x

的離差平方和反應(yīng)各總體樣本均值之間的差異程度,又稱組間平方和,包括隨kk ni kx xi=1

j=1 i=1k nixi=1

j=1S組間方差MSA、組內(nèi)方差MSA

分別為SSA、SE

的均方,計算公式MSA=SSAS統(tǒng)計量F=

MSA

F

k n k據(jù)給定的顯著性水平a,在F

分布表中查找與第一自由度df1=k-1、第二自由度df2=n-k相應(yīng)的臨界值Fa

,若F

>Fa

,表明均值之間的差異是顯著的,所檢驗的因素對觀察值有顯著影響。若F

<Fa

,不能認(rèn)為所檢驗的因素對觀察值有顯著影響。221C. 采用方差分析方法評價不同批號定量檢測試劑盒的批間差異實例221C.. 數(shù)據(jù)檢測與匯總C

C分別采用3個不同批號甲醛定量檢測試劑盒對同一份泡發(fā)魷魚樣品進(jìn)行5次平行測定,結(jié)果匯C

C于EXCEL中。其中第B、

、

列分別為3個不同批號定量試劑盒的5次平行測定結(jié)果。12SN/T2775—202322C..統(tǒng)計描述22- -選擇EXCEL中的“數(shù)據(jù)”“數(shù)據(jù)分析”“描述統(tǒng)計”。在“描述統(tǒng)計”對話框中輸入統(tǒng)計量并選擇- -定”。描述統(tǒng)計的結(jié)果:23C.. 方差分析結(jié)果23因僅試劑盒批號這一個因素變化,因此為單因素方差分析。在“數(shù)據(jù)分析”對話框中選擇“方差分-析”“單因素方差分析”,然后在“單因素方差分析”對話框中選擇數(shù)據(jù),最終得到結(jié)果。-13SN/T2775—2023, 1 a;F 8 9在95%置信水平

F=0.039,a=3.85,, 1 a;F 8 9試劑盒測定結(jié)果之間無顯著性差異。14影響因素測定次數(shù)12345678A或aAAAAaaaAB或bBBbbBBbbC或cCcCcCcCcD或dDDddddDDE或eEeEeeEeEF或fFffFFffFG或gGggGgGGg獲得的結(jié)果stuvwxyzSN/T2775—2023附 錄

D(資料性)耐變性檢驗方法1D.耐變性檢驗的實驗設(shè)計1B

C

D

E

F假設(shè)以

A、、

、

、

、

和

G表示7種不同因素,當(dāng)這些因素輕微變化時可能影響檢測B

C

D

E

Fcdefb、、、、和g表示這cdef7 1上述因素共有2

即128種組合方式,出于實際操作的考慮,選擇一種有8個組合的子集(表

7 1以代表可能出現(xiàn)的情況。1表D. 耐變性檢驗的實驗設(shè)計Da=A-a=∑(Ai)-∑(i)1表D. 耐變性檢驗的實驗設(shè)計Da=A-a=∑(Ai)-∑(i)

Da

=值aDb=B-b=∑(i)-∑(i)

Db

=值bDc=C-c=∑(i)-∑(i)

Dc

=值cDd=D-d=∑(D)-∑(i)

Dd

=值dDe=E-e=∑(i)-∑(i)

De

=值eD=F-f=∑(i)-∑(i)

D

=值fDg=G-g=∑(G)-∑(i)

Dg

=值g2 A比較大寫字母(AA

至

AG)的平均值與小寫字母(Aa

至

Ag)的平均值。如果某個因素對檢測結(jié)果有影響,那么其差異比其它因素要大。A /B /C /D /E /F /G /a /b /c /d /e /f /g /DDAA=∑(

i)4

AB=A /B /C /D /E /F /G /a /b /c /d /e /f /g /DDAF=∑(

i)4

AG=∑(

i)4

Aa

=∑(i)4

Ab=∑(i)4

Ac=∑(i)4Ad=∑(i)4

Ae=∑(i)4

Af=∑(i)4

Ag=∑(i)4差異(

i) 差異的平方(

i2)222222215五因素值實驗次數(shù)(二種水平)12345678取樣量AAAAaaaa反應(yīng)溫度BBbbBB